刘文婷;孙青
目的 探讨胰岛素抵抗大鼠血管AGEs水平及其损伤机制和吡格列酮的保护作用.方法 选6~8周龄Wistar 大鼠随机分为对照组(NC组,n=10)、胰岛素抵抗组(IR组,n=13)和吡格列酮组(PIO组,n=13).后两组建立胰岛素抵抗模型,模型成功后PIO组给予吡格列酮[10mg/(kg·d)]干预,12周后采用免疫荧光技术检测血管壁AGEs表达;应用RT-PCR法检测RAGE、NADPH氧化酶p47phox mRNA的表达;免疫组织化学技术检测RAGE、磷酸化NF-κb蛋白的表达.结果 与IR组比较,PIO组AGEs的表达减弱,而两组明显高于NC组;IR组和PIO组RAGE、NADPH氧化酶P47phox mRNA表达较Nc组明显升高(P<0.01),而PIO组上述指标表达较IR组减弱(P<0.05);PIO组RAGE、磷酸化NF-κb蛋白表达较IR组减弱(P<0.05),但两组均明显强于NC组(P<0.01).结论 胰岛素抵抗大鼠血管AGEs及RAGE表达增多,继而促进氧化应激及炎症反应导致血管损伤;吡格列酮能通过减少AGEs、RAGE生成而抑制氧化应激及炎症反应,改善血管损伤.
作者:侯亮;刘雪平;袁树华;王美霞;徐松 刊期: 2010年第04期
目的 初步探讨山东汉族人群中DBP基因416和420位点基因多态性与多发性硬化(MS)疾病发生的关系.方法 经临床诊断为MS患者46例为MS患病组,同期健康体检者43例为对照组,检测其DBP基因416位点(HaeⅢ酶切位点)和420位点(Sty Ⅰ酶切位点)基因多态性,并进行统计学分析.结果 MS患病组和对照组比较,DBP基因416住点和420位点基因型频率、等位基因频率和表现型频率分布差异均不显著.结论 山东汉族人群中DBP基因416位点和420位点基因多态性与MS疾病发生无显著相关性.
作者:李晓红;LI Yun;李芸;王班琴;刘师莲 刊期: 2010年第04期
目的 检测肝癌组织中SnailmRNA和蛋白的表达及其与肝癌侵袭转移的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测70例肝癌组织及其癌旁组织中Snail蛋白的表达,采用RT-PCR方法检测40例新鲜肝癌组织及其癌旁组织中SnailmRNA的表达,并结合临床病理指标进行分析.结果 肝癌组织中Snail的阳性表达率高于癌旁组织中(P<0.05),且癌组织中Snail阳性表达率与包膜侵袭、门脉侵袭及肝内转移情况有关(P<0.05).肝癌组织中SnailmRNA的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),且癌组织中SnailmRNA的阳性表达率与包膜侵袭、门脉侵袭情况有关(P<0.05),而与肝内转移情况无关(P>0.05).结论 肝癌的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白及mRNA的高表达有关,抑制Snail的表达,有望成为治疗肝癌的新靶点.
作者:孙丹;孙成刚;王峰;李涛;主余华 刊期: 2010年第04期
目的 探讨胎盘蛋白13(PP13)和妊娠相关子宫内膜蛋白(glycodelin)在子痫前期患者血清中的表达.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定子痫前期组(包括轻度子痫前期和重度子痫前期组)及正常妊娠妇女外周血血清中PP13、glycodelin的浓度.结果 ①子痫前期组孕妇血清PP13的水平显著高于正常妊娠组(P<0.01),而glycodelin的水平显著低于正常妊娠组(P<0.01);②轻度子痫前期组PP13水平低于重度子痫前期组(P<0.01),而轻度子痫前期与重度子痫前期组的glycodelin水平无明显差异(P>0.05);③PP13、glycodelin在子痫前期患者中不具有相关性;④血清PP13的水平与孕周相关.结论 子痫前期患者血清中PP13、glycodelin水平均异常表达,可能参与了子痫前期的发生,发展.同时血清PP13水平与病情的严重程度有关,可能是预测疾病进展的一项指标.
作者:孙媛;陈丽君 刊期: 2010年第04期
目前甲亢的治疗方法有3种:化学药物治疗、放射性131Ⅰ内照射治疗及手术治疗.对初发及年轻甲亢患者应首选化学药物治疗.
作者:张王峰;叶常青;袁梦晖;蒋仁晶;徐文斌;卢受强;李惕 刊期: 2010年第04期
目的 观察辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型炎症因子及其肺组织病理的影响,探讨辛伐他汀在COPD治疗中的抗炎作用及其机制.方法 采用熏香烟加气管内滴入LPS法建立大鼠COPD模型,随机将30只雄性Wistar大鼠分为正常对照组、COPD模型组和辛伐他汀治疗组,治疗组在造模两周后给予辛伐他汀2.5mg/kg灌胃治疗,每天1次,治疗6周后,观察各组大鼠的体质量增长率,肺组织的病理改变,行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数和分类,先分别测定BALF和血清中IL-8及TNF-α的水平、再测定血清中C-反应蛋白(CRP)的水平.结果 治疗组较模型组体质量增长率显著提高(P<0.05);模型组大鼠出现明显慢性支气管炎特征性病理改变,出现肺气肿,气管及血管周围大量炎症细胞浸润,治疗组也出现肺气肿和炎症浸润,但程度较模型组轻;治疗组BALF细胞总数和中性粒细胞比例较模型组均有显著下降(P<0.05);治疗组BALF及血清中IL-8、TNF-α、CRP水平均较模型组显著降低(P<0.05).结论 辛伐他汀可降低COPD大鼠模型BALF和血清中的炎症因子,减轻肺组织及气道炎症,对COPD大鼠的炎症有抑制作用.
作者:陈旭东;王伟;王永彬 刊期: 2010年第04期
目的 探讨激光扫描共聚焦显微镜观察烧伤后创面组织中神经纤维的形态结构及其分布特点的可行性.方法 取烧伤后1、2、3、4周创面组织,以神经丝蛋白(NF)为标记物,利用荧光免疫技术显示组织中的神经纤维,利用激光扫描共聚焦显微镜进行分层扫描,观察不同层面神经纤维的形态;并进行三维重建,观察神经纤维的立体形态.结果 伤后3周内神经纤维数目低于正常,3周后神经数目开始高于正常,并逐渐变长,随着时间延长出现扭曲缠绕或交错排列,分布呈现区域性集中.分层扫描和三维重建可见伤后2周神经稀疏、短小,3周后神经纤维有不规则肿胀和扭曲变形,内部结构不完整并伴有局部断裂、破损甚至崩解,可见明显的皱褶和出芽,并呈现较正常神经纤维更强的荧光信号,在不同层次以及不同角度的切片上观察到的病理改变程度不同.结论 激光扫描共聚焦显微镜能观察到烧伤后伤区神经纤维三维结构,发现组织修复过程中神经存在再生和重塑现象.
作者:王一兵;何剪太;冯永强;李霞;张芮;张阳德 刊期: 2010年第04期
目的 探讨慢性乙型肝炎患者不同肝功能状况与胃黏膜病变程度的相关性.方法 对30例首次发病的慢性乙型肝炎患者进行胃镜检查,同时取病理并与其肝功能指标、乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量、凝血酶原时间(PT)进行了相关性分析.结果 慢性乙型肝炎患者胃黏膜病变表现多样,以慢行浅表性胃窦炎为主,病理显示主要为轻度及中度慢性炎症.单因素分析表明性别、年龄、血清HBV DNA在轻度及中度慢性胃炎组无明显差异(P>0.05),肝功能指标中白蛋白(ALB)、PT在两组中的差异具有统计学意义(P<0.05).应用Logistic回归方程进行多因素分析表明,PT延长是慢性乙型肝炎患者胃黏膜病变程度的预测因子,P=0.049,OR=2.105(95%可信区间 1.004~4.414).结论 随肝功能损伤加重,胃黏膜病变程度加重,PT 可作为胃黏膜病变程度的预测因素.
作者:李月荣;韩增禄;王磊 刊期: 2010年第04期
目的 比较解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTs)4、5和基质金属蛋白酶(MMP)1、3在骨关节炎(OA)患者早期和中晚期血清中的表达,并探讨其在OA患者不同时期的作用和早期诊断意义.方法 70例单关节OA患者按照MRI Recht分级标准分为早期OA组(44例)和中晚期OA组(26例),同时设健康对照组(30例).应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-1和MMP-3在三组血清中的表达,以ELISA光密度(OD)值代表所测各项在血清中的表达水平.结果 早期OA组的ADAMTS-4表达水平高于中晚期OA组;ADAMTS-5、MMP-1和MMP-3在早期OA组的表达水平均低于中晚期OA组(P均<0.05).而正常对照组血清中仅有少量聚蛋白多糖酶和MMP-1的表达.结论 聚蛋白多糖酶在OA早期和中晚期血清中均有高表达,MMP在OA中晚期血清中有高表达,ADAMTS-4有早期诊断意义.
作者:李文;张磊;张成琪;杜春玲;王广丽;闫新峰;于泓;宋淑香 刊期: 2010年第04期
目的 探讨原发性肺癌组织中ABH及Lewis组织-血型抗原表达与肺癌生物学行为的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法,检测30例正常肺组织、143例原发肺癌及相应41例转移灶中 ABH与Lewis血型抗原的表达.结果 A、B、AB、O(H)血型瘤体抗原阳性率分别为49.02%、55.56%、35.00%、69.44%,各血型间抗原表达无统计学差异(P>0.05),Lewisa、sialylLewisx在癌组织中的表达率高于正常肺组织(P=0.045,P=0.015).低分化癌组织ABH缺失、Lewisa、sialylLewisx表达均高于中高分化癌组织(P<0.001).转移组ABH抗原表达缺失、sialylLewisx抗原表达均高于未转移组(P=0.004,P<0.001),转移灶ABH抗原表达缺失、sialylLewisx抗原表达高于原发癌(P<0.001).ABH、sialylLewisx表达与未表达组5年生存率分别为32%、6%(P<0.001),7%、30%(P=0.0012).结论 原发肺癌组织中存在ABH及Lewis相关抗原的异常表达;ABH血型抗原表达缺失和sialylLewisx表达增加与肺癌转移相关;Lewisa、sialylLewisx抗原异常表达与肺癌组织分化程度有关;ABH及sialylLewisx抗原检测对预测患者预后有重要意义.
作者:李军;王洲;李树海;李玉 刊期: 2010年第04期
目的 检测寻常型银屑病皮损中树突细胞溶酶体相关膜蛋白(DC-LAMP)、树突细胞特异性非整合素(DC-SIGN)的表达,探讨其在银屑病发病机制中的作用.方法 采用免疫组化SP法检测DC-LAMP、DC-SIGN在寻常型银屑病皮损与正常皮肤的表达.结果 DC-LAMP在银屑病表皮角质形成细胞(KC)基底层和棘层以及真皮树突细胞(DC)均高表达,在正常皮肤表皮KC基底层和真皮DC中呈低表达(P<0.01);DC-SIGN在银屑病表皮KC和真皮DC中均高表达,在正常皮肤表皮KC基底层和真皮DC中低表达(P<0.01).结论 寻常型银屑病发病与DC-LAMP、DC-SIGN有关.DC、KC可能通过表达DC-LAMP和DC-SIGN发挥抗原递呈作用,参与银屑病免疫发病过程.
作者:刘文婷;孙青 刊期: 2010年第04期
目的 对不同时点输尿管梗阻再通术后肾功能恢复情况做动态观察.方法 将24只犬随机分成3组,行左输尿管结扎制作输尿管梗阻模型.分别在梗阻后第1、4、8周行输尿管再通术,于梗阻术前、后及再通术后2周、4个月进行放射性核素(99mTc-DTPA)显像,观察梗阻肾功能恢复的影像变化,并计算肾小球滤过率.结果 输尿管梗阻1周组犬行再通术后肾功能可完全恢复到正常水平;4周组犬行再通术后肾功能仅能有部分恢复;8周组犬行再通术后未观察到肾功能恢复.结论 输尿管梗阻时间是影响犬肾功能恢复的关键因素,越早行输尿管再通术,肾脏的功能恢复越好.
作者:高莉;王淑贞;汪彤;杨付勇 刊期: 2010年第04期
目的 应用彩色多普勒超声观测肾结石的闪烁征与声影情况,探讨闪烁征对肾结石的诊断价值.方法 以CT为金标准,将肾结石按大小分为3组,直径≤5mm组、5~10 mm组和直径>10mm组,分别观察其闪烁征及声影显示情况.根据体质量指数(BMI)将患者分为正常组、超重组和肥胖组,观察肾结石闪烁征与患者BMI的关系.结果 不同组中肾结石闪烁征的显示率均比声影显示率高,其中直径≤5 mm和5~10mm组差异具有统计学意义(P<0.01),直径>10mm组差异无统计学意义(P>0.05).肾结石闪烁征显示率与患者BMI无关(P>0.05).结论 肾结石闪烁征与结石大小及患者BMI无关.利用闪烁征这一指标,有利于肾小结石、隐匿性结石的检出与诊断.
作者:魏芸;李杰;时丹丹;肖静;李海英;周炜;宋瑶;吕佳楠 刊期: 2010年第04期
目的 探讨多层螺旋CT血管成像(MSCTA)在活体肾移植供肾切除术前的应用价值.方法 采用西门子公司双源CT设备对40例受检者行MSCTA检查,评估肾脏血管解剖及变异情况.结果 40例80个肾脏中,MSCTA显示64个肾脏由单支动脉供血、67个肾脏由单支静脉引流、16个肾脏存在副肾动脉、11支主肾动脉存在过早分支、1例左肾上段动脉起始部局限性狭窄、1例肠系膜上动脉起始部局限性狭窄、1例左肾静脉中段见一血管袢.40例受检者中22例行供肾摘除术,术中所见供肾血管情况与MSCTA术前评估结果一致.结论 MSCTA可准确显示受检者肾脏血管情况,可作为活体肾移植供肾术前血管评估的首选检查方法.
作者:韩雪;王青;崔凤玉 刊期: 2010年第04期
目的 观察黄芪在高糖环境下对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Apelin/APJ mRNA表达的影响,探寻黄芪对HUVECs的作用机制.方法 原代培养HUVECs,根据实验要求分为:对照组、高糖组、低浓度黄芪组(0.1 g/L浓度黄芪+高糖)、高浓度黄芪组(0.2 g/L浓度黄芪+高糖),用不同浓度的葡萄糖和黄芪注射液培养24 h后,用细胞增殖活力实验(CCK-8)检测HUVECs的增殖活力;在倒置相差显微镜下观察HUVECs的形态变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Apelin/APJ mRNA的表达.结果 经过24h培养,与对照组相比,高糖组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),镜下可见细胞形态改变,Apelin/APJ mRNA的表达减少(P<0.05).与高糖组相比,黄芪干预组细胞增殖活力升高(P<0.05),镜下可见细胞形态明显改善,Apelin/APJ mRNA的表达增高(P<0.05).结论 黄芪可减轻高糖对内皮细胞的损伤,亦可通过升高Apelino/APJ对HUVECs起保护作用.
作者:魏秀娟;吴逸南;姜虹;苗青;王荣 刊期: 2010年第04期
目的 研究免疫复合物对单核巨噬细胞的增殖、细胞因子的分泌及吞噬功能的调节作用.方法 免疫复合物组:细胞坏死上清+系统性红斑狼疮(SLE)患者血清;对照组有5组:坏死上清+正常人血清组、坏死上清组、SLE血清组、正常人血清组和培养基组,以上分别作用于U937细胞和U937细胞诱导产生的巨噬细胞.24 h后,用CCK-8法检测U937细胞的增殖.RT-PCR法检测U937细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和B细胞活化因子(BAFF)的变化,中性红比色法检测诱导产生的巨噬细胞的吞噬功能.结果 与对照组相比,免疫复合物能明显促进U937细胞的增殖(P<0.05),TNF-α和BAFF的mRNA表达水平明显增加(P<0.05),并明显抑制巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05).结论 在免疫复合物作用下,单核巨噬细胞系统(MPS)处于异常活化状态,使免疫复合物的形成增多而清除减少,从而参与了SLE的发生发展.
作者:曲芸芸;马春燕;朱敏;刘晓雯;孙新平;徐洁;赵跃然 刊期: 2010年第04期
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在持续高眼压下对兔视网膜神经节细胞的保护作用.方法 健康新西兰大白兔27只.其中24只(48眼)卡波姆注入前房法制成持续高眼压动物模型,随机分为2组,每只兔一眼为高眼压组(各24眼),另一眼为bFGF实验组(各24眼);另3只(6眼)为正常组.bFGF实验组在建模过程中及成功后1、2、3周玻璃体腔内注射bFGF各1次,正常组在相应的时间仅玻璃体腔内注入与bFGF实验组等体积的磷酸缓冲生理盐水(PBS).术后每日固定时间测量眼压,将眼压维持在30mmHg以上.分别于建模后1、2、3、4周随机处死6只兔子.完整摘除眼球行常规HE染色观察视网膜神经节细胞形态变化并计数存活细胞数目,免疫组织化学染色检测视网膜神经节细胞Bcl-2凋亡基因的表达.建模后4周行电镜观察视网膜神经节细胞超微结构的变化.结果 光镜:建模后两组神经节细胞数目均较正常组减少,自2周后高眼压组与bFGF实验组比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫组织化学:比较视网膜神经节细胞抗凋亡蛋白(RGCsBcl-2)基因蛋白表达的阳性目标面积构成比,第3周时bFGF实验组Bcl-2基因蛋白仍保持较高水平的表达,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).电镜:术后4周bFGF 实验组改变明显轻于高眼压组,细胞器较对照组丰富,部分线粒体仍可见完整嵴.结论 bFGF作为一种神经营养因子,对高眼压下兔视网膜神经节细胞具有保护作用.
作者:杨晓冉;李运;巩磊;肖瑛;郭海燕 刊期: 2010年第04期
目的 构建人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因的原核表达载体,观察表达水平并纯化重组蛋白.方法 根据GenBank中人HMGB1基因序列,用 OptimumGeneTM行密码子优化并合成目的 基因,经PCR扩增,Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,插入原核表达栽体pQE-T7-2的相应位点,构建原核表达质粒pQE-T7-2/HMGB1.经茵落PCR、酶谱分析及序列分析鉴定重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot印迹法鉴定重组蛋白,Ni-NTA树脂亲和纯化目的 蛋白.结果 成功构建人HMGB1克隆栽体和表达载体;表达的目的 蛋白约占菌体总蛋白的20%以上,Western blot法显示,重组蛋白能与抗HMGB1抗体和抗His抗体特异结合,亲和层析纯化后纯度达90%以上.结论 成功构建高效稳定的重组人HMGB1 原核表达载体,获得纯化人HMGB1蛋白,为进一步研究HMGB1的功能奠定基础.
作者:崔彬;王来城;朱敏;焦玉莲;辛玮;马春燕;张捷;赵跃然 刊期: 2010年第04期
目的 比较伴代谢综合征(MS)高血压患者与单纯高血压患者的微量白蛋白尿(MAU)及高分子量脂联素(HMW-ADP)水平的差异,探讨MAU与HMW-ADP的相关性及二者与伴MS高血压的关系.方法 68例原发性高血压患者,根据有无MS分为伴MS高血压组(33例)与单纯高血压组(35例).采用放射免疫分析法测定尿白蛋白/肌酐比(ACR),双抗体夹心ELISA法测定血清HMW-ADP.结果 同单纯高血压组相比,伴MS高血压患者的尿ACR增高,血清 HMW-ADP降低(P<0.01);Pearson相关分析显示,血清HMW-ADP与尿ACR差异无统计学意义(P>0.05);多因素Binary Logistic回归分析显示,空腹血糖(FPG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ACR及HMW-ADP与高血压患者MS的发生具有关联性(P<0.05或0.01).结论 MS加重高血压患者肾功能损害;尿ACR与血清HMW-ADP没有明显相关性;尿ACR增高及血清HMW-ADP降低可促进高血压患者MS的发生.
作者:黄坤玲;王立启;朱世明 刊期: 2010年第04期
目的 研究骨髓异常增生综合征(MDS)患者FLT3基因表达水平及FLT3基因长度突变(FLT3-LM),以探讨其对MDS的临床意义.方法 收集38例诊断明确的MDS及10例非恶性血液病患者骨髓并提取单个核细胞,应用基因组DNA聚合酶链反应(PCR)技术检测FLT3基因表达水平和FLT3-LM.结果 38例MDS患者骨髓单个核细胞有11例检测到FLT3受体的表达,阳性率为28.9%,10例对照组均无FLT3受体的表达,两者差异有统计学意义(P<0.05).11例FLT3受体表达阳性患者中有2例检测到FLT3-LM,阳性率为18.2%,10例正常对照均无FLT3-LM.两者差异有统计学意义(P<0.05).FLT3/ITD(+)和FLT3/ITD(-)患者在年龄、外周血血红蛋白水平、血小板计数、白细胞计数、外周血原始细胞比例之间无相关性.FLT3/ITD(+)患者倾向于有较高的骨髓原始细胞比例(P=0.102).结论 MDS患者中存在FLT3-LM,FLT3-LM与疾病危重程度相关,可能有助于MDS诊断、预后判断和靶向治疗.
作者:周丽云;宋强;李丽珍;赵川莉;王鲁群 刊期: 2010年第04期