于德新；刘成；李传福；张晓明；马祥兴
目的 研究脐血CD34~+细胞向巨核细胞的诱导分化及体外扩增,并观察此过程中巨核细胞特异性基因表达的变化.方法免疫磁珠法分离获得CD34~+细胞培养在无血清无基质培养基中,采用TPO+SCF+IL-3+IL-6、TPO+SCF+IL-3、TPO+SCF三种不同因子组合对其诱导分化及扩增.收集3、7、10、14 d的扩增产物,运用荧光显微镜检测巨核细胞的表面标志;流式细胞术(FCM)检测巨核细胞的凋亡;对巨核细胞进行DNA含量检测以及荧光定量PCR检测特异性基因表达的变化.结果分离获得的CD34~+细胞在体外可以有效扩增,随培养时间的延长,CD34~+/CD41~+细胞数第7天达高值,之后逐渐下降;而CD41~+、CD42b~+、CD61~+细胞随培养时间的延长表达量逐渐增高.DNA含量检测发现,随着培养天数的增加,多倍体细胞所占的百分比增加.三种因子组合中TPO+SCF+IL-3+IL-6组扩增效率高.荧光定量PCR显示转录因子GATA-1、NF-E2、TXS、GPⅡb和HPRT在第7天表达量高,之后下降.凋亡转录因子APAF-1随培养天数的延长表达量增加.结论脐血CD34~+细胞在体外可向巨核细胞诱导分化及扩增,其基因表达的变化也支持这一结论.
作者：王海莲；鞠秀丽；葛伟；李栋；沈柏均 刊期： 2009年第11期
目的 观察黄连水煎刑漱口对固定正畸患者牙龈炎发生率的影响.方法选取11～19岁固定正畸患者100名,随机分为治疗组50例(常规卫生保健措施和黄连水煎剂漱口)和对照组50例(常规卫生保健措施和生理盐水漱口),在放置固定矫治器前及放置后4、8、12周分别测定上下颌第二前磨牙和第一磨牙处的牙龈指数(GI)和菌斑指数(PLI),并进行统计学分析.结果放置固定矫治器后4周复查,两组患者牙龈指数和菌斑指数均上升,对照组明显,但二者之间无统计学差异.8、12周后复查,治疗组与对照组牙龈和菌斑指数均升高且二者有统计学差异(P<0.05).结论黄连水煎剂漱口可有效降低固定正畸患者牙龈炎的发生率.
作者：田李静；梅银生；张文娟；张君；王智 刊期： 2009年第11期
目的 观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂S8203580对小鼠早胚发育及植入的影响.方法①采用体外胚胎培养技术,将孕2 d小鼠早胚随机分组,接种到添加不同浓度抑制剂的培养液内进行培养,以观察p38MAPK特异性抑制剂对早胚发育的影响;②体内官腔注射:取孕4 d小鼠,由子宫角注射不同浓度的SB203580,于孕8d检查胚胎植入数,同时取子宫,观察内膜的组织学变化.结果①添加抑制剂组的早胚不能发育为胚泡,停滞在8～16细胞阶段.但去除抑制剂后继续培养,幼胚仍能发育到胚泡阶段;②注射SB203580组的小鼠,胚胎植入数明显少于对照组(P<0.01).镜下可见,其胚胎组织呈退化坏死状态,胚胎周围蜕膜细胞呈明显的空泡样变性,蜕膜及胚胎中均见大量血细胞浸润.结论①p38MAPK在小鼠植入前胚胎发育过程中起作用;②p38MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制在体小鼠胚泡植入及植入后胚胎和蜕膜细胞的发育.
作者：于清梅；武玉玲 刊期： 2009年第11期
经皮椎体成形术(percutaneous vertelbropltasty, PVP))具有稳定骨折、恢复椎体力学强度、防止椎体进一步压缩和缓解疼痛等作用,在临床上逐步得以推广.本文对2004年8月～2007年8月52例骨质疏松性骨折病例应用经皮椎体成形术治疗的疗效进行了总结,报告如下.
作者：信维伟；程光齐；朱颖华；李展春 刊期： 2009年第11期
目的 制备栽有喜树碱的混合胶束系统,增加喜树碱的载药量.方法以Pluronic P105(P105)和Phronic L61(L61)为材料,难溶性抗癌药物喜树碱为模型药物,制备了载药混合胶束系统.对混合胶束系统的载药量、稳定性进行了研究.采用人胸腺癌细胞系(MCF-7),对载药混合胶束的细胞毒性进行了研究.结果所制备的混合胶束系统,长期存放和多倍稀释后仍然能够稳定存在;加入L61后喜树碱的载药量明显提高.细胞毒性实验结果表明,混合胶束对人胸腺癌细胞系(MCF-7)的细胞毒性高于原料药.结论 Phronic P105/L61混合胶束系统是一种比较稳定的喜树碱给药系统.
作者：孙新堂；王金丽；李凌冰 刊期： 2009年第11期
目的 探讨罗格列酮对体外培养肝星状细胞MMP-2及TIMP-1基因表达的影响.方法采用HSC-T6肝星状细胞系,经不同浓度的罗格列酮干预,采用RT-PCRA法检测各组MMP-2及TIMP-1基因的表达情况.结果在10、20μmol/L罗格列酮组,TIMP-1的表达较空白对照组明显降低(P<0.05),而MMP-2的表达与空白对照组相比差异无统计学意义.结论罗格列酮的抗肝纤维化作用与抑制HSC表达TIMP-1有关.
作者：李森林；赵景润；任晓燕；马青竹；谢佳平；李振方；郎翠翠 刊期： 2009年第11期
目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定掺入降糖宁中的格列苯脲含量的不确定度评定方法.方法建立数学模型,对含量测定过程中各影响因素进行分析评估.结果通过不确定度来源的识别及量化分析,计算各变量的不确定度和合成不确定度,得出测定结果的扩展不确定度.结论该评定方法适用于HPLC法测定中药中非法掺入的格列苯脲含量的不确定度评定.
作者：凌霄；解斐；吴敬德 刊期： 2009年第11期
作者：卢雪峰 刊期： 2009年第11期
目的 观察髓过氧化物酶(MPO)对内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响及二甲双胍的干预作用.方法应用western-blot检测内皮细胞内MCP-1、腺苷酸活化蛋白激酶α亚基(AMPK_α)蛋白表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养液中单核细胞趋化蛋白-1的含量变化.同时应用RNA干扰技术,进一步观察AMPK_α的作用.结果MPO显著增加MCP-1的蛋白表达和培养液中MCP-1的浓度(P<0.01),随作用浓度和时间增加而显著增强.二甲双胍显著减少内皮细胞MCP-1的蛋白表达和培养液中MCP-1的浓度(P<0.01),而AMPK_αSiRNA干预后,二甲双胍对内皮细胞MCP-1的影响作用显著减弱(P<0.01).结论MPO可刺激内皮细胞MCP-1的蛋白表达和分泌,二甲双胍通过促使AMPK_α磷酸化,激活AMPK_α,抑制MPO对内皮细胞的促炎性反应,从而发挥其有益作用.
作者：张栩；于文；管庆波；赵家军 刊期： 2009年第11期
目的 验证不同血细胞分析仪检测结果之间的可靠性和可比性,规范操作血细胞分析仪的比对试验.方法参照国际血液学标准化委员会(ICSH)及美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件,在仪器正常运行的情况下,评价各比对仪器的携带污染率、精密度和总精密度、差异百分率;分析比较20份抗凝新鲜全血中各项指标在不同血细胞分析仪之间的差异;每日取高、中、低3份新鲜血,在各仪器上平行检测,连续比对7日,观察各项指标与参考样机之间的相关性;分析比较仪器分类与手工分类的相关性;通过直线回归方程计算相对偏差,估计每台仪器各检测指标的试验误差.结果除白细胞分类外,各比对仪器携带污染率正常;各检测指标的变异系数以及在不同血细胞分析仪上的总体变异系数均<5%;各检测项目的差异百分率符合ICSH制定的标准;20份样品在不同血细胞分析仪上检测的各项指标经两两比较的q检验(Newman-Keuls法),各配伍组总体均数无统计学差异(P>0.05);连续7日测得的各项指标与参考样机之间的相关系数均大于0.97,其相对偏差在实验允许误差范围内.白细胞分类中,中性粒细胞和淋巴细胞在各比对仪器之间以及仪器与手工分类之间的相关性较好,而嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞和单核细胞,不论在各仪器还是仪器与手工分类之间,都存在较大的试验误差(P<0.05,P<0.01).结论不同血细胞分析仪检测结果之间的比对试验急需规范化,同一科室的多台血细胞分析仪应定期进行比对,以保证检验结果的准确性.
作者：王谦；展凤霞；郑桂喜；王传新；胡志敏；王洪春 刊期： 2009年第11期
目的 探讨依达拉奉(Edaravone)对弥漫性脑创伤后认知功能障碍的治疗作用及其机制.方法随机将SD大鼠分为对照组(40只)、创伤组(68只)、Edaravone干预组(68只).Mamlarou's法建立SD大鼠弥漫性脑创伤模型.在电镜下观察伤后1、6、24、48、72h线粒体形态结构变化;采用免疫组化和Western blot法检测上述时间点磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和Cvtc的表达;伤后第3天水迷宫法测试动物学习记忆功能,连测7 d.结果伤后海马区部分神经细胞线粒体肿胀、内脊断裂、消失;免疫组化显示p-ERK1/2和细胞色素C(Cytc)阳性产物主要定位于细胞浆,Western blot定量显示,伤后p-ERK1/2和Cytc表达水平增高,分别于24、48 h达高峰;水迷宫实验显示,创伤组大鼠搜索安全岛潜伏期(230.9±20.9)s明显高于对照组(50.7±4.9)s;Edaravone治疗组线粒体受损程度、p-ERK1/2和Cytc表达水平以及搜索安全岛潜伏期(70.6±8.7)s均低于创伤组.结论Edaravone对弥漫性脑创伤有治疗作用,其机制与抑制伤后ERK12活化、减轻线粒体形态结构损伤、减少Cyte释放有关.
作者：赵雅宁；张文丽；高俊玲；饶颖臻；田艳霞；尹立国；崔建忠 刊期： 2009年第11期
目的 探讨用胎肝细胞移植治疗小鼠α-L-艾杜糖苷酶(IDUA)缺陷引起的粘多糖贮积症(MPS),筛选免疫抑制方案.方法将人胎肝细胞移植给经不同免疫抑制剂方案处理的IDUA缺陷小鼠,流式细胞仪检测移植前、后受体小鼠T细胞亚群(CD3、CD4/CD8比例);酶联免疫吸附剂测定(EHSA)法检测免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(TFN-γ)水平;荧光分光光度计法检测血清IDUA活性.结果受体移植后血清中反映免疫状态的指标(T细胞亚群、IL-2、TNF-α、IFN-γ)均显著升高(P<0.05);血清IDUA活性在移植后第5天显著提高(P<0.01),后随时间延长,活性随之衰减;经CTX+CsA+FTY720+强的松联合免疫抑制预处理组在移植后IDUA活性维持持久.结论胎肝细胞移植能提高IDUA活性.由于免疫排斥反应,移植前应进行免疫抑制预处理,以CTX+CsA+FTY20+强的松联合方案免疫抑制效果佳.
作者：刘晓莉；万江波；梁辉 刊期： 2009年第11期
目的 分析轻度认知功能障碍(MCI)患者载脂蛋白E(ApoE)基因型及等位基因频率的分布及血脂水平,为MCI的防治提供理论依据.方法对120例MCI患者(MCI组)和120例健康者(对照组),进行简易精神状态检查表(MMSE)、日常生活行为量表(ADL)、总体衰退量表(GDS)、Hachinski缺血积分量表、汉密顿抑郁量表(HAMD)评测,采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析方法(PCR-RFLP),测定ApoE各基因型和等位基因频率并测定各例总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平.结果MCI组在时空定向、即刻记忆、延时记忆、注意计算力、理解力均较对照组差;ε3/4基因型频率及ε4等位基因频率均高于对照组(P<0.05);TC和LDL-C明显高于对照组(P<0.05),MCI组和对照组ε4组血脂均较ε3、ε2高(P<0.05).结论ApoE基因型频率和等位基因频率在MCI组和对照组间的分布不同,ApoE基因可能是MCI的风险基因,MCI患者存在血脂紊乱,ApoEε4与MCI患者血脂紊乱有关.
作者：徐明明；易咏红；张萌 刊期： 2009年第11期
目的 探讨鞘氨醇激酶/1-磷酸鞘氨醇信号途径(SPK/S1P)对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响.方法体外培养人肝癌细胞株HepG2,观察5～20μmoL/L浓度范围鞘氨醇激酶的特异性抑制剂N,N'-二甲基鞘氨鞍醇(DMS)对HepG2细胞增殖、凋亡的影响.结果MTT实验结果显示,5～20μmoL/L浓度范围的DMS对细胞增殖均有抑制作用,透射电镜观察对照组细胞可见细胞凋亡的变化,TUNEL标记法检测处理组阳性细胞表达百分数较对照组明显增多(P<0.01).结论DMS对HepG2细胞的生长增殖具有抑制作用,并促其发生凋亡.
作者：姜大磊；高艳景；刘慧亚 刊期： 2009年第11期
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)与胰岛素抵抗(IR)的相关性.方法选择330例COPD患者,根据<慢性阻塞性肺疾病诊治指南>(2007年修订版)分为:轻度COPD组95例,中度COPD组95例,重度COPD组75例,极重度COPD组65例,并设正常对照组40例.取新鲜标本以全自动生化分析仪测定所有对象的空腹血糖、胰岛素、血脂,免疫比浊法测定尿白蛋白排泄率,电发光测定法测定胰岛素敏感指数(ISI)等指标.结果与正常对照组相比,各COPD组空腹血糖、血脂、尿白蛋白排泄率均显著升高,ISI显著降低(P均<0.05).与轻、中度COPD组相比,重度、极重度COPD组空腹血糖、血脂、尿白蛋白排泄率显著升高,ISI显著降低(P均<0.05).结论慢性阻塞性肺疾病的患者存在胰岛素抵抗,并随疾病程度的加重,胰岛素敏感性降低.
作者：黄芬；蒋钰；朱厚珍；李春明 刊期： 2009年第11期
目的 观察酒精性肝纤维化与盘状结构域受体2(DDR2)的关系以及复方甘草酸苷(GGT)治疗对二者的影响.方法48只大鼠随机分为正常对照组、模型组、停酒组、未停酒组、停酒治疗组及未停酒治疗组(n=8).模型组酒精灌胃16周后,与正常对照组一起处死.其余4组于酒精灌胃16周后分别予以停酒、不停酒、停酒+GGT治疗、不停酒+GGT治疗4周,至20周末全部处死.检测各组血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(CⅣ)含量,取肝组织进行HE染色及Masson染色观察其组织病理学变化,实时荧光定量PCR和Western blot蛋白印迹法分别检测肝组织DDR2 mRNA和蛋白表达.结果酒精灌胃16周后,大鼠肝组织呈明显肝纤维化病理表现,血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平和肝组织胶原面密度及DDR2表达均较正常对照组升高(P<0.01).停酒治疗组与停酒未治疗组、未停酒治疗组与未停酒未治疗组比较,上述各指标均降低(P<0.05).结论CGT对酒精性肝纤维化具有一定的治疗作用,其作用可能与下调DDR2的表达相关.
作者：张玉泉；阎明；张喜红；刘慧敏 刊期： 2009年第11期
目的 探讨急性心肌梗死(AMT)发病前伴有糖尿病、高血压对心肌梗死范围影响的程度.方法选取2006年6月～2008年6月收住院的AMI患者62例,根据AMI发病前是否伴有合并症分为3组,其中伴有糖尿病18例为A组;伴有高血压21例为B组;不伴有糖尿病和高血压23例为C组.测定AMI患者血清肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶-Mbmass(CK-Mbmass)、肌酸激酶-MB活性(CK-Mbact)的动态变化情况.结果①血清cTnT、CK-Mbmass、CK-Mbact出现异常值的时间,A组患者分别平均为3.9、2.9和3.0 h;B组患者分别平均为3.5、1.6和2.3 h;C组患者分别平均为2.8、1.3和1.7 h;②上升至峰值的时间,A组患者分别平均为38.9、28.5和32.4 h;B组患者分别平均为35.4、26.7和29.5 h;C组患者分别平均为30.5、18.2和20.7 h;③自峰值下降至正常的时间,A组患者分别平均为78.5、72.6和63.2h;B组患者分别平均为58.7、52.4和41.7h;C组患者分别平均为62.5、58.6和52.5 h;④根据动态变化计算心肌梗死量,A组患者分别平均为45.2 cTnT-g、42.5 CK-Mbmass-g、45.7 CK.Mbact-g;B组患者分别平均为40.8 cTnT-g、37.4 CK-Mbmass-g、39.2 CK-Mbact-g;C组患者分别平均为31.4 cTnT-g、28.7 CK-Mbmass-g、31.6CK-Mbact-g.结论AMI发病前伴有糖尿病、高血压的患者病情重,并发症发生率高,心肌梗死范围明显增大.
作者：巩祖顺；邢启崇 刊期： 2009年第11期
目的 探讨外源性肾上腺髓质素(ADM)对肾脏机械性损伤早期肾小管评分的影响.方法选健康成年普通级Wistar大鼠104只,随机分为4组:正常对照组8只,创伤组32只,创伤前注射ADM组32只,创伤后注射ADM组32只.后3组动物分别于创伤后1、6、12和24 h各处死8只,采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型.两给药组分别于创伤前、后10min腹腔注射ADM(0.1 nmol/kg).3组肾损伤大鼠平均分为4批,分别于创伤后1、6、12和24 h迅速解剖动物提取下肾脏标本,10%甲醛固定.HE染色观察创伤后肾组织的基本病理改变.结果单纯创伤组于创伤早期(1、6 h)肾小管评分明显升高(P<0.05),急性创伤后期(12、24 h)上述指标逐渐降低,接近正常对照组(P>0.05).外源性ADM可降低肾小管评分.结论肾脏损伤期间给予外源性ADM对肾组织均有明显的保护作用,其作用强弱与给药时间关系密切.
作者：韩晓鹏；孙少华；刘宏斌 刊期： 2009年第11期
目的 探讨2型糖尿病、糖耐量减低者内脏和皮下脂肪组织的内脂素基因表达及与相关代谢指标的关系.方法研究对象均为汉族人群,对照组23例,无糖尿病家族史;糖耐量减低组(IGT组)18例;2型糖尿病组(T2DM组)22例.同时测量血压,计算体质量指数(BMI)及腰臀比(WHR),测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(Fins)等指标,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).半定量RT-PCR法检测脂肪组织内脂素基因的表达水平.结果T2DM组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量高于IGT组和对照组(P均<0.01).IGT组与对照组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量差异无统计学意义(P>0.05).对照组、IGT组及T2DM组皮下脂肪组织的内脂素基因表达量无统计学差异(P>0.05).肥胖/超重组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量高于体质量正常组(P<0.01).各组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量均高于对应的皮下脂肪组织的表达(P均<0.01).相关分析中,网膜脂肪组织内脂素基因表达与WHR相关(P<0.05);与年龄、BMI、SBP、DBP、FINS、FBG、HbA1C、HOMA-IR均无相关性(P>0.05),而皮下脂肪组织内脂素基因表达则与,TC相关(P<0.05).结论内脂素在汉族人群T2DM、肥胖者中表达增加,且主要在内脏脂肪组织中表达,在维持葡萄糖稳态平衡中发挥作用.
作者：姜秀云；郑冬梅；庄霞；张海清；孔磊；管庆波；赵家军 刊期： 2009年第11期
目的 研究吡非尼酮(PFD)对实验性大鼠的抗肝纤维化作用.方法 45只雄性Wistar大鼠随机均分为3组.模型纽腹腔注射1%二甲基亚硝胺(DMN)10mg/(kg·d),每周连续3d,共4周,制作肝纤维化模型;干预纽除应用DMN外,同时给予P阳500ms/(ks·d)灌胃,1次/d,共4周;模型组及正常组以等体积生理盐水灌胃作对照.4周试验结束时进行组织学检查、电镜观察、血清肝纤维化指标、肝功能及转化生长因子-β1(TGF-β1)检测.结果与模型组相比,干预组大鼠体质量下降较少(P<0.05)、肝脾肿大较轻(P<0.05),血清透明质酸、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原浓度均明显低于模型组(P<0.05);干预组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素及'TGF-β1含量与模型组相比明显降低(P<0.001);MASSON染色显示,干预组肝脏纤维化及炎症反应明显减轻,无明显假小叶;透射电镜观察证实干预组大鼠肝细胞损伤明显减轻,肝窦及Disse腔内胶原纤维沉积明显减少.结论 PFD对实验性大鼠肝纤维化模型具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制TGF-β1的产生有关,PFD有可能用于肝脏疾病的抗纤维化治疗.
作者：杜磊；王昌源；张立华；谭炳芹 刊期： 2009年第11期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
