学术投稿

Cyclopamine对人肺癌细胞系NCI-H460生长和增殖的影响

史阳;王军臣;华咏;张士镓

关键词:肺肿瘤, 信号转导通路, Cyclopamine, 流式细胞分析
摘要:目的 研究Hedgehog信号通路特异性抑制剂Cyclopamine对人肺癌细胞NCI-H460生长和增殖的影响.方法 培养NCI-H460细胞,加入不同浓度Cyclopamine,作用不同时间,倒置显微镜下观察细胞形态变化,CCK-8法检测Cyclopamine对肺癌细胞生长和增殖的影响,同时用流式细胞仪检测Cyclopamine对NCI-H460细胞周期的影响.结果 与空白对照组和Tomatidine对照组相比,2~40 μmol/L的Cyclopamine作用于NCI-H460细胞后,倒置显微镜下观察,细胞立体感消失,皱缩成圆形,细胞间隙增大.CCK-8比色法显示, Cyclopamine对NCI-H460细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,20 μmol/L 的Cyclopamine使NCI-H460细胞生长曲线下移,并可将NCI-H460细胞阻滞在G1期,明显减少其S期细胞数量,引起细胞凋亡.结论 Cyclopamine对人肺癌细胞系NCI-H460生长和增殖有比较明显的抑制作用,提示大细胞肺癌的发生和发展与Shh信号转导通路的异常激活有关.
同济大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 幽门螺杆菌感染与结肠息肉关系的研究

    目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与结肠息肉的关系.方法 经胃、肠镜检查,入选100例结肠息肉,另150例结肠无明显异常者为对照.采用免疫印迹法进行Hp的血清学分型,并取结肠息肉、胃黏膜观察病理组织学变化.结果 结肠息肉组Hp阳性率较对照组增高,差别有统计学意义(P=0.038);与对照组相比,直、乙、降结肠息肉及多发性结肠息肉Hp阳性率增高有统计学意义(P=0.030,P=0.004).但Hp血清分型的分布无显著差异(P>0.05).结论 Hp感染可能是结肠息肉发生的一个因素.

    作者:王韶英;惠萍萍;叶荣菊;吴剑;王娜;陈锡美 刊期: 2009年第03期

  • 宫腔镜、腹腔镜联合在不孕症诊治中的应用

    目的 探讨宫腔镜、腹腔镜联合诊治不孕症的价值.方法 联合应用宫腔镜、腹腔镜诊治55例不孕症患者,随访4年,观察妊娠情况.结果 在导致女性不孕的常见原因中,输卵管因素是导致女性不孕的主要原因,尤其对继发不孕而言,输卵管因素占47.2%(26/55),明显高于其他因素(P<0.05).子宫内膜异位症也是导致女性不孕的重要原因之一,在原发不孕和继发不孕的患者该因素无显著性差异(P>0.05).55例患者中累计术后随访4年内总妊娠率54.5%(30/55).结论 宫腔镜、腹腔镜联合手术可明确不孕症病因,在诊断的同时进行治疗,其创伤小、并发症少、安全有效,具有重要的临床应用价值.

    作者:夏红;赵勇锋;李怀芳 刊期: 2009年第03期

  • 黄连素抑制促炎症因子生成保护多巴胺能神经元

    目的 探讨黄连素对炎症介导的多巴胺能神经元损伤的影响.方法 于中脑原代神经元-胶质细胞培养体系中,应用脂多糖建立多巴胺能神经元损伤的炎症机制模型,黄连素(10、20 μg/ml和 40 μg/ml)与脂多糖(1~100 ng/ml)同时处理该培养体系.免疫细胞化学法检测酪氨酸羟化酶阳性神经元的数目,液闪测定法测定多巴胺摄取力,并检测促炎症因子,包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)(ELISA法)、一氧化氮(NO)(Griess反应)和超氧化物(细胞色素c还原法)的变化.结果 黄连素(10、20 μg/ml和 40 μg/ml)对脂多糖(1~100 ng/ml)诱导的中脑多巴胺能神经元损伤具显著的保护作用,且呈剂量依赖性;黄连素也显著降低促炎症因子TNF-α、IL-1β、NO和超氧化物的生成.结论 黄连素抑制促炎症因子生成,保护多巴胺能神经元.

    作者:张宇红;汪锡金;叶民;陈玉娟;杨红彦;刘学源 刊期: 2009年第03期

  • 人体测量参数与胰岛素分泌水平的关系

    目的 探索人体测量参数对胰岛素、C肽分泌水平的预测作用.方法 予123例志愿者(2型糖尿病患者58例,非糖尿病患者65例)行75 g无水葡萄糖口服葡萄糖耐量试验及胰岛素、C肽释放试验,分析体质指数、腰围、腰围/臀围比值与胰岛素、C肽水平的关系.结果 各组均显示体质指数、腰围与空腹胰岛素、空腹C肽水平成正相关关系;腰臀围比值与30 min和(或)60 min胰岛素、C肽水平成负相关关系.结论 人体测量参数与胰岛素和C肽水平密切相关,可作为临床防治糖尿病的简易预测标志参数.

    作者:贺铭;王博;李颖;谢壮丽;刘琦;张秀珍 刊期: 2009年第03期

  • p16、c-erbB-2、E-cadherin在胃癌及转移淋巴结中的表达

    目的 探讨胃癌及淋巴结转移癌组织中p16、c-erbB-2和E-cadherin蛋白表达的差异,并结合肿瘤的病理学特征进行分析.方法 123例胃腺癌及82例淋巴结转移癌组织构建组织芯片,免疫组织化学方法检测p16、c-erbB-2和E-cadherin蛋白的表达.结果 ①p16在伴有淋巴结转移的胃癌组织中的阳性表达明显高于不伴淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05);②在伴淋巴结转移的病例中,p16在原发癌中的阳性表达率明显高于淋巴结转移癌(P<0.05);③p16和c-erbB-2在中高分化腺癌中的阳性表达明显高于低分化腺癌(P<0.05).结论 p16高表达的胃腺癌组织易于发生淋巴结转移.p16的缺失可能是胃癌进展的晚期事件之一.p16和C-erbB-2也许可以作为判断胃腺癌分化程度的参考指标.

    作者:蒋虹伟;李倩玉;张莉萍;刘爱英;王一 刊期: 2009年第03期

  • 人促甲状腺激素受体全长表达载体在真核细胞内的稳定表达

    目的 构建pcDNA3.1/人TSH受体(human thyroid-stimulating hormone receptor,hTSHR)基因真核表达载体(已完成),将该真核表达载体在CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)中表达,并筛选获得稳定表达细胞株.方法 通过脂质体介导,用重组质粒pcDNA3.1-hTSHR转染CHO细胞,以G 418筛选稳定表达细胞株,挑取单克隆,扩大培养并传代;取P5代细胞,抽提基因组DNA及蛋白分别用PCR及Western blot方法鉴定被转染CHO细胞hTSHR的表达情况.结果 得到阳性单克隆5个,传代培养.P5代细胞PCR扩增产物为约530 bp特异性条带,大小与预期相符,未见非特异性条带.Western 印记法结果表明被转染CHO传代细胞有hTSHR蛋白表达.结论 pcDNA3.1-hTSHR真核表达载体可以在CHO细胞中稳定表达,成功构建稳定表达细胞株.为测定自身免疫性甲状腺疾病患者血清TSHR奠定了基础.

    作者:张洪梅;周亚芹;董艳;冯绮文;李晓永;苏青 刊期: 2009年第03期

  • 不同手术方式治疗声带息肉的疗效比较

    目的 比较显微支撑喉镜与纤维喉镜下摘除声带息肉的疗效,探讨不同声带息肉手术方式的选择.方法 回顾性分析我院1998年1月至2008年11月采用这两种方法治疗的声带息肉患者共590例,其中显微支撑喉镜组404例,纤维喉镜组186例.术后随访3月,对比分析两组的疗效,并对比复杂型及双侧声带息肉患者的疗效.结果 显微支撑喉镜组和纤维喉镜组的疗效无明显差别(P=0.067),复杂型声带息肉患者在显微支撑喉镜下手术的疗效优于纤维喉镜下手术(P=0.001),双侧声带息肉患者显微支撑喉镜下手术与纤维喉镜下手术疗效无明显差别(P=0.096).结论 复杂型声带息肉患者采用显微支撑喉镜下手术的疗效优于纤维喉镜下手术,而对于双侧息肉患者的疗效无明显差别.

    作者:单颖军;崔佳文;费刚;张汉清 刊期: 2009年第03期

  • 非球面人工晶状体术后视觉质量的研究

    目的 前瞻对比性研究AkreosTM系列人工晶状体植入术后视力、术眼波前像差的表现.方法 选择年龄相关性白内障患者36例(40只眼),随机将患者分为2组:A组20例(20只眼)植入非球面(消像差)AkreosTMAO人工晶状体、B组16例(20只眼)植入传统正球面AkreosTM人工晶状体,分别于术前、术后一周和一月检查,采用ZEIZZ波前像差仪测量波前像差,并进行统计分析.结果 2组患者术后矫正视力均大于0.9;非球面(消像差)AkreosTMAO人工晶状体组术后四阶像差(S4)低于植入传统正球面AkreosTM人工晶状组,两组术后的波前像差值中的四阶像差S4和Zernike多项式中的Z(2,0)、Z(4,0)、Z(5,1)和Z(6,0)有统计上的差异,其它指标无统计学差异.结论 白内障超声乳化术植入消像差AkreosTMAO人工晶状体在夜视条件下即瞳孔直径大时,较植入传统正球面人工晶状体AkreosTM的波前像差稍低,成像质量更好.

    作者:李艳红;盛敏杰;陈轶卉;金依华 刊期: 2009年第03期

  • 第4、5跖跗关节的应用解剖及临床意义

    目的 通过测量第4、5跖跗关节的多个解剖学参数,了解具体结构,评估其活动能力.方法 对10个成人新鲜冰冻足部标本进行解剖测量第4、5跖跗关节的关节面直径、关节面夹角和第5跖骨倾斜角.结果 ①测得第4跖跗关节面远侧横径为(8.58±0.30)mm,纵径(12.89±0.52)mm,近侧横径为(8.65±0.29)mm,纵径(13.0±0.47)mm;第5跖跗关节面远侧横径(10.61±0.98)mm,纵径(12.22±0.46)mm,近侧横径(8.65±0.29)mm,纵径(13.0±0.47)mm;②第5跖骨倾斜角为51.5°±2.8°,骰骨两跖跗关节面所构成的夹角为147.2°±8.5°;③两关节为平面关节,第5跖跗关节面呈三角形,第4跖跗关节面呈长方形,纵轴较长.结论 第4、5跖跗关节为平面关节,在不同平面尤其矢状面具有一定的活动度,临床上需要尽可能保留此两关节的活动功能.

    作者:胡孙君;俞光荣;陈舰;陈杰 刊期: 2009年第03期

  • 5-Aza-CdR对膀胱癌EJ细胞系生长及Apaf-1基因异常甲基化的影响

    目的 观察5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycitydine, 5-Aza-CdR)对体外培养的膀胱癌EJ细胞增生、细胞周期影响及其对此细胞株中Apaf-1基因的甲基化状态的影响.方法 不同浓度5-Aza-CdR处理体外培养膀胱癌EJ细胞后,用MTT法检测药物处理24、48、72 h后的细胞增殖活性;PI染色和流式细胞仪检测药物处理72 h后的细胞周期分布;MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态;Real-time RT-PCR法检测用药前后细胞中Apaf-1的mRNA表达变化.结果 2×10-6、5×10-6、1×10-5mol/L 5-Aza-CdR处理膀胱癌EJ细胞24、48、72 h后,细胞增生受到抑制, 有时间和剂量依赖性.流式细胞仪分析表明, 不同药物浓度处理EJ细胞72 h后细胞增殖指数降低明显:5×10-6、1×10-5mol/L组分别为(34.09±0.79)、(28.55±1.76),与对照组(42.78±1.23)相比,差异有统计学意义(P<0.05).在5-Aza-CdR处理前未检测到膀胱癌EJ细胞系的Apaf-1基因的mRNA表达, 经过5-Aza-CdR处理后, Apaf-1基因在膀胱癌EJ细胞系中甲基化状态得到了逆转,Apaf-1基因的mRNA重新表达.结论 5-Aza-CdR对膀胱癌EJ细胞具有增生抑制作用;Apaf-1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关.

    作者:冷俊;翁文浩;李智;许闪闪;李晶华 刊期: 2009年第03期

  • LEEP术在宫颈上皮内瘤变中的诊治价值

    目的 评价LEEP术在宫颈上皮内瘤样病变中的诊治价值.方法 回顾性分析674例经阴道镜诊断为CIN,后行LEEP手术治疗的患者的手术,预后及病理级别变化的情况.结果 手术时间4~18 min,中位数为8 min.术中出血5~25 ml,中位数为9 ml;术后CIN分级上升的共有63例,占总例数的9.4%,级别相等的病例共有220例,占总例数的32.6%,术后分级下降的有391例,占总例数的58%.术后切缘累及共50例,占总病例数的7.73%.术后随访治愈率达98.7%.结论 LEEP术在宫颈上皮内瘤变的诊治中有着重要的价值,是疾病治疗的首选方法.

    作者:姚红霞;王玲;吴红;陈琦 刊期: 2009年第03期

  • Cyclopamine对人肺癌细胞系NCI-H460生长和增殖的影响

    目的 研究Hedgehog信号通路特异性抑制剂Cyclopamine对人肺癌细胞NCI-H460生长和增殖的影响.方法 培养NCI-H460细胞,加入不同浓度Cyclopamine,作用不同时间,倒置显微镜下观察细胞形态变化,CCK-8法检测Cyclopamine对肺癌细胞生长和增殖的影响,同时用流式细胞仪检测Cyclopamine对NCI-H460细胞周期的影响.结果 与空白对照组和Tomatidine对照组相比,2~40 μmol/L的Cyclopamine作用于NCI-H460细胞后,倒置显微镜下观察,细胞立体感消失,皱缩成圆形,细胞间隙增大.CCK-8比色法显示, Cyclopamine对NCI-H460细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,20 μmol/L 的Cyclopamine使NCI-H460细胞生长曲线下移,并可将NCI-H460细胞阻滞在G1期,明显减少其S期细胞数量,引起细胞凋亡.结论 Cyclopamine对人肺癌细胞系NCI-H460生长和增殖有比较明显的抑制作用,提示大细胞肺癌的发生和发展与Shh信号转导通路的异常激活有关.

    作者:史阳;王军臣;华咏;张士镓 刊期: 2009年第03期

  • VS-1基因转染对血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

    目的 构建Ad-VS-1基因转染HUVEC的体外缺氧/复氧模型,探讨VS-1转基因治疗对血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制.方法 ①建立HUVEC缺氧/复氧(H/R)损伤模型,分为4组:空白组,H/R组,空载腺病毒转染+H/R组,Ad-VS-1转染+H/R组;②测定内皮细胞活力(MTT),超氧化物歧化酶活力(SOD)、丙二醛(MDA)、eNOS、NO表达、炎症因子ICAM-1、VCAM-1、TNF-α的表达情况;③在Ad-VS-1转染+H/R组基础上增设Hb、KT5823、SB203580和Wortmanin 4个信号抑制组,流式细胞仪测定细胞凋亡率进行统计学分析.结果 ①成功构建Ad-VS-1转染HUVEC表达后H/R模型;②与空白组比较,H/R组和空腺病毒感染+H/R组的MTT、SOD含量、eNOS、NO表达显著降低,而MDA、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α含量显著增加(P<0.05);与H/R组和空载腺病毒感染+H/R组比较,VS-1转染+H/R组MTT、SOD、eNOS、NO表达含量明显回升,而MDA、ICAM-1, TNF-α生成量明显回落(P<0.05);③与H/R组和空载腺病毒感染+H/R组比较,VS-1转染组细胞凋亡率明显降低,而4组信号抑制剂组的细胞凋亡率较VS-1转染组均明显回升(P<0.05).结论 Ad-VS-1成功转染HUVEC,并通过PI3K/Akt-eNOS-NO-cGMP-PKG和P38MPAK等信号途径,抑制氧化应激和炎症反应,产生显著的抗血管内皮细胞缺氧/复氧损伤作用,为今后VS-1抗心肌缺血/再灌注损伤研究奠定基础.

    作者:王铮;肖明第;袁忠祥;虞敏 刊期: 2009年第03期

  • P物质与小鼠病毒性心肌炎机制研究

    目的 P物质广泛分布于中枢神经系统和外周组织如心脏内神经组织内,P物质在病毒性心肌炎病理生理中的作用尚不清楚,本实验研究P物质在小鼠病毒性心肌炎病理生理中的变化.方法 脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)接种4周龄DBA/2小鼠制成病毒性心肌炎模型.免疫组化法检测P物质阳性细胞在病毒性心肌炎小鼠心脏组织内的分布,酶免疫分析法测定P物质在病毒性心肌炎小鼠血清和心脏组织的水平.结果 病毒性心肌炎小鼠心脏组织内P物质水平和P物质阳性细胞密度均低于正常对照组(P<0.05).小鼠心脏组织P物质水平与小鼠心脏质量/体质量比值成负相关(r=-0.460, P<0.05).小鼠血清与心脏组织P物质水平成正相关(r=0.399, P<0.05).病毒性心肌炎小鼠血清P物质水平低于正常对照组(P<0.05).结论 病毒性心肌炎小鼠P物质血清水平降低,心脏组织内分布减少,可能反映心脏内神经组织受损,并引起心脏电活动调控和神经内分泌调节过程的改变.

    作者:王勇;李觉;徐亚伟;胡大一 刊期: 2009年第03期

  • 转录因子Sp1在胰腺癌中的表达及其与预后的关系

    目的 研究转录因子Sp1在胰腺导管腺癌组织中的表达特征,并探讨其表达对胰腺导管腺癌患者预后的影响.方法 采用免疫组织化学技术检测60例胰腺导管腺癌组织Sp1的表达情况,分析该因子的表达与胰腺导管腺癌患者预后的关系.结果 Sp1在胰腺导管腺癌组织中的阳性表达率为75%(45/60),伴有门静脉侵犯和神经侵犯患者Sp1阳性表达明显高于不伴有门静脉侵犯和神经侵犯患者,而Sp1的阳性表达和肿瘤的部位、分化程度、淋巴结转移、是否伴有十二指肠侵犯及肿瘤分期无明显相关.Sp1阳性组患者中位生存期12个月,Sp1阴性组患者中位生存期19个月,Sp1阴性组患者生存期长于Sp1阳性组生存期,有显著性差异.结论 Sp1在胰腺导管腺癌中呈过度表达和活化,Sp1对胰腺导管腺癌侵犯门静脉和胰周神经具有提示作用,是一个预后不良的指标.

    作者:陈泉宁;袁平;范跃祖;张景涛 刊期: 2009年第03期

  • 纤维桩在老年磨耗上颌前牙修复中的临床应用

    目的 评价纤维桩在老年严重磨耗上颌前牙修复治疗中的作用.方法 选择临床老年修复病例严重磨耗的上颌前牙130颗,对130颗患牙行完善的根管治疗后,分别用纤维桩系统和铸造桩恢复桩核后作全冠修复,随访1~2年.结果 其中铸造组57例桩冠修复体完好,成功率为81.4%;其中纤维桩组58个桩冠修复体良好,成功率为96.6%,纤维桩系统修复组较铸造桩核组有更高的治疗成功率.结论 用预成的根管玻璃纤维桩系统进行修复老年磨耗上前牙,具有操作简单、方便、减少根折,提高牙齿再可能,缩短就诊次数的优点,值得临床推广.

    作者:仲琳 刊期: 2009年第03期

  • 微型营养评价法与主观全面评价法的比较

    目的 探讨评估老年恶性肿瘤患者营养状态:微型营养评价法(mini-nutritional assessment, MNA)及主观全面评价法(subjective global assessment, SGA)对老年恶性肿瘤患者营养状态的评价作用,并比较MNA和SGA.方法 对102例老年恶性肿瘤患者进行MNA、SGA评价和传统营养评价指标测量.结果 (1)根据MNA评价结果,营养正常者、潜在营养不良者、营养不良者分别为27.4%、35.3%、37.3%;根据SGA评价结果,营养正常者、轻中度营养不良者、重度营养不良者分别为43.1%、21.6%、35.3%.(2)根据MNA评价,营养正常组、潜在营养不良组和营养不良组的体质量指数(body mass index,BMI)、肱三头肌皮褶厚度(triceps skin-fold thickness,TSF)、上臂肌围(arm muscle circumference,ACMC)、腓肠肌围(calf circumference,CC)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,Alb)、前白蛋白(prealbumin,PA)、总淋巴细胞计数(total lymphocyte count,TLC)等指标,3组之间相互比较差异有显著性,(P<0.05).根据SGA评价,营养正常组和轻中度、重度营养不良组比较,其BMI、ACMC、CC、Hb、TP、Alb、PA、TLC等指标差异有显著性(P<0.05).轻中度营养不良组和重度营养不良组比较,其TP、Alb差异有显著性,(P<0.05).结论 (1)恶性肿瘤患者营养不良的发生率高;(2)MNA和SGA皆是评价老年恶性肿瘤患者营养状态的简单有效方法,在评价老年恶性肿瘤营养状态与传统营养评价指标上总体趋势一致,在某些方面,MNA优于SGA.

    作者:吴萍;卞大荣 刊期: 2009年第03期

  • 条件性SV40 TAg转基因小鼠模型的建立

    目的 建立可调控的脑组织特异性表达SV40 TAg的转基因小鼠模型.方法 构建由大鼠神经元特异性烯醇化酶基因(rat neuron-specific enolase, NSE)启动子驱动四环素基因表达调控系统的载体,从而控制SV40 TAg基因的表达;受精卵雄原核显微注射该线性化载体制备转基因小鼠;PCR方法鉴定首建鼠;RT-PCR方法检测小鼠组织中四环素反式激活子(rtTA)及SV40 TAg基因的表达情况.结果 显微注射获得17个首建鼠,其中的6个首建鼠建系成功;1#、6#品系小鼠的脑组织中表达rtTA基因;强力霉素诱导后,可检测到6#品系小鼠脑组织中SV40 TAg基因的特异性表达.结论 可调控的脑组织表达SV40 TAg的转基因小鼠模型已经建立.

    作者:荆华;匡颖;王龙;毛积芳;费俭 刊期: 2009年第03期

  • 妊娠期常规行宫颈疾病筛查可行性及结果分析

    目的 通过对妊娠期宫颈疾病筛查结果的分析,探讨对妊娠期常规进行宫颈疾病筛查的必要性.方法 2007年3月1日至2008年5月31日在我院正规接受产前检查的孕妇共2 338例,所有孕妇均在首次产前检查时采用TCT技术常规行宫颈细胞学检查,对细胞学检查异常的孕妇进行人乳头瘤病毒检测及宫颈活检.结果 2 338例孕妇中细胞学检查异常者43例,占1.84%,其中ASCUS 27例,LSIL 14例,HSIL 2例.宫颈活检结果慢性宫颈炎14例,CINⅠ 11例,CINⅡ 9例,CINⅢ 9例.高危HPV检测阳性36例,占83.72%.除1例因合并梅毒要求引产外其余均足月分娩.结论 产前检查时应进行宫颈疾病筛查有助于及时发现宫颈疾病,细胞学筛查及宫颈活检对孕妇是安全、可行、必要的.

    作者:孟晓彦;陶敏芳 刊期: 2009年第03期

  • 糖皮质激素在肺部感染辅助治疗中的应用

    肺部感染是临床常见的感染性疾病,并且一直高居感染性疾病死因顺位之首.抗生素治疗无疑是基本和重要的手段.但是令人难以理解是,即以社区获得性肺炎(community-acguired pnumonia,CAP)为例,自从20世纪40年代青霉素以及其后许多高效广谱抗生素开发和应用以来,CAP的死亡率并没有下降[1].

    作者:何礼贤 刊期: 2009年第03期

同济大学学报(医学版)杂志

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