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骨髓基质细胞分化和其在缺血性心脏病治疗中应用

唐耀亮;赵强;杨英珍

关键词:骨髓基质细胞, 诱导, 心肌化
摘要:缺血性心脏病在我国的发病率逐年提高,一般认为出生后心肌细胞即失去分裂能力,一旦损伤发生,则只能由成纤维细胞所填充,终为瘢痕替代,并逐步发生心室重构形成慢性心力衰竭.目前常规采用的心肌再血管化只能解决心肌血供问题,而不能使坏死心肌修复.近年来研究发现心肌细胞移植有可能完全修复损伤心肌.细胞移植作为再血管化的辅助治疗已引起了心血管医生的高度重视,适靶细胞的选择成为成功的关键.目前公认移植细胞须具备3个条件:(1) 自体来源,无免疫排斥反应;(2) 在体内外有良好增生能力,快速修复损伤区并易于调控,无恶变可能;(3) 能在体内分化为心肌细胞,并与宿主细胞形成闰盘连接,形成正常电生理耦合.目前靶细胞的选择已从初的有免疫排斥反应和伦理问题的胚胎心肌细胞转向成体自身组织来源,而骨骼肌卫星细胞由于不能形成有效闰盘连接且取材和操作繁琐等方面缺点而使其应用价值受限,而自体骨髓基质细胞以其符合理想细胞移植要求而备受重视.
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  • 骨髓基质细胞分化和其在缺血性心脏病治疗中应用

    缺血性心脏病在我国的发病率逐年提高,一般认为出生后心肌细胞即失去分裂能力,一旦损伤发生,则只能由成纤维细胞所填充,终为瘢痕替代,并逐步发生心室重构形成慢性心力衰竭.目前常规采用的心肌再血管化只能解决心肌血供问题,而不能使坏死心肌修复.近年来研究发现心肌细胞移植有可能完全修复损伤心肌.细胞移植作为再血管化的辅助治疗已引起了心血管医生的高度重视,适靶细胞的选择成为成功的关键.目前公认移植细胞须具备3个条件:(1) 自体来源,无免疫排斥反应;(2) 在体内外有良好增生能力,快速修复损伤区并易于调控,无恶变可能;(3) 能在体内分化为心肌细胞,并与宿主细胞形成闰盘连接,形成正常电生理耦合.目前靶细胞的选择已从初的有免疫排斥反应和伦理问题的胚胎心肌细胞转向成体自身组织来源,而骨骼肌卫星细胞由于不能形成有效闰盘连接且取材和操作繁琐等方面缺点而使其应用价值受限,而自体骨髓基质细胞以其符合理想细胞移植要求而备受重视.

    作者:唐耀亮;赵强;杨英珍 刊期: 2002年第06期

  • c-erbB-2多克隆抗体的制备及特性分析

    目的制备针对表皮生长因子受体(c-erbB-2)细胞表面受体的抗体,不仅可阻止生长信号的传递,从而抑制肿瘤生长,还可通过抗体介导的细胞毒作用杀伤肿瘤细胞,具有重要的临床治疗应用价值.方法通过重组表达获得了纯化的c-erbB-2基因产物--融合蛋白GST-c-erbB-2,用此抗原制备兔抗血清,经rProtein G Agarose和Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化获得IgG型抗c-erbB-2蛋白的多克隆抗体.对此抗体进行了细胞表面特异识别、体外肿瘤细胞生长抑制等方面的功能研究.结果抗体可特异性识别重组表达蛋白、细胞表面c-erbB-2抗原,并与之结合;抗体对c-erbB-2阳性的人乳腺癌细胞SK-BR-3有特异性的杀伤作用,且呈剂量相关,而对c-erbB-2阴性的人乳腺癌细胞MCF-7则无明显作用.结论 c-erbB-2抗体通过其对c-erbB-2阳性细胞的特异识别和生长抑制,有广阔的临床应用前景.

    作者:顾斐;邹强;倪泉兴;徐永华 刊期: 2002年第06期

  • 吗氯贝胺与聚维酮固体分散体的研制及热力学

    目的探讨吗氯贝胺(MCB)在聚维酮(PVPκ30)中分散作用的热力学,研制MCB-PVPκ30固体分散体.方法采用溶解度法测定MCB的溶解度及其热力学参数,差示扫描量热分析(DSC)和X-射线衍射分析鉴定MCB在该固体分散体(SD)中存在状态,并进行体外溶出度研究.结果 MCB-PVPκ30表观稳定常数(Kc)在实验范围内随温度升高而减小,反应热(ΔH0)为-13.22 kJ/mol.经DSC、X-射线衍射分析,SD中药物晶体消失(1∶3),经统计学分析所有SD的溶出速率显著大于原药的溶出速率.结论 MCB在PVPκ30中分散作用是放热过程,MCB-PVPκ30SD提高了MCB的溶出度,有助于MCB SD的制备及开发具有高生物利用度的新剂型.

    作者:胡道德;毛丹卓;裴元英 刊期: 2002年第06期

  • 国产和进口盐酸氨溴索片溶出度比较

    盐酸氨溴索(ambroxol hydrochloride)为溴己新的活性代谢产物,是新一代呼吸道润滑祛痰药,能增强气道黏膜廓清功能,增加呼吸道液量,减少黏液分泌,有效地促进肺表面活性物质的分泌及支气管纤毛运动,使痰易于咳出.主要用于急慢性支气管炎、哮喘性支气管炎、支气管扩张、肺结核等引起的咳痰困难及手术前后咳痰困难.目前国内外均有厂家生产,为了评价其产品质量,我们对其进行了体外溶出度等各项指标的比较.

    作者:戈升荣;安富荣;曹惠明;俞一心 刊期: 2002年第06期

  • 三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞的诱导凋亡作用

    目的研究三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞(PIEC)的诱导凋亡作用.方法采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、细胞涂片苏丹Ⅲ染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后PIEC的变化.结果 PIEC细胞与三氧化二砷共孵育后出现细胞变圆、贴壁减少、上浮、细胞空泡样变性,脂肪颗粒增多;电镜等观察到核膜皱缩、核染色质凝结、边集等细胞凋亡现象,并且在一定的范围内该现象随药物浓度的增加而明显.结论一定浓度的三氧化二砷能抑制PIEC细胞的生长,细胞脂肪变性,并诱导细胞凋亡.提示向肿瘤组织局部导入三氧化二砷可以抑制肿瘤局部供血动脉内皮的生长,促进供血动脉闭塞.

    作者:瞿旭东;王建华;胡美玉 刊期: 2002年第06期

  • 血管紧张素Ⅱ对大鼠系膜细胞葡萄糖转运蛋白1表达的影响

    目的研究血管紧张素Ⅱ(ANG Ⅱ)、高糖及血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(AT1RA)对于大鼠系膜细胞(MCs)上葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达及MCs所合成的系膜区细胞外基质(ECM)的影响.方法采用免疫组化法检测大鼠系膜细胞上GLUT1蛋白的合成,半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)测定系膜细胞GLUTmRNA水平,ELISA法测定细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)的表达.结果 ANGⅡ作用后能显著增加大鼠MCsGLUT1的转录及蛋白合成(P<0.05),这种作用具有浓度及时间依赖性且能被AT1RA伊贝沙坦(Irbesartan)所阻断.高糖(27.8 mm1/L)作用4 h 后未能增加MCsGLUT1的转录及表达.ANG Ⅱ能使培养的MCs上清液中FN含量显著增加(P<0.001),Irbesartan能使增加的FN降低50.54%.结论 ANG Ⅱ能从转录水平刺激MCs上GLUT1的表达,增加ECM的合成,ANG Ⅱ的这种作用通过AT1受体介导并能被AT1RA阻断.ANG Ⅱ可通过上调GLUT1的表达参与糖尿病肾病(DN)的发生及发展.

    作者:尤莉;陆福明;杨海春;林善锬 刊期: 2002年第06期

  • Gas2基因在肝细胞癌中的表达及意义

    目的探讨Gas2基因在HCC中的表达规律及与HCC中细胞凋亡和增殖的关系.方法对36例癌、癌旁肝组织及8例正常肝组织,应用石蜡切片原位杂交技术观察 Gas2 mRNA 在 HCC 中的表达.TUNEL 技术检测凋亡细胞(APOP),免疫组织化学方法检测 PCNA 的表达作为细胞增殖的参数.结果肝癌、癌旁及正常肝组织中均有半数以上病例有 Gas2 mRNA 表达,但肝癌组阳性积分显著高于癌旁和正常肝.Gas2 mRNA 表达高的组织内见较多凋亡细胞,以不同病理特征分组中,Gas2 mRNA 阳性积分与 APOP 阳性分值多呈现一致性.Gas2 mRNA 表达与细胞增殖无明显相关.结论 Gas2 mRNA 在癌内表达明显较高,其阳性表达与细胞凋亡关系较密切,Gas2 基因有可能通过影响细胞的凋亡状况而在 HCC 的生长过程中起作用.

    作者:成宇帆;翟为溶;朱腾方;张萍萍 刊期: 2002年第06期

  • 早期干预在窒息新生儿中的应用

    目的探讨早期干预应用于窒息新生患儿中,对新生儿智力发育的作用.方法 67例窒息儿随机分为干预组35例,对照组32例,对干预组从新生儿起干预至24个月.结果两组患儿在24个月时盖氏测定总的精神运动发育商(DQ),干预组105.7±15.53,对照组90.6±14.22,干预组明显高于对照组,而且干预组无一例发生脑瘫,对照组有2例.结论早期干预能促进窒息儿的智能发育,值得在临床上推广应用.

    作者:陈碧琴;彭巧娣;张宝发 刊期: 2002年第06期

  • 遗传性非息肉病性结直肠癌的临床特征与诊断原则

    作者: 刊期: 2002年第06期

  • 儿童阴道病512例临床分析

    目的探讨儿童阴道病的临床特征、病原菌的分布及治疗.方法对512例儿童阴道病患儿进行阴道分泌物细菌及人型和解脲支原体培养,部分子宫卵巢的B超检查.结果 512例患儿细菌培养阳性率达66.6%.菌谱中葡萄球菌与大肠杆菌占71.8%.培养阳性组采用敏感药物治疗总有效率达90%;培养阴性组中有36例抗早熟治疗后症状消失,4例支原体培养阳性患儿经红霉素治疗后痊愈.结论对儿童阴道病患儿常规进行细菌培养+药敏试验是必要的,早熟患儿可表现出阴道病症状,对因治疗可消除.对久治不愈患儿应予支原体培养,阳性者红霉素治疗有效.

    作者:王榴慧;周莲宝;王传清 刊期: 2002年第06期

  • 高强度聚焦超声联合丝裂霉素治疗对荷瘤小鼠T细胞水平的影响

    目的研究高强度聚焦超声(HIFU)联合丝裂霉素治疗对T739小鼠T细胞水平的影响.方法制作小鼠膀胱肿瘤(BTT739)皮下种植模型共31只,随机分荷瘤对照组、低剂量化疗组、高剂量化疗组、HIFU治疗组和HIFU联合化疗组.荷瘤对照组未用任何治疗,其余按分组运用HIFU、丝裂霉素进行治疗.2周后采血检测各组外周血T细胞亚群差异.结果荷瘤对照组、低剂量化疗组、高剂量化疗组、HIFU组和HIFU联合化疗组小鼠CD4(%)分别为:17.76±1.06、17.00±1.82、13.53±1.35、23.19±4.87、21.34±5.27;CD8(%)分别为:9.14±0.76、9.22±1.99、11.65±4.57、12.98±4.71、20.82±8.44;CD4/CD8分别为:1.96±0.28、1.92±0.50、1.29±0.43、2.02±0.84、1.20±0.61(P<0.05).结论 HIFU有助于增强机体抗肿瘤免疫,HIFU联合丝裂霉素治疗对提高疗效有积极意义.

    作者:杨渊峰;王国民;孙立安;徐志兵;徐叶青 刊期: 2002年第06期

  • 静脉复合胸段硬膜外阻滞对兔心肌梗死后c-fos和HSP70基因表达的影响

    作者: 刊期: 2002年第06期

  • 不同T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异

    目的在体内和体外研究SEA再次刺激后Vβ3+ CD4+和Vβ3+ CD8+T细胞亚群的免疫反应,探讨CD4+和CD8+T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异.方法分离小鼠超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)应答性Vβ3+ CD4+和Vβ3+ CD8+两个T细胞亚群,检测其对SEA再次刺激的增殖反应及产生IL-2活性.结果 Vβ3+ CD4+和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群对SEA再次刺激所诱导的增殖反应以及产生IL-2活性的能力有显著差异(P<0.01).结论 SEA单次刺激时Vβ3+ CD4+和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群反应性相似,再次刺激时Vβ3+ CD8+呈显著低反应性.

    作者:张瑞华;陈露秋;储以微;刘瑞梓;王缨;熊思东 刊期: 2002年第06期

  • 骨间前神经的应用解剖

    目的了解骨间前神经(AION)及其局部联属的解剖特点,加深对该神经卡压后症状的理解,为临床提供更加适合的手术方式.方法解剖38侧成人尸体,肉眼及镜下观察前骨间神经与其周围结构的联属关系.结果常见可能引起AION卡压的结构为中指指屈浅肌腱腱弓(出现率44.7%)、拇长屈肌副头(出现率34.2%)、旋前圆肌下方腱性组织(13.1%)、横跨AION上方的血管(21.1%)等.结论临床卡压的形成可能是多因素共同作用的结果,卡压可以来自前方也可以来自后方.术中应尽可能松解已经存在和潜在的卡压结构.

    作者:李学渊;陈德松 刊期: 2002年第06期

  • 系统性红斑狼疮的传递/不平衡分析

    目的应用传递/不平衡方法,分析HLA-D区系统性红斑狼疮(SLE)等位基因的家系相关性.方法对42个SLE家系提取DNA,PCR并进行杂交,根据DQA1、DQB1、DRB1位点的关联分析结果,对这3个位点关联显著的等位基因进行传递/不平衡分析.结果 DQA1*0102在家系中经TDT传递不平衡检验,χ2=5.80,Pc<0.05;DQA1*0501,χ2=3.24,P>0.05;DQB1、DRB1位点等位基因经TDT与sTDT的联合检验,未发现显著相关性,z值均小于1.96,P>0.05.结论传递/不平衡检验结果发现, DQA1*0102等位基因与SLE相关,提示该等位基因可能是中国南方汉族人群中与SLE有关的一个易感等位基因.

    作者:孟炜;张卫华;沈福民;江峰;秦万章;金岚 刊期: 2002年第06期

  • 粪类圆线虫病相关肾病综合征的临床分析

    目的探讨粪类圆线虫病(SD)相关肾病综合征(NS)的临床表现、诊断与治疗特点.方法通过6例患者的病因、临床特征及诊治过程进行综合分析.结果 SD起病先于NS,临床表现不典型,易被NS掩盖而忽视;SD与NS间有明显相关性;阿苯达唑对本病疗效较好.结论 SD是继发性NS的原因之一,应引起临床医师的重视.

    作者:吴锡信;郑志雄 刊期: 2002年第06期

  • 胃癌的治疗近况

    胃癌首选的治疗方法仍是手术切除,但术后并发症给患者带来不少的痛苦,因此不少学者强调为提高患者的生活质量,应用微创外科技术来治疗早期胃癌.

    作者:Amegbegnuie Komlan Agbessi;蔡端 刊期: 2002年第06期

  • PKB的PH结构域在原核表达及其纯化和活性

    目的利用原核系统表达原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶B(PKB)的PH结构域,为进一步研究其结构和功能奠定基础.方法我们构建了PKB的PH结构域的表达质粒,在大肠杆菌中表达出PH结构域,并利用蛋白N端加入的组氨酸标签进行亲和层析及离子交换层析纯化蛋白.结果在大肠杆菌中表达的PH结构域以包涵体形式存在,经变性和复性后成为具有天然构象的可溶性蛋白,经亲和层析和离子交换层析纯化的PH结构域具有与磷脂酰肌醇PI*.4,5*.P2的结合能力,证明其具有生物学活性.结论本方法成功表达纯化了PKB的PH结构域,可用作PH结构域结构和功能的进一步研究.

    作者:施冬云;魏廉;黄伟达;刘珊林;徐伯赢;申宗侯 刊期: 2002年第06期

  • STZ糖尿病大鼠心肌短型瘦素受体基因的转录表达及心脏纤维化观察

    目的研究瘦素受体在STZ糖尿病大鼠心肌中转录表达及心脏的纤维化情况.方法用STZ制备糖尿病大鼠模型,在病程12周时测定大鼠血压和心功能后处死,取心肌组织和分离、培养心脏成纤维细胞,用RT-PCR检测长、短型瘦素受体mRNA转录表达,PCR产物测序,电镜观察心肌的超微结构.血清瘦素、胰岛素放射免疫测定.结果 STZ糖尿病大鼠和对照鼠心肌均可转录表达短型瘦素受体mRNA,两组之间无显著差别,但糖尿病心肌成纤维细胞短型瘦素受体mRNA表达较高,伴心功能减退和显著的心脏纤维化病理改变.结论糖尿病大鼠心脏成纤维细胞短型瘦素受体表达增加与心脏纤维化并存.

    作者:周丽诺;沈稚舟;吴烯;张琳;杨叶虹;方京冲;俞茂华;朱禧星 刊期: 2002年第06期

  • 草分支杆菌疫苗治疗哮喘模型小鼠的实验研究

    目的研究草分支杆菌疫苗对哮喘模型小鼠的疗效及其作用机制.方法将18只BALB/c小鼠分为3组,每组各6只,其中卵蛋白致敏哮喘组(OVA组)和草分支杆菌疫苗治疗组(Utilin组)皮下注射卵蛋白致敏制作哮喘模型,然后用卵蛋白激发2次;阴性对照组(NS组)皮下注射生理盐水(NS),然后NS激发2次.Utilin组在激发前后分别给予草分支杆菌疫苗0.5 μg腹腔注射3次,其他两组不作干预.3组分别在第2次激发后第1、2、3、4周眼眶后静脉丛采血测OVA特异性免疫球蛋白IgE,并于激发后第4周处死小鼠测肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)计数,肺组织病理切片观察形态学改变,并测定脾细胞培养上清液中OVA特异性IFN-γ.结果 Utilin组BALF中细胞总数为(29.51±5.81)×104/mL、EOS为(2.88±0.96)×104/mL,明显低于OVA组[分别为(40.15±6.12)×104/mL和(6.91±1.92)×104/mL],P<0.05;Utilin组肺组织炎症反应较OVA组明显减轻;Utilin组脾细胞培养上清液中OVA特异性IFN-γ的浓度为(469±86)pg/mL,明显高于OVA组(193±80)pg/mL,P<0.05;Utilin组激发后第3周和第4周OVA特异性IgE分别为(0.299±0.092)(OD值),(0.267±0.085)(OD值),较OVA组[分别为(0.458±0.091)和(0.385±0.096)]明显下降,P<0.05.结论草分支杆菌疫苗是有效的免疫调节剂,可能通过调节1型T辅助细胞/2型T辅助细胞的平衡,达到治疗哮喘的作用.

    作者:金美玲;蔡映云;任涛;郑玲洁 刊期: 2002年第06期

复旦学报(医学版)杂志

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