学术投稿

橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响

杨双;徐继璞

关键词:橄榄苦苷, 2型糖尿病, 胰岛素抵抗, HepG2肝细胞, 胰岛素受体, 胰岛素受体底物-1, 葡萄糖转运蛋白-2
摘要:目的:观察橄榄苦苷(oleuropein,OL)对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响.方法:常规复苏细胞,于10% FBS+ 1%青-链霉素的DMEM(1 g·L-1葡萄糖)培养基中,37℃5% CO2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用;利用1×10-6mol· L-1胰岛素溶液刺激HepG2肝细胞36 h后建立肝细胞胰岛素抵抗模型,分为模型组,OL组(50 μmol·L-),另设正常HepG2肝细胞为正常组,每组设6个复孔;对数生长期细胞,饥饿培养24 h后,诱导建立胰岛素抵抗模型,进行药物干预36 h后,以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测OL对细胞活性的影响;OL对胰岛素抵抗HepG2肝细胞干预后,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肝细胞胰岛素受体(InsR),胰岛素受体底物-1(IRS-1),葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)mRNA和蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性明显降低(P<0.05),胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,OL干预后胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性显著升高(P<0.01);胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显升高(P <0.05,P<0.01).结论:OL能够增加胰岛素抵抗肝细胞活性,上调肝细胞胰岛素信号通路中InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 基于脾主运化水湿理论探讨慢性心衰的发病机制

    随人口老龄化及城镇化进程的加速,以及生活习惯和饮食结构的改变,慢性心衰的发病率呈逐年上升的趋势,因其发病率高、预后差、病死率高,已成为重大公共卫生问题,因此,探讨慢性心衰的发病及论治具有重要的意义.慢性心衰属于中医学“心痹”“心胀”“心水”等范畴,其病性当属本虚标实、虚实夹杂之证,本虚为阳虚、气虚,标实乃血瘀、痰饮、水湿.“五脏皆致心衰,非独心也”,肺、肝、脾、肾之病变均可导致慢性心衰的发病;其中,心为脾之母,脾为心之子,脾与心衰的发生密切相关.本文旨在探析慢性心衰的病因病机与脾主运化水湿的关系.在发病因素方面,从五大病因探讨慢性心衰的发病,认为外邪侵袭,久客经络,脾虚损阳,痰饮内生,发为心衰;饮食不节,损伤脾胃,脾不运湿,心脉不畅,发为心衰;情志失调,损伤脾胃,化血无力,心失所养,发为心衰;劳倦内伤,耗伤脾胃,脾虚湿停,心脉痹阻,发为心衰;失治误治,耗伤脾阳,痰湿积聚,上凌于心,发为心衰.在致病机理环节,从“气”“水”“血”三个方面探讨慢性心衰的发病,从“气”,认为脾气虚弱,气血匮乏,心失所养,气阳两虚,发为心衰;从“水”,认为脾失健运,化生痰饮,困遏心阳,水饮上犯,发为心衰;从“血”,认为脾气不足,化湿无力,血行不畅,血瘀于脉,发为心衰.为临床从脾从痰湿论治慢性心衰提供重要的辨证思路及理论依据.

    作者:陈莹;刘悦;张艳 刊期: 2018年第20期

  • 柴胡配伍白芍治疗PMDD肝气郁证的研究进展

    柴胡和白芍是我国传统医学在治疗内科疾病时常用的两位中药,二药前者功为解表退热、疏肝解郁、升举阳气,后者长于养血敛阴、柔肝止痛、平抑肝阳.两药配伍使用的历史早可以追溯到东汉张仲景所作《伤寒论》中“四逆散”一方,方以柴胡入肝胆经,升发阳气疏肝解郁为君药,又以白芍敛阴养血柔肝为臣.二药配伍以其调肝作用之长,在我国已有数千年的应用历史.经前烦躁障碍症(premenstrual dysphoric disorder,PMDD)是经前期综合征(PMS)的严重类型,肝气郁证是其主要证型之一,该证以情绪低落,抑郁悲伤为主要特点,患者多在黄体月经周期过程中出现,月经后几天消失或减轻,该病发病率在当前社会节奏加快,生活压力增加的背景下呈持续上升的状态,严重影响患者的工作和生活.目前针对PMDD发病与γ-氨基丁酸(y-aminobutyric acid,GABA),5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)等微观机制关系的研究取得了较多成果,应用中医药治疗该病证目前也已有较多研究.以柴胡配伍白芍为主要组分的方剂在治疗PMDD肝气郁证方面疗效显著,但缺少相关综述.本文以柴胡、白芍和PMDD肝气郁证为关键词进行检索,通过对相关国内外文献进行归纳整理,并从历史沿革、药理作用机制分析以及临床应用等角度对柴胡配伍白芍治疗PMDD肝气郁证进行综述,以期在充分体现两药配伍精髓的同时更好的指导临床应用及新药的研发.

    作者:牟翔宇;郭英慧;孙文君;高明周;蔡亚伟;乔明琦 刊期: 2018年第20期

  • 养阴舒肝颗粒对VCD诱导卵巢功能下降大鼠Bcl-2,Bax及Caspase-3蛋白表达的影响

    目的:探讨养阴舒肝颗粒对卵巢功能下降模型大鼠卵巢功能及;B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的影响.方法:选取动情周期规则的雌性SD大鼠,取10只作为正常组,其余大鼠均采用160 mg·kg-1去氧乙烯基环己烯(VCD)腹腔注射诱导卵巢功能下降模型,取造模成功的56只大鼠按体质量随机分为模型组,养阴舒肝颗粒低(2.1g·kg-1),中(4.2 g·kg-1),高剂量组(8.4 g·kg-1)和坤泰胶囊组,每组11只(模型组12只).采用养阴舒肝颗粒和坤泰胶囊进行灌胃给药,干预治疗4周后进行卵巢称质量,计算各级卵泡的数目,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清性激素水平卵泡刺激素(FSH),雌二醇(E2),抗缪勒氏管激素(AMH),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达量.结果:与正常组比较,模型组大鼠的卵巢质量和卵巢指数下降(P<0.01),闭锁卵泡数目增多(P<0.01),FSH水平升高(P<0.01),E2和AMH水平下降(P<0.05),卵巢组织Bcl-2蛋白的表达减少(P<0.01),Bax,Caspase-3蛋白的表达(P<0.01);与模型组比较,养阴舒肝颗粒可以增加模型大鼠的双侧卵巢质量(P<0.05,P<0.01);养阴舒肝颗粒和坤泰胶囊可以增加卵巢指数(P<0.05,P<0.01);养阴舒肝颗粒可以减少闭锁卵泡的数目(P<0.05);养阴舒肝颗粒和坤泰胶囊均可以降低FSH水平(P<0.05),升高E2和AMH水平(P<0.05),增加卵巢组织Bcl-2的表达(P<0.01),同时抑制Bax,Caspase-3的表达(P<0.01).结论:养阴舒肝颗粒可以提高卵巢功能下降模型大鼠的卵巢功能,其机制可能与抗细胞凋亡有关.

    作者:王吉菊;刘建;黄旭春;曾玉燕;王小云 刊期: 2018年第20期

  • 自噬及中医药调控自噬在治疗和防治疾病中的研究进展

    自噬是广泛存在于真核细胞中的生命现象,维持细胞内的稳态及胞内成分的不断更新,在保持细胞正常的生理状态过程中起着至关重要的调节作用.其是一条依赖溶酶体降解的途径,它具有清除细胞内蛋白质聚集体、损伤的细胞器,维持细胞内稳态的作用,同时还参与细胞很多生理和病理过程,尤其与肿瘤和神经退行性疾病的发生发展密切相关.近年来,中药单体通过调控自噬的某些信号通路,影响和抑制肿瘤的发生发展的作用机制日渐明了;此外,中医药在防治老年神经退行性疾病理论知识方面也取得了很多突破;本文介绍了与自噬密切相关的信号通路如雷帕霉素靶向蛋白信号通路(mTOR),磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路,活性氧(ROS)信号通路,核转录因子-κB(NF-κB)信号通路,另外还从中药单体调节自噬机制方面,概述中药单体在肿瘤和神经退行性疾病治疗中的应用及其分子机制.诸多研究表明,中药单体通过激活自噬途径,调节自噬活性,在肿瘤治疗和防治老年病如帕金森、阿尔兹海默症、亨廷顿等疾病方面有很好的改善作用,研究中药单体对肿瘤和神经退行性疾病的防治是崭新的思路和方法,以期为中医药研究工作者在探索中医药调控自噬的作用靶点研究中提供基础理论支撑,发现更多的中药及单体化合物通过调节自噬用于治疗肿瘤、神经退行性疾病等多种疾病.

    作者:李欢;苗明三 刊期: 2018年第20期

  • 款冬花散治疗支气管扩张症急性加重期痰热郁肺证的临床观察

    目的:观察款冬花散治疗支气管扩张症急性加重期痰热郁肺证患者的临床疗效.方法:将符合条件的100例患者采用随机数字表法分成治疗组、对照组各50例.治疗组患者采用常规西医治疗联合服用款冬花散,对照组患者单纯采用常规西医治疗,两组疗程均为7d,比较两组患者的临床症状评分、中医证候疗效、血炎症指标水平、血气分析及不良反应.结果:与本组治疗前比较,两组患者治疗后的临床症状评分(咳嗽、痰量、痰色、痰质、口渴、便干、尿黄)均显著降低,且治疗组显著低于对照组(P<0.01);治疗组患者总有效率为92%,对照组为80%,治疗组总有效率高于对照组(P<0.01);与本组治疗前比较,治疗后两组患者血炎症指标水平(白细胞计数、中性粒细胞数、粒淋比、血沉、快速C反应蛋白及降钙素原)均明显降低,且治疗组显著低于对照组(P<0.01);与本组治疗前比较,治疗后两组患者在血气分析血氧分压(PaO2),血二氧化碳分压(PaCO2)方面均有所改善,且治疗组显著优于对照组(P<0.01).在试验过程中,治疗组中有2例患者出现轻微腹泻,经对证处理后症状好转,不影响后续的治疗.结论:在常规西医治疗基础上,加用款冬花散能明显改善支气管扩张症急性加重期痰热郁肺证患者的临床症状,提高中医证候疗效,减少血炎症指标水平,改善血气分析指标,疗效更好,值得在临床上推广使用.

    作者:钟云青;许光兰;王秀峰;陈平;欧阳暾 刊期: 2018年第20期

  • 基于网络药理学构建新型中药复方降压抗纤方抗高血压心肌纤维化的作用

    目的:结合网络药理学和传统中医理论构建治疗高血压心肌纤维化的新型中药复方——降压抗纤方,并探讨其对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的治疗效果.方法:获取中药网络药理学数据库中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)中的中药、成分和靶标等信息,运用网络分析软件Cytoscape从中筛选出能作用于高血压心肌纤维化疾病靶标的中药,再根据中医辨证理论和组方原则进一步筛选并构建复方.通过SHR动物模型实验观察降压抗纤方抗心机纤维化的作用,以5只正常血压大鼠(normal blood pressure rat,WKY)为空白组,30只12周龄的SHR大鼠随机分为5组,分别为高血压模型组(SHR),降压抗纤方低剂量组(KXL,2 g·kg-1),降压抗纤方中剂量组(KXM,4 g·kg-1),降压抗纤方高剂量组(KXH,8 g·kg-1)和卡托普利阳性药组(CAP,13.5 mg·kg-1),每组5只.连续灌胃12周后停药,取材前禁食12 h.运用大鼠无创尾压仪和彩色多普勒超声诊断仪检测血压及心脏功能,运用组织学染色和相应检测试剂盒观察心脏组织形态学改变及血清生化指标.结果:确认降压抗纤方组成成分为丹参、三七、黄芪、鸡血藤和化橘红.动物实验结果表明,与正常组比较,模型组的血压明显升高(P<0.01),心脏功能指标下降(P<0.01),同时血清中心肌酶谱的水平升高(P <0.05,P<0.01),炎症因子水平升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组能有效逆转上述指标(P<0.05,P<0.01).结论:运用网络药理学和传统中医理论所构建的新型复方降压抗纤方具有抗高血压心肌纤维化的作用,并对肝肾无毒副作用.

    作者:陈凯;刘馨;管怡晴;庄宇鑫;党文振;吕琳;张国华 刊期: 2018年第20期

  • 橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响

    目的:观察橄榄苦苷(oleuropein,OL)对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响.方法:常规复苏细胞,于10% FBS+ 1%青-链霉素的DMEM(1 g·L-1葡萄糖)培养基中,37℃5% CO2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用;利用1×10-6mol· L-1胰岛素溶液刺激HepG2肝细胞36 h后建立肝细胞胰岛素抵抗模型,分为模型组,OL组(50 μmol·L-),另设正常HepG2肝细胞为正常组,每组设6个复孔;对数生长期细胞,饥饿培养24 h后,诱导建立胰岛素抵抗模型,进行药物干预36 h后,以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测OL对细胞活性的影响;OL对胰岛素抵抗HepG2肝细胞干预后,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肝细胞胰岛素受体(InsR),胰岛素受体底物-1(IRS-1),葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)mRNA和蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性明显降低(P<0.05),胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,OL干预后胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性显著升高(P<0.01);胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显升高(P <0.05,P<0.01).结论:OL能够增加胰岛素抵抗肝细胞活性,上调肝细胞胰岛素信号通路中InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一.

    作者:杨双;徐继璞 刊期: 2018年第20期

  • 卒中得生丸联合原络通经针法治疗卒中后认知障碍的临床分析

    目的:探讨卒中得生丸联合原络通经针法治疗卒中后认知障碍(PSCI)瘀阻脑络证的临床疗效及抗炎和抗氧化作用.方法:将114例患者以诊疗先后,按随机数字表法分为对照组和观察组各57例.两组患者均口服多奈哌齐片,10 mg/次,1次/d.对照组采用原络通经针法,1次/d,6次/周.观察组在对照组治疗的基础上给予卒中得生丸,10 g/次,3次/d,口服.两组疗程均为连续治疗4周.采用简易智力状态检查量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评价认知功能,进行治疗前后日常生活能力(ADL),神经功能缺损(NIHSS)和瘀阻脑络证评分;进行治疗前后听觉P300电位检测;检测治疗前后白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平.结果:经Ridit分析,观察组MMSE疗效和中医证候疗效均优于对照组(P<0.05);观察组患者MoCA和MMSE评分均高于对照组(P<0.01);观察组患者ADL高于对照组,NIHSS和瘀阻脑络证评分均低于对照组(P<0.01);观察组患者N2和P3潜伏期均短于对照组,波幅高于对照组(P<0.01);观察组患者血清IL-1β,IL-6,TNF-α和MDA水平均低于对照组,SOD水平高于对照组(P<0.01).结论:卒中得生丸联合原络通经针法能进一步改善PSCI瘀阻脑络证患者认识功能,减轻临床症状,提高生活自理能力,并具有抗炎和抗氧化损伤的作用.

    作者:张淼;武文鹏;夏昆鹏;祝鹏宇 刊期: 2018年第20期

  • 车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的肾保护作用及机制

    目的:观察车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的药效学指标及对肾组织半胱氨酸蛋白酶-1(cysteine-aspartic acid protease-1,Caspase-1),Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)和凋亡相关点样蛋白(fapoptosis-associated specklike protein,ASC)表达的影响,探讨车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的肾保护作用和初步机制.方法:60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,阳性药组(别嘌醇,50 mg·kg-1),车前子水煎液高、中、低剂量组(1.62,0.81,0.27 g·kg-1),除正常组外,其余各组采用腺嘌呤和酵母联用的方法制作痛风性肾病大鼠模型,给予车前子水煎液,观察肾脏特征;计算肾重指数;检测大鼠血清中尿酸(uric acid,UA),尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),肌酐(creatinine,SCr),丙氨酸氨基转移酶(cereal third transaminase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST),碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP);采用光镜观察肾脏病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western bolt)和免疫组化法(immunohistochemical methods)测定肾组织中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达量.结果:与模型组比较,别嘌醇组和车前子水煎液各剂量组的肾脏体积减小,别嘌醇组和车前子中剂量组肾重指数降低,车前子高剂量组肾重指数降低明显,别嘌醇组和车前子水煎液各剂量组血清UA,BUN,SCr,ALT,AST,ALP明显降低(P<0.05,P<0.01),肾组织病变程度均有一定减轻,其中车前子高、中剂量组好,别嘌醇组和车前子水煎液高剂量组中NLRP3,ASC和Caspase-1蛋白的表达明显降低(P <0.05,P<0.01),车前子水煎液中剂量组中NLRP3蛋白的表达降低(P<0.05).结论:车前子对痛风性肾病大鼠具有较好肾保护作用,可能与其下调肾组织中NLRP3,ASC和Caspase-1蛋白表达,抑制下游炎性细胞因子释放有关.

    作者:赵宏;柴桂芳;刘颖斐;李洋;肖洪彬;匡海学 刊期: 2018年第20期

  • 化香树果序乙醇提取物调控RAS/MAPK通路对鼻咽癌细胞的影响

    目的:研究化香树果序醇提物(ethanol extract of infructescence of Platycarya strobilacea,EPS)的对鼻咽癌CNE1,CNE2细胞的药理作用机制.方法:以鼻咽癌CNE1,CNE2细胞为研究对象,以EPS 0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L-1干预,设空白组,孵育24 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测EPS对CNE1,CNE2细胞活力的影响.用1.0 g·L-1 EPS处理CNE1,CNE2细胞24 h,倒置显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察细胞器的变化.流式细胞仪检测细胞凋亡程度,RNA高通量测序检测EPS处理后细胞中的差异基因.蛋白免疫印迹法检测HRas proto-oncogene(HRAS)蛋白细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和c-Fos proto-oncogene (c-Fos)蛋白表达水平.结果:与空白组比较,EPS能明显抑制CNE1,CNE2细胞的增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性.与空白组比较,EPS明显诱导CNE1,CNE2细胞质出现大量空泡,空泡相互融合,不断增大,后细胞膜破裂,透射电镜发现细胞核没有发生明显的变化,溶酶体空泡化明显,流式结果未发现明显凋亡,与细胞methuosis死亡特征一致.高通量测序结果显示与癌蛋白(RAS)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关,与空白组比较HRAS,ERK1/2,c-Fos蛋白表达降低,磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达升高(P<0.05).结论:EPS可通过调控RAS/MAPK信号通路诱导人鼻咽癌细胞CNE1,CNE2发生methuosis死亡,导致细胞相互融合,细胞内出现大量空泡.

    作者:刘金坤;应敏;敖利;涂维;蔡红兵 刊期: 2018年第20期

  • 丹红注射液治疗冠心病心绞痛研究中的问题与解决对策

    冠心病心绞痛是一种常见的多基因复杂疾病,血瘀证是其主要证候.在世界范围内冠心病是目前重要的死亡原因和疾病负担之一.尽管有诸多治疗方法和抗心绞痛药物出现,但一些患者仍然会经历心血管事件,而且由于症状频发所致生活质量受损的患者人数仍很高.在我国,中医药长期以来被广泛用于心血管疾病的临床治疗.随着中药制药技术的发展,越来越多的中药注射液被用于冠心病心绞痛的治疗.其中,丹红注射液是目前临床治疗冠心病心绞痛的有效药物.研究表明,丹红注射液辅助用于不同类型心绞痛,能减少心绞痛发作次数,缩短持续时间,减少心绞痛积分,提高心电图复查有效率和硝酸甘油片的用量等,且有较好的安全性.然而,当前丹红注射液治疗冠心病心绞痛的临床研究和药理机制研究中仍存在一些问题与不足.通过对研究现状进行分析发现,第一,多数临床研究方法学质量不高,缺乏良好的随机对照试验设计,仍需要严格设计的高质量临床试验来评价其有效性和安全性.第二,虽然研究表明,丹红注射液的药理机制可能涉及抗氧化、抗凝、抗炎、抗纤维化、抗血管增生、抗动脉硬化等,但丹红注射液治疗冠心病心绞痛的确切机制目前尚不清楚,还有待迸一步的研究.因此,本研究提出应用模块药理学的分析框架可为进一步研究丹红注射液治疗冠心病心绞痛的多靶点作用提供新方法和新思路.

    作者:陈寅萤;王忠;南景一;王阶 刊期: 2018年第20期

  • 补肾健脾活血方对去卵巢大鼠BMP2/Smad信号通路的影响

    目的:研究补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨形态发生蛋白2(BMP2)/Smad信号通路的影响.方法:72只6月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(24只),手术组(48只),双侧卵巢切除法造模,术后3个月两组各随机选取12只检测骨密度验证造模成功.手术组剩余的36只大鼠随机分为双侧卵巢切除模型组(OVX),补肾健脾活血方组(BSJPHX,给药剂量2.979 g·kg-1),阿仑膦酸钠维D3片(Ⅱ)组(ALN,给药剂量1.02 mg· kg-),假手术组,OVX组给与等体积生理盐水灌胃.12周后处死各组大鼠,双能X射线法检测大鼠全身骨密度,生物力学试验进行胫骨三点弯曲试验,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测BMP2,Smad1,Runt相关转录因子2(Runx2),骨保护素(OPG)基因的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BMP2,p-Smad1,Runx2,OPG蛋白的表达.结果:造模3个月后,与假手术组比较,OVX组大鼠骨密度明显降低,大载荷及刚度均降低,BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);给药3个月后,与OVX组比较,BSJPHX组,ALN组骨密度均明显增高,大载荷及刚度均增加,能显著提高BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平(P<0.05).结论:补肾健脾活血方既能通过调控BMP2/Smad通路的信号转导,又能上调OPG的表达,这可能是补肾健脾活血方防治绝经后骨质疏松症的机制之一.

    作者:柴爽;王吉利;黄佳纯;黄宏兴;万雷;刘少津;汪悦东;胡仕畅 刊期: 2018年第20期

  • 调脉饮及其拆方对快速心律失常大鼠心肌L型钙通道mRNA表达的影响

    目的:观察调脉饮全方及其拆方对快速性心律失常模型大鼠心电图及心室肌L型钙通道(L-type calcium channels,LTCC) α1c亚基mRNA表达的影响.方法:把60只Wistar大鼠随机分成6组,每组各10只,分别为模型组,调脉饮全方组(22 g·kg-1),凉血清热组(7 g·kg-1),行气通脉组(7.5 g·kg-1),益气养心组(7.5 g·kg-1)和西药组(胺碘酮,100 mg·kg-1).除模型组外,每组按相应剂量分别灌胃给药7d.采用乌头碱舌下静脉注射造模,分别记录室性早搏、室性心动过速和室颤及死亡出现的时间,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组心室肌组织LTCCα1c亚基mRNA和蛋白表达情况.结果:与模型组比较,全方组、凉血清热组、胺碘酮组大鼠出现室性早搏时间均有延迟,其中全方组、胺碘酮组大鼠出现室性早搏时间延迟明显(P <0.05,P<0.01);全方组、凉血清热组、胺碘酮组出现室性心动过速时间明显延迟(P<0.05);全方组、凉血清热组、胺碘酮组出现室颤时间明显延迟(P <0.05,P<0.01);全方组、凉血清热组、胺碘酮组出现死亡时间明显延迟(P<0.05,P<0.01).与模型组相比,全方组、凉血清热组、胺碘酮组大鼠心肌LTCCα1c亚基mRNA表达均有所降低,其中全方组和胺碘酮组与模型组相比有显著差异(P<0.05);与模型组比较,全方组、凉血清热组、胺碘酮组大鼠心肌LTCCα1c亚基蛋白表达均有所降低,有显著差异(P<0.01).结论:调脉饮全方及其中凉血清热药具有抗实验性快速心律失常的作用,作用机制可能与干预心肌组织LTCC mRNA的表达水平有关.

    作者:韩垚;秦田雨;刘红旭;孙文;戴梅;张大炜;魏执真 刊期: 2018年第20期

  • 金花茶中黄酮类活性成分的GC-MS分析

    目的:建立石墨烯-搅拌棒吸附萃取(SBSE)结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析金花茶中黄酮类活性成分并对总黄酮的相对含量进行测定.方法:自制稻草源活性炭制备石墨烯聚合物,实验中对影响SBSE的因素(萃取涂层选择、萃取温度和时间等)进行了优化,用GC-MS鉴定金花茶中黄酮类活性成分,在所得优化条件下采用峰面积归一化法对金花茶中总黄酮相对含量进行测定.结果:样品中黄酮类活性成分经鉴定有儿茶素,表没食子儿茶素(EGC),儿茶酚(C),槲皮素-7-O-葡萄糖苷,芦丁,异槲皮苷,花青素,槲皮素,山柰酚,儿茶素没食子酸酯(CG),儿茶素没食子酸酯(CG)等,经检测金花茶中总黄酮相对含量(主要为槲皮素和山柰酚)达到3.0%.同一样品经6次测定,以金花茶总黄酮的总峰面积值为考察指标,其RSD 1.0%.结论:建立的SBSE-GC-MS方法分离鉴定出24个成分,测定金花茶总黄酮相对含量重复性较好,适于金花茶黄酮类成分的分析检测,为金花茶黄酮类活性成分的进一步研究提供了理论参考.

    作者:梁香;程金生;陈信炎;吴凌凤 刊期: 2018年第20期

  • 白芷、没药单煎与合煎对欧前胡素含量及其镇痛作用的影响

    目的:比较白芷、没药单煎与合煎对欧前胡素含量及其镇痛作用的影响.方法:采用常规水煎工艺得到白芷单煎液、没药单煎液、白芷-没药合煎液.采用LC-MS测定不同提取液中欧前胡素的含量,乙腈-水(55∶45),流速0.3 min·mL-1,进样量5 μL,柱温35℃;电喷雾离子源(ESI),正离子扫描模式,单离子监测(SIM).小鼠分为空白组、阳性组(氨酚双氢可待因片组)和3种水煎液的低、中、高剂量组,阳性药给药剂量为0.24 g·kg-1·d-1,白芷单煎液将3,6,12 g·kg-·d-1,没药单煎液将1.5,3,6 g·kg-1·d-1,白芷-没药合煎液将4.5,9,18 g·kg-1·d-1设定为低、中、高给药剂量,分别灌胃给药7d后进行热板试验和扭体试验,记录舔足时间和扭体次数.结果:欧前胡素线性范围0.02 ~0.20 mg·L-1 (R2 =0.991 1),欧前胡素在白芷单煎液中转移率仅0.62%,在白芷-没药合煎液中转移率提高至2.00%.除了个别时间点外,热板试验中单煎液、合煎液各剂量组与空白组比较均有显著性差异(P <0.05,P<0.01).扭体试验中白芷单煎低、中剂量组,没药单煎高剂量组和白芷-没药合煎各剂量组与空白组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01).结论:白芷与没药合煎能促进白芷中欧前胡素的溶出.单煎液、合煎液各剂量组均能延长小鼠热板舔足时间,合煎液各剂量组均能延长扭体潜伏时间,合煎液高剂量组对小鼠的疼痛抑制率高.

    作者:王莉鑫;陈影;孔一鸣;闫惠捷;张倩;游云;张东;仝燕;孟凤仙;王锦玉 刊期: 2018年第20期

  • HPLC-MS鉴定塔中栽培肉苁蓉药材的17个成分

    目的:通过HPLC-MS对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉Cistanche deserticola药材60%甲醇提取物的色谱图进行鉴定.方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量10 μL.结果:在相同色谱条件下,通过与已分离得到的对照品的保留时间、相对分子质量以及碎片离子进行比较,对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉药材的16个色谱峰中的17个成分进行了准确的鉴定,分别确定为松柏苷,去甲紫丁香苷,紫丁香苷,松果菊苷,肉苁蓉苷A,类叶升麻苷(管花苷A),肉苁蓉苷B,异类叶升麻苷,2'-乙酰基肉苁蓉苷A,肉苁蓉苷C,异肉苁蓉苷C,2'-乙酰基类叶升麻苷,管花苷B,epimeridinoside A,肉苁蓉苷K,肉苁蓉苷J.结论:该研究方法适用于肉苁蓉60%甲醇提取物色谱峰的鉴定,为全面分析该药材的化学成分提供了一定的科学数据.

    作者:南泽东;任华忠;赵明波;姜勇;屠鹏飞 刊期: 2018年第20期

  • 补肾养血安胎汤治疗先兆流产合并甲状腺功能减退疗效及对妊娠激素水平、甲状腺功能的影响

    目的:探讨补肾养血安胎汤治疗肾阳虚型先兆流产合并甲状腺功能减退疗效及对妊娠激素水平、甲状腺功能的影响.方法:选择2016年2月至2017年6月在河北省中医院接受治疗的肾阳虚型先兆流产合并甲状腺功能减退患者144例为研究对象,按入院顺序对其做编号,并利用随机数字表分成观察组和对照组,各72例.对照组给予优甲乐治疗,观察组在此基础上加用补肾养血安胎汤治疗.治疗2周后对两组疗效进行评估,并比较治疗前后两组妊娠激素水平及甲状腺功能相关指标等变化情况.结果:治疗2周后,观察组总有效率为90.28% (65/72),与对照组的69.44%(50/72)比较明显上升(P<0.05).观察组治疗后总三碘甲状腺激素(TT3),总四碘甲状腺激素(TT4)水平均明显高于治疗前(P<0.05),游离三碘甲状腺激素(FT3),促甲状腺激素(TSH)水平均明显低于治疗前(P<0.05);与本组治疗前比较,对照组治疗后游离四碘甲状腺激素(FT4)水平明显升高(P<0.05),FT3,TSH水平均明显下降(P<0.05);且与对照组治疗后对比,观察组同期TT3水平明显升高(P<0.05),TSH水平明显降低(P<0.05).与本组治疗前比较,治疗后两组血清雌二醇(E2),孕酮(P),人绒毛膜促性腺激素(HCG)水平均明显升高(P<0.05);观察组治疗后E2,P,HCG水平均明显高于对照组(P<0.05).与本组治疗前对比,两组治疗后血清白细胞介素-2(IL-2)水平明显降低(P<0.05),白细胞介素-10(IL-10)水平明显上升(P<0.05);且与对照组治疗后比较,观察组血清IL-10水平更高(P<0.05).结论:对于肾阳虚型先兆流产合并甲状腺功能减退患者采用补肾养血安胎汤治疗能有效促进临床症状的缓解,并能有效改善妊娠激素水平,促进甲状腺功能的恢复,疗效确切.

    作者:寇印巧;李健飞;王丽珍 刊期: 2018年第20期

  • 多指标综合评分法优化稳心汤提取工艺

    目的:采用多指标综合评分法确定临床经验方稳心汤的佳提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验设计法对稳心汤进行提取工艺优化,采用多指标综合评分法确定优提取工艺.对姜黄、肉桂、莪术、细辛考察加水量、浸泡时间、提取时间对挥发油得率的影响;对党参、川芎、全蝎进行乙醇正交试验设计,以党参炔苷和干膏率进行综合评分;对赤芍、大黄、山楂、麦冬、甘草,以及经乙醇提取党参、川芎、全蝎残留的药渣进行水提醇沉工艺正交试验优化,以芍药苷和干膏率的综合评分为考察指标,优选出佳工艺参数,并进行验证.结果:确定了稳心汤的提取工艺,其中姜黄、肉桂、莪术、细辛提取挥发油的佳提取工艺为加入8倍量水,浸泡6h,蒸馏5h,挥发油的得率较高;对党参、川芎、全蝎加入乙醇提取,佳工艺为加入10倍70%乙醇,提取1.5h,提取2次;对乙醇提取药材残渣及赤芍、大黄、山楂、麦冬、甘草等进行水提醇沉,水提取工艺为加入8倍水,提取1.0h,提取2次,醇沉工艺为药液质量浓度1.12 g·mL-1,加入95%乙醇使含醇量达到60%,静止醇沉36 h.结论:通过多指标综合评分法优化的稳心汤提取工艺稳定可靠,适合工业化生产,为临床应用和新药的研发提供参考.

    作者:陈恒文;田盼盼;何轩辉;马涛;李军 刊期: 2018年第20期

  • 栀子苷对正常和黄疸模型大鼠的亚急性肝、肾毒性

    目的:开展栀子苷对正常及黄疸模型大鼠的亚急性肝、肾毒性对比研究,为栀子临床安全用药提供科学依据.方法:SD大鼠80只,随机分为8组,空白组、栀子苷低、中、高剂量(60,180,360 mg·kg-1)组,黄疸模型组和α-萘异硫氰酸酯(ANIT)+栀子苷低、中、高剂量(60,180,360 mg·kg-1)组.黄疸模型采用ANIT造模,24 h后灌胃(ig)栀子苷.分别于给药后第7,14天,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr)活性,取大鼠肝、肾组织进行病理检测.结果:与空白组比较,第7,14天栀子苷中、高剂量组TBIL,SCr明显升高(P<0.05,P<0.01);黄疸模型组大鼠ALT,AST,TBIL均明显升高(P <0.05,P<0.01).与黄疸模型组比,第7,14天ANIT+栀子苷低、中剂量组AST显著升高(P<0.01),ANIT+栀子苷中剂量组TBIL,BUN明显升高(P<0.05).ANIT+栀子苷高剂量组ig7d后陆续全部死亡.病理切片显示,栀子苷给药后肝肾组织出现极轻度炎细胞浸润和肾小管嗜碱性变;模型组和ANIT+栀子苷各剂量组动物均出现胆管上皮细胞增生,纤维组织增生,并且有随剂量增大病变程度加重的趋势.结论:栀子苷剂量超过180 mg·kg-1(约折合栀子生药量55 g·d-1)连续ig给药14 d可对正常及黄疸模型大鼠造成肝、肾损伤;且剂量超过60 mg· kg-1时即会加重黄疸模型大鼠已有的肝损伤,随剂量增加病变程度加重.

    作者:张海虹;卫璐戈;李会芳 刊期: 2018年第20期

  • 外源激素处理对远志种子萌发及幼苗生长的影响

    目的:研究不同浓度吲哚乙酸(IAA),吲哚丁酸(IBA),6-苄氨基嘌呤(6-BA)和赤霉素(GA3)4种外源激素对药用植物远志种子萌发和幼苗生长的影响.方法:采用不同浓度的4种外源激素对远志种子进行适度浸泡处理,以蒸馏水为对照,测定其发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,发芽结束后测量株高、根长、鲜重及干重.结果:不同浓度GA3溶液处理与蒸馏水对照组相比对远志种子的萌发及幼苗生长均具有促进作用;10,20,30 mg·L-IAA,20,30 mg·L-IBA和20,30 mg·L-16-BA对远志种子的萌发有不同程度的促进作用;当IAA,IBA,6-BA≥40 mg·L-1及IBA,6-BA≤10 mg·L-1时,对远志种子的发芽率有不同程度的抑制作用;对外源激素处理后的远志种子幼苗生长状况中,IAA,IBA和6-BA表现出不同程度的抑制.总体效果为GA3>IAA> IBA> 6-BA.其中以150 mg·L-1GA3处理效果好,发芽率、活力指数分别是对照组的1.17倍和2.13倍,并对种子的幼苗根伸长、幼苗鲜重增加等早期生长有明显影响,种子发芽整齐,出苗一致.结论:通过研究不同外源激素浸种对远志种子萌发及幼苗生长的影响,筛选出对其有促进作用的外源激素,可为远志的种苗培育、人工栽培提供一定的理论基础及数据参考.

    作者:黄涛;安衍茹;彭亮;赵停;孙涛;刘阿萍;胡本祥 刊期: 2018年第20期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会