任翠爱；张芬莲；赵秀兰；张茂宏
目的:初步探讨口腔不同组织来源的成纤维细胞生物学特性的差异,为深入研究口腔癌相关成纤维细胞(CAFs)的生物学行为奠定基础.方法:用组织块培养法获得原代CAFs和正常粘膜成纤维细胞(NMFs),0.25%胰蛋白酶消化传代和纯化细胞;通过形态学观察和免疫细胞化学染色对口腔CAFs和NMFs进行鉴定:采用半定量RT-PCR检测口腔CAFs和NMFs 4种基因的表达.结果:获得第三代纯化口腔CAFs和NMFs,CAFs表达Vimentin和α-SMA,NMFs只表达Vimentin,二者均不表达Cytokeratin;二者的形态、生长方式、生长速度明显有差异,与NMFs相比,口腔CAFs体积大,细胞呈长梭形,胞浆丰满,核圆形或椭圆形一侧有切迹,杂乱排列,生长速度快;半定量RT-PCR结果显示,口腔CAF8表达不同水平的VEGF、TGF-β1、MMP-9、Tenascin-C,而NMFs均不表达.结论:口腔CAFs的形态和生长速度改变以及口腔CAFs过表达上述4种基因可能是口腔CAFs与口腔癌细胞相互作用所致.为口腔癌细胞的生存和发展提供了有利的微环境.
作者：施琳；孙善珍；王振光；王东关 刊期： 2006年第01期
目的:探讨腭咽环扎术(VRLP)后阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者的上气道形态特征.方法:应用纤维鼻咽镜和头影测量技术检查了6例VRLP后并发OSAHS患者、6例VRLP后未发生OSAHS和6例未手术腭裂患者的上气道形态,测量了鼻咽腔直径、腭咽环扎处咽腔直径、口咽腔直径、舌根后咽腔直径、下咽腔直径、舌骨至下颌骨的距离等6个相关参数,并应用单因素方差分析进行组间比较.结果:未手术腭裂患者上气道形态光滑,VRLP后上气道在软腭后区和舌根后区出现2处狭窄,VRLP后OSAHS患者上气道鼻咽部明显狭窄变形,为腺样体肥大所致.结论:X线头影测量技术是一种简单实用的评估VRLP后OSAHS的方法,建议VRLP术前行此检查以排除腺样体严重增生患者.
作者：王克涛；赵华强；魏奉才；李国菊；张东；张帆 刊期： 2006年第01期
目的:研究RARβ在肺癌细胞的增殖、分化和诱导细胞凋亡中的作用.方法:应用脂质体将RARβ的表达载体pcDNA3.0-RARβ瞬时转染到RARβ表达下降的肺腺癌细胞A549中,观察形态学变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR检测细胞RARβ、p53、cdk4、cyclinD1的表达水平.结果:试验组出现细胞皱缩、粘附性降低、染色体凝集和边集现象,细胞凋亡率为65.8%,DNA断裂成片状.RT-PCR显示凋亡细胞中的RARβ表达明显升高(P＜0.01)、p53的表达无明显变化、cdk4和cyclinD1的表达明显降低(P＜0.01).结论:9-顺-维甲酸通过RARβ受体诱导细胞凋亡并且显著降低cdk4、cyclinD1的表达;9-顺-维甲酸不影响细胞中p53的表达;9-顺-维甲酸在p53表达正常的细胞中引起凋亡.
作者：李尊岭；于雪艳；胡国强；张世国；贺美兰；徐霞 刊期： 2006年第01期
目的:探讨缝隙连接在癫痫发病机制中的作用.方法:采用无镁液诱导的体外原代培养新生大鼠海马神经元细胞癫痫模型,应用膜片钳技术记录细胞外放电.观察放电不同时点缝隙连接蛋白Cx32的表达情况,以及生胃酮和卡马西平的抑制作用.结果:神经元经无镁培养液处理3 h后产生稳定的放电,放电后Cx32表达显著增多,8 h后可达对照组5倍.生胃酮和卡马西平均可抑制神经元的放电.生胃酮显著抑制了Cx32的表达,而卡马西平组Cx32水平无明显变化.结论:缝隙连接参与癫痫的发生发展过程,而且具有独立于传统的化学性突触的机制,为开发新的作用于缝隙连接的治疗药物提供了思路.
作者：赵秀鹤；迟兆富；迟令懿；尚伟；刘学伍 刊期： 2006年第01期
目的:研究复方丹参注射液体外诱导人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)体外定向神经细胞发育的规律.方法:应用复方丹参注射液诱导体外培养的人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞,观察诱导过程中的形态学变化,并于诱导后5、24、72h分别应用抗Nestin、抗βⅢ-tubulin、抗MBP及抗GFAP抗体进行免疫细胞化学染色,RT-PCR检测mRNA表达,Westem Blot检测蛋白表达.应用5mmol/L和10 mmol/L的2-巯基乙醇作为诱导对照组.结果:复方丹参注射液和2-巯基乙醇均可诱导骨髓基质干细胞分化为神经样细胞,但复方丹参注射液诱导作用更为缓和,细胞死亡率远低于2-巯基乙醇诱导组.免疫细胞化学示Nestin和βⅢ-tubulin呈阳性表达,MBP及GFAP呈阴性表达.RT-PCR可见Nestin和βⅢ-tubulin mRNA呈阳性表达,Westem Blot检测证实,Nestin和βⅢ-tubulin蛋白呈阳性表达.结论:复方丹参注射液可在体外诱导人胚胎和成年小鼠骨髓基质干细胞向神经细胞发育,是较为理想的诱导剂.
作者：吴承远；孟凡刚；王建刚；刘兆华；朱树干；刘玉光；魏东光；刘猛 刊期： 2006年第01期
目的:探讨转染67 kDa层粘连蛋白受体(67 kDa laminin receptor,67 kDa LN-R)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)后卵巢癌细胞HRA的生物学行为变化.方法:合成67 kDa LN-R反义及正义寡核苷酸片段(sense oligonucleotide SODN),设定反义组、正义组及对照组并分别转染卵巢癌细胞HRA;采用形态学观察、MTT、流式检测各组细胞生长情况;免疫组化检测各组细胞67 kDa LN-R蛋白表达:Transwell小室法检测67 kDa LN-R反义寡核苷酸对卵巢癌细胞体外侵袭转移能力的影响.结果:转染24～48 h内细胞增殖受到不同程度抑制,48 h后细胞生长状态有所恢复.0.02、0.04、0.08μg/μlASODN处理24 h后细胞凋亡率分别为19.38%、21.62%、30.35%,差异有统计学意义(P＜0.05).转染反义寡核苷酸组67 kDa LN-R的表达逐渐减少,且下调作用与ASODN浓度呈剂量依赖性,与正义组及对照组相比差异有显著性(P＜0.05);转染后HRA穿透人工基底膜的能力显著降低并呈现剂量依赖性(P＜0.05).结论:67 kDa LN-R ASODN可下调卵巢癌细胞HRA67 kDa LN-R表达并降低其体外侵袭转移能力.
作者：李晓翠；傅艺冰；王斌；王希芝；傅庆诏；张向宁 刊期： 2006年第01期
单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK)是常见、易复发的角膜病,反复发作是HSK致盲的主要原因.治疗和预防HSK复发是降低致盲率的主要手段.无环鸟苷对HSK有较好的疗效,并对控制复发有明显的作用[1].本院自1999年以来应用无环鸟苷治疗和预防HSK的复发,取得了良好的效果,报告如下.
作者：吴欣怡；李淑卿；孙秀芳 刊期： 2006年第01期
目的:观察人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因转染丙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)长期存活状态下,细胞内丙肝病毒(HCV)是否仍然存在和复制.方法:将外源性hTERT基因导入4例丙型肝炎患者PBMC,RT-PCR检测其在细胞内的表达,并观察细胞生物学特征.RT-PCR检测细胞内HCV RNA正、负链的表达.结果:转染后细胞寿命延长,增殖旺盛,并保持正常细胞生物学特征.4例患者中,1例患者细胞中连续2个月检测到HCVRNA正链,HCV RNA负链间断出现.结论:HCV可在人端粒酶逆转录酶基因转染后丙型肝炎患者PBMC中长期存在和复制,是一种自然感染状态并长期存活的HCV阳性传代的细胞模型.
作者：刘长虹；袁孟彪；陈丰哲；辛华；郭希民 刊期： 2006年第01期
目的:探讨西洛他唑对糖尿病大鼠肾组织细胞间粘附分子1(ICAM-1)的影响及对肾脏的保护作用.方法:用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型.正常对照组(10只),糖尿病对照组(15只),高剂量西洛他唑组(11只,25mg·kg-1·d-1),低剂量西洛他唑组(13只,18mg·kg-1·d-1),治疗12周.用微量法分别测血糖、糖化血红蛋白及肾重/体重的比值,分别检测肾脏ICAM-1 mRNA及ICAM-1蛋白表达.结果:与正常组相比,糖尿病组血糖、糖化血红蛋白明显升高;与糖尿病组相比,高、低剂量西洛他唑组血糖、糖化血红蛋白水平差异无统计学意义(P＞0.05).糖尿病组肾重/体重比值明显增加,高、低剂量西洛他唑有减轻肾脏肥大趋势,但与糖尿病组的差别无统计学意义(P＞0.05);ICAM-1 mRNA表达在糖尿病组明显升高,西洛他唑组有显著改善(P＜0.01);免疫荧光染色显示,糖尿病组ICAM-1在肾组织分布广且呈强阳性表达,而西洛他唑组ICAM-1着色弱,分布局限;Western blot检测显示,正常组ICAM-1蛋白表达较弱,糖尿病组显著增强,经西洛他唑治疗的糖尿病大鼠ICAM-1蛋白表达降低.结论:链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠肾脏ICAM-1表达增加,西洛他唑可降低糖尿病大鼠肾组织ICAM-1 mRNA和蛋白表达,可能对糖尿病肾病具有保护作用.
作者：李梅；高聆；胡建廷；卞丽香；张捷；崔彬；赵家军；张岫美 刊期： 2006年第01期
目的:探讨自发性肾破裂的病因、临床诊断及治疗.方法:回顾分析5例患者临床资料,结合文献进行讨论.结果:4例患者急性发病,B超及CT证实有肾周出血,同时发现肾脏肿瘤,肿瘤内可见脂肪密度,终行开放手术治疗.1例症状不典型,辅助检查证实左肾被膜下积液,逆行造影检查见左侧肾盂中上盏处有少量造影剂溢出,行患肾双J管置入术,4周后复查被膜下积液完全吸收.结论:肾血管平滑肌脂肪瘤是引起自发性肾破裂常见的病因,B超及CT有重要的诊断价值,其治疗主要根据原发病的诊断及出血情况.
作者：葛南；孙文东；许纯孝；张怀强；宋鸿彬；孟彦 刊期： 2006年第01期
目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在上皮性卵巢癌中的表达及其选择性抑制剂塞来昔布对卵巢癌细胞株生长的影响.方法:应用免疫组化的方法检测正常卵巢、卵巢良性肿瘤、上皮性卵巢癌组织及卵巢癌细胞株0VCAR3、SKOV3中COX-2的表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色结合荧光显微镜等技术,研究塞来昔布对0VCAR3细胞增殖和凋亡的影响.结果:COX-2在上皮性卵巢癌组织中高表达,阳性率为71.1%,而在正常卵巢和良性卵巢肿瘤中未见表达.COX-2在上皮性卵巢癌组织中的表达与临床分期、组织学类型、组织学分级无关(P＞0.05),而与淋巴结转移有关(P＜0.05).塞来昔布可抑制OVCAR3、SKOV3细胞生长,呈浓度和时间依赖性,S-N-K分析及小显著差(LSD)检验组间两两比较,P均＜0.05.荧光显微镜下见典型的凋亡形态学改变,凋亡比例呈剂量和时间依赖,S-N-K分析组间两两比较,P均＜0.05.结论:上皮性卵巢癌组织及细胞株0VCAR3、SKOV3中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制卵巢癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡,塞来昔布可能成为卵巢癌化疗的有效药物.
作者：辛刚；刘培淑；杜鹃 刊期： 2006年第01期
目的:探讨血清肌酸激酶-MB蛋白(CK-MBmass)动态变化对冠状动脉(冠脉)再通的心肌梗死定量诊断的意义.方法:动态测定98例急性心肌梗死(AMI)血清CK-MB蛋白的变化,其中静脉溶栓治疗36例和常规治疗62例,根据血清CK-MB蛋白动态变化分为冠脉再通组35例,包括溶栓再通28例和常规治疗自发冠脉再通7例;冠脉未通组63例,包括溶栓未通8例及常规治疗冠脉未通55例.结果:血清CK-MB蛋白、CK-MB活性自发病至恢复正常总的时间,冠脉再通组平均为46.8 h,56.3 h,冠脉未通组平均为74.6 h、85.2 h;上升至峰值时间的速率,冠脉再通组平均为0.275 h-1,0.255 h-1,冠脉未通组平均为0.096 h-1、0.087 h-1;下降至正常时间的速率,冠脉再通组平均为0.065 h-1,0.058 h-1,冠脉未通组平均为0.048 h-1、0.041 h-1;计算心肌梗死量,冠脉再通组分别平均为32.8CK-MBmass-g、36.2CK-MB-g,冠脉未通组分别平均为48.6CK-MBmass-g、52.6CK-MB-g.结论:根据血清CK-MB蛋白动态变化定量计算心肌梗死显示,冠脉再通患者心肌梗死量明显减少.
作者：邢启崇；李国华；邢姗姗；陈明友 刊期： 2006年第01期
目的:探讨CD15抗原和CD44v6蛋白在乳腺癌及乳腺增生组织中的表达及其在乳腺癌鉴别诊断中的价值.方法:采用免疫组织化学S-P法检测CD15抗原和CD44v6蛋白在51例乳腺癌及67例乳腺增生中的表达.结果:CD44v6蛋白在乳腺癌和乳腺增生组织中的阳性表达率分别为80.4%和37.3%,而CD15抗原的阳性表达率分别为78.4%和44.8%,两者表达差异有统计学意义.CD15抗原和CD44v6蛋白阳性表达率与乳腺癌患者腋淋巴结状况及组织学分级有相关性(P＜0.05),而与患者绝经状况及TNM分期无相关性(P＞0.05).CD15表达与CD44v6表达呈正相关(r=0.43,P＜0.05).结论:联合检测CD15抗原和CD44v6蛋白对乳腺癌的鉴别诊断具有重要参考价值.
作者：牛虎；臧益秀；田斌；陈连胜；王晓 刊期： 2006年第01期
目的:分析青年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syn-drome,OSAHS)患者的多导睡眠监测特点.方法:青年组50例、平均年龄(31.2±4.1)岁,中老年组199例、平均年龄(47.1±7.5)岁,进行两组间多导睡眠监测(polysomnography,PSG)资料的比较.结果:50例青年患者体块指数(body mass index,BMI)平均(30.0±4.3)kg/m2.青年组呼吸暂停低通气指数(apnea hypop-nea index,AHI)平均(61.2±32.2)次/h明显高于中老年组患者(44.6±26.5)次/h(P＜0.01).非快速动眼睡眠期(non-rapid eye movement,NREM)所占百分比的比较显示:青年组Ⅰ期(53.9±18.3)%低于中老年组(61.5±18.9)%(P＜0.05);青年组Ⅱ期(33.4±15.3)%、Ⅲ+Ⅳ期(3.0±6.9)%均高于中老年组Ⅱ期(23.3±17.0)%,Ⅲ+Ⅳ期(1.1±2.8)%(P＜0.05).快速动眼睡眠期(rapid eye movement,REM)和微觉醒指数在两组间差异无统计学意义.青年组＜90%、＜80%、＜70%血氧降低次数明显高于中老年组(P＜0.05),而低血氧饱和度(lowest SaO2,LSaO2)和长呼吸暂停时间在两组间差异无统计学意义.结论:就诊的青年OS-AHS患者呼吸紊乱及低血氧程度明显重于中老年患者,但睡眠结构紊乱的程度基本接近.
作者：王卫之；蔡晓岚；王岩；李延忠；王廷础 刊期： 2006年第01期
目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)在腋淋巴结阴性乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌分型、分级及预后的关系,探讨HIF-1α作为判断肿瘤恶性程度、预后及肿瘤基因治疗靶点的可行性.方法:采用免疫组织化学方法检测73例乳腺癌组织中HIF-1α、VEGF、MVD的表达状况,并与临床随访结果进行综合分析,对其中随访10年以上的32例作生存分析研究.结果:HIF-1α在乳腺癌中总阳性表达率为65.8%,其中强表达7例(9.6%),中度表达10例(13.7%),弱表达31例(42.5%),不表达25例(34.2%);73例乳腺癌组织中69例VEGF表达阳性,占94.5%,其中强表达52例(71.2%),中度表达15例(20.5%),弱表达2例(2.7%),不表达4例(5.5%).73例乳腺癌中每例MVD为4～48个,平均为20.16±16.48.HIF-1α和VEGF在乳腺癌中两者阳性指数呈正相关(P＜0.01).HIF-1α、VEGF均为单独影响乳腺癌预后的危险因素.结论:HIF-1α可作为判断乳腺癌恶性程度、预后的单独指标,与VEGF联合检测可提高判断水平;HIF-1α可作为肿瘤治疗的靶点.
作者：马超；周庚寅；肖颖；郭玲玲；林晓燕 刊期： 2006年第01期
膜片钳记录(patch clamp recording)是利用玻璃微电极吸引封接面积仅为几个μm2的细胞膜片,在10-12A水平,记录单个或几个通道的离子电流,已达到当今电子测量的极限.
作者：李贵宝；毕玉顺 刊期： 2006年第01期
目的:探讨不同时期正常和糖尿病大鼠肾组织中galectin-3表达水平的变化及与糖尿病肾病发生发展的关系.方法:2月龄雄性Wistar大鼠60只,随机选取30只,单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,55 mg/kg)诱发糖尿病模型,余30只为正常对照,免疫组化法分别检测4、8、12周末galectin-3抗原在大鼠肾脏中的表达.结果:糖尿病组肾小球8周末开始检测到galectin-3蛋白的产生,且随病程进展有增高趋势.正常组肾小球在4、8、12周末均未见到表达.两组在肾小管组织中,4、8、12周末均可检测到galectin-3的表达,但糖尿病组较同期正常对照组表达显著增高.相关分析表明,糖尿病组肾小球galectin-3阳性细胞平均光密度值与糖化血红蛋白、尿素氮及24 h尿蛋白呈正相关,与肌酐清除率呈负相关.结论:高血糖环境中,galectin-3高表达可能与DN的进展密切相关.
作者：楚玉峰；蒋玲；侯志强；张丽萍；张晓黎 刊期： 2006年第01期
患者,女,53岁,因反复发作胸闷、胸痛1个月,于2004年10月9日来心内科门诊就诊.1年前有过1次晕厥,在当地抢救后好转.
作者：李希荣；陈焕芹；高海青 刊期： 2006年第01期
目的:探讨丙烯酰胺亚慢性中毒大鼠坐骨神经电生理学指标的时间效应变化.方法:雄性Wistar大鼠腹腔注射丙烯酰胺40 mg·kg-1,对照组注射生理盐水,每周3次,连续10周,分别于2、4、6、10周观察大鼠的步态并测其坐骨神经的电生理指标.结果:与对照组相比,染毒组大鼠坐骨神经复合动作电位波幅降低(P＜0.01),第4、6、10周分别降低44%、70%、89%;潜伏期延长(P＜0.05),第4、6、10周分别延长15%、24%、45%;时程延长(P＜0.01),第10周延长44%;阈刺激强度增高(P＜0.01),第6、10周分别增高51%、293%;神经传导速度降低(P＜0.01),第4、6、10周分别降低17%、23%、33%.结论:丙烯酰胺亚慢性中毒大鼠坐骨神经的电生理学改变存在时间效应关系,神经传导速度、复合动作电位波幅变化早.
作者：朱英建；王青山；张利平；郭新；谢克勤 刊期： 2006年第01期
目的:研究葛根素对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤的影响.方法:建立H2O2致PC12细胞损伤模型,倒置相差显微镜下进行一般形态学观察,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:100 μmol/L H2O2诱导PC12细胞4 h,细胞呈现明显损伤形态,LDH释放量升高(P＜0.001),细胞培养液和细胞内MDA含量增加(P＜0.001),SOD活性下降(P＜0.001).葛根素可明显改善形态学损伤,显著降低LDH释放量和细胞培养液及细胞内MDA含量,提高SOD活性.结论:葛根素对H2O2诱导PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关.
作者：王立祥；曾季平；魏欣冰；张斌；刘兆平；孙霞；秦文；张岫美 刊期： 2006年第01期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
