孙基栋；曲元明；刘军；徐广明
目的:探讨慢性乙型肝炎、肝癌组织中人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)的表达和临床意义.方法:应用流式细胞仪对51例慢性乙型肝炎患者肝组织和43例原发性肝癌癌组织中的HLA-Ⅰ抗原进行检测.结果:肝癌组织中HLA-Ⅰ抗原表达为36.47±19.38,明显低于慢性乙肝的79.54±41.55和正常肝组织的81.86±46.53(P均＜0.01),而慢性乙型肝炎肝组织和正常肝组织HCA-Ⅰ类抗原表达无明显差异(P＞0.05),伴有肝内和(或)淋巴结转移的肝癌组织中HLA-Ⅰ抗原表达较无转移组明显降低(22.83±11.59 vs 46.28±23.16,P＜0.05);HLA-Ⅰ类抗原表达与血清AFP水平呈明显负相关(r=-0.741 1,P＜0.01),但与肝癌组织分化程度呈明显正相关(r=0.805 1,P＜0.05).结论:HLA-Ⅰ抗原表达异常与肝癌的发生和转移密切相关.
作者：程宝泉；谢英慧；刘春涛；钟宁；樊薇；张尚忠 刊期： 2006年第04期
目的:比较3.0T超高场磁共振2D MRCP及3D MRCP的图像质量及对正常胆胰管系统的显示情况,探讨其临床应用价值.方法:对52例正常人分别行2D及3D MRCP扫描.2D MRCP采用SSFSE序列,小角度多层旋转屏气扫描,3D MRCP采用FRFSE序列,斜冠状面多层单块呼吸门控下扫描.分别判定图像质量(0～3级)、有无伪影(0～3级)及胆胰管显示质量(0～3级).观察肝内胆管显示情况并分别测量左、右肝管,肝总管,胆总管及主胰管的大横径.结果:52例受检者中80.6%图像质量达3级,97.9%图像无伪影或伪影很少,2D MRCP图像质量优于3D MRCP.1～3级胆管、胆囊、胆囊管及胆总管在2D和3D MRCP图像中的显示率均为100%.较细小结构如肝内4～5级胆管、主胰管、副胰管及胰管侧支2D MRCP的显示优于3D MRCP.各管径的测量值有较大的变化范围,主胰管的大横径3D MRCP较2D MRCP宽[(2.78±0.90)mm vs(2.37±0.66)mm,P＜0.05].左肝管大横径较右肝管宽[(3.54±1.02)mm vs(3.08±0.97)mm,P＜0.05].结论:3.0T超高场磁共振MRCP图像清晰完整,正常胆胰管得到良好显示.
作者：张晓明；李传福；冯德朝；郑金勇；从培新；孟祥水 刊期： 2006年第04期
目的:利用pSUPER载体构建针对人核因子E2 p45相关因子2(Nrf2)基因的RNA干扰真核表达载体,为研究Nrf2基因在结肠癌化学预防中的作用奠定实验基础.方法:设计特异性针对Nrf2基因的寡核苷酸序列及相应的对照序列,构建重组载体pSUPER-Nrf2转染人结肠癌HT-29细胞.同时转染pEGFP-N1质粒,通过荧光显微镜观察及流式细胞仪检测绿色荧光监测转染效率,共转染pEGFP-N1 48h后G418筛选稳定表达的细胞.RT-PCR和Western blot检测瞬时及稳定转染细胞Nrf2基因的表达,观察稳定筛选出的细胞中UGT1A基因mRNA水平的表达变化.结果:成功构建RNA干扰真核表达载体pSU-PER-Nrf2.转染后24～96 h,荧光显微镜及FCM检测显示转染效率为30%～75%.瞬时转染pSUPER-Nff2-A2,pSUPER-Nrf2-B2重组质粒Nrf2 mRNA的表达差异无显著性(P＞0.05);瞬时转染72 h及稳定转染后,pSUPER-Nrf2-A1,pSUPER-Nrf2-B1可显著抑制Nrf2基因的表达.RT-PCR检测显示,稳定筛选出的细胞中UGT1A表达水平降低(P＜0.05).结论:成功构建了Nrf2的RNA干扰表达载体,筛选并获得低表达Nrf2基因的稳定克隆,筛选出的细胞UGT1A表达水平明显降低,表明Nrf2可能对UGT1A酶的表达具有调节作用.
作者：杨晓云；李延青；梁晓红；郭玉婷；袁俊华；张燕；朱强 刊期： 2006年第04期
目的:研究球囊损伤血管后内膜增生的过程、血小板活化水平、血管紧张素ⅡAT1受体mR-NA的变化及氯沙坦对其的影响.方法:随机将72只雄性Wistar大鼠分为对照组、手术组和氯沙坦治疗组,每组24只.分别在术后3、7、14和28d,采用组织学检查、放射免疫法和RT-PCR技术检测内膜增生的情况、血小板表面GMP-140的数量、AT1受体mRNA的水平及氯沙坦(30 mg·kg-1·d-1)灌胃对其的影响.结果:①AT1受体mRNA于术后3 d明显增高(P＜0.05),并持续至术后14 d(P＜0.01);②GMP-140于术后3 d明显升高,术后7 d开始下降(P＜0.01);③内皮损伤术后3 d已有增殖的血管平滑肌细胞(VSMC)移行至内膜层,7 d内膜开始增生,14d VSMC的增殖及内膜增生更为明显,28 d VSMC的增殖明显减弱,细胞外基质增加,内膜继续增生;④应用氯沙坦后AT1受体mRNA表达增加(P＜0.05,P＜0.01),但血小板表面GMP-140的数量和VSMC的移行、增殖减弱,内膜增生程度减轻(P＜0.05,P＜0.01).结论:血管内皮损伤后内膜增生的过程中血小板活化、AT1受体mRNA表达增加,氯沙坦能抑制血小板的活化及VSMC的移行、增殖,减轻内膜增生的程度,上调AT1受体mRNA的表达.
作者：吴逸南；葛志明；李永红；李方；张成秋；张运 刊期： 2006年第04期
目的:探讨金属硫蛋白在食管鳞癌中的表达及其与癌细胞增殖、凋亡的关系.方法:采用免疫组化法检测92例食管鳞癌组织中的金属硫蛋白(MT)、增殖细胞核相关抗原(Ki-67抗原)的表达,并用TUNEL法检测细胞凋亡指数.结果:92例食管鳞癌标本中65例MT呈阳性表达,阳性率为70.6%,明显高于正常食管粘膜上皮组织(3/20,P＜0.01);MT表达与食管鳞癌患者年龄、性别、浸润深度及病变长度无关,而与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关,MT与Ki-67抗原表达强度呈正相关,Pearson列联系数=0.227(P＜0.05).随MT表达强度的增加,癌组织凋亡指数逐渐降低.结论:MT表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,MT能促进癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,可作为食管鳞癌治疗的新靶点.
作者：孙雪飞；杜贾军；孟龙；陈景寒；杨奎忠 刊期： 2006年第04期
目的:构建多药耐药基因(MDR1)启动子调控的CD-TK双自杀基因真核表达载体用于耐药白血病的靶向性基因治疗.方法:采用PCR方法从K562/A02细胞基因组DNA中扩增MDR1启动子,将其连接到双自杀基因CD-TK的上游,构建pcDNA3-MDR1-Promoter-CD-TK真核表达载体,用脂质体介导法将构建好的载体转染入K562、K562/A02细胞,PCR鉴定CD、TK基因的整合,RT-PCR鉴定CD、TK基因的表达.结果:PCR克隆出MDR1启动子经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3-MDR1-Promoter-CD-TK.转染入细胞后PCR结果显示,CD、TK基因均整合入K562、K562/A02细胞中,RT-PCR结果显示,K562/A02/CD-TK细胞CD、TK基因有特异性条带表达,而K562/CD-TK细胞无特异性条带.结论:MDR1启动子调控的CD-TK双自杀基因真核表达载体的成功构建及其在K562/A02细胞中的特异性表达为耐药白血病的靶向性基因治疗提供了实验基础.
作者：王向玲；纪春岩；马道新；赵建强；侯明；余海青；臧绍蕾 刊期： 2006年第04期
目的:探讨膳食摄入对血清apoA-Ⅳ水平的影响,以进一步阐明apoA-Ⅳ调节摄食和能量平衡的作用机理.方法:选取山东省淄博市农村和济南市社区居民389例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测空腹12 h血清apoA-Ⅳ的水平;采用3 d膳食记录法获得膳食摄入量.所有数据使用SPSS12.0版软件进行分析.结果:apoA-Ⅳ水平与脂肪、膳食纤维、碳水化合物、蛋白质撮入量呈负相关关系(P＜0.05),高脂膳食者血清apoA-Ⅳ水平显著低于低脂膳食者(P＜0.05).结论:高脂肪摄入是影响血清apoA-Ⅳ水平的主要因素.
作者：徐贵发；李辉；刘跟生；石劢；李慧 刊期： 2006年第04期
目的:探讨安氏Ⅱ1成人与青少年拔牙矫治后软硬组织变化之间的相关性.方法:选取安氏Ⅱ1经拔除4个第一前磨牙进行固定矫治的女性患者72例(成人35例、青少年37例).矫治前后拍摄X线头颅侧位片,进行头影测量,并采用SPSS12.0统计软件进行统计分析.结果:青少年软组织面型指标变化量与相应的颌骨指标间表现出明显的相关性.成人组软组织唇型指标变化量与上切牙的内收量呈明显的相关性(P＜0.01),无骨性相关;而青少年组不仅与牙性指标有一定的相关性,而且与下颌骨的前移有明显的相关性(P＜0.05);同时两组软组织指标间亦有明显相关性.结论:矫治后两组软硬组织变化间及软组织变化间均表现出明显的相关性,但两组间相关性的大小有统计学差异;软组织的改变不仅与牙颌变化明显相关,而且受其自身形态、功能、内部结构及生长发育的影响.
作者：赵艳红；王春玲；王秀印；魏福兰 刊期： 2006年第04期
目的:探讨联合应用神经营养因子(NGF)和神经节苷脂(GM1)对大鼠周围神经损伤后初级传入神经元的保护作用.方法:选用SD大鼠96只,随机分为对照组、NGF组、GM1组和NGF+GM1组.将大鼠右侧坐骨神经切断,神经两断端相距5mm,硅胶管桥接,用不同的药物处理后,于术后不同时间取出背根神经节进行研究.结果:4周时神经元数和神经传导速度,NGF+GM1组多于或快于其它各组(P＜0.01),NGF组和GM1组均多于或快于对照组(P＜0.01);8周时,各实验组多于或快于对照组(P＜0.01),各实验组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:周围神经损伤后,联合应用NGF和GM1对初级传入神经元的保护作用优于单用NGF、GM1,且起效早.
作者：黄飞；王怀经；邢毅；高薇；李永刚；邢子英；李振中 刊期： 2006年第04期
目的:探讨食管癌患者骨髓微转移的检测及临床意义.方法:以癌胚抗原(CEA)为分子标记物,采用RT-PCR技术检测43例食管癌患者及17例食管良性病变患者肋骨骨髓中癌胚抗原的表达.结果:43例食管癌患者骨髓中CEA mRNA阳性率为34.9%,食管良性病变患者骨髓中未见表达,两者差异有统计学意义(P＜0.05),CEA mRNA的表达与食管癌患者年龄、性别、病理组织类型、肿瘤细胞分化程度无相关性,但与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论:用RT-PCR法检测食管癌患者肋骨骨髓微转移具有较高的敏感性和特异性,骨髓中CEA的检测可帮助综合判断疾病的恶性程度及患者预后,有助于发现亚临床转移灶.
作者：吕英义；陈景寒；彭忠民；孟龙 刊期： 2006年第04期
目的:利用Pgenesil-1质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒,并筛选有效的抑制序列.方法:分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列,经退火成互补双链,再克隆至带有U6启动子的质粒载体Pgenesil-1中,构建重组体,转化DH5α菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析.将构建成功的4组重组体转染HSC-T6 24h后,通过半定量RT-PCR分析HSC-T6 CTGFmRNA的表达水平,与空白对照及仅加转染试剂组比较分析.结果:CTGF的shR-NA片段被成功克隆到Pgenesil-1质粒载体中,经酶切与测序证实构建成功,转染HSC-T6 24h后,与空白对照组相比,通过半定量RT-PCR分析发现有两组细胞CTGFmRNA水平明显下降,24 h抑制效率分别为(74±5)%,(P＜0.01);(61±3)%,(P＜0.05).转染非特异shRNA组及仅加转染试剂组CTGFmRNA表达水平无明显变化.结论:成功构建了能表达CTGFshRNA的3组重组体,并筛选出能高效抑制CTGF表达的shRNA序列,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径奠定了实验基础.
作者：主余华；张春清；任万华；马艳丽；赵幼安 刊期： 2006年第04期
目的:了解人疱疹病毒8型(HHV-8)在济南地区不同献血者中的感染情况,并对其与年龄、性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性进行统计学分析.方法:以HHV-8 ORF K8.1合成多肽为抗原,采用ELISA方法检测献血者血清中相应IgG水平.结果:520份血清中抗HHV-8 ORFK8.1抗体的总体检出率为5.962%(31/520),有随年龄增加而增高的趋势,但与性别、HBV、HCV、梅毒螺旋体的相关性无统计学意义.结论:济南地区献血者中有一定比率的HHV-8感染.采取措施,防止HHV-8经输血传播具有一定的现实意义.
作者：齐眉；赵蔚明；周亚滨；栾怡；卞继锋；王红；程轶喆；刘娟；唐伟；于晗 刊期： 2006年第04期
目的:探讨咀嚼肌卫星细胞的体外培养方法并研究其生物学特性.方法:取新生绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)转基因小鼠面部咀嚼肌,采用酶消化法分离出咀嚼肌卫星细胞,体外进行原代和传代培养.采用倒置显微镜及荧光显微镜观察、测定生长曲线等指标,研究咀嚼肌肌卫星细胞的增殖与分化能力,采用骨骼肌肌动蛋白(α-sarcometric actin)单抗免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定.结果:酶消化法适于咀嚼肌卫星细胞的分离,体外培养的咀嚼肌卫星细胞增殖速度快.免疫化学染色显示,体外培养的咀嚼肌肌卫星细胞呈阳性表达.结论:体外培养的咀嚼肌肌卫星细胞有强的增殖分化能力,能用于颌面部组织工程种子细胞库的构建.
作者：张风河；黄萍；孙树洋 刊期： 2006年第04期
目的:比较两种方法治疗恶性胸腔积液的疗效.方法:随机将69例恶性胸腔积液患者分为治疗组(A组,n=36)和对照组(B组,n=33).A组采用一次性中心静脉导管行胸腔穿刺并置入胸腔,持续引流胸水后再注入顺铂,置管时间平均20 d;B组采用传统方法胸腔穿刺放胸水,每周1次穿刺放液后注入顺铂,80～100 mg/次,每周1次,连续3周,1个月后观察两组的疗效及不良反应.结果:A组有效率为88.9%,B组有效率为54.5%,两组疗效差异有显著性(P＜0.05),两组不良反应及并发症的发生率无显著性差异(P＞0.05).结论:中心静脉导管胸腔内置入持续引流胸水后再注入顺铂治疗恶性胸腔积液安全有效,操作简便.
作者：孙丽美；刘联；张文东；秦凤萍 刊期： 2006年第04期
目的:研究细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路在癫痫大鼠脑内的表达规律及其意义.方法:建立戊四氮致痫大鼠模型,在痫性发作30 min、1.5 h、5 h和8 h应用免疫组织化学和Western印迹法对海马ERK1、ERK2和p-ERK1/2蛋白水平的表达进行研究,并加用ERK通路阻断剂PD98059干预.结果:正常大鼠脑内有少量的ERK1和ERK2阳性神经元,未见有p-ERK1/2阳性神经元.戊四氮致痫后30min p-ERK1/2开始表达,ERK1和ERK2表达较对照组开始增强(P＜0.05),1.5 h后p-ERK1/2强烈表达(P＜0.05),5 h后3者的表达开始减弱.PD98059干预组ERK1/2的活化较癫痫组显著受抑(P＜0.05).Western Blot结果显示,癫痫组大鼠ERK1、ERK2和p-ERK1/2蛋白表达较对照组明显增强(P＜0.05),PD98059干预组3种蛋白水平显著低于癫痫组(P＜0.05).1.5 h时点的蛋白表达水平高于其他各时点相应组(P＜0.05).同时PD98059完全抑制了大鼠的痫性发作.结论:ERK信号途径在戊四氮致痫模型中被激活,参与癫痫发作的病理生理过程,并可能具有上游始动发生的作用.
作者：赵秀鹤；迟兆富；吴伟；王胜军 刊期： 2006年第04期
目的:探讨阻塞型睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者外周血白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化在发病机制中的作用.方法:①采用放射免疫法检测24例OSAS患者及20例正常人血浆IL-6、TNF-α水平,比较其组间差异,并分析OSAS患者血浆IL-6、TNF-α水平与睡眠呼吸紊乱指数(AHI)和低血氧饱和度(SaO2)的相关性;②OSAS组患者进行持续气道正压通气(CPAP)治疗,3个月后复查上述各项指标,比较治疗前后血浆中IL-6、TNF-α水平的变化.结果:①OSAS组血浆IL-6和TNF-α水平较对照组升高[(25.92±4.48)pg/ml vs(13.21±1.97)pg/ml,(11.27±2.60)pg/ml vs(5.83±0.99)pg/ml,P均＜0.05].OSAS患者血浆IL-6和TNF-α水平与AHI呈正相关(r分别为0.456、0.464,P均＜0.05),与其低SaO2呈负相关(r分别为-0.495、-0.483,P均＜0.05);②OSAS患者用CPAP治疗后,血浆IL-6、TNF-α水平较治疗前减低[(25.92±4.48)pg/ml vs (15.37±1.78)pg/ml,(11.27±2.60)pg/ml vs(6.79±0.87)pg/ml,P均＜0.05].结论:OSAS患者外周血IL-6、TNF-α水平升高与其低氧血症有关;CPAP可改善OSAS患者缺氧状态,降低外周血IL-6、TNF-α水平.
作者：李凤云；薛玉文；杜以明；雷大鹏；张超；肖伟 刊期： 2006年第04期
目的:探讨经眶颧-海绵窦入路增加基底动脉上段显露的方法.方法:在10例成人头颅标本上模拟了经眶颧-海绵窦入路,观察该入路对基底动脉上段的显露情况.结果:磨除前床突后形成的间隙为床突间隙,在前床突下表面,存在于颈内动脉与动眼神经间的膜为颈内动脉-动眼神经膜,沿此膜即可进入海绵窦,磨除后床突后,暴露鞍背、上斜坡,即可显露基底动脉上段.结论:经眶颧-海绵窦入路中磨除前床突和后床突,可增加对基底动脉上段的显露.
作者：孙基栋；曲元明；刘军；徐广明 刊期： 2006年第04期
目的:探讨应用可吸收脱细胞猪主动脉基质诱导原位食管再生进行食管替代的可行性.方法:应用胰酶、Triton X-100制备脱细胞猪主动脉基质.选用6只中国杂种犬,切除5 cm食管,用两片脱细胞猪主动脉基质缝制的人工食管进行重建,观察存活情况和食管再生过程.结果:应用胰酶、Triton X-100可有效的去除猪主动脉细胞.6只实验犬无围手术期死亡,1只发生吻合口瘘,1只在行内镜下扩张治疗时导致新生食管破裂死亡.病理结果显示,术后2周时有疏松结缔组织及大量新生血管形成,4周时整个人工食管被上皮细胞覆盖,镜下见粘膜上皮细胞约5～8层,其下可见粘膜下腺体结构及肌肉组织.12周时上皮细胞分化至8～10层,有粘膜下腺体结构及肌肉组织.原人工食管已完全吸收,肉眼已无法分辨人工和正常食管.结论:酶-去污剂联合应用能有效的祛除猪主动脉细胞.可吸收猪胸主动脉脱细胞血管基质能较好诱导组织的再生,为人工食管的临床应用研究提供了依据.
作者：张哲；陈景寒；孟龙；王磊；王晓航 刊期： 2006年第04期
目的:观察大蒜素对大鼠血清高半胱氨酸水平的影响.方法:Wistar雄性大鼠50只,随机分成5组:大蒜素大剂量组(GL组),大蒜素小剂量组(GS组),叶酸对照组(AC组),阳性对照组(HC组)和空白对照组(NC组),每组10只,前4组均喂以高蛋氨酸饲料.GL组、GS组每天分别腹腔注射大蒜素10 mg/kg和6 mg/kg,HC组注射等量生理盐水,AC组给予叶酸,维生素B6和B12灌胃,第6周末,取血测定血清高半胱氨酸和血生化指标.结果:HC组血清高半胱氨酸的浓度明显高于GL组、GS组和NC组(P均＜0.01),而与AC组相比差异无统计学意义(P＞0.05);GL组、GS组和NC组与AC组相比,高半胱氨酸浓度明显降低(P＜0.05).结论:大蒜素可明显降低大鼠血清高半胱氨酸水平,有效防治高半胱氨酸血症及动脉粥样硬化.
作者：王淑丽；刘德山；郭瑞臣；张维东 刊期： 2006年第04期
目的:观察角膜炎大鼠动物模型的组织特征和眼部表现,探讨细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM)-1在绿脓杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性角膜炎大鼠角膜组织中的表达及意义.方法:角膜炎动物模型制作前30 min,分别在大鼠球结膜下注射二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)(PDTC预处理组)和生理盐水(炎症组).LPS刺激后1、3、6、12、24 h时,用裂隙灯显微镜观察大鼠的眼部表现并评分;抽取大鼠房水立即涂片,光镜观察房水细胞变化;透射电子显微镜观察角膜组织超微结构的改变.免疫组织化学法检测角膜组织内ICAM-1蛋白的表达.结果:预先用PDTC处理后再给予LPS刺激,可明显改善大鼠角膜炎症状、减轻角膜及房水混浊的程度.PDTC预处理组大鼠房水的细胞改变及角膜的超微结构变化较炎症组均有明显改善,角膜组织中ICAM-1的表达在各个时段较炎症组均有不同程度的降低(P＜0.01).结论:绿脓杆菌LPS参与了大鼠急性角膜炎的病理过程:PDTC可下调角膜组织ICAM-1的表达,有效减轻了LPS引起的角膜炎症.
作者：陈国玲；吴欣怡 刊期： 2006年第04期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
