林宁；梁松；曹新国；张敏；史春梅；季晨博；郭锡熔
目的 研究microRNA-328(miR-328)和microRNA-155(miR-155)在急性冠脉综合征(ACS)患者血浆中的水平及其在ACS诊断和鉴别诊断中的价值.方法 收集56例ACS患者[其中24例为不稳定心绞痛(UA),32例为急性心肌梗死(AMI)]和20例体检健康者,分析两组一般临床资料及相关生化指标；用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组研究对象血浆miR-328及miR-155的含量,并分析其与心肌肌钙蛋白T(cTnT)的相关性.结果 ACS组与健康对照组血浆miR-328为(8.12±3.81 vs 1.00±0.00),差异有统计学意义(t=7.924,P＜0.05)；AMI亚组与UA亚组血浆miR-328含量为(10.69±2.17 vs 4.26±2.06),差异有统计学意义(t=7.227,P＜0.05).ACS组与健康对照组血浆miR-155含量为(1.00±0.26 vs1.00±0.00),AMI亚组与UA亚组血浆miR-155含量为(1.02±0.28 vs 0.96±0.22),差异均无统计学意义(P＞0.05).血浆miR-328水平与cTnT呈正相关(r=0.434,P＜0.05)；ACS患者血浆miR-155水平与cTnT无相关性(r=-0.233,P＞0.05).结论 miR-328在ACS患者血浆中水平升高,可能作为ACS诊断及鉴别诊断的潜在生物标志物.
作者：吕品；赵雪；贺付成；王玺 刊期： 2013年第07期
目的 对小鼠皮肤中miR-206-3p及其靶基因脑源性神经营养因子(Bdnf)进行表达与定位检测,以探讨其在皮肤发育过程中的可能作用.方法 手术剪取13.5 dpc(交配后天数)、15.5 dpc、17.5 dpc胎鼠,1 dpp(出生后天数)、4 dpp乳鼠及16周龄雄鼠的背部全层皮肤,用实时荧光定量RT-PCR检测miR-206-3p与Bdnf mRNA的表达水平,western blot检测BDNF蛋白质表达水平,原位杂交与免疫组化分别检测miR-206-3p与BDNF的组织定位.结果 皮肤中miR-206-3p在胚胎期持续升高,到17.5 dpc后逐渐降低,于成年鼠时回复至13.5 dpc时水平；BDNF表达趋势与miR-206-3p相反,而Bdnf mRNA在17.5 dpc至成年鼠并无显著改变.miR-206-3p的分布在皮肤发育过程中逐渐区域化,在出生后主要分布于上基部和毛囊外周,与同期BDNF表达区域毗邻但不重叠.结论 miR-206-3p可能通过转录后调控Bdnf参与了小鼠皮肤神经发育过程.
作者：穆原；周红；李文艳；李耀武 刊期： 2013年第07期
用参考方法测量血清总蛋白时,选择合格试剂是做好测量的前提.双缩脲溶液中低浓度的五水硫酸铜(CuSO4·5H2O)和高浓度的碱溶液形成[Cu(OH)4]2-络离子,四水酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)具有络合作用可以保护[Cu(OH)4]2-不被析出形成沉淀,防止试剂失效.筛选合格的KNaC4H4O6·4H2O试剂对保证配制试剂的性能具有重要作用.本研究主要探讨如何筛选符合参考方法测量总蛋白要求的KNaC4H4O6·4H2O试剂.
作者：李月玲；邵燕；孙慧颖；胡滨；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
我们在日常工作中发现分别检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、清蛋白(A1b)、总胆红素(T-Bil)、直接胆红素(D-Bil)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)后检测钙浓度偏低,怀疑试剂携带污染对钙测定造成了负干扰.
作者：王毅；何咏婷；刘银河 刊期： 2013年第07期
慢性病贫血(anemia of chronic disease,ACD)是指在慢性感染、炎症、肿瘤和创伤等原发病基础上伴发的一组轻、中度贫血,以无效造血和铁代谢紊乱为特征.hepeidin(铁调素)是在2000年发现的富含半胱氨酸的小分子抗菌肽,在铁代谢及ACD进展中发挥重要作用[1].本研究通过检测ACD、再生障碍性贫血(AA)、缺铁性贫血(IDA)患者铁调素(hepcidin)表达水平,探讨其与骨髓贮存铁的关系.
作者：常洪劲；陈丽；陈春丽 刊期： 2013年第07期
目的 探讨不同评价标准对便携式血糖仪血糖测量结果正确度和精密度评价结果的影响.方法 以5个水平冰冻人血清葡萄糖标准物质为评价样本评价A～E5种常用便携式血糖仪的正确度和精密度,分别按计量学溯源标准、国标标准判断各血糖仪测量结果的正确度,分别按国标标准、自定义标准判断各血糖仪测量结果的精密度.结果 按计量学溯源标准判断,各血糖仪血糖测量结果的正确度均不可接受；按国标标准判断,B血糖仪血糖测量结果的正确度可接受,其他均不可接受.按国标标准,血糖测量结果的精密度均符合要求；按自定义标准,D、E2种血糖测量结果的精密度不符合要求.结论 用不同的正确度、精密度评价标准可得出不同的结论,血糖仪测量结果正确度、精密度的评价方法亟待完善.
作者：邵燕；胡滨；孙慧颖；李月玲；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
目的 比较两种结核分枝杆菌γ-干扰素释放试验对结核病的诊断性能.方法 用TB-IGRA试剂(ELISA)和T-SPOT.TB试剂(酶联免疫斑点法)对44例结核病患者、31例非结核患者及25例健康人的外周血标本进行检测,评价两种方法的诊断效能和结果一致性.结果 T-SPOT.TB法敏感性为90.9％(40/44),特异性为89.3％(50/56),阳性预测值为87.0％(40/46),阴性预测值为92.6％ (50/54).TB-IGRA法敏感性为88.6％(39/44),特异性为83.9％ (47/56),阳性预测值为81.3％(39/48),阴性预测值为90.2％(46/51).2种方法的Youden指数分别为0.802和0.725,差异无统计学意义(μ=0.846,P ＞0.05).2种方法结果一致率为86.0％(86/100),Kappa值为0.72.结论 TB-IGRA和T-SPOT.TB诊断结核病性能相当,结果有较高的一致性.TB-IGRA操作和结果判定更为简便.
作者：郑建洲；王亚楠；俞小卫 刊期： 2013年第07期
目的 利用碱基猝灭探针技术建立检测编码α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的新型诊断方法.方法 探针3′端标记6-羧基荧光素,同时构建2个载体作为阳性对照模板,分别代表两种可能的纯合子基因型,即野生型和PiZZ纯合突变型.用熔解曲线对两种不同基因型结果进行分析判断,并验证检测方法的准确性和灵敏度.结果 熔解曲线分析显示,338例患者标本均在50℃左右出现熔解谷,即所有标本均为野生型；Kappa检验结果显示,该法的检测结果与DNA测序法完全一致(k=1,P=0.000).灵敏度分析结果显示,模板DNA量在103拷贝时可以看到明显的熔解谷.结论 构建的方法准确、简单、经济,适合大规模对α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的分型诊断.
作者：秦莉；张俊；冯悦华；罗光华 刊期： 2013年第07期
目的 观察LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响.方法 体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,分别构建YRM1基因过表达细胞株(LYRM1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1/myc-His B)；实时定量RT-PCR验证转染情况；RT-PCR检测诱导分化成熟后的线粒体代谢酶HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C基因表达水平.结果 RT-PCR结果证实LYRM1质粒转染成功；与空载对照组比较,LYRMl过表达组HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C mRNA表达水平均显著降低(P均＜0.05).结论 LYRM1基因过表达下调了3T3-L1脂肪细胞中线粒体的代谢关键酶基因表达水平,可能参与调节脂肪细胞线粒体的代谢.
作者：林宁；梁松；曹新国；张敏；史春梅；季晨博；郭锡熔 刊期： 2013年第07期
目的 探讨血栓弹力图(TEG)监测妊娠合并血小板减少症孕妇凝血功能的应用价值.方法 选择于我院就诊的妊娠合并血小板减少症孕妇56例[按血小板计数＜50×109/L、(50～79)×109/L、(80 ～99)×109/L分为A、B、C组]及同期健康孕妇226例,分别检测R值、K值、α值、MA值、CI值、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)与纤维蛋白原(Fib).结果 妊娠合并血小板减少组与健康孕妇对照组比较,R值、K值、PT值、APTT值升高(t分别为2.28、5.80、3.05、3.87,P均＜0.05),α值、MA值、CI值降低(t分别为-6.67、-6.37、-6.30,P均＜0.01).妊娠合并血小板减少组中B、C组K值低于A组(P均＜0.05),α值、MA值与CI值高于A组(P均＜0.05).R值、K值、α值、MA值、CI值与PLT值相关,相关系数(r)分别为-0.13、-0.56、0.61、0.64、0.59,P均＜0.05；PT、APTT、TT、Fib值与PLT值间均无相关性.结论 TEG较传统凝血四项更能反映血小板减少症孕妇凝血功能状态.
作者：章莉；俞菁；侯雅萍；胡荷宇；李海川；俞琼琰；谭美玉；何虹；龚波 刊期： 2013年第07期
目的 构建hsa-miR-26b沉默载体,与其靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞验证其沉默效果.方法 用miRNA海绵体技术设计并合成与hsa-miR-26b成熟序列反向互补的3个重复序列的双链DNA,将短发卡状RNA(shRNA)克隆入LV3-GFP-Puro载体,与靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞,于24 h后收集细胞RNA,用real-time PCR检测hsa-miR-26b表达水平,同时用双荧光素报告系统检测其对靶基因的作用.结果 成功构建了有效的hsa-miR-26b沉默载体,经测序验证与设计序列一致；real-time PCR验证hsa-miR-26b表达水平降低了75％；双荧光素报告系统验证其对靶基因无抑制作用(P＞0.05).结论 成功构建hsa-miR-26b沉默载体,并验证其对靶基因PTEN无抑制作用.
作者：史春梅；徐广峰；宋桂仙；季晨博；陈玲；杨蕾；庞玲霞；赵亚萍；郭锡熔 刊期： 2013年第07期
目的 了解鲍曼不动杆菌主动外排系统和外膜蛋白基因的表达情况,探讨其在介导细菌多重耐药中的作用.方法 K-B法和琼脂二倍稀释法检测100株鲍曼不动杆菌临床分离株的药物敏感性；PCR扩增adeB、adeJ、carO基因；实时荧光定量PCR检测外排泵AdeABC、AdeIJK的mRNA表达水平.结果 100株中有75株多重耐药株,对米诺环素和多黏菌素B的耐药率分别为60.0％和0％；多重耐药组与敏感组adeB基因阳性率分别为82.7％(62/75)和44.0％(11/25),carO基因阳性率分别为98.7％ (74/75)和40.0％(10/25),差异均有统计学意义(x2分别为14.223和48.016,P均＜0.05).敏感和多重耐药两组间adeB基因相对表达量差异有统计学意义(t=4.209,P＜0.01),而两组间adeJ基因相对表达量结果无显著性差异.结论 鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药情况严重；adeB基因在多重耐药及部分敏感株中表达量明显增加；AdeA BC主动外排系统在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中具有一定的作用.
作者：吴春阳；钱雪峰；张险峰；顾国浩 刊期： 2013年第07期
异形淋巴细胞为抗原刺激后的一类转化型细胞,其胞核和胞质都有形态学改变,特征为细胞体积增大,胞质嗜碱性增强、出现空泡,胞核变大、染色质疏松、甚至出现核仁,是一种形态异常的淋巴细胞.《全国临床检验操作规程》第3版将其称为异形淋巴细胞,国内外有称变异淋巴细胞(variant lymphocyte)[1-2],有称不典型淋巴细胞(atypical lymphocyte)[3],也有称反应性淋巴细胞(reactive lymphocyte)[4].不同的命名既影响了临床教学,也困扰着临床医师的诊疗工作,甚至引起患者疑虑.
作者：郝冀洪；李顺义 刊期： 2013年第07期
地中海贫血(地贫)是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致的遗传性溶血性贫血[1],我国以广东、广西、海南等发病率较高,北方地区较为少见[2].目前研究多集中在胎儿地贫基因的缺失或点突变基因诊断,较少关注胎儿染色体核型.为了解地贫孕妇与胎儿染色体核型关系及胎儿染色体的核型,本研究对用裂口PCR (gap-PCR)和PCR结合反向斑点杂交(RDB-PCR)检测确诊为地贫的孕妇进行羊水检测,并对胎儿染色体进行核型分析.
作者：邓国生；张炬光；何芳 刊期： 2013年第07期
Nucleostemin(NS)基因在干细胞中高表达,在干细胞分化时迅速减少,参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控,维持干细胞扩增并抑制其向成熟细胞分化,从而阻止细胞凋亡.NS基因在肿瘤细胞干细胞特性维持中也起重要作用.NS蛋白以依赖于GTP的形式穿梭于核仁和核质之间,参与核糖体特别是前核糖体rRNA的装配过程.NS基因与肿瘤发生关系密切,或可作为靶向治疗的候选基因.
作者：韩崇旭；许文荣；孙艳 刊期： 2013年第07期
SLE和类风湿关节炎(RA)的分类标准对这两种疾病患者的早期发现、临床准确诊断和规范化治疗至关重要.数十年来,分类标准不断更新、修订和完善.医学检验人员在撰写论文时应采用新修订的分类标准,避免使用二、三十年前的分类标准.本文介绍了SLE和RA分类标准的演变进程,望广大医学检验人员了解其新的分类标准,熟悉并掌握各项新的实验室检测指标.
作者：武建国 刊期： 2013年第07期
目的 探讨高分辨率熔解曲线(HRM)法检测结直肠癌患者循环DNA中KRAS和EGFR基因突变的可行性.方法 用HRM法检测70例结直肠癌患者KRAS基因2号和3号外显子以及EGFR基因19和21号外显子的突变情况,用直接测序法验证结果的准确性.结果 70例结直肠癌患者血液标本经HRM法、直接测序法分别检测到18例(25.7％)和17例(24.3％)KRAS基因2号外显子突变；均检测到3例EGFR基因19号外显子突变(4.3％)；两法均未检测到3号外显子和21号外显子突变.HRM检测与直接测序法结果符合率为99.6％ (279/280).结论 HRM法检测结直肠癌患者血样本KRAS和EGFR基因突变,具有准确度高、操作简单、检测成本低等优点,适合在临床推广应用.
作者：曾俊萍；尹苹；徐克前 刊期： 2013年第07期
目的 评价血清葡萄糖(Glu)常规检测系统测量结果的正确度.方法 用参考方法和7种常规系统(A～G)测量5种不同浓度的血清Glu标准物质和30份Glu浓度为1.88～20.72 mmol/L的冰冻人血清样本(分光光度法),按分析标准物质法、方法学比对法分别评价7种常规系统测量结果的正确度.结果 依据计量学溯源标准,按分析标准物质法评价,A常规系统Glu测量结果正确度可接受,B～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受；按方法学比对法评价,A～C常规系统Glu测量结果正确度可接受,D～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受.结论 用不同方法评价Glu测量结果的正确度时,同一常规系统的评价结论可能不一致,实验室应选择合适的正确度评价方法并使用符合ISO 15189正确度要求的血清Glu常规检测系统.
作者：孙慧颖；邵燕；胡滨；李月玲；张天骄；张传宝；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
目的 探讨LSMI基因多态性与江苏地区汉族人精神分裂症的关联性.方法 用连接酶检测反应PCR (LDR-PCR)单核苷酸多态性(SNP)分型技术对506例精神分裂症患者和522例健康对照者LSM1基因rs16887244、rs2843738、rs2843746 3个标签单核苷酸多态性(tgSNP)进行基因分型,比较各组间等位基因、基因型分布频率.结果 与健康对照组比较,精神分裂症组rs16887244等位基因分布频率差异不显著(OR =0.992,P=0.935)；rs2843738和rs2843746等位基因分布频率也无显著差异(OR分别为1.036,1.013,P均＞0.05)；rs16887244基因型(AA/AG/GG)、rs2843738基因型(CC/CG/GG)和rs2843746基因型(CC/CT/TT)分布频率均无显著差异(x2分别为0.511,0.147,5.981,P均＞0.05).结论 江苏地区汉族精神分裂症患者与LSM1基因rs16887244、rs2843738、rs2843746多态性不相关.
作者：俞水；金春慧；袁建民 刊期： 2013年第07期
目的 探讨肺癌患者外周血单个核细胞中CD28/B7家族共刺激分子mRNA的表达水平.方法 收集50例(鳞癌24例,腺癌26例)肺癌患者作为疾病组,50例体检健康者作为健康对照组,提取外周血单个核细胞,用Taqman探针实时荧光定量RT-PCR检测各组CD28、CD80、CD86、CTLA-4 mRNA的表达情况.结果 肺癌患者CD28、CD80、CD86、CTLA-4 mRNA表达水平均低于健康对照组(P均＜0.05)；鳞癌组CD28、CD80、CTLA-4 mRNA表达水平低于腺癌组(P＜0.05),CD86稍高于腺癌组(P＞0.05),但均低于健康对照组(P均＜0.05).结论 肺癌患者CD28/B7家族共刺激分子表达降低,且与组织学类型有关,可能导致免疫系统发生紊乱.
作者：赵春楠；史进方；周志英；沈怡敏；蒋敏；彭群新；王琳；顾国浩 刊期： 2013年第07期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
