孙慧;王倩;张之芬;武焕玲;田文君;刘斌
目的 探讨老年性痴呆( Alzheimer disease,AD)转基因模型鼠Tg(APPswe PSEN1 dE9)85Dbo的优化繁育和基因分型方法,筛选出适合AD研究的稳定转基因动物.方法 3种不同的繁殖配伍分组(组1,+/+♂×-/-♀;组2,+/+♀×-/-♂;组3,+/+♀×+/+♂)研究子代鼠的存活率及PS1转基因阳性率;提取子二代鼠尾基因组DNA并鉴定其质量,用双重PCR方法扩增PS1转基因片段,琼脂糖凝胶电泳观察结果;PCR产物测序证实其基因序列.结果 改良后的方法全程耗时不到8h,提取的基因组DNA在23 kb以上,完整性好,浓度为65~175 ng/μl.共繁殖子二代小鼠27窝计222只,存活206只,配伍组1子代存活率94.29%(99/105);配伍组2子代存活率91.67%(66/72);配伍组3子代存活率91.11% (41/45),3组间存活率差异无统计学意义(P =0.423>0.05).3种配伍产生的子代鼠转基因阳性率都基本符合孟德尔遗传规律,转基因阳性率差异有统计学意义(P=0.028 <0.05).配伍组1子代鼠雄鼠阳性率65.1% (28/43),雌鼠阳性率35.7% (20/56),差异有统计学意义(P=0.003 <0.05),性别与转基因阳性率相关(CO=0.280,P=0.004 <0.05);配伍组2子代鼠,雄鼠阳性率56.3%(18/32),雌鼠阳性率55.9%(19/34),差异无统计学意义(P =0.586 >0.05);配伍组3子代鼠,雄鼠阳性率81%(17/21),雌性阳性率65%(13/20),差异无统计学意义(P=0.212 >0.05).双重PCR产物经测序证实和预期完全一致.结论 Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo杂合子亲代配伍能产生存活至成年的纯合子子代鼠;改进后的基因分型可以作为小鼠基因分型的可靠方法,用于AD研究相关的胎鼠神经元培养实验,该动物模型杂合子雄鼠与野生型雌性鼠的配伍繁殖为佳繁育筛选组合.
作者:罗金刚;罗晓红;肖颂华;王英;许英;段朝晖 刊期: 2012年第05期
目的 观察白血病细胞株(HL-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)胞浆5'-核苷酸酶-Ⅱ(CN-Ⅱ)基因表达,以及长期传代后的变化规律,探索CN-Ⅱ与Ara-C疗效及耐药机制的相关性.方法 采用RT-PCR方法测定HL -60和HL-60/R的细胞内CN-ⅡmRNA表达,并通过体外培养传代,检测长期传代(5、10、20、30、40、50代)后CN-ⅡmRNA表达变化.结果 培养初期结果显示,HL-60和HL-60/R的CN-ⅡmRNA表达水平分别为0.23±0.04和0.47 ±0.05,HL-60/R的CN-ⅡmRNA表达水平明显高于HL-60(P<0.05).经长期培养传代至10、20、30、40和50代,各传代检测节点的HL-60和HL-60/R细胞内CN-ⅡmRNA表达水平均无明显变化(P均>0.05).上述各传代检测节点,HL-60/R的CN-ⅡmRNA表达水平均明显高于HL-60(P均<0.05).结论 HL-60、HL-60/R细胞中CN-ⅡmRNA表达差异有统计学意义.经长期传代后,上述差异持续存在,提示CN-Ⅱ表达与Ara-C的疗效相关,但在长期传代后,变化并不明显,可能与Ara-C耐药现象的发生无关.
作者:唐晋清;谢晓恬;李威;乔晓红;石苇;周晓迅 刊期: 2012年第05期
自噬是指细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,终将吞噬物在溶酶体内降解的过程.自噬作为细胞的一种程序性死亡方式,与凋亡有联系也有区别.自噬的分子诱导机制非常复杂且具有高度的保守性,其可能与PI3K-Akt-mTOR信号转导通路、Ⅲ型PI3K复合物、RAS-RAF-1-MEK-ERK1/2信号转导通路等有关.自噬发挥抑制肿瘤作用的分子机制尚不清楚,越来越多的证据提示自噬的抑癌作用可能与其潜在的促死亡和促生存效应有关.
作者:陈聪颖 刊期: 2012年第05期
目的 通过观察活性维生素D3[1,25-(OH) 2VitD3,活性VitD3]对单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)的CD-1小鼠肾组织胶原Ⅳ蛋白(collagen Ⅳ)表达的研究,探讨活性VitD3阻止肾组织纤维化作用的机制.方法 42只CD-1小鼠随机分成假手术组(n=6)、UUO组(n=18)、UUO加活性VitD3治疗组(n=18),治疗组再分为0.5、0.25、1.0μg/kg 3个剂量组.UUO组分别于术后(建模后)第3、7、14天处死,其余各组均在术后第7天处死.Western印迹法检测肾脏中胶原Ⅳ蛋白表达量.结果 术后第3、7、14天,UUO组肾组织胶原Ⅳ蛋白表达水平都显著低于假手术组,尤其是术后第7天,几乎检测不到胶原Ⅳ蛋白表达.UUO加活性VitD3治疗组的胶原Ⅳ蛋白表达水平显著高于UUO组(P<0.05).结论 活性VitD3对UUO所致CD-1小鼠的肾间质纤维化模型胶原Ⅳ蛋白的表达有一定的促进作用,提示活性VitD3可能具有帮助维持肾小管基底膜完整性的作用.
作者:李瑾;李微;殷少军;陈维杰 刊期: 2012年第05期
目的 观察脂肪组织创伤愈合的情况,探讨成熟脂肪细胞的变化.方法 以杜洛克母猪为实验动物,用滚轴取皮刀在其背部制作脂肪组织切割伤皮瓣,大体观察伤后1、2、4及12周的愈合情况.并于伤后3、7、14及21 d在皮瓣中央处取材,观察切缘及周围成熟脂肪细胞的形态学改变,用酶联免疫吸附法和免疫组织化学方法检测脂肪组织中瘦素和脂联素的表达情况.结果 脂肪组织切割伤组皮瓣中央与未创伤处皮肤无异,但皮瓣边缘早期有明显炎症反应,后期则呈典型的疤痕生长.组织学观察发现:脂肪组织创伤后,仍以纤维化愈合为主,但愈合过程中,炎症反应的局灶性及小脂肪细胞出现呈现一定的规律性;与未创伤组相比,脂肪组织创伤后其瘦素及脂联素的表达量均呈下降趋势,但两者的比值在愈合的过程中存在差异.结论 脂肪组织创伤后,脂肪细胞表面瘦素及脂联素的表达量下降.早期创缘附近出现大量的小脂肪细胞,可能与脂肪分解有关.
作者:钱雄;林炜栋;江万里;刘伟伟;原博;陈向芳 刊期: 2012年第05期
目的 研究得宝松局部封闭联合伐昔洛韦等治疗急性期带状疱疹的疗效.方法 将200例带状疱疹患者随机分为治疗组(120例,得宝松局部封闭配合口服伐昔洛韦、甲钴胺治疗)和对照组(80例,单纯口服伐昔洛韦、甲钴胺治疗),比较两组疗法的临床有效率及痊愈率.结果 治疗组临床有效率及痊愈率均高于对照组(P<0.01),无严重不良反应发生.结论 联合应用得宝松局部封闭及伐昔洛韦等治疗带状疱疹疗效显著,可明显缓解急性期带状疱疹的神经痛,值得临床推广应用.
作者:李秀丽;王茠茠;史玉玲;顾俊瑛;刘志昱;李晓建 刊期: 2012年第05期
目的 明确上海市陆家嘴地区公司职员非酒精性脂肪肝( non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发病率及相关危险因素.方法 选取从2008年1月到2011年8月来同济大学附属东方医院体检的上海市陆家嘴地区公司在职职员,进行血液及肝脏超声检查.结果 共3 532人完成调查,其中男性1 709人,平均年龄(41.99±9.04)岁,共检出NAFLD患者1 265例,患病率为35.8%,其中男性患病率为53.5%,女性为19.1%,男女性患病率均在41 ~50岁年龄组达到高峰(分别为61.3%和27.4%),在各个年龄组中男性患病率均高于女性(P<0.01).Logistic回归分析发现年龄、体质量、血尿酸、血HDL-C及ALT与NAFLD独立相关.结论 陆家嘴地区公司在职职员中NAFLD发病率高,与年龄、体质量、血尿酸、HDL -C及ALT水平相关.
作者:赵红梅;张洁;杨小青;周洁如;韩捷 刊期: 2012年第05期
目的 系统评价血清中幽门螺杆菌CagA抗体对东亚三国胃癌的诊断价值.方法 检索1990年1月至2012年1月万方数据、中国生物医学文献数据库、中国学术期刊全文数据库、Corhrance图书馆、PubMed、Embase 及Web of Science数据库,应用STATA12.0及meta Disc 1.4软件对纳入研究进行综合定量评价,根据异质性结果选择相应效应模型进行定量合并,绘制受试者工作特征( summary receiver operating characteristic,SROC)曲线并计算曲线下面积(area under curve,AUC),进行敏感度分析.结果 共纳入12篇中英文研究,累计病例1 524例,对照3 327例,血清Cag A抗体阳性患者相对于抗体阴性OR值为1.90(95% CI:1.64~2.20,P=0.000),差异有统计学意义.血清幽门螺杆菌CagA抗体诊断胃癌的合并敏感性为0.71(95% CI:0.69 ~0.73),合并特异性为0.40(95% CI:0.39~0.42),SROC下面积为0.636.从研究国家进行分层分析,血清CagA抗体诊断胃癌在日本人群中敏感度更高(0.75,95% CI:0.72~0.77),而在中国人群中特异度更高(0.53,95% CI:0.50~0.56).结论 在东亚国家中,血清CagA抗体与胃癌关系极为密切,并对胃癌的诊断可能有重要的临床参考价值.
作者:张庆慧;陈玲;顾金花;刘芸;段厚全;俞黎亚 刊期: 2012年第05期
目的 探讨TCT、SCC-Ag单一及联合检测在宫颈病变筛查中的应用价值.方法 189例TCT检测提示异常的妇女,进一步行血清SCC-Ag检测和阴道镜下病理学活检,以病理诊断结果为金标准,计算TCT、SCC-Ag及两者联合检测筛查宫颈病变的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,评价两者诊断价值.结果 SCC-Ag筛查宫颈病变的灵敏度低于TCT检测(60.32% vs 79.36%),特异度高于TCT检测(92.86% vs 70.63%),两者差异有统计学意义(P<0.05);两者联合检测诊断的特异度为96.31%、阳性预测值为90.00%、诊断符合率为83.69%,与单一TCT检测指标相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TCT、SCC-Ag联合检测可降低筛查的假阳性率,提高特异度及诊断符合率,在宫颈病变的筛查中具有一定的应用价值.
作者:高月清;翁雷;孙静 刊期: 2012年第05期
心血管疾病已成为现代社会人类死亡的首要病因.本文综述了近年来核因子-κB( NF-κB)在心血管疾病的发病、进展和治疗方面的研究进展.可以预见,NF-κB将有可能成为心血管疾病治疗中的新途径和新靶向.
作者:刘小雨;杨勇 刊期: 2012年第05期
目的 观察强脉冲光(intense pulsed light,IPL)和5-氨基酮戊酸光动力技术(5-aminolevulinic acid photodynamic therapy,ALA-PDT)相结合治疗中重度痤疮的有效性和安全性.方法 28例中重度痤疮患者于皮损部位涂抹10% ALA霜,避光封包60 min后,采用420~ 950 nm IPL治疗.每周治疗1次,连续4次.治疗结束后第4、8、12周随访.结果 经过4次治疗和12周随访,患者总有效率达78.6%,平均疗效指数为(73.4±4.2)%;炎症性和非炎症性皮损平均减少率分别达到(84.3±3.6)%和(56.1±5.2)%.患者无色沉、水疱、结痂等严重不良反应.有4例患者出现一过性皮损加重和局部红肿.结论 ALA-IPL-PDT治疗能有效治疗中重度痤疮,效果维持达治疗结束后12周,且无严重的色素沉着等不良反应.
作者:梅兴宇;朴英兰;齐龙霞 刊期: 2012年第05期
目的 观察胀消贴敷脐联合自身腹水超滤浓缩回输治疗乙肝后肝硬化顽固性腹水的临床疗效.方法 选择乙肝后肝硬化顽固性腹水住院患者,治疗组采用胀消贴敷脐联合自身腹水超滤浓缩回输,对照组采用单纯性自身腹水超滤浓缩回输,观察治疗前后患者的症状、体征、血钠、尿钠以及肝功能指标,同时彩色多普勒检测腹水量与门静脉血流量的变化.结果 治疗组总有效率为80.0%,对照组总有效率为62.2%,差异有统计学意义(Z=-2.469,P=0.014).治疗后,治疗组体质量、腹围明显下降,肝功能明显改善,尿量增多,门脉血流量明显下降(P<0.05),而对照组无明显改善(P>0.05).结论 胀消贴敷脐联合自身腹水超滤浓缩回输治疗乙肝后肝硬化顽固性腹水疗效显著.
作者:祝峻峰;顾宏图;钱平安;李勇 刊期: 2012年第05期
目的 建立一种实用高效的小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外分离培养方法,并进行初步表型鉴定.方法 采取贴壁细胞分离法分离和培养MSCs.倒置显微镜观察原代及传代细胞的形态及生长过程,使用免疫细胞化学方法进行MSCs的初步表型鉴定.结果 MSCs贴壁生长,形态均一,呈成纤维缓胞样,生长状态良好.免疫细胞化学检测CD44、CD105、CD34阳性率分别为94.3%、82.3%、3.3%.结论 采用贴壁培养法可分离培养出高纯度的MSCs.
作者:朱建宇;施伟民 刊期: 2012年第05期
目的 探讨重症脑卒中患者肠内营养支持治疗的临床意义.方法 伴意识障碍的脑卒中患者64例,随机分为治疗组(34例)、对照组(30例),两组病例的基本情况和一般治疗差异无统计学意义(P>0.05).入院72 h内,治疗组通过鼻胃管给予个性化的高能营养液104.6 ~ 146.4 kJ/(kg·d)治疗;对照组给予传统的鼻饲法.观察并比较两组营养状况和感染并发症的发生情况.结果 治疗后治疗组的血清白蛋白、前白蛋白、外周血淋巴细胞计数治疗组明显高于对照组(P<0.05).而且治疗后肺部感染、电解质紊乱、上消化道出血的发生率对照组明显高于治疗组(P<0.05).结论 重症脑卒中患者早期肠内营养支持治疗对改善患者一般情况、减少并发症、加快康复有重要意义.
作者:沈颖;余静;韩婷 刊期: 2012年第05期
目的 探讨多层螺旋CT小肠造影(multi-slice CT enterography,MSCTE)对肠管克罗恩病(Crohn's diease,CD)的诊断价值.方法 对48例临床疑似CD患者进行MSCTE检查,对照肠镜、病理结果,计算其诊断敏感性、特异性,并分析CD的影像学表现,包括发生部位、肠壁增厚程度、强化程度及增强特点、肠腔狭窄程度、并发症及周围脏器受累情况.结果 MSCTE诊断CD的敏感性为89.2%,特异性为36.4%.CD常见发生部分为末端回肠(81.1%).影像学表现为:肠壁环形增厚(89.2%),黏膜明显强化(97.3%),黏膜面毛糙,肠壁分层状强化(88.9%),肠腔节段性中-重度狭窄(86.7%).并发症包括肠梗阻、肠系膜淋巴结增生、梳征(肠系膜血管增粗)、肠瘘.结论 MSCTE是CD的重要影像学检查方法,在CD的诊断、活动性判断及肠外并发症的显示中具有重要意义,结合肠镜、病理结果,有助于提高诊断准确性.
作者:张琳;汤光宇;李伟;刘勇;陈云燕 刊期: 2012年第05期
目的 探讨脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSC)移植和肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因联合治疗兔急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的疗效及机制.方法 家兔30只,复制急性心肌梗死模型.随机分为3组:AMI/ADSC+ hHGF组、AMI/ADSC组、AMI未治疗组,每组10只,另外随机选取10只兔作为假手术组.AMI术后3d,取兔腿部脂肪,分离ADSC培养,流式细胞术鉴定其表面标记.构建pcDNA3.1-hHGF重组表达载体,移植前用脂质体包裹表达载体转染ADSCs,孵育24 h.AMI术后14d,自体细胞移植,AMI未治疗组接受等量的无血清培养基注射,假手术组只开胸,不注射.细胞移植后28 d,超声心动图检测左室功能指标;取心肌组织,酶联免疫吸附法( ELISA)测定心肌组织中HGF的含量;计算心肌血管密度和纤维化面积.结果 移植后28 d,超声心动图测定显示AMI/ADSC+ hHGF组心功能改善明显优于AMI/ADSC组;AMI/ADSC+ hHGF组HGF含量高于AMI/ADSC组以及AMI组.AMI/ADSC+ hHGF组梗死区血管的数量及心肌纤维化面积等参数明显优于AMI/ADSC组.结论 转染肝细胞生长因子基因的脂肪来源干细胞移植可改善兔心肌梗死后的心功能,其疗效明显优于单纯干细胞移植,其可能通过促进血管新生、改善梗死区的血供及抗纤维化效应而起作用.
作者:裴艳;徐亚伟;侯磊;沈建颖 刊期: 2012年第05期
目的 探讨冠状动脉旁路移植术(coronary artery bypasses grafting,CABG)后发生低氧血症的相关危险因素.方法 对2007年1月至2009年6月接受单纯CABG的患者共288例的术前、术中、术后资料进行回顾性分析.将CABG术后在机械通气(FiO2> 45%)或面罩加鼻导管供氧(氧流量6 L/min)条件下,PaO2低于[102 -(0.33×年龄)] mmHg者,确诊为低氧血症.结果 288例CABG患者中,78例(27.08%)发生术后低氧血症.CABG术后发生低氧血症的独立危险因素有:术前慢性阻塞性肺部疾病史(OR=8.531,95% CI3.136~23.210)、术前急性心肌梗死史( OR =3.351,95% CI1.539 ~7.296)、术前糖尿病(OR=3.108,95% CI 1.439 ~ 6.713).结论 慢性阻塞性肺部疾病史、术前急性心肌梗死史、术前糖尿病是CABG术后发生低氧血症的3个独立危险因素.
作者:冯靖;季强;梅运清;王玺胜;蔡建志 刊期: 2012年第05期
目的 研究流行性感冒病毒裂解疫苗刺激人原代气道上皮细胞后能否促进人β防御素2( humanβ-defensin-2,HBD-2)的表达及分泌,探讨人工诱导增强防御素表达的方法.方法 分离培养人原代气道上皮细胞,以不同浓度流行性感冒病毒裂解疫苗刺激人原代气道上皮细胞,分别于刺激后6、12、24h提取细胞总RNA及培养细胞上清液,RT-PCR、ELISA检测hBD-2的mRNA和蛋白表达,纸片法观察杀菌效果.结果 不同浓度流行性感冒病毒裂解疫苗刺激气道上皮细胞6h后,各组细胞中hBD-2的mRNA和蛋白表达与对照组相比无明显变化;12h后,疫苗浓度>1.0 μg/ml的各组细胞中mRNA表达和蛋白水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),但24 h后均下降.1.0 μg/ml流行性感冒病毒裂解疫苗作用12 h后的细胞培养上清液有明显的杀菌效果.结论 一定浓度的流行性感冒病毒裂解疫苗刺激人原代气道上皮细胞,可促进hBD-2 mRNA的表达和hBD-2蛋白浓度的增加,为人工方法刺激机体产生hBD-2,对抗病原菌感染提供新的方向.
作者:沈桢巍;唐瑾;雷撼 刊期: 2012年第05期
目的 观察老年心力衰竭患者ESS的发生规律及变化,以探讨甲状腺素在老年心力衰竭患者病情转归和预后中的临床意义.方法 对82例不同心功能分级老年心力衰竭患者(老年心力衰竭组)及65例老年非心力衰竭患者(对照组)进行血清甲状腺素水平进行比较,观察心力衰竭缓解后的甲状腺素水平.结果 与对照组相比,老年心力衰竭组血清TT3浓度明显降低,且心力衰竭程度越重,TT3水平越低.治疗后,老年心力衰竭组血清TT3水平显著升高,rT3水平降低.结论 老年心力衰竭患者血清甲状腺素水平与病情严重程度和预后有关.
作者:陈维杰;曲娜;樊美红 刊期: 2012年第05期
目的 探讨氟离子导入后乳牙牙釉质表层氟含量的变化和釉质磷灰石晶胞结构的变化.方法 40颗下颌乳中切牙,随机编号1~40号,对半切开,选取1 ~ 20号标本的一半为导入组,20~40号标本的一半为浸泡组,选取1 ~40号标本另一半偶数组作为对照组.导入组以2% NaF溶液为导入液进行氟离子导入处理,浸泡组以2%NaF溶液进行浸泡,对照组以生理盐水进行浸泡,每天20 min,持续10d,处理完成后标本用环氧树脂包埋.应用电子探针测量仪检测釉质表面下100 μm分析微区内釉质氟含量,并用X线衍射仪对釉质表面下100 μm分析微区进行X线衍射检测,观察釉质晶胞结构的变化.结果 釉质表面下100μm内氟含量,导入组高于浸泡组,浸泡组又高于对照组(P<0.01).X线衍射图谱显示,3组乳牙标本的X线衍射峰形明显不同于羟基磷灰石,但相互间基本相似.3组乳牙标本晶体的a轴均大于羟基磷灰石,c轴均小于羟基磷灰石(P<0.01),而3组乳牙标本间晶胞轴长差异无统计学意义(P>0.01).结论 氟离子导入可以有效提高乳牙釉质表层的氟含量,乳牙釉质氟离子的导入并没有引起釉质晶胞轴长的改变.
作者:董宏伟;石四箴;许强;今井裕树;新谷诚康 刊期: 2012年第05期