目的:检测同种带瓣大动脉(conduit valved homograft,CVH)移植后的免疫反应,探讨其作用机制及临床意义.方法:①建立液氮冻存和4℃保存犬CVH (各14例)移植于异性受体犬腹主动脉实验模型;②在移植术后不同时点切取植入的CVH标本;免疫组织化学染色法检测细胞免疫及体液免疫反应,用光镜、扫描电镜及透射电镜进行观察.结果:术后7 d即可出现细胞免疫反应;1～3月达高峰;6～12月呈持续的低水平状态;表现为CVH内膜、动脉外膜、瓣下心肌组织中T细胞(以CD8+细胞和CD4+细胞为主)浸润,IL-2Ra持续表达.体液免疫反应仅发生于术后7 d～3个月,IgG沉积于CVH内膜和动脉中层平滑肌细胞周围;CVH瓣下心肌细胞、动脉中层平滑肌细胞间有散在的CD2r细胞浸润.结论:①CVH具有免疫原性.内皮细胞、平滑肌细胞、心肌细胞是其免疫原性表达的主要部分;②CVH移植术后早期(3个月以内)行免疫排斥反应的监测及防治具有临床意义.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨抵抗素基因第2内含子多态性在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)发病中的作用.方法:为75例多囊卵巢综合征患者(PCOS组)和66例正常者(对照组)的DNA进行测序,观察两组间抵抗素基因第2内含子序列有无差异.结果:两组抵抗素基因在距第2外显子末端39 bp位点上存在C和CT两种基因型,CT均表现为套峰,未发现由C向T的突变,内含子2其余碱基序列稳定不变.PCOS组C等位基因出现的频率为0.96(72/75),出现CT套峰的频率为0.04(3/75);对照组中C等位基因出现频率为0.95(63/66),CT套峰出现频率为0.05(3/66),两组差异无统计学意义(P>0.05).结论:①抵抗素基因第2内含子基因多态性位于距第2外显子末端39位点上,存在C和CT两种基因型;②抵抗素基因第2内含子多态性与多囊卵巢综合征的发病无关.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨二甲双胍治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的作用及机制.方法:选择30例PCOS患者作为研究对象,口服二甲双胍,1 500mg/d,连续12周.观察服用二甲双胍后患者的临床特征、性腺激素及糖代谢指标的变化.结果:PCOS患者经二甲双胍治疗后,BMI、WHR、LH、LH/FSH比值、T、A、DHEAS、FI、Homa IR、Homa β cell均较治疗前明显降低(P<0.01,P<0.05),ISI较治疗前明显增高(P<0.05).结论:二甲双胍可显著改善PCOS患者的临床特征,其机制与二甲双胍降低胰岛素水平、提高胰岛素的敏感性密切相关.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨HLA-B基因型与山东地区汉族人慢性乙型肝炎的相关性.方法:用序列特异性寡核苷酸分型方法对29例山东地区慢性乙肝患者进行HLA-B的基因分型,并与健康汉族人的HLA-B的基因型进行比较分析.结果:山东地区汉族人乙肝患者中HLA-B55、71、72基因阳性率明显高于山东地区健康汉族人的基因携带率(P<0.05),HLA-B54在乙肝患者中的阳性率明显低于健康汉族人的基因携带率(P<0.05).结论:HLA-B55、71、72基因表型与山东地区乙肝慢性化相关,而HLA-B54基因型与抗HBV的感染相关,免疫遗传因素参与慢性乙肝的发病机制.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spike protein,S蛋白)与钙调蛋白结合肽(calmodulin binding peptide,CBP)-蛋白A串连亲和纯化(tandem affinity purification,TAP)标签在Vero细胞内的融合表达及亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选奠定基础.方法:从质粒pGEM-4Z-S中扩增S片段,在5'端加入Kozak序列,并与TAP标签基因共同插入pcDNA3.1(-)中,构建出真核表达载体pcDNA3.1-S-TAP(C).将构建好的质粒瞬时转染Vero细胞,并共感染重组痘苗病毒vTF7-3,用间接免疫荧光及Western-blotting技术检测融合蛋白的表达及亚细胞定位.结果:成功构建出真核表达载体pcDNA3.1-S-TAP(C),瞬时转染Vero细胞后S-CBP-蛋白A融合蛋白[S-TAP(C)]得到表达,重组痘苗病毒vTF7-3可有效增强该融合蛋白的表达水平,且检测到S-TAP(C)融合蛋白表达于细胞膜上.结论:S蛋白与TAP标签融合蛋白表达于细胞膜上,且vTF7-3的感染有助于靶蛋白表达水平的提高,可用于S蛋白结合蛋白的筛选.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:建立大鼠绿脓杆菌性角膜炎模型,探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对绿脓杆菌脂多糖(lipopolysacchride,LPS)诱导产生的大鼠角膜炎模型的抗炎作用.方法:建立角膜炎动物模型,模型制作前30 min于大鼠球结膜下分别注射生理盐水(炎症组)和PDTC(治疗组),模型制作后1、3、6、12 h观察大鼠表现,角膜的组织学改变;免疫组化法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活化情况.结果:LPS刺激后大鼠角膜组织中NF-κB早期活化.治疗组大鼠角膜中的NF-κB p65核染色阳性细胞明显少于炎症组;鼠眼表现和角膜组织学改变较炎症组改善显著.结论:成功建立了绿脓杆菌性角膜炎动物模型.NF-κB活化在绿脓杆菌性角膜炎的发病中起重要作用,PDTC可有效减轻角膜炎症.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:研究驱动蛋白Rbkinesin-6对人肺腺癌细胞系A549有丝分裂的影响.方法:采用Rbkinesin-6特异性esiRNA介导的RNAi技术,系统分析Rbkinesin-6对肺癌细胞系A549有丝分裂的影响.结果:Rbkinesin-6 esiRNA可特异性地消除A549细胞Rbkinesin-6的表达,Rbkinesin-6缺失的细胞无法完成有丝分裂末期/胞质分裂,进而转变为双/多核细胞.结论:Rbkinesin-6在A549细胞有丝分裂末期/胞质分裂后阶段起重要作用,Rbkinesin-6基因沉默可以抑制肺癌细胞的生长,为肺癌基因治疗的研究提供了新的思路.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)诊断子宫内膜癌肌层浸润程度的准确性及其临床应用价值.方法:对51例经手术病理证实为临床Ⅰ期的子宫内膜癌患者术前行MRI检查,判断其肌层浸润程度,并与术后病理结果进行对照分析.结果:51例患者术前MRI均能做出准确诊断,其判断子宫内膜癌肌层浸润的准确率为86.27%(44/51),浅肌层浸润的准确率88.46%(23/26),深肌层浸润的准确率88.23%(15/17),动态增强MRI的准确率为90.5%(19/21).结论:MRI能准确地诊断子宫内膜癌并判断肌层浸润深度,动态增强MRI尤为准确,是术前判断肌层浸润程度的有效途径.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨同种瓣移植后早期环孢素A(CsA)的钙化防治作用.方法:成年SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,行同种异体带瓣主动脉腹主动脉的异位移植,分为CsA组、对照组和同基因组3组.CsA组移植后给予CsA 15 mg/(kg·d),共2周;对照组不做任何处理;同基因组行同一种系的近交系大鼠同种异体瓣膜移植.各组随机分为5组,每组8只,分别于术后2、4、8、12、16周采用流式细胞仪测定大鼠CD25、CD71的表达,取出移植物,原子火焰吸收法测定钙含量,对移植物行电镜观察.结果:①对照组移植后CD25和CD71表达的高峰时段主要在移植后早期,此后逐渐回落,12周后维持在低水平.CsA组在移植后2～4周CD25和CD71的表达明显低于对照组(P<0.01),但8周后的表达水平与对照组无差异(P>0.05);②对照组的钙含量从4周开始随时间的推移逐渐升高,12周达到高峰,此后进入平台期.CsA组的钙含量在移植后4、8、12、16周4个不同时点显著低于对照组(P<0.01);③移植后早期,CsA组的内皮细胞脱落和平滑肌细胞的坏死情况较对照组轻.结论:同种瓣移植后早期使用环孢素A具有抗钙化作用.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨长时间手术过程中患者凝血功能变化的规律.方法:随机将20例头颈部恶性肿瘤手术患者分为对照组(A组,n=10)和肝素组(B组,n=10).B组自肿瘤切除后持续静脉投入小剂量肝素,使部分活化凝血活酶时间(APTT)稳定在50～70 s.两组患者自麻醉开始到手术结束,每2 h采集1次静脉血检测血常规、PT、纤维蛋白原APTT、Fbg、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、凝血酶原片段(F1+2)、D-二聚体(D-D).结果:与麻醉开始时比较,两组患者4～6 h后PT缩短,Fbg增高,AT-Ⅲ降低,F1+2与D-D增加,差异有统计学意义(P<0.05).B组应用肝素后,F1+2与D-D开始降低,并明显低于同时点的A组(P<0.05).结论:随着手术的进行,患者血液凝固、纤溶功能增强,6 h后出现血栓前状态,小剂量肝素可改善血栓前状态.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)与正常T细胞表达和分泌的调节活化蛋白(RANTES)的相互关系及其在子宫内膜异位症(EMs)发病中的作用.方法:培养EMs在位内膜基质细胞作为体外实验模型,分别加入浓度为0.1、1.0、10.0 ng/ml的IL-1β后采用RT-PCR、ELISA法从转录及转录后水平观察趋化因子RANTES的表达.结果:RT-PCR结果显示,基础状态下EMs在位内膜基质细胞有RANTESmRNA的表达.0.1ng/ml的IL-1β作用4h即可明显增加细胞RANTES mRNA的表达(P<0.05),1.0 ng/ml的IL-1β作用8 h时作用达高峰,随着时间的递增,mRNA水平呈递减趋势,且各浓度组之间差异无显著性.ELISA结果显示,基础状态下细胞培养上清液内有微量RANTES蛋白的表达.0.1ng/ml浓度的IL-1β作用4 h即可显著诱导细胞分泌RANTES,1.0 ng/ml浓度的IL-1β作用12 h培养上清液中RANTES含量达高峰.结论:IL-1β可增强EMs在位内膜基质细胞对RANTES的基因表达,二者在EMs的发病过程起重要作用.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨15△三棱镜诱发眼斜诊断弱视的作用.方法:采用双盲法检查278例儿童视力和用15△三棱镜诱发眼斜检查确定注视类型,并比较结果.结果:①53例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为双眼持续注视,其双眼视力相等,46例双眼视力均为1.0,7例视力为1.0-2-3;②51例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为轻度弱视的患者中,44例双眼视力相差两行或少于两行,视力为0.6～0.8;7例双眼视力相差两行以上,视力为0.4～0.5;③122例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为明显弱视的患者双眼视力相差两行以上,视力均在0.2～0.5之间,与我国中度弱视视力诊断标准相符合;④31例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为重度弱视患者视力均低于0.1;⑤21例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为双眼持续注视,其双眼视力相等,但双眼视力为0.6～0.8;⑥用检查视力和15△三棱镜诱发眼斜两种方法诊断弱视的符合率为92.4%(257/278).结论:15△三棱镜诱发眼斜检查确定注视类型,提高弱视的诊断率,使早期治疗弱视成为可能.
作者： 刊期： 2005年第08期
1资料与方法1.1一般资料109例腰腹部绞痛、镜检血尿患者,均为我院门诊与住院患者,经B超诊断确诊为肾结石、输尿管结石.随机分为两组,治疗组61例,男45例,女16例,年龄22～52岁.其中肾结石18例,输尿管结石43例;对照组48例,肾结石15例,输尿管结石33例.两组病例在年龄、性别、病史及病情等方面无明显差异,具有可比性.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨急、慢性乏氧标记物(HIF-1α、GLUT1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,及其与NSCLC患者临床病理特征和预后的关系.方法:应用HIF-1α和GLUT1抗体对46例NSCLC组织进行免疫组化染色,检测两者表达水平,分析其与NSCLC患者临床病理特征和预后的关系.结果:HIF-1α与GLUT1在NSCLC中的阳性表达率分别为58.70%(27/46)和39.11%(18/46),r=0.492(P=0.001).HIF-1α表达与年龄、性别、肿瘤大小、分期、淋巴结转移、组织学类型和分化程度均无显著相关,而GLUT1与淋巴结转移(P=0.021)和鳞癌(P=0.001)密切相关.Kaplan-Meier生存分析,GLUT1阳性的NSCLC患者术后无病生存率低于阴性患者(P=0.039),而HIF-1α与总生存率、无病生存率均无关.结论:NSCLC患者肿瘤组织中同时存在急、慢性乏氧,其无病生存率主要与慢性乏氧有关.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨女性压力性尿失禁(stress urinary incontience,SUI)的手术治疗效果.方法:采用尿道中段无张力悬吊带术治疗41例女性压力性尿失禁患者,其中经阴道无张力悬吊带术(tension-free vaginal tape,TVT)治疗33例,经耻骨上途径无张力悬吊带术(suprapubic Arch sling,SPARC)治疗8例.结果:41例手术时间25～50 min(平均35.5 min),出血量10～25ml(平均15ml).膀胱损伤5例,2例为双侧损伤.40例患者拔尿管后排尿良好,1例因带气囊拔尿管而损伤尿道,出现尿潴留.术后随访1～23个月,4例患者在明显增加腹压时有少许尿液滴出,其余患者皆可很好地自主控尿,1h尿垫试验<2g,治愈率为90.2%(37/41).结论:尿道中段无张力悬吊带术可有效地治疗女性压力性尿失禁.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:构建靶向于人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)调控区的反义RNA腺病毒.方法:PCR扩增hTERT调控区1 779 bp的DNA片段,与腺病毒穿梭载体pShuttleCMV连接,PCR筛选反向插入的hTERT反义腺病毒穿梭载体pCMV-ashTERT,将pCMV-ashTERT与骨架质粒pAdEasy-1共转染受体菌BJ5 183,进行同源重组.用含卡那霉素的LB平板筛选同源重组阳性的克隆,酶切鉴定后,以Pac Ⅰ酶切线性化,转染包装细胞HEK293,在显微镜下观察细胞形态以鉴定重组的腺病毒,并以空斑形成实验测定重组病毒的滴度.结果:成功构建了端粒酶催化亚单位调控区的反义RNA重组腺病毒(pAd咀shTERT),滴度为2.8×1011pfu/ml.结论:成功构建hTERT调控区反义腺病毒,为探讨以端粒酶为靶点的抗肿瘤药物奠定了基础.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:观察新型发光纳米材料-无机纳米晶体颗粒量子点对小鼠骨髓造血细胞的标记和成像,探讨它在血液细胞分化发育研究中的作用.方法:采用大发射波长为550 nm的绿色量子点转铁蛋白复合物分别在体外和体内对小鼠骨髓造血细胞进行标记研究,并观察量子点转铁蛋白复合物对骨髓造血干细胞CFU-GM的影响.结果:量子点转铁蛋白复合物可标记骨髓中大部分造血细胞,而且荧光强度强,光学和化学稳定性好,对骨髓造血干细胞的增殖分化功能无影响.结论:量子点在血液细胞成像方面表现了优良的特性,在细胞生物学研究中具有重要作用.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨胰岛素对体外肾小管细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:建立体外肾小管细胞损伤模型.取肾小管细胞,随机分为3组,分别用正常兔血清(SC组)、再灌注损伤兔血清(SIR组)和再灌注肾损伤兔血清+胰岛素(IN组)处理培养48 h后,分别用分光光度计比色法检测肾小管细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性、钙ATP酶(Ca2+-ATPase)活性、一氧化氮(NO)和培养液中丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)含量.细胞组化染色检测肾小管细胞内SDH活性.结果:IN组与SIR组比较,肾小管细胞内SOD、SDH、Ca2+-ATPase活性明显升高(P<0.05);细胞上清液MDA、LDH、NO含量显著下降(P<0.05);细胞组化染色显示IN组SDH颗粒密集,着色较深,而SIR组颗粒稀疏,着色浅淡.结论:胰岛素对损伤肾小管细胞有明显的保护作用,其机制为提高细胞抗氧化能力、减少氧自由基生成并减轻细胞内Ca2+超载,促进细胞能量代谢.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨钙离子载体A23187或联合嘌呤霉素(puromycin)对人类体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用.方法:收集体外培养成熟的人卵母细胞124枚,根据体外成熟培养的时间分为24、48、72 h组.分别采用A23187、A23187联合嘌呤霉素进行孤雌激活,然后应用荧光原位杂交(FISH)技术对孤雌胚胎进行性染色体分析.结果:A23187或联合嘌呤霉素能激活体外成熟的卵母细胞,激活率分别为38.9%、71.8%;二者联合应用能有效地提高孤雌胚胎的发育潜能.随着体外成熟培养的时间延长,A23187联合嘌呤霉素对卵母细胞激活率呈下降趋势;其中24、48 h组成熟的卵母细胞激活率和胚胎发育潜能显高于72 h组.FISH对9个孤雌胚胎的性染色体分析示,7个孤雌胚胎为XX,2个为X.结论:钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效地激活人体外成熟卵母细胞,形成的孤雌胚胎核型多数为双倍体.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:检测精液中前列腺特异抗原(prostate special antigen,PSA)与纤维连接蛋白(fibronectin,FN)含量,分析其相关性,以探讨其对精液液化的影响.方法:将精液标本按不同的液化时间分为:60 min内不液化组(A组)47例和60min内液化组(B组)30例,采用时间分辨荧光分析法检测精液PSA,酶联免疫法检测FN含量,对所得结果行独立样本t检验和相关性分析.结果:PSA含量比较:A组为(0.849±0.563)mg/ml;B组为(1.779±0.22)mg/ml;两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).FN含量比较:A组为(148.74±2.51)ng/ml,B组为(115.39±1.83)ng/ml,A组含量显著高于B组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).精液中PSA与FN含量呈负相关(r=-0.04,p<0.05).结论:精液中PSA含量下降,FN水解减少,造成精液液化异常.
作者： 刊期： 2005年第08期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
