逆病毒载体介导的双耐药基因在小鼠骨髓细胞的转移

鞘内注射孤啡肽对正常及创伤大鼠NK细胞活性的影响

目的观察鞘内注射孤啡肽(orphanin FQ,OFQ)对正常及手术创伤大鼠NK细胞活性的影响.方法用3H-TdR释放法测定大鼠脾脏自然杀伤细胞(NK细胞)活性.结果鞘内分别注射0 1、1μg OFQ后,正常大鼠NK细胞活性与生理盐水组(NS)相比无明显差异;5、10μgOFQ则明显抑制NK细胞活性(P＜0.01),提示脊髓OFQ对正常大鼠免疫功能具有抑制作用.手术创伤后大鼠NK细胞活性明显降低,鞘内分别注射OFQ0.1、1、5、10μg后NK细胞活性与单纯创伤组无明显差异,注射20μgOFQ后,NK细胞活性则比创伤组显著降低,提示鞘内注射OFQ不能翻转创伤介导的免疫抑制,大剂量的OFQ反而加剧免疫抑制.结论脊髓OFQ在正常大鼠和创伤应激大鼠都具有免疫调节效应.

作者：王宁；姜建伟；杜莅娜；王彦青；吴根诚；曹小定 刊期： 2002年第01期

西拉普利对糖尿病高血压大鼠肾脏内皮素系统的影响

目的观察糖尿病高血压大鼠肾脏内皮素(ET)系统的改变以及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)影响.方法将自发性高血压大鼠建成链脲佐菌素诱导的糖尿病模型(SHR-DM),设Cilazapril组、Amlodipine组和非治疗组.4周后采用免疫组化和RT-PCR方法检测肾脏ET-1及其A、B受体基因和蛋白表达.结果与WKY对照组相比,SHR-DM大鼠存在明显的蛋白尿和肾功能减退,肾脏ET-1及A受体的mRNA和蛋白表达也明显升高,而ETB受体的变化不显著,Cilazapril和Amlodipine治疗均可使肾脏ET-1降至正常水平,但仅Cilazapril能明显降低蛋白尿,改善内生肌酐清除率,下调ETA受体的过度表达.结论糖尿病高血压大鼠肾脏ET系统明显上调,Cilazapril较Amlodipine更具有治疗作用.

作者：陈靖；顾勇；杨海春；朱蔚钰；林凡；林善锬 刊期： 2002年第01期

大鼠局灶性脑缺血早期脑内HO-1 蛋白的表达

目的研究局灶性脑缺血血红素氧合酶(HO)在脑内的表达.方法采用大鼠大脑中动脉栓塞致脑缺血,对缺血早期不同时间点进行HO-1免疫组化及病理学研究,并应用计算机图像分析技术计算HO-1表达的强弱.结果栓塞后30min皮质及海马即有HO-1阳性神经元和胶质细胞,且随着时间推移,HO-1的表达逐渐增强,HO-1主要分布在灶周皮质、梗死皮质区、梨状皮质内的神经元及胶质细胞,丘脑、下丘脑、海马齿状回的神经元及对测海马也出现HO-1的表达.结论脑缺血时脑内HO-1迅速而强烈的表达可能是脑组织对自身损伤的恢复机制.

作者：符荣；陈衔城；任惠民；宋后燕；金复生；季耀东 刊期： 2002年第01期

维生素D受体基因多态性与乳腺癌的相关性(摘要)

作者：崔静 刊期： 2002年第01期

荧光定量RT-PCR检测人组织因子 mRNA

目的建立检测组织因子(tissue factor,TF)mRNA荧光定量的方法,了解组织中TF的表达水平,研究TFmRNA的表达与肿瘤的关系.方法构建克隆载体pUC-TF作为定量模板,在GeneAmp 5700型检测仪上定量检测42例不同恶性程度胶质瘤组织标本,5例正常脑组织标本和人恶性胶质瘤细胞株U 251.结果42例肿瘤组织均有mRNA的表达,范围从3.6×105～8.8×107拷贝/μgRNA,均值为2.9×106拷贝/μg RNA,且拷贝数与恶性程度成正比;5例正常脑组织中,1例检测不出,其他4例的强度为3 8×103～5.l×104拷贝/μgRNA,均值为6.2×103拷贝/μg RNA;胶质瘤细胞株U-251的强度为2 8×106拷贝/μg RNA.结论成功地建立了荧光定量检测TF基因表达方法,检测结果可用绝对拷贝数表示,定量准确可靠.TF mRNA荧光定量测定方法的建立为研究TF与胶质瘤等肿瘤恶性程度及转移的关系打下了基础.

作者：关明；苏兵；吕元 刊期： 2002年第01期

脂质体介导的c-myc反义硫代寡核苷酸诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡

目的探讨c-myc反义硫代寡核苷酸(antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide, APSODN)对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响.方法人工合成c-myc APSDDN,通过脂质体转染法处理人胃癌细胞系SGC-7901后,于不同时间收集细胞,采用Northern blot、Western blot检测c-myc基因mRNA及蛋白表达,采用TUNEL方法检测凋亡指数,以流式细胞仪检测细胞周期.结果TUNEL显示c-myc APSODN可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,并与APSODN的浓度和处理时间有关.流式细胞仪检测显示细胞阻滞于G0/G1期.结论c-myc APSODN可诱导胃癌细胞凋亡.

作者：范钰；林庚金；钱立平；许祖德；李华；徐康 刊期： 2002年第01期

软组织骨化性纤维黏液样瘤8例临床病理分析(摘要)

作者：王坚 刊期： 2002年第01期

脑池应用重组链激酶预防猪迟发性脑血管痉挛

目的研究重组链激酶(r-SK)在预防蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(DCV)中的作用方法选取家猪12头,随机分成SAH对照组和r-SK治疗组,每组6头,用腰穿枕大池置管2次注血法制作动物模型;第2次注血后24 h,治疗组经留置导管注入r-SK 15 mg,对照组注入生理盐水;两组均行脑脊液(CSF)引流,并测定CSF中氧合血红蛋白(Oxy Hb)含量;以实验前后脑血管造影和基底动脉(BA)组织学改变作为脑血管痉挛的判定指标.结果对照组双侧颈内动脉(ICA)和BA明显痉挛(P＜0.01);BA电镜和组织切片检查有内膜增生、内褶、弹力层断裂等病理改变;Oxy Hb随时间逐渐升高.治疗组总体血管直径变化无显著性差异( P＞0.05);BA均正常;Oxy Hb随时间逐渐降低.结论r-SK可溶解蛛网膜下腔中的血凝块,预防SAH后DCV的发生.

作者：沈冰；陈衔城；季耀东；张彪；夏鹰；吴劲松 刊期： 2002年第01期

磷脂酶C抑制剂对脑缺血大鼠脑细胞膜游离脂肪酸释放的影响

目的观察磷脂酶C抑制剂苯甲基磺酰氟(phenylmethylsu1fonyl fluoride,PMSF)对脑缺血时脑细胞膜游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)释放的治疗及保护作用.方法选用雄性SD大鼠局灶性脑缺血模型,气-液色谱分析技术观察了脑缺血前后应用PMSF对不同缺血时间点脑细胞膜FFA含量的变化.结果PMSF主要抑制缺血早期磷脂酰肌醇和缺血后期磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱的FFA释放.结论多不饱和脂肪酸(C20:4、C22:6)积聚是反映缺血性脑损伤程度的重要指标,PMSF对缺血脑组织有一定的保护及治疗作用.

作者：鲁佑瑜；秦震；莫谷强 刊期： 2002年第01期

胃切除术后残胃部癌、贲门部癌、食管部癌的外科手术治疗

目的总结胃大部或全胃切除术后因残胃部癌、贲门部癌或食管部癌再次手术的治疗经验.方法将86例按肿瘤部位浸润范围归纳为6类,施行不同手术方式.①残胃部癌13例,9例施行了全胃切除、食管空肠吻合;②残胃贲门部癌46例,38例施行了全胃贲门和食管部分切除、食管空肠吻合;③贲门部癌8例,直径小于3 cm,施行贲门部食管胃局部切除、食管残胃胸内吻合;④食管下段部癌11例,施行食管下段及胃贲门部切除、空肠或结肠代食管术;⑤胃大部切除术后食管中段部癌7例,5例施行了全食管切除、结肠代食管术;⑥全胃切除食管空肠襻式吻合术后食管中段部癌1例,施行食管大部切除,倒转近端空肠襻代食管,食管空肠弓上吻合、空肠空肠吻合.结果72例再次手术切除了肿瘤,手术切除率83.7%.术后2例分别死于结肠坏死和呼吸衰竭.术后吻合口瘘3例,吻合口狭窄6例,切口感染7例,脓胸3例,膈下感染3例,剖胸止血1例,结肠坏死1例.随访1989～1999年55例切除病人,术后平均寿命超过2年.结论胃大部或全胃切除术后残胃部癌、贲门部癌或食管部癌仍应采用积极外科手术为主的综合治疗方案,选用合适手术方式,注重手术质量,是提高生存率和术后生活质量的关键.

作者：仇德惠；徐松涛；王群；郑如恒；徐正浪；曾亮；谭黎杰 刊期： 2002年第01期

干扰素对扩张型心肌病心功能的影响

目的观察干扰素治疗对扩张型心肌病心功能的影响.方法选择从1997年10月～2000年4月间在我院住院和门诊病人52例,随机分为干扰素治疗组和常规治疗组.在治疗前、治疗1、3和6个月后分别记录临床心功能分级,记录24 h室性早搏次数,心衰住院次数和上呼吸道感染次数;超声心动图定量分析心功能变化.对两组病人进行随访.干扰素治疗组除常规药物治疗外,加用干扰素一α(interferon-α)300万U隔天肌注,共3～6月.结果临床及超声心动图结果发现干扰素组的心功能改善优于常规组;在治疗6个月后两组差异有显著性(P＜0.05);干扰素治疗组在减少室性早搏次数、上呼吸道感染次数和心衰次数方面优于常规治疗组,结论干扰素对扩张型心肌病心功能的改善有较好作用.

作者：卜丽萍；杨英珍；舒先红；陈瑞珍；黄国倩；虞敏；葛均波 刊期： 2002年第01期

肥胖患者血清C-反应蛋白水平变化与代谢综合征的关系

目的比较肥胖患者急性期标志-血清C-反应蛋白(CRP)水平的变化并探讨与代谢综合征的关系.方法选择153例肥胖患者和47例正常体重者,测定血清CRP水平,同时检测体重指数(BMI)、腰围(W)、腰臀比(WHR)、血压、糖脂代谢参数、空腹胰岛素(FIN)、胰岛素原(PI)、胰岛素原/胰岛素比值(P/I),并对导致血清CRP改变的因素进行相关分析研究.结果(1)肥胖组血清CRP高于体重正常组(P＜0 001),单纯肥胖组与肥胖伴糖代谢异常组之间无明显差异(P=0.413);(2)肥胖组相关分析显示血清CRP与W、WHR、SBP、TG、PI、HOMA-IR、P/I呈正相关;(3)矫正年龄和BMI后,血清CRP与SBP、WHR和RI仍存在相关性,与其他变量的相关性消失.结论1、肥胖患者血清CRP水平明显高于非肥胖者,与SBP、TG、HOMA-fR呈正相关,提示肥胖患者血清CRP水平升高与代谢综合征、胰岛素抵抗有密切关系;(2)血清CRP水平与P/I也呈正相关,提示血清CRP升高与β-细胞功能缺陷可能也有一定关系;(3)BMI、WHR、SBP和PI是血清CRP升高的主要相关因素.

作者：余丹菁；高鑫；赵耐青；孙璇；江孙芳；蒋小红；潘柏申 刊期： 2002年第01期

皮肤T细胞淋巴瘤患者的人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ型感染

目的研究皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)患者中是否存在人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)的感染.方法检测CTCL患者血清中的HTLV-Ⅰ抗体以及患者外周血细胞和活检标本中的前病毒DNA.结果PCR法检测CTCL患者外周血样57例,其中HTLV-Ⅰ前病毒DNA阳性患者6例;ELISA法检测CTCL患者54例,其中1例为可疑阳性;Western印迹法检测CTCL患者18例,其中HTLV-Ⅰ抗体阳性者4例,此4例患者前病毒DNA PCR结果也为阳性.结论皮肤T细胞淋巴瘤患者存在HTLV-Ⅰ病毒感染,CTCL与HTLV-Ⅰ有一定的关系.HTLV-Ⅰ病毒感染可能是CTCL发病的诱因之一.

作者：高红阳；单易非；王平；邱丙森；王松梅 刊期： 2002年第01期

抗肿瘤血管生成治疗进展

恶性肿瘤的无限制侵袭性生长及其转移依赖于血管生成(angiogenesis),抑制血管生成是不同于常规抗肿瘤治疗的新策略.近年来,人们对肿瘤血管生成有了更多的认识,抗肿瘤血管生成治疗的研究也取得了很大进展,并逐渐进入临床应用.肿瘤血管生成机制及意义肿瘤的生长有两个不同的阶段,即从无血管的缓慢生长阶段转变为有血管的快速增殖阶段.无论肿瘤转移的起始或终末阶段,血管生成均发挥着重要作用.正常状态下,机体血管生成过程受到严格的、多层次的控制,机体可在短时间内打开或关闭血管的调控系统,其中抑制血管生成的因子占主导地位.但肿瘤血管生成的调节存在障碍,在任何时候均有10%～20%的肿瘤血管内皮细胞处于DNA合成状态.

作者：郭学良；林庚金；钱立平 刊期： 2002年第01期

动脉介入化疗加手术治疗四肢软组织肿瘤

目的探讨动脉介入化疗加手术治疗四肢软组织肿瘤的方法与临床价值.方法18例肢体软组织肿瘤,其中11例(61%)术前影像学检查显示肿瘤与大血管及神经粘连侵犯.分别采用股动脉或肱动脉插管,介入化疗2至3周后,施行肿瘤广泛切除并保存患肢功能.结果动脉介入后病理学检查,肿瘤均有不同程度坏死,体积缩小,周围水肿浸润带明显减少,肿瘤与邻近组织尤其大血管及神经间隙增宽,术中得以分离切除并保存患肢,术后随访10～52个月,患肢基本功能正常.结论对四肢软组织肿瘤,影像学检查大血管与神经受累但有保肢可能者,术前动脉介入化疗对提高切除率、降低局部复发与远处转移特别是保存患肢与功能起到积极作用.

作者：傅红；师英强；莫善兢；朱慰祺；周旭根；周烨 刊期： 2002年第01期

Bc-tIGF-1对NOD 小鼠T细胞亚群的调节作用

目的了解Bc-tIGF-1是否能预防NOD小鼠糖尿病(DM)的发生并探讨其免疫机制.方法4周龄时给NOD雌性小鼠腹腔注射(ip)Bc-tIGF-1 7.5μg/(kg@d),连续应用2周(n=10);同时等体积生理盐水ip 2周作为对照组(n=10).40周龄处死小鼠,测定血清C-肽和谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab),并观察脾脏T细胞亚群、胰岛病理和淋巴细胞免疫组化变化.结果Bc-tIGF-1组DM发病率(50%)明显低于NS组(90%,P＜0.05),且发病时间延缓,胰岛炎症程度也明显减轻;脾脏CD+4T淋巴细胞较NS组明显降低,CD+8细胞比例则显著升高(P＜0.01).免疫组化显示Bc-tIGF-1组胰岛CD+4T细胞浸润较对照组减少且局限在胰岛周围.两组的GAD-Ab阳性率无显著性差异.结论早期应用Bc-tIGF-1可减少和延缓NOD小鼠糖尿病发病,其机制可能与恢复CD+4和CD+8T细胞亚群平衡、抑制CD+4T细胞活动有关.

作者：刘芳；俞茂华；朱秋毓；颜怡谦；许祖德；杨秀芳；朱禧星 刊期： 2002年第01期

裸鼠高致瘤性K562-n细胞系基因表达谱的变化

目的探索K562和K562-n细胞在裸鼠体内致瘤性不同的分子生物学机制.方法应用基因芯片技术,检测K562细胞和K562-n细胞的差异表达基因.结果在被检测的12 800个基因中,一些与细胞增殖、分化及凋亡等相关基因的表达在高致瘤性K562-n与K562细胞中有显著的变化.表达上调的基因包括MAD-3基因、转录因子ⅡA(TFⅡA)λ亚基基因等,表达下调的基因包括人Fas相关因子基因、含转录子F2F2、ID3(DNA结合蛋白3)基因的染色体1p36.13～36.22、精氨琥珀酸裂解酶基因等.结论K562-n细胞的裸鼠高致瘤特性,和与细胞凋亡过程直接或间接相关的基因表达变化导致的细胞凋亡受阻有关.

作者：吕书晴；许小平；夏放；陈莉；李瑶；应康；毛裕民 刊期： 2002年第01期

经颅多普勒监测缺血性卒中患者脑动脉微栓子

目的了解缺血性卒中患者微栓子的发生率及其可能发病机制.方法采用德国FME TC-4040型经颅多普勒(TCD)检测仪,用sound track 2.4版本的软件对61例缺血性卒中患者双侧大脑中动脉(MCA)进行微栓子监测.监测时间不少于30 min,监测前常规行颈动脉B超检查.结果6例发现了微栓子(占9.83%),其中3例为心脏机械瓣膜修复术后患者(1例合并脑栓塞,另2例神经功能正常),另3例为非心源性脑梗死患者(占58例非心源性脑梗死患者中5.17%).3例颅外颈动脉狭窄的患者中1例微栓子阳性.在非心源性脑梗死患者中,仅于患侧MCA处监测到微栓子,而在心脏人工瓣膜修复术后患者中,双侧MCA均可监测到微栓子.结论非心源性脑梗死急性期微栓子阳性率低,可能与颅外颈动脉狭窄程度有关.

作者：傅建辉；吕传真；董强；洪震；周华琳 刊期： 2002年第01期

逆病毒载体介导的双耐药基因在小鼠骨髓细胞的转移

目的增强造血细胞对化疗药物的耐受性,探讨逆转录病毒介导的基因转移效率及耐药基因导入在造血细胞保护性基因治疗中的作用.方法应用电穿孔基因转移法将逆转录病毒载体G1Na-MGMT-IRES-MDR1导入病毒包装细胞GP+E86及PA317,以VCR加压筛选后的阳性克隆上清感染小鼠骨髓细胞,应用PCR、Southern bbt及流式细胞仪检测耐药基因MGMT及MDR1在细胞中的转移与表达.结果加压筛选及乒乓效应使病毒滴度由(0.2～7.6)×104 CFU/mL提高到(1.9～5 7)×106CFU/mL,从DNA、RNA及蛋白水平上分别证实了双耐药基因在小鼠骨髓细胞中获得了有效转移和表达,而转基因后的小鼠骨髓细胞对VCR、高三尖杉酯碱和BCNU的耐药性比未转导细胞分别提高了5.7、5.0和8.5倍.结论双耐药基因成功导入小鼠骨髓细胞为肿瘤基因治疗的临床研究提供了实验基础.

作者：周鑫莉；王季石；顾静文；林果为 刊期： 2002年第01期

中国汉族人群DXS15位点多态性研究及其应用

目的研究中国人群FⅧ基因旁微卫星序列DXS 15的多态性.方法用聚合酶链反应(PCR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,检测67名中国汉族人共103条X染色体DXS15位点的重复序列长度变化.结果中国人群中该位点有8种等位片段,多态信息量(polymorphism information content,PIC)为0 844.应用该位点多态性对一血友病甲家系进行连锁分析,一名可疑携带者被确认为正常人.结论该位点为血友病甲的高多态遗传标记之一,对血友病甲的携带者诊断和产前诊断具有重要价值.

作者：金洁；吴朝阳；刘木根；盛瑞兰；陆化；朱广荣；许文林 刊期： 2002年第01期