吴春阳；钱雪峰；张险峰；顾国浩
用参考方法测量血清总蛋白时,选择合格试剂是做好测量的前提.双缩脲溶液中低浓度的五水硫酸铜(CuSO4·5H2O)和高浓度的碱溶液形成[Cu(OH)4]2-络离子,四水酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)具有络合作用可以保护[Cu(OH)4]2-不被析出形成沉淀,防止试剂失效.筛选合格的KNaC4H4O6·4H2O试剂对保证配制试剂的性能具有重要作用.本研究主要探讨如何筛选符合参考方法测量总蛋白要求的KNaC4H4O6·4H2O试剂.
作者：李月玲；邵燕；孙慧颖；胡滨；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
目的 观察LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响.方法 体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,分别构建YRM1基因过表达细胞株(LYRM1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1/myc-His B)；实时定量RT-PCR验证转染情况；RT-PCR检测诱导分化成熟后的线粒体代谢酶HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C基因表达水平.结果 RT-PCR结果证实LYRM1质粒转染成功；与空载对照组比较,LYRMl过表达组HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C mRNA表达水平均显著降低(P均＜0.05).结论 LYRM1基因过表达下调了3T3-L1脂肪细胞中线粒体的代谢关键酶基因表达水平,可能参与调节脂肪细胞线粒体的代谢.
作者：林宁；梁松；曹新国；张敏；史春梅；季晨博；郭锡熔 刊期： 2013年第07期
我们在日常工作中发现分别检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、清蛋白(A1b)、总胆红素(T-Bil)、直接胆红素(D-Bil)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)后检测钙浓度偏低,怀疑试剂携带污染对钙测定造成了负干扰.
作者：王毅；何咏婷；刘银河 刊期： 2013年第07期
目的 初步建立长沙地区健康人群胃蛋白酶原(PG)参考区间,为本地区胃癌的早期筛查提供依据.方法 选择长沙地区体检健康者1 793例,用ELISA法检测血清PG Ⅰ、PGⅡ,计算PG Ⅰ/PGⅡ比值,并作统计学分析.结果 PG Ⅰ参考区间:18 ～ 59岁为(69.5～176.9) μg/L,≥60岁为(80.8～184.2) μg/L.PGⅡ参考区间:18～44岁男性为(0～14.8) g/L、女性为(0～14.6) μg/L,45～ 59岁男性为(0～18.5) μg/L、女性为(0～18.3) μg/L,≥60岁为(0～19.0) μg/L.PG Ⅰ/PGⅡ比值的参考区间:18 ～44岁男性为≥8.8、女性为≥9.2,45～ 59岁男性为≥7.5、女性为≥7.4,≥60岁为≥7.1.结论 初步建立了长沙地区健康人群血清PG参考区间,可为本地区胃癌早期筛查提供参考.
作者：钟一鸣；刘文恩；李艳华；陈伟；罗珊 刊期： 2013年第07期
目的 了解我院鲍曼不动杆菌(AB)的耐药率,探讨广泛耐药AB感染的临床用药新途径.方法 分析我院2007年1月至2011年12月临床各类送检标本中AB的耐药状况,采用微量棋盘稀释法测定头孢他啶和米诺环素对临床分离的广泛耐药鲍曼不动杆菌(XDR-AB)联合药敏情况,计算部分抑菌浓度(FIC)指数.结果 分离出的326株AB对17种抗菌药物的耐药率总体呈逐年上升趋势,其中包括XDR-AB 110株.头孢他啶与米诺环素联合应用有协同作用(77.3％)和相加作用(20.0％),2.7％的菌株表现为无关作用,未发生拮抗作用.结论 AB耐药率逐年上升,头孢他啶与米诺环素联合药敏试验对97.3％的XDR-AB菌株有协同或相加作用.
作者：彭健桥；仇杭佳；李帼宁 刊期： 2013年第07期
目的 对小鼠皮肤中miR-206-3p及其靶基因脑源性神经营养因子(Bdnf)进行表达与定位检测,以探讨其在皮肤发育过程中的可能作用.方法 手术剪取13.5 dpc(交配后天数)、15.5 dpc、17.5 dpc胎鼠,1 dpp(出生后天数)、4 dpp乳鼠及16周龄雄鼠的背部全层皮肤,用实时荧光定量RT-PCR检测miR-206-3p与Bdnf mRNA的表达水平,western blot检测BDNF蛋白质表达水平,原位杂交与免疫组化分别检测miR-206-3p与BDNF的组织定位.结果 皮肤中miR-206-3p在胚胎期持续升高,到17.5 dpc后逐渐降低,于成年鼠时回复至13.5 dpc时水平；BDNF表达趋势与miR-206-3p相反,而Bdnf mRNA在17.5 dpc至成年鼠并无显著改变.miR-206-3p的分布在皮肤发育过程中逐渐区域化,在出生后主要分布于上基部和毛囊外周,与同期BDNF表达区域毗邻但不重叠.结论 miR-206-3p可能通过转录后调控Bdnf参与了小鼠皮肤神经发育过程.
作者：穆原；周红；李文艳；李耀武 刊期： 2013年第07期
慢性病贫血(anemia of chronic disease,ACD)是指在慢性感染、炎症、肿瘤和创伤等原发病基础上伴发的一组轻、中度贫血,以无效造血和铁代谢紊乱为特征.hepeidin(铁调素)是在2000年发现的富含半胱氨酸的小分子抗菌肽,在铁代谢及ACD进展中发挥重要作用[1].本研究通过检测ACD、再生障碍性贫血(AA)、缺铁性贫血(IDA)患者铁调素(hepcidin)表达水平,探讨其与骨髓贮存铁的关系.
作者：常洪劲；陈丽；陈春丽 刊期： 2013年第07期
目的 利用碱基猝灭探针技术建立检测编码α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的新型诊断方法.方法 探针3′端标记6-羧基荧光素,同时构建2个载体作为阳性对照模板,分别代表两种可能的纯合子基因型,即野生型和PiZZ纯合突变型.用熔解曲线对两种不同基因型结果进行分析判断,并验证检测方法的准确性和灵敏度.结果 熔解曲线分析显示,338例患者标本均在50℃左右出现熔解谷,即所有标本均为野生型；Kappa检验结果显示,该法的检测结果与DNA测序法完全一致(k=1,P=0.000).灵敏度分析结果显示,模板DNA量在103拷贝时可以看到明显的熔解谷.结论 构建的方法准确、简单、经济,适合大规模对α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的分型诊断.
作者：秦莉；张俊；冯悦华；罗光华 刊期： 2013年第07期
目的 构建hsa-miR-26b沉默载体,与其靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞验证其沉默效果.方法 用miRNA海绵体技术设计并合成与hsa-miR-26b成熟序列反向互补的3个重复序列的双链DNA,将短发卡状RNA(shRNA)克隆入LV3-GFP-Puro载体,与靶基因PTEN共转染HEK-293T细胞,于24 h后收集细胞RNA,用real-time PCR检测hsa-miR-26b表达水平,同时用双荧光素报告系统检测其对靶基因的作用.结果 成功构建了有效的hsa-miR-26b沉默载体,经测序验证与设计序列一致；real-time PCR验证hsa-miR-26b表达水平降低了75％；双荧光素报告系统验证其对靶基因无抑制作用(P＞0.05).结论 成功构建hsa-miR-26b沉默载体,并验证其对靶基因PTEN无抑制作用.
作者：史春梅；徐广峰；宋桂仙；季晨博；陈玲；杨蕾；庞玲霞；赵亚萍；郭锡熔 刊期： 2013年第07期
目的 建立快速鉴定致病真菌的多重PCR体系.方法 选取19种致病真菌的rDNA内部转录间隔区(ITS)序列设计引物,建立两个多重PCR体系,扩增临床与环境分离真菌菌株、人类细胞及9种常见细菌DNA,检测体系的特异性；以浓度梯度的DNA模板检测体系的灵敏度.结果 对氟康唑天然耐药的克柔念珠茵、光滑念珠茵以及对两性霉素B耐药的土曲霉、镰刀茵、尖端赛多孢、根霉在该体系中可扩增出特异性条带,其他真菌可同时进行种属鉴定.74株被测真菌菌株的鉴定结果与常规鉴定的符合率为95.9％.两个多重PCR体系对人类基因组及9种常见细菌DNA的扩增结果均为阴性；扩增阳性的低模板浓度均为10 fg/μL.结论 建立的两个多重PCR体系可对致病真菌进行检测和种属鉴定.
作者：杨小康；张荣波；胡东；吴静；陈丽萍；张世武；王赜煜；干翔；赵瑜 刊期： 2013年第07期
目的 探讨肠杆菌科细菌K-B法检测结果对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的相关机制.方法 收集K-B法对AMK呈双圈耐药的临床分离大肠埃希菌(E.coli)5株和肺炎克雷伯菌(Kpn)2株作为实验菌株,同期分离对AMK完全耐药的E coli和Kpn各2株作为对照菌株；分别采用Vitek 2 Compact药敏卡和琼脂稀释法复核菌株对AMK的药物敏感性；用PCR及DNA测序检测氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及16S rRNA甲基化酶相关基因；用基因外重复回文序列(REP)-PCR法分析菌株的同源性.结果 Vitek 2 Compact药敏卡结果显示,7株实验菌中3株对AMK为敏感,4株为中介；对照菌株均对AMK耐药.琼脂稀释法结果显示所测菌株均对AMK耐药,MIC均＞512 mg/L.所测菌株携带不同的氨基糖苷类修饰酶基因,主要为aac(6)-Ⅰ基因；整合子可变区携带基因盒为aadA5-dfrA17的菌株8株,为aadA2-dfrA12的菌株3株.双圈耐药表型菌株均扩增出armA基因,而对照菌株未扩增出该基因.REP-PCR结果显示双圈耐药菌株同源性较高,与同期分离的对照菌株差异较大.结论 AMK双圈耐药表型的出现与16S rRNA甲基化酶armA基因的表达相关；Vitek 2 Compact药敏系统对K-B法中对AMK呈双圈耐药的肠杆菌科细菌药敏结果可能发生偏差.
作者：周万青；沈瀚；宁明哲；张之烽；张葵 刊期： 2013年第07期
目的 比较四分位数稳健统计和迭代稳健统计在定量检测指标室间质量评价(EQA)数据处理中的应用.方法 分析2012年参加上海市临床检验中心常规化学第1次EQA酶法检测肌酐的实验室结果,用四分位数稳健统计和迭代稳健统计分别进行统计.结果 2种方法确立的靶值基本相同,迭代稳健统计的标准差、变异系数较四分位数稳健统计大,稳健Z比分数值偏离0的程度总体上较四分位数法小,不合格实验室数较四分位数稳健统计少.结论 相对于四分位数稳健统计,迭代稳健统计是一种更宽松可靠的统计方法.
作者：金中淦；居漪；唐立萍；王美娟；刘文彬；李卿；欧元祝；虞啸炫 刊期： 2013年第07期
目的 了解鲍曼不动杆菌主动外排系统和外膜蛋白基因的表达情况,探讨其在介导细菌多重耐药中的作用.方法 K-B法和琼脂二倍稀释法检测100株鲍曼不动杆菌临床分离株的药物敏感性；PCR扩增adeB、adeJ、carO基因；实时荧光定量PCR检测外排泵AdeABC、AdeIJK的mRNA表达水平.结果 100株中有75株多重耐药株,对米诺环素和多黏菌素B的耐药率分别为60.0％和0％；多重耐药组与敏感组adeB基因阳性率分别为82.7％(62/75)和44.0％(11/25),carO基因阳性率分别为98.7％ (74/75)和40.0％(10/25),差异均有统计学意义(x2分别为14.223和48.016,P均＜0.05).敏感和多重耐药两组间adeB基因相对表达量差异有统计学意义(t=4.209,P＜0.01),而两组间adeJ基因相对表达量结果无显著性差异.结论 鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药情况严重；adeB基因在多重耐药及部分敏感株中表达量明显增加；AdeA BC主动外排系统在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中具有一定的作用.
作者：吴春阳；钱雪峰；张险峰；顾国浩 刊期： 2013年第07期
脂联素是体内唯一一种来源于脂肪组织的保护性脂肪因子,与乳腺癌的发生、发展密切相关.近年来关于脂联素与乳腺癌发病危险性的研究取得了较大进展,本文就脂联素及其受体基因多态性与乳腺癌的相关性研究进展做一综述.
作者：许晔琼；邓齐文；孙慧玲 刊期： 2013年第07期
地中海贫血(地贫)是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致的遗传性溶血性贫血[1],我国以广东、广西、海南等发病率较高,北方地区较为少见[2].目前研究多集中在胎儿地贫基因的缺失或点突变基因诊断,较少关注胎儿染色体核型.为了解地贫孕妇与胎儿染色体核型关系及胎儿染色体的核型,本研究对用裂口PCR (gap-PCR)和PCR结合反向斑点杂交(RDB-PCR)检测确诊为地贫的孕妇进行羊水检测,并对胎儿染色体进行核型分析.
作者：邓国生；张炬光；何芳 刊期： 2013年第07期
目的 研究microRNA-328(miR-328)和microRNA-155(miR-155)在急性冠脉综合征(ACS)患者血浆中的水平及其在ACS诊断和鉴别诊断中的价值.方法 收集56例ACS患者[其中24例为不稳定心绞痛(UA),32例为急性心肌梗死(AMI)]和20例体检健康者,分析两组一般临床资料及相关生化指标；用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组研究对象血浆miR-328及miR-155的含量,并分析其与心肌肌钙蛋白T(cTnT)的相关性.结果 ACS组与健康对照组血浆miR-328为(8.12±3.81 vs 1.00±0.00),差异有统计学意义(t=7.924,P＜0.05)；AMI亚组与UA亚组血浆miR-328含量为(10.69±2.17 vs 4.26±2.06),差异有统计学意义(t=7.227,P＜0.05).ACS组与健康对照组血浆miR-155含量为(1.00±0.26 vs1.00±0.00),AMI亚组与UA亚组血浆miR-155含量为(1.02±0.28 vs 0.96±0.22),差异均无统计学意义(P＞0.05).血浆miR-328水平与cTnT呈正相关(r=0.434,P＜0.05)；ACS患者血浆miR-155水平与cTnT无相关性(r=-0.233,P＞0.05).结论 miR-328在ACS患者血浆中水平升高,可能作为ACS诊断及鉴别诊断的潜在生物标志物.
作者：吕品；赵雪；贺付成；王玺 刊期： 2013年第07期
目的 评价血清葡萄糖(Glu)常规检测系统测量结果的正确度.方法 用参考方法和7种常规系统(A～G)测量5种不同浓度的血清Glu标准物质和30份Glu浓度为1.88～20.72 mmol/L的冰冻人血清样本(分光光度法),按分析标准物质法、方法学比对法分别评价7种常规系统测量结果的正确度.结果 依据计量学溯源标准,按分析标准物质法评价,A常规系统Glu测量结果正确度可接受,B～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受；按方法学比对法评价,A～C常规系统Glu测量结果正确度可接受,D～G常规系统Glu测量结果正确度不可接受.结论 用不同方法评价Glu测量结果的正确度时,同一常规系统的评价结论可能不一致,实验室应选择合适的正确度评价方法并使用符合ISO 15189正确度要求的血清Glu常规检测系统.
作者：孙慧颖；邵燕；胡滨；李月玲；张天骄；张传宝；陈宝荣 刊期： 2013年第07期
目的 探讨LSMI基因多态性与江苏地区汉族人精神分裂症的关联性.方法 用连接酶检测反应PCR (LDR-PCR)单核苷酸多态性(SNP)分型技术对506例精神分裂症患者和522例健康对照者LSM1基因rs16887244、rs2843738、rs2843746 3个标签单核苷酸多态性(tgSNP)进行基因分型,比较各组间等位基因、基因型分布频率.结果 与健康对照组比较,精神分裂症组rs16887244等位基因分布频率差异不显著(OR =0.992,P=0.935)；rs2843738和rs2843746等位基因分布频率也无显著差异(OR分别为1.036,1.013,P均＞0.05)；rs16887244基因型(AA/AG/GG)、rs2843738基因型(CC/CG/GG)和rs2843746基因型(CC/CT/TT)分布频率均无显著差异(x2分别为0.511,0.147,5.981,P均＞0.05).结论 江苏地区汉族精神分裂症患者与LSM1基因rs16887244、rs2843738、rs2843746多态性不相关.
作者：俞水；金春慧；袁建民 刊期： 2013年第07期
SLE和类风湿关节炎(RA)的分类标准对这两种疾病患者的早期发现、临床准确诊断和规范化治疗至关重要.数十年来,分类标准不断更新、修订和完善.医学检验人员在撰写论文时应采用新修订的分类标准,避免使用二、三十年前的分类标准.本文介绍了SLE和RA分类标准的演变进程,望广大医学检验人员了解其新的分类标准,熟悉并掌握各项新的实验室检测指标.
作者：武建国 刊期： 2013年第07期
目的 研究2013年甲型H7N9流感病毒血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)的基因进化特征,探讨该病毒的遗传变异和分子特性.方法 收集GenBank中已登录的禽流感病毒基因相关参考序列,利用生物信息学软件DNAMAN和MEGA 4.0对HA和NA基因序列进行进化分析,并利用Phymol软件进行同源建模.结果 2013年甲型H7N9流感病毒HA与NA的氨基酸序列与国际/国内参考毒株的同源性为95.7％～99.8％.同源建模发现该毒株HA的氨基酸序列发生了Q226L突变,NA上也发生了R294K和69 5N del氨基酸突变.结论 新型甲型H7N9流感病毒的HA和NA基因序列与我国江浙地区和部分东亚国家的H7N9禽流感病毒参考株具有高度的同源性,该毒株HA与NA蛋白氨基酸序列发生的变异,可能是病毒致病性改变的原因之一.
作者：王杨；崔大伟；黄明珠；霍朝霞；谢国良；杨先知 刊期： 2013年第07期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
