目的:探讨钙离子载体A23187或联合嘌呤霉素(puromycin)对人类体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用.方法:收集体外培养成熟的人卵母细胞124枚,根据体外成熟培养的时间分为24、48、72 h组.分别采用A23187、A23187联合嘌呤霉素进行孤雌激活,然后应用荧光原位杂交(FISH)技术对孤雌胚胎进行性染色体分析.结果:A23187或联合嘌呤霉素能激活体外成熟的卵母细胞,激活率分别为38.9%、71.8%;二者联合应用能有效地提高孤雌胚胎的发育潜能.随着体外成熟培养的时间延长,A23187联合嘌呤霉素对卵母细胞激活率呈下降趋势;其中24、48 h组成熟的卵母细胞激活率和胚胎发育潜能显高于72 h组.FISH对9个孤雌胚胎的性染色体分析示,7个孤雌胚胎为XX,2个为X.结论:钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效地激活人体外成熟卵母细胞,形成的孤雌胚胎核型多数为双倍体.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)诊断子宫内膜癌肌层浸润程度的准确性及其临床应用价值.方法:对51例经手术病理证实为临床Ⅰ期的子宫内膜癌患者术前行MRI检查,判断其肌层浸润程度,并与术后病理结果进行对照分析.结果:51例患者术前MRI均能做出准确诊断,其判断子宫内膜癌肌层浸润的准确率为86.27%(44/51),浅肌层浸润的准确率88.46%(23/26),深肌层浸润的准确率88.23%(15/17),动态增强MRI的准确率为90.5%(19/21).结论:MRI能准确地诊断子宫内膜癌并判断肌层浸润深度,动态增强MRI尤为准确,是术前判断肌层浸润程度的有效途径.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:检测精液中前列腺特异抗原(prostate special antigen,PSA)与纤维连接蛋白(fibronectin,FN)含量,分析其相关性,以探讨其对精液液化的影响.方法:将精液标本按不同的液化时间分为:60 min内不液化组(A组)47例和60min内液化组(B组)30例,采用时间分辨荧光分析法检测精液PSA,酶联免疫法检测FN含量,对所得结果行独立样本t检验和相关性分析.结果:PSA含量比较:A组为(0.849±0.563)mg/ml;B组为(1.779±0.22)mg/ml;两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).FN含量比较:A组为(148.74±2.51)ng/ml,B组为(115.39±1.83)ng/ml,A组含量显著高于B组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).精液中PSA与FN含量呈负相关(r=-0.04,p<0.05).结论:精液中PSA含量下降,FN水解减少,造成精液液化异常.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨中耳乳突手术治疗慢性分泌性中耳炎的适应证及治疗效果.方法:回顾分析接受中耳乳突手术治疗30例36耳慢性分泌性中耳炎患者的临床资料.36耳均接受了完壁式(闭合式)乳突-上鼓室切除、鼓室探查术,其中28耳同时行中耳置管术,5耳同时行听骨链成形术.所有病例术中清除的肉芽术后均作病理检验,其中炎性肉芽28耳,胆固醇肉芽肿8耳.结果:中耳置管者于术后1～3月拔除中耳通气管,鼓膜愈合良好.术后所有患耳均有不同程度的听力改善,以语频气导听阈的平均值为标准,听力达到应用水平(语频气导平均听阈30 dB以内)的31耳(31/36,86.11%).鼓室功能曲线检查结果显示,A型27耳(75%),C型8耳(22.22%),B型1耳(2.78%).术后随访0.5～3年,除1耳因鼓室积液复发,再次中耳置管外,其余患者症状无复发,主观听力无下降,鼓室功能曲线C型8耳有2耳转为A型.结论:经过各种治疗无效的慢性分泌性中耳炎,应积极采取中耳乳突手术治疗.中耳乳突手术可彻底清除病变,建立鼓室、鼓窦及乳突的通气引流,以防复发.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨青霉胺对腹腔粘连的预防作用及对刀口愈合的影响.方法:随机将60只昆明小鼠分成A、B、C 3组,每组20只.行1.5 cm腹正中切口,在右侧腹膜缝植5 mm2大小乳胶片,关腹前A组留置生理盐水1 ml,B组留置3%青霉胺1 ml,C组留置3%青霉胺1 ml且术后连续每天口服3%青霉胺1 ml.术后10、20 d分别处死各组的一半,根据Bigatt's计分法计算每组小鼠粘连发生率和粘连积分,观察刀口愈合情况,行抗张力测试,部分粘连组织行免疫组化染色,观察血管及组织增生情况.结果:术后10 d,B、C组粘连发生率低于A组(P<0.05)、粘连积分明显低于A组(P<0.01);术后20 d,粘连发生率C组低于A组(P<0.05),粘连积分B、C组明显低于A组(P<0.01).B、C组刀口均甲级愈合,但抗张力测试低于A组(P<0.01).结论:青霉胺具有明显预防腹腔粘连的作用,降低刀口抗张力而不影响刀口愈合.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:检测同种带瓣大动脉(conduit valved homograft,CVH)移植后的免疫反应,探讨其作用机制及临床意义.方法:①建立液氮冻存和4℃保存犬CVH (各14例)移植于异性受体犬腹主动脉实验模型;②在移植术后不同时点切取植入的CVH标本;免疫组织化学染色法检测细胞免疫及体液免疫反应,用光镜、扫描电镜及透射电镜进行观察.结果:术后7 d即可出现细胞免疫反应;1～3月达高峰;6～12月呈持续的低水平状态;表现为CVH内膜、动脉外膜、瓣下心肌组织中T细胞(以CD8+细胞和CD4+细胞为主)浸润,IL-2Ra持续表达.体液免疫反应仅发生于术后7 d～3个月,IgG沉积于CVH内膜和动脉中层平滑肌细胞周围;CVH瓣下心肌细胞、动脉中层平滑肌细胞间有散在的CD2r细胞浸润.结论:①CVH具有免疫原性.内皮细胞、平滑肌细胞、心肌细胞是其免疫原性表达的主要部分;②CVH移植术后早期(3个月以内)行免疫排斥反应的监测及防治具有临床意义.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨HLA-B基因型与山东地区汉族人慢性乙型肝炎的相关性.方法:用序列特异性寡核苷酸分型方法对29例山东地区慢性乙肝患者进行HLA-B的基因分型,并与健康汉族人的HLA-B的基因型进行比较分析.结果:山东地区汉族人乙肝患者中HLA-B55、71、72基因阳性率明显高于山东地区健康汉族人的基因携带率(P<0.05),HLA-B54在乙肝患者中的阳性率明显低于健康汉族人的基因携带率(P<0.05).结论:HLA-B55、71、72基因表型与山东地区乙肝慢性化相关,而HLA-B54基因型与抗HBV的感染相关,免疫遗传因素参与慢性乙肝的发病机制.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:研究驱动蛋白Rbkinesin-6对人肺腺癌细胞系A549有丝分裂的影响.方法:采用Rbkinesin-6特异性esiRNA介导的RNAi技术,系统分析Rbkinesin-6对肺癌细胞系A549有丝分裂的影响.结果:Rbkinesin-6 esiRNA可特异性地消除A549细胞Rbkinesin-6的表达,Rbkinesin-6缺失的细胞无法完成有丝分裂末期/胞质分裂,进而转变为双/多核细胞.结论:Rbkinesin-6在A549细胞有丝分裂末期/胞质分裂后阶段起重要作用,Rbkinesin-6基因沉默可以抑制肺癌细胞的生长,为肺癌基因治疗的研究提供了新的思路.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨女性压力性尿失禁(stress urinary incontience,SUI)的手术治疗效果.方法:采用尿道中段无张力悬吊带术治疗41例女性压力性尿失禁患者,其中经阴道无张力悬吊带术(tension-free vaginal tape,TVT)治疗33例,经耻骨上途径无张力悬吊带术(suprapubic Arch sling,SPARC)治疗8例.结果:41例手术时间25～50 min(平均35.5 min),出血量10～25ml(平均15ml).膀胱损伤5例,2例为双侧损伤.40例患者拔尿管后排尿良好,1例因带气囊拔尿管而损伤尿道,出现尿潴留.术后随访1～23个月,4例患者在明显增加腹压时有少许尿液滴出,其余患者皆可很好地自主控尿,1h尿垫试验<2g,治愈率为90.2%(37/41).结论:尿道中段无张力悬吊带术可有效地治疗女性压力性尿失禁.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:分离和纯化7～8d新生雄性小鼠精原细胞,为深入研究生精机理及其影响因素提供细胞来源和技术支持.方法:采用组合酶消化法制备7～8d雄性小鼠的生精细胞悬液;Percoll密度梯度离心法分离精原细胞,贴壁培养法进一步纯化精原细胞;滴片进行碱性磷酸酶染色;取同时间段雄性小鼠睾丸组织冰冻切片进行碱性磷酸酶染色.结果:精原细胞主要分布于45%～55%梯度间的Percoll中,经贴壁培养后纯度达75.2%.结论:用上述方法成功地分离和纯化了小鼠精原细胞.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:构建靶向于人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)调控区的反义RNA腺病毒.方法:PCR扩增hTERT调控区1 779 bp的DNA片段,与腺病毒穿梭载体pShuttleCMV连接,PCR筛选反向插入的hTERT反义腺病毒穿梭载体pCMV-ashTERT,将pCMV-ashTERT与骨架质粒pAdEasy-1共转染受体菌BJ5 183,进行同源重组.用含卡那霉素的LB平板筛选同源重组阳性的克隆,酶切鉴定后,以Pac Ⅰ酶切线性化,转染包装细胞HEK293,在显微镜下观察细胞形态以鉴定重组的腺病毒,并以空斑形成实验测定重组病毒的滴度.结果:成功构建了端粒酶催化亚单位调控区的反义RNA重组腺病毒(pAd咀shTERT),滴度为2.8×1011pfu/ml.结论:成功构建hTERT调控区反义腺病毒,为探讨以端粒酶为靶点的抗肿瘤药物奠定了基础.
作者： 刊期： 2005年第08期
1资料与方法1.1一般资料109例腰腹部绞痛、镜检血尿患者,均为我院门诊与住院患者,经B超诊断确诊为肾结石、输尿管结石.随机分为两组,治疗组61例,男45例,女16例,年龄22～52岁.其中肾结石18例,输尿管结石43例;对照组48例,肾结石15例,输尿管结石33例.两组病例在年龄、性别、病史及病情等方面无明显差异,具有可比性.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨同种瓣移植后早期环孢素A(CsA)的钙化防治作用.方法:成年SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,行同种异体带瓣主动脉腹主动脉的异位移植,分为CsA组、对照组和同基因组3组.CsA组移植后给予CsA 15 mg/(kg·d),共2周;对照组不做任何处理;同基因组行同一种系的近交系大鼠同种异体瓣膜移植.各组随机分为5组,每组8只,分别于术后2、4、8、12、16周采用流式细胞仪测定大鼠CD25、CD71的表达,取出移植物,原子火焰吸收法测定钙含量,对移植物行电镜观察.结果:①对照组移植后CD25和CD71表达的高峰时段主要在移植后早期,此后逐渐回落,12周后维持在低水平.CsA组在移植后2～4周CD25和CD71的表达明显低于对照组(P<0.01),但8周后的表达水平与对照组无差异(P>0.05);②对照组的钙含量从4周开始随时间的推移逐渐升高,12周达到高峰,此后进入平台期.CsA组的钙含量在移植后4、8、12、16周4个不同时点显著低于对照组(P<0.01);③移植后早期,CsA组的内皮细胞脱落和平滑肌细胞的坏死情况较对照组轻.结论:同种瓣移植后早期使用环孢素A具有抗钙化作用.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:损伤大鼠双侧基底核形成阿尔茨海默病(AD)模型,用空间参考记忆和空间工作记忆共同检测该模型的可靠性.方法:选用3月龄大鼠16只,随机选8只制成模型组,将鹅膏蕈酸钠(IBO)注入大鼠双侧基底核,其余8只为青年对照组.另选24月龄大鼠8只为老年对照组.用Morris水迷宫对3组大鼠进行行为学检测.结果:模型组与青年组、老年组相比,空间参考记忆和空间工作记忆均明显下降(P<0.01).结论:空间参考记忆和空间工作记忆是检测AD模型的可靠方法.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨抵抗素基因第2内含子多态性在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)发病中的作用.方法:为75例多囊卵巢综合征患者(PCOS组)和66例正常者(对照组)的DNA进行测序,观察两组间抵抗素基因第2内含子序列有无差异.结果:两组抵抗素基因在距第2外显子末端39 bp位点上存在C和CT两种基因型,CT均表现为套峰,未发现由C向T的突变,内含子2其余碱基序列稳定不变.PCOS组C等位基因出现的频率为0.96(72/75),出现CT套峰的频率为0.04(3/75);对照组中C等位基因出现频率为0.95(63/66),CT套峰出现频率为0.05(3/66),两组差异无统计学意义(P>0.05).结论:①抵抗素基因第2内含子基因多态性位于距第2外显子末端39位点上,存在C和CT两种基因型;②抵抗素基因第2内含子多态性与多囊卵巢综合征的发病无关.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突蛋白(Spike protein,S蛋白)与钙调蛋白结合肽(calmodulin binding peptide,CBP)-蛋白A串连亲和纯化(tandem affinity purification,TAP)标签在Vero细胞内的融合表达及亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选奠定基础.方法:从质粒pGEM-4Z-S中扩增S片段,在5'端加入Kozak序列,并与TAP标签基因共同插入pcDNA3.1(-)中,构建出真核表达载体pcDNA3.1-S-TAP(C).将构建好的质粒瞬时转染Vero细胞,并共感染重组痘苗病毒vTF7-3,用间接免疫荧光及Western-blotting技术检测融合蛋白的表达及亚细胞定位.结果:成功构建出真核表达载体pcDNA3.1-S-TAP(C),瞬时转染Vero细胞后S-CBP-蛋白A融合蛋白[S-TAP(C)]得到表达,重组痘苗病毒vTF7-3可有效增强该融合蛋白的表达水平,且检测到S-TAP(C)融合蛋白表达于细胞膜上.结论:S蛋白与TAP标签融合蛋白表达于细胞膜上,且vTF7-3的感染有助于靶蛋白表达水平的提高,可用于S蛋白结合蛋白的筛选.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨15△三棱镜诱发眼斜诊断弱视的作用.方法:采用双盲法检查278例儿童视力和用15△三棱镜诱发眼斜检查确定注视类型,并比较结果.结果:①53例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为双眼持续注视,其双眼视力相等,46例双眼视力均为1.0,7例视力为1.0-2-3;②51例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为轻度弱视的患者中,44例双眼视力相差两行或少于两行,视力为0.6～0.8;7例双眼视力相差两行以上,视力为0.4～0.5;③122例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为明显弱视的患者双眼视力相差两行以上,视力均在0.2～0.5之间,与我国中度弱视视力诊断标准相符合;④31例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为重度弱视患者视力均低于0.1;⑤21例用15△三棱镜诱发眼斜检查确定为双眼持续注视,其双眼视力相等,但双眼视力为0.6～0.8;⑥用检查视力和15△三棱镜诱发眼斜两种方法诊断弱视的符合率为92.4%(257/278).结论:15△三棱镜诱发眼斜检查确定注视类型,提高弱视的诊断率,使早期治疗弱视成为可能.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK)自杀基因体系联合重组干扰素α-2a(rIFNα-2a)对前列腺癌PC-3m细胞的体外杀伤作用.方法:应用逆转录病毒载体将HSV-TK基因转染PC-3m细胞,经RT-PCR鉴定后,MTY法检测应用丙氧鸟苷(ganciclovir GCV)前体药物及联合应用rIFN-α2a对转染PC-3m细胞的杀伤作用,以未转染PC-3m细胞为对照;同时采用流式细胞仪检测药物作用前后的变化.结果:GCV对转染后PC-3m细胞有较强的细胞毒作用,半数抑制浓度(IC50)为8.34μg/ml,但其旁观者效应不明显;联合应用rIFN-α2a可明显增强旁观者效应,两药相互作用指数小于0.7.结论:HSV-TK基因与rIFNα-2a联合应用对前列腺癌细胞具有协同杀伤作用.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)与正常T细胞表达和分泌的调节活化蛋白(RANTES)的相互关系及其在子宫内膜异位症(EMs)发病中的作用.方法:培养EMs在位内膜基质细胞作为体外实验模型,分别加入浓度为0.1、1.0、10.0 ng/ml的IL-1β后采用RT-PCR、ELISA法从转录及转录后水平观察趋化因子RANTES的表达.结果:RT-PCR结果显示,基础状态下EMs在位内膜基质细胞有RANTESmRNA的表达.0.1ng/ml的IL-1β作用4h即可明显增加细胞RANTES mRNA的表达(P<0.05),1.0 ng/ml的IL-1β作用8 h时作用达高峰,随着时间的递增,mRNA水平呈递减趋势,且各浓度组之间差异无显著性.ELISA结果显示,基础状态下细胞培养上清液内有微量RANTES蛋白的表达.0.1ng/ml浓度的IL-1β作用4 h即可显著诱导细胞分泌RANTES,1.0 ng/ml浓度的IL-1β作用12 h培养上清液中RANTES含量达高峰.结论:IL-1β可增强EMs在位内膜基质细胞对RANTES的基因表达,二者在EMs的发病过程起重要作用.
作者： 刊期： 2005年第08期
目的:探讨急、慢性乏氧标记物(HIF-1α、GLUT1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,及其与NSCLC患者临床病理特征和预后的关系.方法:应用HIF-1α和GLUT1抗体对46例NSCLC组织进行免疫组化染色,检测两者表达水平,分析其与NSCLC患者临床病理特征和预后的关系.结果:HIF-1α与GLUT1在NSCLC中的阳性表达率分别为58.70%(27/46)和39.11%(18/46),r=0.492(P=0.001).HIF-1α表达与年龄、性别、肿瘤大小、分期、淋巴结转移、组织学类型和分化程度均无显著相关,而GLUT1与淋巴结转移(P=0.021)和鳞癌(P=0.001)密切相关.Kaplan-Meier生存分析,GLUT1阳性的NSCLC患者术后无病生存率低于阴性患者(P=0.039),而HIF-1α与总生存率、无病生存率均无关.结论:NSCLC患者肿瘤组织中同时存在急、慢性乏氧,其无病生存率主要与慢性乏氧有关.
作者： 刊期： 2005年第08期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
