学术投稿

人类肿瘤组织及肿瘤细胞系中Smoothened第十外显子基因序列变异的检测

杨凌;张弛;田延鑫;孔北华;黄淑红;张红卫

关键词:Hedgehog, Smoothened, 外显予, 寡核苷酸序列分析
摘要:目的 研究Hedgehog (Hh)信号通路中的重要作用分子Smoothened (SMO)第10外显子基因序列变异在人类肝、肺、胃、卵巢肿瘤及5种肿瘤细胞系中存在的状况.方法 提取人类肝、肺、胃、卵巢肿瘤组织及5种肿瘤细胞系的基因组DNA,对基因组DNA中SMO第10外显子进行PCR体外扩增,然后进行DNA测序,对测序结果进行序列比对分析.结果 测序结果显示,在2例胃肿瘤组织中存在SMO第10外显子序列的变异,分别为1958C→T,1971A→G,胃肿瘤细胞系AGS中也存在SMO第10外显子序列的变异2002T→C( rs2016607).结论 在胃肿瘤中存在SMO基因序列的变异,而其基因的改变与SMO构象和活性存在一定关系,从而为进一步研究人类胃肿瘤的发生与SMO基因序列变化之间的相关性提供依据.
山东大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 妊娠期下肢深静脉血栓形成的诊疗分析

    目的 探讨妊娠期下肢深静脉血栓形成(LDVT)的临床特点及治疗方法.方法 回顾性分析山东大学附属省立医院血管外科自2006年8月到2010年10月收治的32例妊娠期发生LDVT患者的临床资料及治疗方法.结果 32例患者中,剖宫产17例,顺产2例,新生儿无畸形,阿氏评分均在8分以上;11例应患者要求中止妊娠,2例患者在治疗过程中流产.共有27例患者放置可回收下腔静脉滤器并终全部取出.所有患者经治疗出院时患肢周径较健侧差异在(2±0.3)cm之内.本组无死亡,无肺栓塞发生,无出血并发症.平均随访(1l±1.1)个月,随访期间行超声检查,17例患者下肢静脉仍存有静脉血栓,D-二聚体测定阴性,所有患者肢体症状无反复,未发现明显的症状性肺栓塞.结论 妊娠期妇女合并LDVT,不推荐溶栓治疗;肝素、低分子肝素抗凝治疗安全有效;华法林在妊娠期禁用,在哺乳期可择情使用;严格掌握下腔静脉滤器置入的指征,不建议放置永久性滤器.

    作者:孙岩;张十一;刘洋;金星;王默 刊期: 2011年第10期

  • 人类肿瘤组织及肿瘤细胞系中Smoothened第十外显子基因序列变异的检测

    目的 研究Hedgehog (Hh)信号通路中的重要作用分子Smoothened (SMO)第10外显子基因序列变异在人类肝、肺、胃、卵巢肿瘤及5种肿瘤细胞系中存在的状况.方法 提取人类肝、肺、胃、卵巢肿瘤组织及5种肿瘤细胞系的基因组DNA,对基因组DNA中SMO第10外显子进行PCR体外扩增,然后进行DNA测序,对测序结果进行序列比对分析.结果 测序结果显示,在2例胃肿瘤组织中存在SMO第10外显子序列的变异,分别为1958C→T,1971A→G,胃肿瘤细胞系AGS中也存在SMO第10外显子序列的变异2002T→C( rs2016607).结论 在胃肿瘤中存在SMO基因序列的变异,而其基因的改变与SMO构象和活性存在一定关系,从而为进一步研究人类胃肿瘤的发生与SMO基因序列变化之间的相关性提供依据.

    作者:杨凌;张弛;田延鑫;孔北华;黄淑红;张红卫 刊期: 2011年第10期

  • 山东省项目地区女性性工作者滋病干预效果评价

    目的 分析干预地区与对照地区女性性工作者的艾滋病相关知识、态度、行为状况,评估干预地区宣传干预效果.方法 选择山东省全球基金艾滋病项目首批项目县为干预地区,选择经济条件相似的非干预地区作为对照,按照同样的方法开展问卷调查,并分析比较干预地区、对照地区问卷调查结果.结果 干预地区完成有效问卷1 157份,女性性工作者平均年龄为(24.58±5.08)岁,对照地区收集有效问卷1 506份,女性性工作者平均年龄(25.20±5.54)岁,均以未婚女性、初中文化程度为主.干预地区女性性工作者艾滋病知识知晓率为81.94%,对照地区为17.80%,差异有统计学意义(x2 =1 084.91,P<0.001),干预地区女性性工作者对艾滋病病毒感染者的态度明显好于对照地区,差异有统计学意义(x2 =281.35,P<0.001).干预地区女性性工作者近一个月商业性行为时安全套使用率为86.78%,对照地区为66.07%,差异有统计学意义(x2=151.40,P<0.001).结论 干预地区女性性工作者艾滋病相关知识、态度、行为状况明显好于对照地区,持续深入的宣传干预能有效地提高女性性工作者人群艾滋病知识的知晓率,减少危险行为.

    作者:康殿民;陶小润;李建卓;廖玫珍;朱晓艳;张娜;郑薇;于青 刊期: 2011年第10期

  • 多胺代谢与肿瘤治疗

    多胺代谢在肿瘤发生发展中起重要作用.鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)是多胺生物合成的两个关键酶.ODC和SAMDC的抑制剂治疗肿瘤的作用,在体外实验和动物水平的研究中已获得认可,但是,在临床实验中却因英毒副作用而遭受质疑.近年的研究发现,肿瘤组织中ODC和SAMDC基因表达水平增加,而沉默二者的基因表达,则可抑制肿瘤的增殖和侵袭活性,这可能为以多胺代谢为靶标探讨肿瘤防治技术的研究提供了新的思路.本文概述了多胺代谢与肿瘤治疗关系的研究进展.

    作者:刘贤锡 刊期: 2011年第10期

  • 我国经自然腔道内镜手术的发展现状

    经自然腔道内镜手术(natural orifice transluminal endoscopic surgery,NOTES)是指内镜经自然腔道穿出空腔脏器壁,在空腔脏器外进行的外科手术[1].这一概念由美国约翰·霍普金斯大学的Kal1oo于1998年提出,经2004年Kalloo的动物实验报道[2]而被广大腹腔镜医师和内镜医师所了解和熟悉.NOTES具有突出的优势,它使微创手术从“腹壁无可见瘢痕”发展为真正的无瘢痕,消除了腹壁切口感染问题,减少了术后疼痛,降低了切口疝的风险,减小了粘连程度,患者术后恢复快,心理创伤小,对追求美容效果的患者具有极大的吸引力.目前治疗性内镜可以在仪使用镇静剂下进行,因此,临床NOTES手术完全有可能不用气管插管和全身麻醉来完成,减轻了麻醉深度,相应的麻醉风险也大大降低,NOTES如能在门诊开展,可降低个人和社会的医疗消费[3].近年,NOTES已成为国内外腹腔镜外科医师及内镜医师关注的热点[4],我国医师在动物实验、临床应用等方面都进行了探索,取得了一定的成绩,现结合我们的应用体会,将我国NOTES的发展现状做一简单介绍.

    作者:胡三元 刊期: 2011年第10期

  • 消化内镜诊断新技术

    消化内镜是消化系统疾病诊断的佳手段.医学的发展也为消化内镜的革新提出了很多要求,比如胃癌和结肠癌是威胁包括我国在内的全世界人群健康的主要恶性肿瘤,经济有效的应对措施是发现早期患者给予早期根治,避免向进展期发展;随着食管腺癌发病率的升高,早期发现Barrett食管中的癌变也有重要的临床意义,而传统消化内镜容易漏诊早期癌变,当发现病变时往往根治困难,且治疗的创伤也会加大;小肠和胰胆管系统是传统消化内镜诊断的盲区,往往需要借助间接的造影成像手段,受到诸多限制,并且准确性欠佳.随着消化内镜技术的进展,这些局限正在逐步得到解决.下面对近些年来的一些消化内镜诊断新技术做一简要介绍.

    作者:李延青 刊期: 2011年第10期

  • PI3K/Akt信号转导通路在绞股蓝皂苷拮抗谷氨酸诱导胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤中的作用

    目的 应用磷脂酰肌醇3位羟基激酶(PI3K)的特异性阻断剂LY294002,研究PI3K/Akt信号转导通路在绞股蓝皂苷(GPs)拮抗谷氨酸(Glu)诱导胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤中的作用.方法 以体外原代培养的14~15d胎鼠大脑皮层神经元为研究对象,用相差显微镜进行形态学观察,MTT法检测神经元存活率,流式细胞仪检测神经元凋亡率,Western blot法检测磷酸化Akt和总Akt的表达,分析PI3K/Akt信号转导通路在GPs拮抗Glu 诱导神经元氧化性损伤中的作用.结果 GPs可抑制Glu诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤,使神经元存活率上升,凋亡率降低,磷酸化Akt表达增加,PI3K的特异性抑制剂LY294002明显抑制了GPs对神经元的保护作用.结论 绞股蓝皂苷激活了PI3K/Akt信号转导通路,拮抗谷氨酸诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤.

    作者:张道来;孙涛;谢珊珊;王玉卓;冯玉新;辛华 刊期: 2011年第10期

  • Toll样受体与角膜抗感染天然免疫研究进展

    免疫系统包括天然免疫和适应性免疫.适应性免疫是T淋巴细胞和B淋巴细胞介导的对特定致病原或抗原的免疫反应,它的产生需要数天的时间并通过记忆T细胞和B细胞发挥作用.相比之下,天然免疫系统在感染发生的初始时刻即为宿主提供保护.以往天然免疫被认为是一种非特异性反应,表现为巨噬细胞通过内吞和消化作用清除微生物或异己抗原.近年发现一种天然识别受体——Toll样受体(Tolllike receptors,TLRs),可通过识别特定的致病原结构来区分自身和致病原,从而启动快速的防御反应.目前研究热点主要集中在TLRs如何识别致病原、调动宿主防御反应及调节适应性免疫的作用.

    作者:吴欣怡 刊期: 2011年第10期

  • 束缚-浸水应激对大鼠疑核胆碱能及儿茶酚胺能神经元活动的影响

    目的 研究束缚-浸水应激( RWIS)大鼠疑核(NA)中胆碱能、儿茶酚胺能神经元的活动情况.方法 随机将10只雄性Wistar大鼠分为对照组和应激组(RWIS组),采用Fos、胆碱乙酰转移酶(ChAT)或酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学双标技术,统计对照组和应激组Fos、ChAT或TH单标阳性神经元以及Fos+ ChAT或Fos+TH双标阳性神经元数目.结果 NA中ChAT免疫阳性神经元胞体呈梭形或多角形,有较多的TH阳性终末.与对照组相比,RWIS组大鼠NA大量神经元表达Fos(P <0.05);RWIS组Fos +ChAT双标阳性神经元数目也较对照组显著增加(P<0.05),占ChAT免疫阳性神经元的比例在对照组和RWIS组中分别为7.5%、29.8%(P<0.01).结论 NA中胆碱能神经元参与RWIS调控过程,而这些神经元可能接受其他核团儿茶酚胺能神经元的纤维投射.

    作者:赵东芹;艾洪滨 刊期: 2011年第10期

  • 初发2型糖尿病患者血清vaspin水平与颈动脉斑块的相关性

    目的 探讨初发2型糖尿病(T2DM)患者血清vaspin水平与血糖、血脂、胰岛素抵抗等代谢因素及糖尿病早期颈动脉粥样硬化的关系.方法 选择初发T2DM患者69例,根据有无颈动脉斑块分为糖尿病无斑块组(男17例,女15例)和糖尿病伴斑块组(男20例,女17例),另外选择年龄、性别相匹配的健康查体者为对照组(男15例,女l1例).测定收缩压(SBP)、腰围(WC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标,采用ELISA方法测定血清vaspin水平.结果 校正年龄、性别后,耱尿病无斑块组的血清vaspin水平显著高于对照组[(0.66±0.22) ng/mLvs (0.46±0.12) ng/mL,P<0.01],而糖尿病伴斑块组血清vaspin水平低于无斑块组[(0.52±0.22)ng/mLvs(0.66+0.22)ng/mL,P<0.05].偏相关分析显示,血清vaspin与HOMA-IR呈负相关(r=-0.276,P=0.025).Logistic回归分析结果显示,SBP和vaspin水平是糖尿病发生颈动脉硬化的独立相关因素.结论 血清vaspin水平在初发T2DM人群中升高,血清vaspin水平下降可能与初发T2DM患者颈动脉斑块形成有关联.

    作者:李振作;张艳;马驰骋;刘金波;孙宇;侯新国;陈丽 刊期: 2011年第10期

  • 基于高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱 联用技术的高血压病血浆代谢组学分析

    目的 研究高血压患者和健康志愿者的血浆代谢组变化,寻找高血压病的特征代谢物,揭示高血压病的生物学本质.方法 根据临床高血压病的诊断标准,选择典型病例10例,健康志愿者12例,以高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用技术(HPLC-ESI-TOFMS)分析高血压病患者和健康志愿者的血浆代谢物谱,以Mass-Profiier进行数据的匹配、对齐,将数据结果以文本文件贮存,用于模式识别分析,利用Simca-P 11.0软件进行主成分分析和偏小二乘判别分析,寻找血浆内差异代谢物,并做出相关代谢途径的可能解释.结果 主成分分析(PCA)和偏小二乘判别分析(PLS-DA)方法处理高血压患者和健康志愿者的血浆代谢物谱数据显示,两组HPLC-ESI-TOFMS谱数据可以明显分开,与健康志愿者作比较,高血压病患者机体相关代谢发生显著变化,体内部分氨基酸代谢和磷脂代谢明显异于健康志愿者.结论 HPLC-ESI-TOFMS结合模式识别的代谢组学方法具有研究复杂条件下机体病理生理变化的优势,为理解高血压病的生物学本质和诊断该类疾病提供了科学依据.

    作者:蒋海强;李运伦;解君 刊期: 2011年第10期

  • ERAP1基因与山东汉族人群强直性脊柱炎的相关性

    目的 利用基于群体的病例对照关联分析方法,探讨ERAP1基因是否为北方汉族人群的易感基因.方法 从山东省立医院收集了311例临床确诊的强直性脊柱炎病例及320例正常对照资料,利用Taqman探针法对ERAP1基因内的两个单核苷酸多态性位点rs7711564和rs27434分型,利用PLINK软件行Hardy-Weinberg遗传平衡检验、等位基因及基因型频率分布分析.样本统计学效能采用CaTS软件计算.结果 两个位点在病例组及对照组中均达到遗传平衡,其中rs7711564位点罕见等位基因频率在病例组及对照组分别为0.430 9和0.489 1(OR=1.26,P=0.04),rs27434位点罕见等位基因频率在病例组和对照组分别为0.483 9与0.421 9(OR =0.78,P=0.03).结论 ERAP1基因内的遗传变异与北方汉族人群强直性脊柱炎相关,进一步证实了该基因是强直性脊柱炎的易感基因.

    作者:夏羽;王来城;孙慧;唐宏伟;马春燕;崔彬;赵跃然 刊期: 2011年第10期

  • miR-122表达载体的构建及其对HepG2.2.15细胞增殖的抑制作用

    目的 构建miR-122表达载体并检测其表达对HepG2.2.15细胞恶性表型的逆转作用.方法 以HepG2.2.15细胞基因组DNA为模板,PCR扩增miR-122前体cDNA序列,以质粒pSilencer3.1-H1 neo为母本,构建miR-122表达载体将其转染HepG2.2.15细胞.表达后,利用ELISA检测HepG2.2.15细胞HBV复制和表达的变化,利用CCK8检测细胞增殖的变化.结果 构建的miR-122表达载体可在He pG2.2.15细胞中表达.转染后HepG2.2.15细胞中HBV复制、表达以及细胞增殖均被抑制.结论 miR-122表达载体可在HepG2.2.15细胞中有效表达,其表达可抑制HBV复制、表达以及细胞增殖.

    作者:范春光;王春梅;王燕;李丽;孙汶生;刘玉刚;李瑞峰 刊期: 2011年第10期

  • 免疫调节T细胞的基础理论及临床应用

    Recently,major advances have been made in our understanding of a naturally occurring lymphocyte subset called regulatory T (Treg) cells that are used by the immune system to perform antigen- or tissuespecific immunosuppression[1-6].They play indispensable roles in maintaining health since their deficiency in mice or humans causes fatal inflammatory diseases[1-6].They may also be directly involved in the development of autoimmune diseases since their numbers and/or functions are reduced in patients studied by several groups[7-11].More importantly,a number of laboratories including ours have shown that adoptive transfer of antigen-specific Treg cells effectively prevents,and ameliorates ongoing,experimental models of autoimmune diseases such as multiple sclerosis[12-20].

    作者:陈有海 刊期: 2011年第10期

  • 受体-受体相互作用:神经递质受体功能的一种重要调控机制

    1 Introduction Neurotransmitter receptors are proteins embedded in the synaptic plasma membrane where they play a dual role in synaptic transmission.First,receptors have domains that extend into the synpatic cleft and bind neurotransmitters/agonists that are released into this space from the presynaptic neuron.Second,the binding of neurotransmitters to these domains open or close ion channels directly or indirectly in the postsynaptic membrane,or activate signalling events in the postsynaptic neuron,thus mediating the transfer of information across the synapse[1 ].

    作者:刘芳;CHEN Sheng 刊期: 2011年第10期

  • 腹腔镜单侧肾上腺切除术治疗肾上腺结节样增生性原发性醛固酮增多症的效果评价

    目的 探讨经腹腔途径腹腔镜单侧肾上腺切除术治疗肾上腺结节样增生性原发性醛固酮增多症的效果.方法 2004年4月至2010年8月间,我科共收治114例肾上腺结节样增生性原发性醛固酮增多症患者,其中105例为单侧,9例为双侧,均行经腹腔途径腹腔镜单侧肾上腺切除术.回顾性分析患者的临床资料,并随访其术后血压恢复情况及血浆醛固酮、血钾的变化.结果 所有手术均获成功,无中转开放手术患者.平均手术时间为(32.4±8.3)min,平均术中出血量为(10.5±5.2)mL,平均术后住院时间(7.9±3.1)d,术中及术后无重大并发症.术后病理均为肾上腺结节样增生,结节大小在2 ~16mm间.在中位时间为31(6 ~82)个月的随访期内,55例(48.2%)患者高血压治愈,57例(50%)改善,2例(1.8%)无效,1例患者术后醛固酮仍高出正常,其余患者的血浆醛固酮及血钾均在正常范围内.结论 腹腔镜单侧肾上腺切除术是治疗肾上腺结节样增生性原发性醛固酮增多症的一种安全、有效的方法.

    作者:蒋绍博;金讯波;王翰博;巩若箴;郭旭东;熊晖;王正 刊期: 2011年第10期

  • 授精后5h补救性卵胞浆内单精子显微注射的临床应用价值

    目的 探讨授精后5h对可能受精失败的卵子行补救性卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的可行性.方法 授精后3、4、5h分别观察卵子是否排出第二极体.若已经排出第二极体,则认为卵子已经被激活,是受精的征象.如果患者在授精后5h观察少于65%的卵子排出第二极体,则剩余的只有第一极体的卵子接受补救性ICSI.1 050例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的患者,按照有无补救性ICSI将患者分为2组:Ⅰ组:部分接受补救性ICSI,本组又按照有无补救性ICSI将卵子分为两部分:补救性ICSI部分及IVF部分;Ⅱ组:未接受补救性ICSI.201例接受ICSI治疗的患者作为对照组.结果 ①Ⅰ组患者卵子在授精后3、4、5h第二极体排出率均低于Ⅱ组(P<0.05),Ⅰ组患者原发不孕的比例、不明原因性不孕的比例高于Ⅱ组(P<0.05);②Ⅰ组、Ⅱ组、对照组,受精率、多精受精率、临床妊娠率、种植率均无显著性差异(P>0.05),但Ⅰ组补救性ICSI部分卵子优胚率低于Ⅱ组和对照组(P<0.05).结论 IVF中精卵共培养3h是可行的;授精后5h第二极体的排出可作为卵子激活的征象;授精后5h行补救性ICSI可获得可观的临床结局,且不会增加多精受精率;低受精率可能更易出现在原因不明性不孕及原发不孕患者.

    作者:杨慧军;李媛;吴克良;李梅;车詈;马水英;仲万霞;陈子江 刊期: 2011年第10期

  • 做科研的几点体会

    我在高校当教师已逾30年,数十年来教学科研兼顾,从科研起步到逐步深入,科研水平也在不断地提高,有成功,也有挫折,有些较深的体会和感受,写在下面,请大家参考和指正.1 作为高校的教师必须搞科研大学的教师应该参与科学研究,研究型大学的教师必须从事科研,才算是称职的教师.我校是“985”高校,现又争创“世界一流”大学,作为山大的老师,不搞科研只能被淘汰.高校的教师承担着培养创新性人才的重任,教师必须做科研,通过言传身教,才能培养学生的创新意识和创新能力.

    作者:于修平 刊期: 2011年第10期

  • 天然杀伤T细胞对多树突状细胞的调节作用

    作者:杨熙 刊期: 2011年第10期

  • 心肌梗死量对性行为影响的临床研究

    目的 探讨心肌梗死后性行为引起心肌缺血、损伤的危险因素.方法 急性心肌梗死(AMI)42例入院后动态测定血清肌酸激酶-MB蛋白(CK-MBmass)计算其心肌梗死量,根据心肌梗死范围大小患者分为A、B组;患者出院后性行为时佩戴动态心电图检测ST-T变化.结果 根据血清CK-MBmass动态变化计算其心肌梗死量,其中A组患者平均为32.2 CK-MBmass-g,B组患者平均为21.7CK-MBmass-g,两组对比差异有统计学意义(P<0.01).出院后患者性行为时计算心电图∑T波、∑ST段改变的面积,其中A组患者平均为5.6 mm2、2.3mm2;B组患者平均为3.7 mm2、1.2mm2,两组对比差异有统计学意义(P<0.01).结论 心肌梗死后性行为能否诱发心肌缺血、损伤,取决于心肌梗死量的大小.

    作者:邢启崇 刊期: 2011年第10期

山东大学学报(医学版)杂志

山东大学学报(医学版)杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:山东大学