学术投稿

基于ITS2序列的中药材苍术种苗DNA条形码鉴定

刘金欣;李耿;陈彩霞;魏妙洁;王燕;赵春颖;石林春

关键词:苍术, 种苗, DNA条形码, 核糖体内部转录间隔区2, 朝鲜苍术
摘要:目的:建立基于DNA条形码技术的中药材苍术种苗鉴定方法.方法:收集中药材苍术及其易混品原植物样品28份,构建苍术种苗鉴定参考核糖体内部转录间隔区2(ITS2)条形码数据库.从河北、山东、山西、内蒙古、辽宁及湖北等苍术主产地收集苍术种苗52份.通过提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增,双向测序获得其ITS2条形码序列.应用PUAP 4.0软件计算种内、种间遗传距离,利用MEGA 7.0软件构建邻接树,对中药材苍术种苗进行DNA条形码鉴定.结果:中药材苍术及其易混品原植物ITS2条形码序列具有稳定的序列差异,邻接树呈现单系性,可以明显区分苍术及其易混品;基于标准参考数据库,42份苍术种苗为朝鲜苍术(80.8%),7份苍术种苗为苍术(13.5%),3份苍术种苗为白术(5.7%).结论:基于ITS2序列可以准确区分中药材苍术及其混伪品种苗.苍术种苗基原物种鉴定结果以朝鲜苍术为主,提示苍术临床用药存在潜在安全风险.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 中医药拮抗创伤后应激障碍的研究现状

    创伤后应激障碍(PTSD)是由于遭受异乎寻常的威胁性或灾难性心理创伤,而诱发的长期持续的精神障碍.近年来,随着战争、自然灾害、严重交通意外、暴力犯罪等重大创伤意外的不断增多,PTSD的患病率逐年上升,引起了人们的高度关注.本文检索2006-2016年被中国知网(CNKI)收载的有关中医药拮抗PTSD的临床和实验性研究文献.从PTSD所属中医病证的范畴;中医对PTSD的病因病机的认识;PTSD的临床辨证分型与选方用药;中医药治疗PTSD的临床研究;针灸治疗PTSD的临床研究;中药拮抗PTSD的实验研究等6个方面对中医药拮抗PTSD的现状进行了综述.通过对检索的文献的整理与分析,多数学者将PTSD归属于中医百合病、嗜睡、心悸、不寐、健忘、厥证、郁证、奔豚气、梅核气等范畴;PTSD的中医临床辨证分型所涉及了心、肝、脾、肺与肾五脏,尤其是心、肝二脏;电针头穴治疗PTSD具有显著地临床疗效优势;中药复方拮抗PTSD的实验研究结果表明,海马区域的糖皮质激素受体(GR)与盐皮质激素受体(MR)受体的表达变化及调节HPA轴是中药复方拮抗PTSD的作用靶点或关键环节.对中医药拮抗创伤后应激障碍综合症研究中存在的问题进行了初步的分析.

    作者:郭宏伟 刊期: 2018年第02期

  • 苍术炒焦前后GC指纹图谱的比较

    目的:建立生苍术和焦苍术挥发油的GC指纹图谱,阐明苍术炒焦前后挥发油部位化学成分的变化规律.方法:采用水蒸气蒸馏法制备挥发油;建立气相色谱指纹图谱,检测条件为HP-5石英毛细管柱(0.32 mm ×30 m,0.25 μm),载气(N2)流速0.8 mL· min-1,进样口温度240℃,进样量1 μL,分流进样,分流比20∶1,检测器温度260℃,柱温采用程序升温模式;并对炒焦前后的GC指纹图谱进行比较与分析.结果:在苍术炒焦前后挥发油的GC指纹图谱中有25个共有峰,各共有峰相对保留时间基本相同,但相对峰面积发生了显著变化;其中15 ~ 17,19,23 ~ 25号峰的峰面积降低率均>20%;16号与17号色谱峰的峰面积比值在生品中均>3.0,而在焦品中却均<3.0;19号与23号色谱峰的峰面积比值在生品中均<3.0,而在焦品中却均>3.0.鉴定16号峰为β-桉叶醇,19号峰为邻苯二甲酸二异丁酯,23号峰为白术内酯Ⅱ,24号峰为白术内酯Ⅰ,25号峰为白术内酯Ⅲ.结论:苍术生品和焦品的GC色谱特征峰差异明显、结果稳定、专属性强,可作为二者的定性鉴别特征之一,这为阐释焦苍术的降燥减毒机制提供了实验依据.

    作者:陈祥胜;刘艳菊;陈海霞;孙雄杰;瞿领航 刊期: 2018年第02期

  • 含漏芦方剂主治病证的用药规律分析

    目的:应用Matlab R2013a软件对《中医方剂大辞典》中含漏芦的方剂进行分析,为指导临床用药、扩大漏芦使用范围提供依据.方法:收集整理《中医方剂大辞典》中包含漏芦的方剂,按特定格式录入软件中,按时期和主治疾病进行对应分析、加权秩和比综合评价和关联分析,分析漏芦运用的时代特点和用药规律.结果:共收集相关方剂287首,漏芦治疗疮疡类疾病常与大黄、升麻等配伍,找出58个常用药组;治疗缺乳常与栝楼配伍,找出23个常用药组;治疗皮肤病类疾病常与刺蒺藜、玄参等配伍,找出38个常用药组.以上配伍沿用稳定、专属性强;药组用药集中,用药思路明晰.结论:《中医方剂大辞典》中含漏芦的方剂用药特点明确,分析含漏芦方剂在不同时期与不同主治时的用药规律和特点,对该药物的现代临床应用有一定的指导意义.

    作者:栗圣榕;夏厚林;涂翔;胡攀;李洋;李文婷;刘娟;邓曦;张廷模 刊期: 2018年第02期

  • 柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及ERK/p38MAPK信号通路的影响

    目的:观察柴朴汤对哮喘模型大鼠气道炎症及细胞外信号调节激酶(ERK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响.方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、柴朴汤低、中、高(0.75,1.5,3.0 g·kg-1)组,地塞米松组.采用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型.柴朴汤低、中、高剂量组于激发前0.5h给予相应剂量柴朴汤灌胃;地塞米松组于激发前0.5h给予地塞米松(0.005 g·kg-1)灌胃;模型组于激发前0.5h给予等体积生理盐水灌胃;空白组以生理盐水代替OVA进行腹腔注射及雾化吸入;隔日1次,共激发28 d.观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类细胞计数的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织磷酸化ERK(p-ERK),磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的活性;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析检测ERK,p38 MAPK mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK,p-ERK,p38MAPK,p-p38 MAPK蛋白的表达;光镜下观察病理组织形态学变化及进行炎症评分.结果:模型组大鼠BALF中细胞总数和分类细胞计数;肺组织p-ERK,p-p38 MAPK的活性,ERK,p38 MAPK mRNA的表达,p-ERK,p-p38 MAPK的表达,炎症评分均明显高于空白组(P<0.01);柴朴汤低、中、高剂量组和地塞米松组上述指标则明显低于模型组(P <0.05,P<0.01).结论:柴朴汤可改善哮喘模型大鼠气道炎症,其机制可能与其抑制ERK/p38 MAPK信号通路有关.

    作者:徐凤;肖韩艳;周淑芬;毛艺纯 刊期: 2018年第02期

  • 金荞麦提取物对肠易激综合征大鼠肥大细胞,PAR-2,SP的影响

    目的:观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)模型大鼠内脏高敏感的作用以及对肥大细胞(MC),蛋白酶激活受体-2(PAR-2),P物质(SP)的影响.方法:将清洁级新生雄性乳大鼠采用新生期母婴分离、乙酸灌肠、鸡卵清白蛋白腹腔注射的复合造模方法制备IBS内脏高敏感模型,大鼠随机分为正常组(生理盐水),模型组(生理盐水),Fag低、中、高剂量组(0.14,0.42,1.26 g·kg-1),酮替芬组(0.18 mg·kg-1),每组10只,连续灌胃14 d.采用腹壁撤退反应(AWR)评估大鼠内脏敏感性,免疫组化法(immunohistochemistry)检测大鼠结肠MC数量、脱颗粒程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PAR-2蛋白表达,免疫组化、酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠SP水平.结果:与正常组比较,模型组20,40,60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力下AWR评分明显升高,结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显上升(P<0.05);与模型组比较,Fag中剂量组(20,40,60 mmHg压力下),Fag高剂量组(20,40 mmHg压力下)的AWR评分,远端结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显下降(P<0.05);与酮替芬组比较,Fag高剂量组AWR评分(40 mmHg压力下),SP水平降低(P<0.05).结论:Fag能降低IBS模型大鼠内脏敏感性,其机制与抑制MC数量及活化脱颗粒程度,下调PAR-2受体,降低SP有关,并且镇痛作用优于酮替芬.

    作者:严晶;刘丽娜;陆茵;尚文斌;鲁俊;葛飞;余利华;彭雯;于希忠;张颢;赵娟;孙志广 刊期: 2018年第02期

  • 基于HPLC和HSGC结合的黄芩酒制前后饮片特征图谱表征

    目的:建立黄芩片和酒黄芩的特征图谱,分析黄芩酒制前后饮片特征图谱的变化规律.方法:分别采用高效液相色谱法(HPLC)和顶空气相色谱法(HSGC)分析黄芩片和酒黄芩的特征图谱.色谱条件为流动相甲醇(A)-含10 mmol·L-1甲酸铵的0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ~ 10 min,20% ~40%A;10~20min,40% ~46%A;20 ~30 min,46% ~ 52%A;30~50 min,52% ~ 70% A),检测波长260 nm.结果:黄芩片和酒黄芩的HPLC特征图谱中均可标示13个特征峰,并归属了其中黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A共6个色谱峰,黄芩片酒制前后HPLC特征图谱无显著差异.黄芩生品、炮制品的HSGC特征图谱差异显著,酒黄芩饮片中可以检测到炮制辅料乙醇的特征峰,可有效地区别生品和酒制品.结论:将HPLC和HSGC建立的特征图谱综合运用于黄芩片、酒黄芩的质量评价和鉴别,弥补了HPLC特征图谱在生品和酒制品属性识别方面的局限性,为酒制类中药饮片的质量评价和真伪鉴别提供了新思路.

    作者:苏慧;霍雨佳;扶垭东;刘颖;麻印莲;李丽 刊期: 2018年第02期

  • 痛泻要方加减引经药防风对肠易激综合征大鼠内脏敏感性及脑肠轴不同靶点脑肠肽的影响

    目的:研究痛泻要方加减防风对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠内脏敏感性及脑肠轴不同靶点脑肠肽的影响.方法:将新生SD大鼠随机分为正常组、模型组、痛泻要方缺防风组、痛泻要方全方组,和痛泻要方倍用防风组,每组10只,除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法,复制腹泻型肠易激综合征大鼠模型,造模后各组灌胃给予相应药物,连续2周,检测粪便含水量和腹壁撤退反射(AWR),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测5-羟色胺(5-HT)和P物质(SP)的含量,通过免疫组化法检测促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的表达.结果:与模型组比较,各实验组均能显著降低粪便含水量、小容量阈值和血浆、下丘脑、结肠中的5-HT,SP含量,减少CRH的表达(P<0.05,P<0.01).痛泻要方全方组和痛泻要方倍用防风组大鼠粪便含水量,5-HT和SP含量及CRH的表达量较痛泻要方缺防风组明显减低,AWR评分明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论:防风具有增强痛泻要方抑制腹泻型肠易激综合征的内脏高敏感性和调节脑肠轴不同靶点中的脑肠肽的效应.

    作者:梁瑞峰;葛文静;王慧森;魏征;崔伟锋;李更生 刊期: 2018年第02期

  • 八正散加减对湿热下注型痔瘘术后尿潴留疗效及对恢复排尿时间的影响

    目的:探讨湿热下注型痔瘘术后尿潴留(UR)应用八正散加减治疗的临床效果及对患者排尿功能恢复时间的影响.方法:选取河北省中医院2015年3月-2017年3月收治的134例痔瘘术后UR患者,运用随机数字表法均分为两组.所有患者均予以相同的基础治疗,对照组在此基础上联合新斯的明治疗,观察组在对照组基础上加用八正散加减治疗.记录比较两组治疗前后视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS),焦虑自评量表(self-rating anxiety scale,SAS)评分,术后首次排尿情况、临床疗效及不良反应情况.结果:与治疗前比较,两组治疗后VAS,SAS评分较治疗前均显著降低(P<0.01);与对照组治疗后比较,观察组下降更显著(P<0.01).观察组术后首次排尿时间显著缩短、膀胱残余尿量(RUV)显著减少、大尿流率(Qmax)较对照组显著升高(P<0.01).治疗后,观察组总有效率为94.0%,对照组总有效率79.1%,观察组优于对照组(P<0.05).治疗后观察组患者尿路感染、出血、疼痛及再次发生尿潴留发生率明显低于对照组(P<0.05).两组不良反应比较差异无统计学意义.结论:湿热下注型痔瘘术后尿潴留应用八正散加减治疗更能迅速缓解患者的临床症状体征、恢复自主排尿功能,临床疗效优于新斯的明.

    作者:陈爱霞;王欣;吴春晓;江雪;王梅青;周颖;刘占伦 刊期: 2018年第02期

  • 加味五虎汤联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎疗效及对T淋巴细胞亚群的影响

    目的:探讨加味五虎汤联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎的临床疗效,及对T淋巴细胞亚群的影响.方法:研究对象为2015年1月-2017年2月河南中医药大学第二附属医院收治的150例痰热闭肺型小儿支原体肺炎患儿,采取随机数字表将其分成两组,每组75例.两组患儿均给予阿奇霉素治疗,观察组联合给予加味五虎汤治疗,比较两组临床疗效以及治疗前后T淋巴细胞亚群、炎性细胞因子变化情况.结果:经14 d治疗后,观察组总有效率达98.67%,对照组总有效率为88.00%,观察组优于对照组(P<0.01).观察组患儿千湿哕音、咳嗽消失时间以及退热时间较对照组患儿均有缩短(P<0.01).经14 d治疗后,两组CD4+水平,CD4+/CD8+均有明显上升(P<0.01),与对照组治疗后比较,观察组CD4+水平,CD4+/CD8+升高更显著(P<0.01);观察组CD8+水平有显著下降(P<0.01),对照组无明显变化.两组患儿在治疗14 d后血清白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-8(IL-8),肿瘤坏死因子(TNF)-α水平相对于治疗前有明显降低,但与对照组治疗后比较,观察组上述血清炎性因子水平降低更显著(P<0.01).两组治疗过程中均未发生明显的药物不良反应,且观察组不良反应发生率显著低于对照组(P<0.01).结论:加味五虎汤联合阿奇霉素治疗痰热闭肺型小儿支原体肺炎能有效减轻患儿机体内炎症反应,提高免疫功能,疗效确切.

    作者:边红恩;陈团营;单海军 刊期: 2018年第02期

  • 蓝萼香茶菜二萜类物质对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型大鼠的干预作用

    目的:通过加热回流的方法提取蓝萼香茶菜中二萜类物质,测定其含量,研究二萜类物质对乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型大鼠的干预作用及其作用机制.方法:雌性SD大鼠随机分层分组为正常组、枸橼酸他莫昔芬片组、模型组、蓝萼组.除正常组外其他各组均用二甲基苯蒽(DMBA)结合慢性不可预见应激行为制备乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证模型,造模结束后,观察记录各组大鼠的生物表征变化及病理变化验证模型.蓝萼组给予二萜类提取物水溶液5 mg·kg-1灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水10 mL·kg-1灌胃,各组均连续灌胃30 d.30 d后,记录各组大鼠肉眼可见肿瘤的发生情况;腹腔取血,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清中雌二醇(E2),孕激素(P)水平;采集乳腺织织,用苏木素-伊红(HE)染色观察乳腺组织病理学变化,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF),趋化因子受体4(CXCR4) mRNA及蛋白表达水平.结果:提取得干燥品质量2.162 g,干燥品中二萜类质量分数为26.35%.与模型组比较,蓝萼组血清中E2,P水平明显降低(P<0.05),乳腺组织中VEGF,CXCR4蛋白及mRNA表达水平均明显降低(P<0.05).结论:蓝萼香茶菜二萜类物质有可能通过抑制VEGF,CXCR4蛋白及mRNA表达,抑制血管生成和趋化因子受体表达,调节大鼠激素水平,从而抑制大鼠乳腺癌癌前病变癌变的发生.

    作者:杨丽霞;邓卫芳;陈鸿;孙琳 刊期: 2018年第02期

  • 汝无糯鸡抗类风湿性关节炎的机制

    目的:研究彝族药汝无糯鸡对佐剂性关节炎(AA)大鼠模型的滑膜病变及滑膜细胞核转录因子-κB(NF-κB),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达的影响,探讨其抗类风湿性关节炎(RA)的作用机制.方法:60只SD大鼠随机分成空白组,模型组,尼美舒利组,汝无糯鸡高、中、低剂量组(按生药量计5.0,2.5,1.25 g·kg-1),采用完全弗氏佐剂建立AA大鼠模型,灌胃给药28 d后取样并处死大鼠,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察大鼠踝关节滑膜组织形态学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清白细胞介素(IL)-1β,IL-6,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO),前列腺素E2(PGE2)含量,免疫组化法检测大鼠滑膜组织中NF-κB,MMP-2,MMP-9的表达水平.结果:彝族药汝无糯鸡组明显减轻滑膜细胞的异常增殖,减少炎性细胞浸润,各剂量组不同程度降低AA大鼠血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,NO,PGE2的含量和升高IL-10的含量,降低关节滑膜组织NF-κB,MMP-2,MMP-9的蛋白含量(P <0.05,P<0.01).结论:彝族药汝无糯鸡治疗RA的作用机制可能是通过下调AA大鼠滑膜组织中NF-κB,MMP-2,MMP-9的蛋白表达,抑制炎性细胞因子生成,从而加速细胞凋亡,改善滑膜病变.

    作者:曾肆;谭谦;童妍 刊期: 2018年第02期

  • 四君子汤加味对肺癌化疗骨髓抑制的作用机制

    目的:探讨四君子汤加味对肺癌化疗骨髓抑制气阴两虚证的疗效及对血清中粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平的影响.方法:将中晚期肺癌患者104例患者,参照数字表法随机分为对照组和观察组各52例.对照组采用化疗方案(TP).观察组在对照组治疗的基础上给予四君子汤加味,化疗第1天开始内服,2次/d,化疗后继续服用1周.比较两组骨髓抑制程度、白细胞减少、中医症状积分及近期临床疗效.测定两组患者外周血T细胞亚群CD3+,CD4+及CD8+水平变化.记录两组患者重组人粒细胞刺激因子注射液(rhG-CSF)使用量;检测两组患者血清中GM-CSF和G-CSF水平.结果:治疗后1周,观察组中性粒细胞、血红蛋白、血小板及白细胞数量均显著高于对照组(P<0.01).观察组的中性粒细胞和白细胞减少发生率均明显低于对照组(P<0.05);治疗后1周,观察组白细胞减少、中医症状积分均明显低于对照组(P<0.01);观察组的近期总有效率为86.27%,显著高于对照组66% (P< 0.05).观察组患者治疗后1周CD3+,CD4+均显著高于对照组,CD8+低于对照组(P<0.01).观察组rhG-CSF使用量明显少于对照组.观察组治疗后1周血清中GM-CSF和G-CSF水平均明显高于对照组(P<0.01).结论:四君子汤加味辅助用于中晚期肺癌化疗气阴两虚证患者,能改善骨髓抑制程度,降低骨髓抑制发生率,提高临床疗效,提高免疫功能和血清中GM-CSF和G-CSF水平可能是其疗效途径之一.

    作者:陈皎皎;胡陵静;张国铎;郭婷婷;何苗;白平 刊期: 2018年第02期

  • 黄芪甲苷联合羟基红花黄色素A对小鼠心肌梗死的保护作用

    目的:观察黄芪甲苷联合羟基红花黄色素A预处理对心肌梗死小鼠心梗面积、心肌细胞凋亡及炎症因子表达的影响.方法:50只(SPF级)C57小鼠雌雄各半,随机分为假手术组(Sham),心肌梗死模型组(MI),黄芪甲苷预处理组(MI+AsⅣ,3.5 mg·kg-1),羟基红花黄色素A预处理组(MI+HSYA,10 mg·kg-1),黄芪甲苷+羟基红花黄色素A联合预处理组(MI +AsⅣ+HSYA,3.5 mg·kg-1+ 10 mg·kg-1).造模前连续腹腔注射7d,每天1次;结扎左冠状动脉前降支建立小鼠心肌梗死模型,用伊文思蓝-TTC双染色方法区分心肌梗死后心肌的梗死区、缺血危险区(AAR)和左心室总面积(LV);ImageJ软件计算心肌梗死面积,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌细胞中B细胞淋巴癌/白血病-2基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved-Caspase-3)的表达水平,酶联免疫吸附法(ELASA)检测血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量.结果:与模型组相比,黄芪甲苷预处理组、羟基红花黄色素A预处理组及联合预处理组均可显著减小小鼠心肌梗死面积,且联合预处理组效果优于单药预处理组(P <0.05,P<0.01);与假手术组相比,模型组的缺血面积和梗死面积增大,单独给药组与联合给药组的缺血面积及梗死面积均减小(P<0.05,P<0.01);与模型组与假手术相比,黄芪甲苷联合羟基红花黄色素A可上调心肌细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,下调促凋亡蛋白cleaved-Caspase-3和Bax的表达;黄芪甲苷与羟基红花黄色素A联合可降低心肌梗死小鼠血清中IL-6,TNF-α的含量(P<0.05,P<0.01).结论:黄芪甲苷联合羟基红花黄色素A可减小小鼠心肌梗死面积,抑制心肌梗死后的心肌细胞凋亡及炎症反应,发挥保护心肌损伤的作用.

    作者:苏宁;卢芬萍;朱明明;征宗梅;申毓军;刘亭宇;施洪飞 刊期: 2018年第02期

  • 基于ITS2序列的中药材苍术种苗DNA条形码鉴定

    目的:建立基于DNA条形码技术的中药材苍术种苗鉴定方法.方法:收集中药材苍术及其易混品原植物样品28份,构建苍术种苗鉴定参考核糖体内部转录间隔区2(ITS2)条形码数据库.从河北、山东、山西、内蒙古、辽宁及湖北等苍术主产地收集苍术种苗52份.通过提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增,双向测序获得其ITS2条形码序列.应用PUAP 4.0软件计算种内、种间遗传距离,利用MEGA 7.0软件构建邻接树,对中药材苍术种苗进行DNA条形码鉴定.结果:中药材苍术及其易混品原植物ITS2条形码序列具有稳定的序列差异,邻接树呈现单系性,可以明显区分苍术及其易混品;基于标准参考数据库,42份苍术种苗为朝鲜苍术(80.8%),7份苍术种苗为苍术(13.5%),3份苍术种苗为白术(5.7%).结论:基于ITS2序列可以准确区分中药材苍术及其混伪品种苗.苍术种苗基原物种鉴定结果以朝鲜苍术为主,提示苍术临床用药存在潜在安全风险.

    作者:刘金欣;李耿;陈彩霞;魏妙洁;王燕;赵春颖;石林春 刊期: 2018年第02期

  • 基于质量源于设计理念辨识影响三叶片抗张强度的颗粒关键质量属性与范围

    目的:以改变流化床工艺条件制备的9批三叶片颗粒为研究对象,抗张强度为产品主要质量属性,辨识颗粒粉体学性质中影响抗张强度的关键质量属性(CQA),并确立设计空间(design space,DS).方法:采用正交试验制备不同性质的三叶片颗粒,测定颗粒的粉体学性质.采用正交偏小二乘法(OPLS)建立颗粒粉体学性质与抗张强度间关系模型.根据OPLS提取综合变量的特性,找出对抗张强度解释作用强的自变量,再绘制抗张强度与自变量的等高线图,求得设计空间.结果:确定关键质量属性为中值粒径(D50)和颗粒孔隙率(占).建立D50,占与抗张强度间的关系模型,在抗张强度范围固定的情况下,找到合适的设计空间,75.7%<占<78.2%,0.390 mm<D50<0.582 mm.结论:建立的OPLS可明确各因素对抗张强度的影响程度大小,拟合效果良好.设计空间范围明确,可为确立三叶片流化床制粒的工艺参数提供实验依据.

    作者:周浩;王亚静;田倩瑜;张哲;石惠姝;王亚楠;李金玲 刊期: 2018年第02期

  • 毛梗豨莶草化学成分研究Ⅱ

    目的:本课题组前期对自建的江西100种中草药提取物组分库样品进行活性筛选时,发现毛梗豨莶草Siegesbeckia glabrescens的二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位具有显著的抑制细胞程序性坏死的生理活性.为明确毛梗豨莶草的活性组分,本课题组对毛梗豨莶草二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位进行系统化学成分分离,以期寻找具有抑制细胞程序性坏死的目标化合物.方法:采用正相硅胶柱色谱(二氯甲烷-甲醇20∶1~0∶1),反相ODS柱色谱(30% ~ 100%甲醇),LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱、重结晶等方法对毛梗豨莶草二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位进行分离和纯化,根据理化性质及1H-NMR,13C-NMR波谱数据进行化合物结构鉴定.结果:从毛梗豨莶草中分离并纯化出9个化合物,分别鉴定为2-methoxy-4-(2-propen-1-yl) penyl-6-acetate-β-D-glucopyranoside(1),苄醇β-D-吡喃葡萄糖苷(2),香豆素(3),棕榈酸(4),咖啡酸乙酯(5),反式对羟基肉桂酸(6),β-谷甾醇(7),β-胡萝卜苷(8),豆甾醇(9).结论:化合物1~6为首次从该植物中分离得到.

    作者:朱伶俐;徐丽;吴华强;周至明;刘峰;曾令峰;徐骏伟;刘华 刊期: 2018年第02期

  • 基本形式化本体的研究进展

    通过介绍基本形式化本体(BFO),给领域本体专家提供通用的顶层结构,有助于各领域专家创建的术语具有更好的互联互通性.通过文献综述的方法,在简要介绍BFO及其他顶层本体的基础上,对目前基于BFO构建的领域本体进行精炼概述,并以生物医学本体和通用医学本体为例详细阐述.目前基于BFO构建的领域本体达到227个,其中疾病相关本体25个,细胞相关本体14个,解剖相关本体7个,蛋白质相关本体7个.BFO已经在包括生物医学领域在内的诸多范围内得到了较为广泛的应用,在领域本体的构建中引入BFO,不但可以提升数据的质量,减少冗余的工作,而且为领域本体的构建提供了框架和基础,为未来的交互和共享提供了可能.

    作者:朱玲;董燕;杨峰 刊期: 2018年第02期

  • 复方血脂宁中4种药材对二苯乙烯苷稳定性的影响

    目的:考察复方血脂宁中4种药材提取液对二苯乙烯苷稳定性的影响,探究该复方的配伍规律.方法:采用UPLC考察不同条件下二苯乙烯苷单体及其在复方各药材提取液中含量随时间的变化规律,流动相甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ~2 min,10% ~25%A;2~9 min,25%~35%A;9~12 min,35% ~40%A;12~40 min,40% ~ 90% A),流速0.2 mL·min-,柱温45℃,检测波长280 nm.利用化学反应动力学方法计算二苯乙烯苷在不同环境下的降解反应动力学参数,表征其半衰期(t1/2)和降解活化能.结果:二苯乙烯苷单体及其在不同药材提取液中的降解均遵循一级反应动力学规律,在pH8.3条件下,二苯乙烯苷单体的降解速率常数(K)0.037 5 h-1,t1/2=18.48 h,该成分在山楂提取液中的K=0.0123 h-1,t1/2=56.35 h,其他3种药材提取液也在不同条件下表现出对二苯乙烯苷的促稳作用.结论:复方血脂宁中药材配伍可不同程度地提高二苯乙烯苷的稳定性,其中以山楂效果为显著,从稳定性角度探究了中药复方配伍的合理性.

    作者:李超;任晓亮;王萌;孙立丽;陈林 刊期: 2018年第02期

  • HS-SPME-GC-MS测定洋甘菊不同部位挥发性成分

    目的:分析比较洋甘菊不同部位挥发性成分.方法:采用顶空固相微萃取法(HS-SPME),通过单因素考察依次筛选固相微萃取纤维头、样品量、萃取温度、萃取时间、解吸附时间,得到佳萃取条件.以该条件萃取洋甘菊不同部位挥发性成分,结合气相色谱-质谱联用法(GC-MS)测定其化学成分,并采用面积归一化法确定各成分的相对含量.结果:以7种主要挥发性成分为指标考察得到了佳萃取条件,即固相微萃取纤维头为PDMS/DVB型,样品量0.5g,萃取温度80℃,萃取时间10 min,解吸附时间1 min.从洋甘菊中鉴定出挥发性成分66个,全草、花、根、茎、叶中分别鉴定出挥发性成分40,31,27,29,35个,分别占挥发性成分总峰面积的84.58%,90.27%,82.41%,87.36%,82.10%.结论:洋甘菊不同部位挥发性成分含量(以总峰面积计)由高到低依次为叶>全草>花>茎>根;不同部位含共有成分14个,花与全草含共有成分25种,分别占花与全草中已鉴定成分总含量的98%和88%.实验结果为洋甘菊以全草入药提供了化学物质依据.

    作者:赵一帆;张东;杨立新;王坤;马悦;杨岚 刊期: 2018年第02期

  • 清肺口服液通过ERK1/2通路调控RSV所致呼吸道炎症损伤的机制

    目的:通过研究清肺口服液对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染后气道上皮细胞胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK1/2)磷酸化蛋白及相关炎症因子表达的影响,探讨清肺口服液抗RSV感染及其继发炎症损伤的调节机制.方法:RSV体外感染人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,16-HBE)建立气道上皮炎症损伤模型,设置空白组,模型组(RSV),利巴韦林组(利巴韦林),清肺口服液高、中、低质量浓度组,共6组.其中空白组给予含2% FBS的RPIM 1640培养基进行培养,其余各组在空白组的基础上造模,模型组加入等量RSV(MOI=1),利巴韦林组加入等量利巴韦林注射液(0.2 mg·L-1),清肺口服液组给予清肺口服液高、中、低质量浓度(200,100,50 mg·L-1)进行干预.应用噻唑蓝(tetrazolium salt eolorimetry,MTT)比色法检测清肺口服液对RSV感染16-HBE的毒性作用,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测清肺口服液对细胞中RSV复制的影响,并用蛋白免疫印迹法(Western blot)检验ERK1/2信号通路相关蛋白磷酸化表达变化,同时用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞上清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)水平.结果:与空白组比较,模型组RSV大量增殖,16-HBE出现典型的炎症损伤表现,ERK1/2磷酸化蛋白水平显著提高(P<0.01),同时细胞上清中释放大量的炎症因子IL-6,IL-8(P<0.01).加入清肺口服液或利巴韦林后,16-HBE中的RSV复制水平显著降低(P<0.01),且清肺口服液(200,100 mg·L-1)可显著下调ERK1/2磷酸化蛋白的表达(P<0.01),并显著降低细胞上清中炎症因子IL-6,IL-8的表达水平(P<0.01).结论:清肺口服液能够抑制RSV病毒复制并减轻RSV感染所致的气道炎症损伤,其机制可能与下调ERK1/2磷酸化蛋白水平及降低气道炎症因子的表达有关.

    作者:邹亚;郭盛;景晓平;何丽 刊期: 2018年第02期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会