学术投稿

层粘连蛋白及生长抑素在高温致神经管畸形发生中的作用

马金龙;高英茂;高彦丽;刘凯

关键词:层粘连蛋白, 生长抑素, 高温, 诱发, 细胞凋亡, 神经管缺损
摘要:目的:探讨高温致畸中细胞凋亡的发生与层粘连蛋白(LN)及生长抑素(SS)的相关性,研究高温致畸的机理.方法:在高温致神经管畸形的动物模型上,用原位末端标记方法对畸形发生过程中细胞凋亡的时空分布进行定量分析,并用免疫组织化学方法,对各期鼠胚神经上皮和周围间充质的LN和SS表达进行定性、定位和相对定量分析.结果:LN主要位于神经上皮的基底膜,与神经管形成过程中的细胞凋亡呈负相关关系;SS位于神经上皮和周围间充质细胞的胞质内,其含量与神经管形成过程中的细胞凋亡呈明显正相关关系.高温后8~24 h胚胎神经上皮基膜LN含量明显低于对照组.高温后各期胚胎神经上皮和周围间充质细胞SS的含量均不同程度地高于对照组.结论:高温可促进胚胎SS的表达、短暂抑制LN的合成,从而诱导神经上皮和周围间充质细胞凋亡的发生,引起神经管畸形.
山东大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 术前髂内动脉栓塞化疗治疗局部晚期宫颈癌的疗效观察

    宫颈癌作为妇科常见的恶性肿瘤,其治疗失败的主要原因是肿瘤局部未控制或复发者约占6%~10%[1],其次是淋巴结转移或远处转移.局部晚期宫颈癌是一组具有高危因素的宫颈癌,此时癌灶已播散,难以确定适当的手术边界,而且盆腔淋巴结转移率高,传统治疗方法是放疗,疗效差,复发率高,而根治术后再放疗并不提高生存率,且增加并发症发生率[2],我们采用术前介入化疗治疗局部晚期宫颈癌,收到良好效果.

    作者:刘霞;汤艳红;郭彩霞 刊期: 2005年第11期

  • 大肠癌E1AF基因的表达对MMP-9的调控作用

    目的:探讨大肠癌患者血浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和肿瘤组织中E1A因子(E1AF)表达的临床意义及两者之间的关系.方法:采用酶链免疫吸附法(ELISA)检测51例大肠癌患者血浆MMP-9浓度,采用RT-PCR方法检测肿瘤组织中E1AF的表达,进行定量和半定量分析.结果:Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者血浆MMP-9浓度和肿瘤组织中E1AF的表达水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05),Ⅳ期大肠癌患者MMP-9的浓度高于Ⅲ期患者(P<0.05);血浆MMP-9浓度和肿瘤组织中E1AF的表达呈正相关(r=0.77,P<0.05).结论:患者血浆MMP-9和肿瘤组织中E1AF的高表达与大肠癌浸润转移有关,E1AF参与MMP-9的表达调控.

    作者:朱民;朱军 刊期: 2005年第11期

  • 反义缺氧诱导因子-1α对人乳腺癌细胞体内生长抑制作用的研究

    目的:研究反义缺氧诱导因子-1α(asHIF-1α)对人乳腺癌细胞MCF-7/ADR体内生长的影响及作用机制.方法:采用裸鼠移植瘤模型,观察移植瘤生长的体积、重量变化及肿瘤抑制率;应用免疫组化、Western blot技术检测种植瘤内微血管密度和HIF-1α的变化;用流式细胞术检测应用asHIF后肿瘤细胞的周期变化.结果:裸鼠体内抑瘤实验显示,asHIF-1α有一定抑瘤作用,肿瘤生长曲线减缓,体积抑制率为36.7%、瘤重抑制率为56%;流式细胞术结果显示,应用asHIF-1α后肿瘤细胞发生G1期停滞,G1期细胞增加14.79%,S期细胞减少7.32%,凋亡率(13.03±1.86)%;免疫组化显示,种植瘤内微血管密度减低;免疫组化、Western blot检测显示,实验2组种植瘤内HIF-1α蛋白含量降低.结论:asHIF-1α能在体内抑制肿瘤细胞的生长,其机制是通过抑制HIF-1α蛋白表达,进而诱导肿瘤细胞凋亡和周期停滞起作用.

    作者:肖颖;马超;周庚寅;阎世坤;曹倩;王琳琳 刊期: 2005年第11期

  • 注射Aβ25-35后大鼠海马超微结构及caspase-3表达的改变

    目的:探讨大鼠双侧海马注射Aβ25-35后海马组织形态、超微结构及caspase-3表达的改变.方法:采用Aβ25-35双侧海马注射的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型,光镜及透射电镜观察海马组织结构,免疫组化法观察caspase-3蛋白的表达.结果:苏木素伊红(HE)染色显示,模型组大鼠海马CA1-CA4区及齿状回神经元数量较对照组明显减少,可见较多的神经细胞胞质浓染,核固缩;透射电镜下,模型组海马CA1区神经元较少,可见部分神经细胞膜皱缩,胞体缩小,核膜完整,核染色质电子密度增强;海马区Caspase-3蛋白的表达明显增加.结论:Aβ25-35可在体内诱导大鼠海马神经元凋亡.

    作者:毕建忠;王萍;许顺良;于君;王晓云;刘震 刊期: 2005年第11期

  • 大鼠肝星形细胞、枯否细胞的同步分离培养与鉴定

    目的:建立经济、简便的同步分离培养肝星形细胞及枯否细胞的方法.方法:应用胶原酶和蛋白酶对大鼠肝脏进行原位灌流、消化,获得大鼠肝脏非实质细胞,经18%(W/V)的Nycodenz密度梯度离心,一步分离肝星形细胞及枯否细胞;肝星形细胞处在界面,枯否细胞则处在界面下;台盼蓝染色鉴定细胞活力;Desmin免疫细胞化学染色鉴定肝星形细胞;溶菌酶免疫细胞化学染色鉴定枯否细胞.结果:该方法分离的肝星形细胞和枯否细胞的纯度达95%左右.肝星形细胞得率(3.0±0.5)×107/肝,枯否细胞得率(4.0±0.5)×106/肝.结论:应用Nycodenz一步密度梯度离心法可以很好的同时分离肝星形细胞和枯否细胞.

    作者:石军;任万华;郝菁华;张捷;朱菊人 刊期: 2005年第11期

  • 安氟醚闭环靶控麻醉系统的临床应用

    目的:探讨安氟醚靶控麻醉系统临床应用的安全性.方法:建立以脑电双频指数(BIS)为控制变量的吸入麻醉药靶控麻醉系统,对13例美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅱ级结肠部分切除患者行安氟醚闭环靶控麻醉(T组),使用BIS执行误差中位数(MDPE)、执行误差绝对值中位数(MDAPE)、摆动度、补偿值对系统控制性能进行临床评价;观察麻醉期间患者血液动力学变化、苏醒期质量,并与传统人工控制麻醉组(H组,n=15)比较.结果:T组MDAP、MDAPE、摆动度和补偿值分别为(2.01±6.63)、(5.48±3.20)、(4.26±2.04)和(2.26±3.95);与H组比较,T组BIS值的摆动度较小(P=0.01),而MDPE、MDAPE、补偿值差异无统计学意义(P>0.05).两组患者术中各时点血压、心率与基础值比较差异无统计学意义(P>0.05).患者苏醒时间比较差异亦无统计学意义.结论:安氟醚闭环靶控麻醉系统能够将BIS控制在预定范围,患者麻醉深度和血液动力学稳定,该系统用于结肠部分切除患者的临床麻醉安全可行.

    作者:王焕亮;吴琦;刘瑞芳;赵连英;类维富 刊期: 2005年第11期

  • CD69在慢性乙肝患者CD4+、CD8+T淋巴细胞的表达

    目的:观测慢性乙肝患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞早期激活标志CD69的表达.方法:静脉采集慢性乙肝患者普通肝素抗凝血2 ml,在植物血凝素(PHA)20μg/ml条件下进行全血培养,4 h后用双色免疫荧光标记流式细胞术检测CD4+、CD8+T淋巴细胞CD69的表达.结果:正常人外周血只有很少量CD4+与CD8+T淋巴细胞表达CD69分子,经PHA刺激后CD4+与CD8+T淋巴细胞CD69的表达率明显升高,较刺激前有统计学差异(P<0.01).同样,慢性乙肝患者在激活前后也有统计学差异(P<0.01);慢性乙肝患者在PHA刺激前有一部分CD4+、CD8+T淋巴细胞表达CD69分子,明显高于对照组(P<0.01).结论:本研究结果可能与乙肝患者体内病毒免疫紊乱有关系.

    作者:姜玉杰;丛雅琴;张锑 刊期: 2005年第11期

  • 恶性淋巴瘤树突状细胞和CD44V6的表达

    目的:研究树突状细胞(DC)及CD44变异体(CD44V6)在恶性淋巴瘤中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学SP方法检测56例淋巴瘤患者的淋巴结及10例肿瘤患者非转移淋巴结中DC及CD44V6的表达,对数据进行统计学处理.结果:DC散在分布于淋巴组织之间,与肿瘤细胞密切接触,存时间长于5年组的DC较短于5年组多,差异有显著性(P<0.05);临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的DC均较Ⅳ期增多,差异有显著性(P<0.01);DC与增殖细胞核抗原(PCNA)的表达呈负相关(r=-0.267,P<0.05);CD44V6在淋巴瘤中可见阳性表达,且阳性率随疾病分期增加而逐渐增高(P<0.05).结论:DC及CD44V6在淋巴瘤的表达不仅可反映淋巴瘤的恶性程度,而且可作为淋巴瘤的预后指标.

    作者:初晓霞 刊期: 2005年第11期

  • 层粘连蛋白及生长抑素在高温致神经管畸形发生中的作用

    目的:探讨高温致畸中细胞凋亡的发生与层粘连蛋白(LN)及生长抑素(SS)的相关性,研究高温致畸的机理.方法:在高温致神经管畸形的动物模型上,用原位末端标记方法对畸形发生过程中细胞凋亡的时空分布进行定量分析,并用免疫组织化学方法,对各期鼠胚神经上皮和周围间充质的LN和SS表达进行定性、定位和相对定量分析.结果:LN主要位于神经上皮的基底膜,与神经管形成过程中的细胞凋亡呈负相关关系;SS位于神经上皮和周围间充质细胞的胞质内,其含量与神经管形成过程中的细胞凋亡呈明显正相关关系.高温后8~24 h胚胎神经上皮基膜LN含量明显低于对照组.高温后各期胚胎神经上皮和周围间充质细胞SS的含量均不同程度地高于对照组.结论:高温可促进胚胎SS的表达、短暂抑制LN的合成,从而诱导神经上皮和周围间充质细胞凋亡的发生,引起神经管畸形.

    作者:马金龙;高英茂;高彦丽;刘凯 刊期: 2005年第11期

  • 超短波治疗慢性支气管炎急性发作期的临床研究

    目的:探讨超短波对慢性支气管炎患者肺通气功能、外周血、诱导痰炎症介质的影响.方法:将74例急性发作期慢性支气管炎患者分为超短波治疗组52例和对照组42例.超短波治疗组除常规治疗外行超短波治疗10~14 d,对照组行常规治疗.所有患者治疗前及治疗10~14 d病情缓解后分别行血常规及肺功能检查测定1 s肺活量(FEV10)占预计值百的分数、用ELISA法检测外周血浆和诱导痰液中白介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.结果:与对照组比较,超短波治疗组治疗10~14 d后外周血及痰液IL-8、TNF-α均显著降低(P<0.05),肺通气功能指标实测值占预计值百分率(FVC%pred、FEV1.0%pred)明显升高(P<0.05).结论:超短波治疗慢性支气管炎具有减轻气道炎症和全身炎症的作用.

    作者:王晓红;杨丽;郭志芹 刊期: 2005年第11期

  • 经皮脾门静脉核素显像在内镜套扎术疗效评估中的作用

    目的:评价经皮脾门静脉核素显像对肝硬化伴食管静脉曲张患者行内镜下静脉曲张结扎(EVL)治疗前的病例筛选及预后评估的价值.方法:39例肝硬化伴食管静脉曲张患者EVL治疗前进行脾门静脉核素显像检查,根据脾门静脉核素显像侧支血管灌注像,分为Ⅰ组(A1型,单纯上行侧支为主)、Ⅱ组(A2型,上行为主伴完全肝外分流型)及Ⅲ组(C型,上行和下行侧支同时存在).观察EVL术后3月、1年食管静脉曲张(EV)显效率及复发率.结果:EVL术后1年EV显效率及复发率Ⅰ组分别为38.9%、44.4%;Ⅱ组分别为9.1%、72.7%;Ⅲ组分别为60%、20%.Ⅲ组EV复发率明显低于Ⅱ组(P<0.05),Ⅰ组虽低于Ⅱ组,但无统计学意义(P>0.05).并且EV复发组的门脉分流指数(PSSI)高于非复发组(P<0.05).提示C型及A1型伴PSSI较低的食管静脉曲张出血患者行EVL疗效满意,复发率低.结论:脾门静脉核素显像可作为EVL术前病例筛选及预后评估安全有效的检查手段.

    作者:栗华;赵幼安;高莉;顾晓萌;吴洪磊 刊期: 2005年第11期

  • 高血压脑出血无创定位穿刺引流治疗的临床研究

    目的:探讨无创立体定位穿刺引流治疗高血压脑出血的准确性和安全性.方法:高血压脑出血患者127例,经CT定位,采用青岛嘉隆科技发展有限公司生产的立体定位器在血肿内置管,对血肿采取无创立体定位穿刺进行液化、引流治疗.结果:血肿内置管准确,误差小于0.3 cm;48 h内71.7%的患者血肿被有效清除,死亡13例,总死亡率占10.2%.结论:无创立体定位穿刺血肿引流术操作简单,定位客观,精确度高,能迅速有效的引流清除血肿,对治疗高血压性脑出血效果显著.

    作者:刘广存;张庆林;王成伟;许尚臣;孙金龙;刘英超;刘树山;李猛 刊期: 2005年第11期

  • 不同应激方式与时程对大鼠海马CA3区HSP70表达及血清皮质醇含量的影响

    目的:探讨不同应激方式与时程对大鼠海马CA3区热休克蛋白70(HSP70)表达及血清皮质醇含量的影响.方法:采用慢性限制活动应激(CRS)作为可预知性应激动物模型,每天随机给予不同轻度应激刺激建立慢性不可预知性应激(CMS)动物模型,观察两组动物海马CA3区HSP70的表达及血清皮质醇含量.结果:CMS大鼠海马神经细胞开始出现损伤的时间较CRS晚,损伤程度较CRS轻.CRS较CMS大鼠海马CA3区HSP70表达逐渐增强,且与对照组比较有统计学差异(P<0.01).应激组大鼠血清皮质醇较对照组高,动态观察显示应激早期达到高峰.结论:CRS大鼠海马的损伤及HSP70的表达均较CMS明显.不同的应激方式下大鼠HSP70细胞保护效应较损伤效应有所延迟,提示应激前诱导HSP70表达可能会起到预防细胞死亡的作用.

    作者:李琦;潘芳;江虹;于洪鸾;路翠艳 刊期: 2005年第11期

  • 头痛宁对大鼠血小板功能及耐缺氧能力的影响

    目的:研究头痛宁对大鼠血小板功能、耐缺氧能力的影响及镇痛机制.方法:取体重(180±20)g Wistar大鼠200只,随机分为4组,分别灌胃给予生理盐水、头痛宁大、小剂量和麦角胺咖啡因片,测定用药后大鼠出凝血时间,ADP诱导的大鼠血栓性死亡的死亡率,寒凝血瘀大鼠血粘度和红细胞聚集指数及密闭缺氧存活时间.结果:头痛宁组大鼠用药后出凝血时间明显延长,ADP诱导的大鼠血栓性死亡的死亡率、寒凝血瘀大鼠血粘度和红细胞聚集指数均低于对照组,大鼠密闭缺氧存活时间长于对照组,且头痛宁高剂量组与麦角胺咖啡因组及头痛宁小剂量组比较,差异显著(P<0.05).结论:头痛宁可明显延长大鼠出凝血时间,降低ADP诱导的大鼠血栓性死亡的死亡率,明显改善寒凝血瘀大鼠循环障碍,改善微循环,降低血粘度和红细胞聚集指数,提高大鼠对缺氧的耐受力,且呈良好的量效关系.

    作者:李淑玲;孙灵芝;顾一珠;李美 刊期: 2005年第11期

  • 新城疫病毒疫苗对人卵巢癌细胞株治疗作用的研究

    目的:研究新城疫病毒疫苗(ATV-NDV)对人卵巢癌细胞株体外生长的抑制作用.方法:制备人卵巢癌细胞株3A0 ATV-NDV瘤苗,将不同浓度的ATV-NDV、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素15(IL-15)、ATV-NDV+IL-12、ATV-NDV+IL-15分别与正常人外周血淋巴细胞混合培养,MTT法测定其刺激淋巴细胞增殖的程度及对肿瘤细胞的生长抑制率;HE染色法观察效靶比为50:1时活化的淋巴细胞与3A0细胞共同培养24~96 h后细胞形态学的变化.结果:活化的淋巴细胞与靶细胞共培养可杀死肿瘤细胞,并具有时效性(P<0.05);不同细胞间细胞生长抑制率(GIR)差异无显著性(P>0.05);IL-15、IL-12与ATV-NDV在活化淋巴细胞方面具有协同作用,与单独作用差异有显著性(P<0.01);IL-15与ATV-NDV作用差异无显著性(P>0.05).淋巴细胞作用48 h后3AO细胞即出现凋亡形态.结论:经ATV-NDV、IL-12、IL-15、ATV-NDV+IL-12、ATV-NDV+IL-15混合培养的正常人外周血淋巴细胞可有效地抑制3AO细胞株的生长,并具有时间、浓度依赖性,其作用机制是诱导细胞凋亡.

    作者:刘培淑;侯萍;毛洪鸾;辛刚;白琴 刊期: 2005年第11期

  • 还原型谷胱甘肽对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞的干预性研究

    目的:探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞损伤的保护作用.方法:将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为正常对照与GSH不同浓度处理组,缺氧、复氧前均给予0、40、80、160mg/L浓度的GSH,缺氧2 h,复氧1 h.应用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,用硫代巴比妥酚显色法测定丙二醛(MDA)含量.结果:与对照组相比,单纯缺氧/复氧(0 mg/L)组SOD活性显著下降、MDA水平显著升高(P<0.01).GSH预处理以剂量依赖性减轻细胞活力下降及MDA的上升,而对SOD的作用则在160 mg/L组达到峰值.结论:GSH对缺氧/复氧损伤的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与GSH的抗氧化作用有关.

    作者:赵丽丽;王一彪;朱晓波;张兆华 刊期: 2005年第11期

  • 丁酸钠对小鼠大肠组织抑癌基因表达的影响

    目的:观察大肠癌变过程中不同类型腺体组织抑癌基因p21waf1、bax、gadd45的表达及丁酸钠对其表达的影响.方法:利用二甲基肼(DMH)制作昆明小鼠大肠癌模型,通过免疫组化和RT-PCR分别检测大肠癌变过程中,小鼠大肠粘膜不同病理状态下3种抑癌基因的表达与变化.结果:在正常粘膜发展至腺瘤的过程3种基因的表达水平逐渐升高,而癌组织中3种抑癌基因的表达不同程度的降低.丁酸钠灌肠组各基因表达明显高于对照组和DMH组,其中以p21waf1的升幅大.结论:大肠粘膜癌变与抑癌基因p21waf1、bax、gadd45的表达有关,丁酸钠可以通过调控3种抑癌基因的表达发挥抗肿瘤作用.

    作者:张孝卫;刘成霞;王兵;李铁军;张静;黄丽华;张尚忠 刊期: 2005年第11期

  • 犬脑积水动物模型建立的初步研究

    目的:通过对犬脑断层解剖、颅脑磁共振三维扫描以及脑积水模型建立的研究,探讨犬脑积水动物模型建立的方法.方法:选择正常杂种雄性犬8只,体重15kg左右,行颅脑磁共振三维扫描.其中3只行颅脑断层解剖切片;5只测量各个脑室多个径线,手术暴露出環枕硬脑膜,将导管的尖端轻柔推进到第四脑室内的头侧半,缓慢注入氰基丙烯酸酯凝胶0.3ml,使之充满第四脑室.实验数据经t检验.结果:通过对正常犬及犬脑积水模型脑室系统的断层解剖及颅脑磁共振三维扫描,获得了犬脑室系统的一系列数据,为建立犬脑积水动物模型及脑积水程度的判定提供了数据资料.诱导后5条犬,其中1条为重度脑室扩大(Evan′s比率改变的百分数为168%),2条中度扩大(57%、75%),2条为轻度扩大(15%、25%).结论:①犬脑积水模型相对于其它大型哺乳动物模型,价格低,易饲养,模型建立成功率高,是比较适合用于脑积水诊断及治疗方面研究的动物模型之一;②研究中发现犬三脑室内的中间块较大,即使较重的脑积水,现有的神经内窥镜达到三脑室底较困难,因此不是进行神经内窥镜第三脑室造瘘术研究的理想动物模型.

    作者:孙金龙;刘广存;张庆林;李猛;崔庆轲;邵广瑞;李佚新;宋磊 刊期: 2005年第11期

  • 基因PTTG、PTEN在泌乳素腺瘤中的表达及意义

    目的:研究泌乳素(PRL)腺瘤中垂体瘤转化基因(PTTG)和抑癌基因PTEN在泌乳素腺瘤中的表达及意义.方法:52例泌乳素腺瘤分为侵袭组24例和非侵袭组28例,采用免疫组化方法分别检测腺瘤组织中PTTG蛋白和PTEN蛋白的表达水平;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测腺瘤组织中PTTG-mRNA的表达水平;应用免疫印迹(Western-bl0t)方法检测腺瘤组织中PTTG蛋白的表达水平并进行定量分析.结果:PTTG蛋白在侵袭组中有23例阳性表达,积分光密度(IOD)为9 874.24±2 143.56,平均吸光度为28.13±4.31,显著高于非侵袭组;RT-PCR检测显示,48例腺瘤标本有PTTG-mRNA特异扩增条带,但侵袭组表达水平有不同程度的增高;PTEN蛋白在非侵袭组中有8例阳性表达,IOD为6489.12±1523.45,与侵袭组比较差异有统计学意义.结论:基因PTTG与POTEN表达与肿瘤的侵袭性密切相关,对肿瘤的发生、发展有重要作用,可以作为临床判定肿瘤侵袭生长的分子标志.

    作者:崔友强;滕良珠;李国新;庞琦 刊期: 2005年第11期

  • 神经元型一氧化氮合酶的核转位现象

    目的:研究神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)的亚细胞分布.方法:以体外培养的大鼠星形胶质细胞以及神经细胞株PC12、R2为研究对象,应用共聚焦激光扫描显微镜及Western Blotting技术检测nNOS的亚细胞分布.结果:次传代后的前6天,nNOS主要分布于星形胶质细胞的细胞质内,细胞核内几乎没有分布.在次传代后的第7天,nNOS主要分布于细胞核内,且持续时间近10 h.此后,nNOS又主要分布于细胞质内.然而,在神经细胞株PC12、R2没有发生nNOS核转位.结论:在一定的体外培养时间,星形胶质细胞发生nNOS核转位,并且nNOS核转位是原代培养神经细胞特有的一种生物学行为.

    作者:刘宝义;袁中瑞;肖伟;郭晓笋;袁兰 刊期: 2005年第11期

山东大学学报(医学版)杂志

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