张王峰;叶常青;袁梦晖;蒋仁晶;徐文斌;卢受强;李惕
目的 研究动态培养条件下人骨髓来源的间充质干细胞在三维多孔支架中的成骨状况.方法 从人骨髓中分离间充质干细胞进行体外培养扩增,将第3代细胞与多孔β-磷酸三钙支架复合.对细胞/支架复合体进行动态灌注培养(动态培养组)以及静态培养(静态培养组),28 d后采用MTT法检测三维支架中细胞的增殖.通过p-磷酸硝基苯法检测碱性磷酸酶活性,以及应用ELISA方法检测培养过程中骨桥蛋白及骨钙素的分泌.同时对培养后的细胞/支架复合体进行电镜观察及组织学检测,观察人骨髓间充质干细胞形成矿化细胞外基质的能力.结果 培养28 d后,动态培养组细胞增殖及ALP活性显著高于静态培养组(P<0.05).整个培养过程中,动态培养组骨桥蛋白及骨钙素的分泌高于静态培养组.静态培养组中细胞仅在多孔支架周缘增殖,而动态培养组中细胞则在整个支架内增殖.另外,动态培养组支架中形成的组织及新生骨明显多于静态培养组(P<0.05).结论 动态培养有利于人骨髓来源的间充质干细胞在三维多孔支架中增殖并向成骨方向分化.
作者:李德强;刘培来;汤亭亭;卢建熙;张元凯;李明;李振中;戴尅戎 刊期: 2010年第04期
目的 对不同时点输尿管梗阻再通术后肾功能恢复情况做动态观察.方法 将24只犬随机分成3组,行左输尿管结扎制作输尿管梗阻模型.分别在梗阻后第1、4、8周行输尿管再通术,于梗阻术前、后及再通术后2周、4个月进行放射性核素(99mTc-DTPA)显像,观察梗阻肾功能恢复的影像变化,并计算肾小球滤过率.结果 输尿管梗阻1周组犬行再通术后肾功能可完全恢复到正常水平;4周组犬行再通术后肾功能仅能有部分恢复;8周组犬行再通术后未观察到肾功能恢复.结论 输尿管梗阻时间是影响犬肾功能恢复的关键因素,越早行输尿管再通术,肾脏的功能恢复越好.
作者:高莉;王淑贞;汪彤;杨付勇 刊期: 2010年第04期
目的 研究成纤维细胞产生的角质细胞生长因子(KGF)时表皮细胞增殖的影响.方法 自包皮分离培养成纤维细胞和表皮细胞,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)、酶联免疫吸附法(ELISA)、MTT法和免疫荧光等方法分别检测成纤维细胞KGF基因的转录水平、培养液中KGF的浓度、成纤维细胞培养液对表皮细胞增殖的促进作用.结果 RT-PCR结果显示,成纤维细胞中KGF转录水平显著,ELISA法可检测到成纤维细胞培养液中存在较高水平的KGF,细胞计数结果和MTT结果表明,含有KGF的成纤维细胞培养液能够促进表皮细胞增殖,保持表皮细胞的活性,免疫荧光观察到KGF与表皮细胞表面的特异性受体结合.结论 成纤维细胞能够合成和分泌较高水平的KGF,成为其促进表皮细胞增殖的重要因素.
作者:单菲;姜笃银;宗宪磊;付小兵;刘军莉;赵敬杰 刊期: 2010年第04期
目的 探讨激光扫描共聚焦显微镜观察烧伤后创面组织中神经纤维的形态结构及其分布特点的可行性.方法 取烧伤后1、2、3、4周创面组织,以神经丝蛋白(NF)为标记物,利用荧光免疫技术显示组织中的神经纤维,利用激光扫描共聚焦显微镜进行分层扫描,观察不同层面神经纤维的形态;并进行三维重建,观察神经纤维的立体形态.结果 伤后3周内神经纤维数目低于正常,3周后神经数目开始高于正常,并逐渐变长,随着时间延长出现扭曲缠绕或交错排列,分布呈现区域性集中.分层扫描和三维重建可见伤后2周神经稀疏、短小,3周后神经纤维有不规则肿胀和扭曲变形,内部结构不完整并伴有局部断裂、破损甚至崩解,可见明显的皱褶和出芽,并呈现较正常神经纤维更强的荧光信号,在不同层次以及不同角度的切片上观察到的病理改变程度不同.结论 激光扫描共聚焦显微镜能观察到烧伤后伤区神经纤维三维结构,发现组织修复过程中神经存在再生和重塑现象.
作者:王一兵;何剪太;冯永强;李霞;张芮;张阳德 刊期: 2010年第04期
目的 观察初诊2型糖尿病患者经诺和锐30特充强化治疗后胰岛β细胞功能的变化.方法 对55例初诊为2型糖尿病的患者进行为期2周的诺和锐30特充治疗,每日3次皮下注射,分析治疗前后口服葡萄糖耐量试验(OGTT)时空腹血糖(FPG)、糖负荷后血糖(PPG)、胰岛素、C-肽、胰岛素及C-肽曲线下面积、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-B)等指标的变化.结果 短期诺和锐30特充强化治疗后,FPG、PPG较治疗前明显下降(P<0.01),胰岛素、C-肽、胰岛素及C-肽曲线下面积、HOMA-B较治疗前明显升高(P<0.01),HO-MA-IR较治疗前明显下降(P<0.05).总胆固醇、甘油三脂治疗前后差异无统计学意义(P>0.05).结论 短期诺和锐30特充强化治疗可迅速降低血糖,改善胰岛β细胞功能,减轻胰岛素抵抗.
作者:张月华;赵新国;岳玉国;吕英俊 刊期: 2010年第04期
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在持续高眼压下对兔视网膜神经节细胞的保护作用.方法 健康新西兰大白兔27只.其中24只(48眼)卡波姆注入前房法制成持续高眼压动物模型,随机分为2组,每只兔一眼为高眼压组(各24眼),另一眼为bFGF实验组(各24眼);另3只(6眼)为正常组.bFGF实验组在建模过程中及成功后1、2、3周玻璃体腔内注射bFGF各1次,正常组在相应的时间仅玻璃体腔内注入与bFGF实验组等体积的磷酸缓冲生理盐水(PBS).术后每日固定时间测量眼压,将眼压维持在30mmHg以上.分别于建模后1、2、3、4周随机处死6只兔子.完整摘除眼球行常规HE染色观察视网膜神经节细胞形态变化并计数存活细胞数目,免疫组织化学染色检测视网膜神经节细胞Bcl-2凋亡基因的表达.建模后4周行电镜观察视网膜神经节细胞超微结构的变化.结果 光镜:建模后两组神经节细胞数目均较正常组减少,自2周后高眼压组与bFGF实验组比较差异有统计学意义(P<0.05).免疫组织化学:比较视网膜神经节细胞抗凋亡蛋白(RGCsBcl-2)基因蛋白表达的阳性目标面积构成比,第3周时bFGF实验组Bcl-2基因蛋白仍保持较高水平的表达,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).电镜:术后4周bFGF 实验组改变明显轻于高眼压组,细胞器较对照组丰富,部分线粒体仍可见完整嵴.结论 bFGF作为一种神经营养因子,对高眼压下兔视网膜神经节细胞具有保护作用.
作者:杨晓冉;李运;巩磊;肖瑛;郭海燕 刊期: 2010年第04期
目的 观察住院期间高血糖对缺血性脑血管病患者预后的预测价值.方法 选取无糖尿病痛史且以首发缺血性脑血管病入院的患者150例为观察对象,分别测定入院随机血糖,≥7.8 mmol/L定义为入院高血糖;第1、2、3、5、7天晨起空腹血糖,其平均值≥6.1 mmol/L定义为住院期高血糖.以3个月死亡率作为评价指标.结果 校正多个变量因素后,住院后发生高血糖与死亡风险增加相关(HR:1.80,95%CI:1.39~2.86,P<0.01),不论是入院时高血糖组的患者(HR:4.83,95%CI:1.93~12.06,P<0.01),还是入院时血糖正常组的患者(HR:1.64,95%CI:1.06~2.54,P=0.03).住院后血糖达标的患者与持续性高血糖患者相比,死亡风险降低(HR:0.21,95%CI:0.08~0.52).入院第一天血糖正常而后出现高血糖的患者与血糖持续正常的患者相比,死亡风险增加(HR:1.55,95%CI:1.01~2.39,P=0.04).结论 住院期间的高血糖与死亡率增加有关,对缺血性脑血管病的预后有预测价值.入院后血糖达标可提高生存率.
作者:李国华;王翠兰 刊期: 2010年第04期
目的 研究抗性淀粉(RS)对结(直)肠癌大鼠的肠道功能及变性隐窝病灶(ACF)的影响.方法 将50只雄性Wistar大鼠随机分为阴性、阳性对照组及RS低、中、高剂量组.阳性时照组大鼠从实验第2周开始腹腔注射氧化偶氮甲烷(AOM),每周1次,连续2周.阴性时照组注射生理盐水.RS各剂量组致癌剂处理同阳性对照组,并分别自由摄食含7.6%、15.2%及22.8%RS的饲料.阴性和阳性对照组大鼠摄食普通饲料.实验期间每周称重1次,于第5周末和第7周末分别进行粪便pH及排便实验.第16周断头处死所有大鼠,取出结肠组织进行指标ACF的测定.结果 与阳性对照组相比,RS各剂量组ACF数目、肠道转运时间(GTT)均明显减少(P<0.01),粪便pH也有所下降(P<0.05),差异有统计学意义.结论 RS有利于肠道内的环境健康,降低ACF的发生,可能是预防结(直)肠癌发生的机制之一.
作者:孟妍;陈立勇;徐贵发 刊期: 2010年第04期
目的 比较解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTs)4、5和基质金属蛋白酶(MMP)1、3在骨关节炎(OA)患者早期和中晚期血清中的表达,并探讨其在OA患者不同时期的作用和早期诊断意义.方法 70例单关节OA患者按照MRI Recht分级标准分为早期OA组(44例)和中晚期OA组(26例),同时设健康对照组(30例).应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-1和MMP-3在三组血清中的表达,以ELISA光密度(OD)值代表所测各项在血清中的表达水平.结果 早期OA组的ADAMTS-4表达水平高于中晚期OA组;ADAMTS-5、MMP-1和MMP-3在早期OA组的表达水平均低于中晚期OA组(P均<0.05).而正常对照组血清中仅有少量聚蛋白多糖酶和MMP-1的表达.结论 聚蛋白多糖酶在OA早期和中晚期血清中均有高表达,MMP在OA中晚期血清中有高表达,ADAMTS-4有早期诊断意义.
作者:李文;张磊;张成琪;杜春玲;王广丽;闫新峰;于泓;宋淑香 刊期: 2010年第04期
目的 研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对大鼠颈脊髓亚急性压迫性损伤的治疗效果.方法 80只Wistar大鼠随机分为4组,假手术组(A组,n=5)仅行椎板切除,余大鼠用后路渐进性压迫法造成C5节段脊髓压迫性损伤.造模成功后,生理盐水对照组(B组,n=25)静脉给予生理盐水1 mL/d,小剂量治疗组(C组,n=25)和大剂量治疗组(D组,n=25)分别静脉给予rhEPO 500 u/(kg·d)、5000 u/(kg·d);损伤后分别于3、7、14、21、28 d用BBB评分评价四肢运动功能;免疫组化法检测受压颈髓节段EPO和EPO-R的分布及数量;各时间点处死模型,脊髓标本进行TUNEL,染色和流式细胞仪定量检测细胞凋亡情况.结果 EPO-R 随颈脊髓亚急性压迫性损伤渐重呈反应性增多,C、D组的各时间点BBB评分明显高于B组(P<0.01);TUNEL 染色和流式细胞仪检测受压脊髓细胞凋亡结果显示:在21 d时,rhEPO能有效抑制脊髓运动神经元细胞的凋亡(P<0.01),小剂量rhEPO维持治疗给药剂量效果好.结论 颈脊髓亚急性压迫性损伤后给予rhEPO可减轻脊髓的运动神经元细胞的凋亡,促进脊髓运动功能恢复,且小剂量rhEPO维持治疗即可取得良好效果.
作者:宁斌;张爱军;贾堂宏;宋宏亮;郭舒亚;龚维明 刊期: 2010年第04期
目的 研究大Y染色体对体外受精-胚胎移植结局的影响.方法 选取2006年1月至2008年12月在山东大学附属省立医院生殖医学中心完成体外受精-胚胎移植的新鲜胚胎移植周期.其中,男方染色体G显带示为大Y(Y≥18号染色体)且其妻排除已知的影响体外受精-胚胎移植结果疾病的治疗周期为大Y组(33例患者,47个治疗周期),同期在本中心行体外受精-胚胎移植治疗的其他所有治疗周期为群体对照组(6620个周期).结果 大Y组与群体对照组比较,其受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、妊娠率、早期流产率等各项指标的差异均无统计学意义(P>0.05),但在畸形率、出生性别比例方面,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),即大Y组畸形儿出生与女孩出生所占比例有较明显升高.结论 大Y染色体对体外受精-胚胎移植的胚胎发育及近期妊娠结果均无显著性影响,但在大Y染色体患者的妻子行体外受精-胚胎移植时,女孩更易出生.
作者:范玲玲;颜军昊;李媛;高芹;陈子江 刊期: 2010年第04期
目的 探讨外周血内皮祖细胞(EPC)水平与原发性肝癌肝动-门静脉瘘(HA-PVS)形成的相关性.方法 用流式细胞术测定20例健康对照组,22例慢性乙型肝炎组,30例无HA-PVS的肝癌组,28例有HA-PVS的肝癌组患者外周血EPC的水平.结果 有瘘肝癌组患者外周血EPC占淋巴细胞的比例为(21.09±2.79)‰,无瘘肝癌组(12.72±3.05)‰,慢性乙型肝炎组(3.53±2.11)‰,健康对照组(2.98±2.64)‰.与健康对照组和幔乙肝组比较,两肝癌组EPC水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.01).有瘘肝癌组中,EPC升高更明显(P<0.01),块状型肝癌、自发性细菌性腹膜炎和门脉栓塞的发生率高,均与无瘘肝癌组存在统计学意义(P=0.031,P=0.036,P=0.044).结论 外周血EPC水平与原发性肝癌HA-PVS的形成有关,并能反映肝癌的类型、转移和预后.
作者:布学慧;郑昭敏;杜文军;刘靓雯;陈士俊 刊期: 2010年第04期
目的 观察黄芪在高糖环境下对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Apelin/APJ mRNA表达的影响,探寻黄芪对HUVECs的作用机制.方法 原代培养HUVECs,根据实验要求分为:对照组、高糖组、低浓度黄芪组(0.1 g/L浓度黄芪+高糖)、高浓度黄芪组(0.2 g/L浓度黄芪+高糖),用不同浓度的葡萄糖和黄芪注射液培养24 h后,用细胞增殖活力实验(CCK-8)检测HUVECs的增殖活力;在倒置相差显微镜下观察HUVECs的形态变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Apelin/APJ mRNA的表达.结果 经过24h培养,与对照组相比,高糖组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),镜下可见细胞形态改变,Apelin/APJ mRNA的表达减少(P<0.05).与高糖组相比,黄芪干预组细胞增殖活力升高(P<0.05),镜下可见细胞形态明显改善,Apelin/APJ mRNA的表达增高(P<0.05).结论 黄芪可减轻高糖对内皮细胞的损伤,亦可通过升高Apelino/APJ对HUVECs起保护作用.
作者:魏秀娟;吴逸南;姜虹;苗青;王荣 刊期: 2010年第04期
目的 研究免疫复合物对单核巨噬细胞的增殖、细胞因子的分泌及吞噬功能的调节作用.方法 免疫复合物组:细胞坏死上清+系统性红斑狼疮(SLE)患者血清;对照组有5组:坏死上清+正常人血清组、坏死上清组、SLE血清组、正常人血清组和培养基组,以上分别作用于U937细胞和U937细胞诱导产生的巨噬细胞.24 h后,用CCK-8法检测U937细胞的增殖.RT-PCR法检测U937细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和B细胞活化因子(BAFF)的变化,中性红比色法检测诱导产生的巨噬细胞的吞噬功能.结果 与对照组相比,免疫复合物能明显促进U937细胞的增殖(P<0.05),TNF-α和BAFF的mRNA表达水平明显增加(P<0.05),并明显抑制巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05).结论 在免疫复合物作用下,单核巨噬细胞系统(MPS)处于异常活化状态,使免疫复合物的形成增多而清除减少,从而参与了SLE的发生发展.
作者:曲芸芸;马春燕;朱敏;刘晓雯;孙新平;徐洁;赵跃然 刊期: 2010年第04期
目的 探讨Ⅰ期假体植入乳房再造在保留乳头乳腺癌改良根治术中应用的可行性.方法 2005年2月至2009年4月对22例早期乳腺癌患者实施保留乳头的乳腺癌改良根治加Ⅰ期假体植入乳房再造术.按自愿原则采用假体植入Ⅰ期乳房再造,术后治疗按常规进行.结果 再造手术均取得成功,经过6~56个月随访,全部病例均未发现复发和转移,再造乳房形态自然,美容效果好,术后外观评价优良率90.9%,差者9.1%.其中2例乳头乳晕部分皮肤发生缺血坏死,通过换药愈合;2例术后出现轻度假体移位.结论 保留乳头乳腺癌改良根治术后Ⅰ期假体植入乳房再造美容效果满意,手术操作简单易行,是早期乳腺癌患者的一种安全有效的手术方式.
作者:高德宗;张强;李亮;李玉阳;余之刚 刊期: 2010年第04期
目的 探讨颅内肿瘤的危险因素和保护因素.方法 采用成组设计病例对照研究方法,对264例原发性颅内肿瘤患者和273例对照进行问卷调查,应用非条件Logistic回归模型推断暴露因素与颅内肿瘤的关系.结果 单因素和多因素Logistic回归分析结果表明,源于配偶的被动吸烟、源于同事的被动吸烟、职业性接触汽(柴)油和经常接触农药可增加患颅内肿瘤的危险性,其OR值及95%CI分别为1.777(1.103,2.861)、1.911(1.095,3.334)、4.298(1.008,18.314)和1.728(1.000,3.049).饮酒和啤酒酒精摄入量<9mL/d可降低忠颅内肿瘤的危险性.其OR值及95%CI分别为0.297(0.108,0.821)和0.216(0.046,1.024).结论 颅内肿瘤的危险因素为源于配偶及同事的被动吸烟、职业性接触汽(柴)油和经常接触农药;保护因素为饮酒和啤酒酒精摄入量<9mL/d.
作者:吴敏;李刚;孙金龙;江玉泉;王洁贞 刊期: 2010年第04期
目的 探讨颅内血管外皮细胞瘤中是否存在血管生成拟态(VM)及其意义.方法 选取12例颅内血管外皮细胞瘤病理标本,进行HE染色、CD34-PAS双重染色,观察是否存在VM.结果 9例颅内血管外皮细胞瘤组织中观察到存在典型PAs染色阳性、CD34染色阴性的管道,在这些管道中均可以找到红细胞.结论 颅内血管外皮细胞瘤组织中存在VM.
作者:韩允;杨伟;范胜强;徐广明 刊期: 2010年第04期
目的 探讨胎盘蛋白13(PP13)和妊娠相关子宫内膜蛋白(glycodelin)在子痫前期患者血清中的表达.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定子痫前期组(包括轻度子痫前期和重度子痫前期组)及正常妊娠妇女外周血血清中PP13、glycodelin的浓度.结果 ①子痫前期组孕妇血清PP13的水平显著高于正常妊娠组(P<0.01),而glycodelin的水平显著低于正常妊娠组(P<0.01);②轻度子痫前期组PP13水平低于重度子痫前期组(P<0.01),而轻度子痫前期与重度子痫前期组的glycodelin水平无明显差异(P>0.05);③PP13、glycodelin在子痫前期患者中不具有相关性;④血清PP13的水平与孕周相关.结论 子痫前期患者血清中PP13、glycodelin水平均异常表达,可能参与了子痫前期的发生,发展.同时血清PP13水平与病情的严重程度有关,可能是预测疾病进展的一项指标.
作者:孙媛;陈丽君 刊期: 2010年第04期
目的 初步探讨山东汉族人群中DBP基因416和420位点基因多态性与多发性硬化(MS)疾病发生的关系.方法 经临床诊断为MS患者46例为MS患病组,同期健康体检者43例为对照组,检测其DBP基因416位点(HaeⅢ酶切位点)和420位点(Sty Ⅰ酶切位点)基因多态性,并进行统计学分析.结果 MS患病组和对照组比较,DBP基因416住点和420位点基因型频率、等位基因频率和表现型频率分布差异均不显著.结论 山东汉族人群中DBP基因416位点和420位点基因多态性与MS疾病发生无显著相关性.
作者:李晓红;LI Yun;李芸;王班琴;刘师莲 刊期: 2010年第04期
目的 探讨女性冠心痛经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的临床特点及PCI治疗前服用β-受体阻滞剂对患者的保护作用.方法 选择冠心病患者,男191例作为男性组,女75例作为女性组,均于PCI治疗前服用 β-受体阻滞剂.同时收集拟行PCI的女性患者50例,术前及术后均未服用β-受体阻滞剂.所有患者均行PCI,并抽取肘静脉血测定肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)及肌钙蛋白T(TNT).结果 与男性组比较,女性组的多支病变明显增高(P均<0.05),PCI术后出血事件、肾功能衰竭及死亡率等并发症均显著增加(P均<0.05).与服用β-受体阻滞剂女性组比较,未服用药物的患者PCI术前和术后E(P<0.01)、NE(P<0.05)均明显增高,术后CK-MB和TNT均显著增高(P均<0.01);其心血管事件(MACE)、心绞痛、心律失常、出血事件的发生率和死亡率均显著升高.结论 女性患者冠心病病情及PCI术后较男性严重,提前服用β-受体阻滞剂具有保护作用.
作者:辛辉;巩会平;张蕊;康维强;葛志明;张运 刊期: 2010年第04期