汪洪杰；潘敏；朱延龄；孟德娣；吕莉萍
目的 研究湖南地区革兰阴性菌中整合子的流行现状及其携带的耐药基因的特点.方法 收集183株革兰阴性菌,MIC法检测其药敏活性,利用不同的引物PCR筛查整合子的种类及整合子可变区,RFLP分析可变区,并测序确定其所携带的耐药基因盒内容.结果 细菌均为多重耐药菌;整合子检出率为54.6%,均为Ⅰ类整合子;携带5种整合子可变区,分别是0.75 kb,1.0 kb,1.8 kb,2.0 kb,3.0 kb;可变区内容为intI1-dfr15-aadA2-qac E△1-ampR,dhfrⅫ-orfF-aad A2,aacA4-catB8-aadA1,dhrfⅫ-aadA2,intI1-dfrA12-aadA2-qacE△1-sull-ISCR1-blaCTX-M-14-IS903.结论 Ⅰ类整合子广泛分布于我院分离的革兰阴性菌中,广泛携带氨基糖苷类和磺胺类耐药基因.氨基糖苷类耐药基因盒的高频出现与抗生素选择性压力无关.
作者：陈辉；李翔；伍勇；万向阳；漆涌；徐令清 刊期： 2009年第04期
医学检验论文中,同一医学名词在不同刊物上常常使用不同的译名;甚至同一刊物前后所译名也不一致.
作者：武建国 刊期： 2009年第04期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中分叉头框(forkhead box,FOX)转录因子-1 mRNA表达水平的变化,了解它在T2DM发病中的作用.方法 采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对62例T2DM患者和40例健康人检测PBMC中FOXO1 mRNA表达水平.结果 T2DM患者PBMC中FOX01 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.05).结论 T2DM患者的FOX01 mRNA表达较健康对照组表达增加.
作者：蔡惠芬；史进方；顾国浩；杨春香 刊期： 2009年第04期
绿色气球菌为条件致病菌,广泛分布于自然界,一般对人不致病,在机体免疫功能低下或婴幼儿免疫功能不健全等情况下可引起严重感染.2009年3月我们从本院食管癌术后患者切口分泌物和胸腔引流液中均培养出绿色气球菌.现报告如下.
作者：郭凤丽；周友全；顾瑛 刊期： 2009年第04期
本研究旨在评价送检时间及运送条件对电化学发光免疫分析(ECLIA)检测甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)可能存在的影响.
作者：张宇；熊中云；邓智勇；安振梅 刊期： 2009年第04期
目的 研究[间隙]连接蛋白37(Cx37)基因C1019T多态性与急性心肌梗死(AMI)相关生化指标变化的关系.方法 用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术结合琼脂糖凝胶电泳,研究283例(病例组136例,健康对照组147例)受试者Cx37 C1019T多态性位点的基因型,并分析研究对象血清中cTnI、CK-MB、CRP、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA I、apoB和Lp(a)的含量与Cx37基因C1019T多态性的关系.结果 在病例组和对照组之间,CC、CT和TT基因型受试者cTnI、CK-MB和CRP水平存在显著差异(P<0.05),CT型和TT型受试者LDL-C水平有显著差异(P值分别为0.030和0.026),3种基因型的TC、TG、HDL-C、apoA Ⅰ、apoB和Lp(a)水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 LDL-C水平差异可能是导致Cx37基因C1019T多态性具不同的AMI患病风险因素之一.
作者：张成禄；王前；谢健敏；郑磊；于新发；曾方银；吴焱贤；莫海鹰 刊期： 2009年第04期
目的 探讨3-硝基酪氨酸(3-NT)在2型糖尿病(T2DM)患者血清中的水平及其与血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及糖化血红蛋白(HbA1c)的关联性.方法 随机选择T2DM患者38例,健康人对照38例,测定血清中3-NT、MDA、SOD和HbA1c,用SPSS 13.0统计软件进行t检验、相关分析和多元回归等分析.结果 患者3-NT(3.38±1.11)nmol/L、MDA(5.10 ±1.73)nmoL/ml、SOD(88.18±27.14)U/ml,与健康人对照组(1.26±0.49)nmol/L、(4.16±1.05)nmol/ml、(103.66±21.51)U/ml相比均有统计学意义(P<0.01);患者血清3-NT与血清MDA、HbA1c为正相关(P<0.05),与血清SOD为负相关,但无显著意义(P=0.106).多元线性逐步回归分析显示3-NT与MDA、HbA1c呈明显关联性(P<0.05).结论 T2DM患者血清中3-NT水平比健康人显著增高,3-NT与脂质过氧化、HbA1c之间的关系较密切.
作者：马邵；武传龙 刊期： 2009年第04期
在CAP(College of America Pathologists)实验室认证的Checklist中,对实验室仪器用水做出规定:Ⅰ类细菌数应少于10 CFU/ml,Ⅱ类应少于1 000 CFU/ml[1].同样在NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards)的GUIDLINE C3-A3中也有类似规定[2].我们对此进行了初步的调查,报道如下.
作者：徐宁；罗强；曹永坚 刊期： 2009年第04期
目的 利用大肠埃希菌体外表达系统克隆、表达解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)多条带抗原(MB抗原)并对其抗原性进行分析.方法 将MB抗原基因的5'端保守性序列克隆到Gateway系统表达载体pDEST17上,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达.通过载体携带的6×His标签,纯化体外表达重组蛋白.并将重组蛋白与临床感染Uu的患者血清反应检测重组蛋白的抗原性.结果 DNA序列分析证明MB抗原基因5'端414 bp的保守序列成功克隆至表达载体上,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达的重组蛋白与MB抗原大小符合.免疫印迹结果表明,体外重组表达的MB抗原能够与Uu感染的患者血清反应,提示其抗原性良好.结论 解脲脲原体MB抗原的体外表达及其良好的抗原性,有助于建立Uu感染的血清学检测方法.
作者：孙竞；吴鹏；李蓓；吴均竹 刊期： 2009年第04期
临床形态学检验仍然是检验学科中基本的技能,也是临床实验室简便、快捷、经济实用的常规检验方法,其中革兰染色法,就是此类检验方法之一.为了探讨革兰染色的质量问题,我们设计了以下试验进行初步调查.
作者：刘瑾；徐志学 刊期： 2009年第04期
随着抗生素的广泛使用,细菌耐药菌株不断增多,从而使胆道感染的控制更趋复杂.本文回顾分析我院2007年1月至2008年8月肝胆外科送检胆汁的细菌培养计数、药敏试验和直接涂片结果.
作者：韦柳华；蒋利君；刘滨；莫善颖；陈翔 刊期： 2009年第04期
目的 构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性.方法 用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达栽体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmidct-EGFP,转染昆虫Sf9细胞.结果 SDS-PAGE和westem blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白.以ELIA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应.阳性率为53.6%.结论 该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性.
作者：沈剑平；朱诗应 刊期： 2009年第04期
人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)是一种少见的条件致病菌.我院于2009年3月自一幼年特发性关节炎患儿血液中分离出1株,现报告如下.
作者：谈华；王惠云；迟富丽；刘雪梅 刊期： 2009年第04期
目的 观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞与胃癌患者的关系,探讨其临床意义.方法 用流式细胞术分析胃癌患者外周血淋巴细胞中Treg细胞的表达.结果 胃癌患者手术前、后外周血淋巴细胞中Treg细胞比例分别为(6.35±1.85)和(4.54±1.42)%(P＜0.05),术后复发时比例为(7.17±1.55)%;化疗前、后分别为(6.47±1.97)%和(8.81±2.01)%(P＜0.05).早期胃癌Treg细胞为(5.88±1.54)%,明显低于进展期胃癌(7.04±1.66)%(P＜0.05).结论 胃癌患者外周血Treg细胞在术后1周比例减少,复发时比例上调,提示其参与了胃癌发生、发展的全过程.化疗后Treg细胞增加,可能与药物诱导的增值分化有关.不同进展期病人外周血中Treg细胞的水平有助于了解病情,判断预后.
作者：俞秋兴；唐军；顾爱萍 刊期： 2009年第04期
目的 建立检测免疫复合物(IC)中抗氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDL-Ab)的ELISA 法.方法 以Cu2+-ox-LDL包被固相板,70 g/L聚乙二醇(PEG)沉淀免疫复合物(ox-LDL-IC),测定冠心病各组与对照组的ox-LDL-Ab,与检测ox-LDL-Ab的某试剂盒测定结果进行比较.结果 抗原佳包被浓度为7.5 mg/L;血清佳加样量为200μl;酶标抗体工作浓度为1∶6 000;灵敏度18.5 mU/ml;批内变异系数3.6%、批间变异系数8.2%.平均回收率97.1%.对稳定型心绞痛(SAP)组和不稳定型心绞痛(UAP)组测定结果与某试剂盒测定的ox-LDL-Ab水平差异无统计学意义(P>0.05),而用本法测定IC中ox-LDL-Ab水平UAP组比SAP组显著增高(P<0.01).结论 测定IC中的ox-LDL-Ab有利于区分UAP组和SAP组患者.
作者：田刚；杨志伟；王金良；王学谦 刊期： 2009年第04期
目的 观察应用诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)靶向阻断信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对肝癌细胞Hep G2的影响,初步探讨其中的分子机制.方法 体外合成的STAT3 decoy ODNs在脂质体的介导下转染Hep G2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率;通过细胞生长曲线观察对细胞增殖的影响;annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;实时定量PCR检测STAT3下游基因bcl-xL、cyclin D1和c-myc的表达.结果 荧光显微镜和流式细胞仪检测表明decoy ODNs能有效转染Hep G2细胞,转染效率达90.2%;生长曲线显示decoy ODNs有效抑制Hep G2细胞增殖;decoy ODNs处理细胞48 h后,流式细胞仪annexin-V/PI染色检测到早期细胞凋亡率为(22.86±2.63)%,晚期细胞凋亡率为(23.00±2.76)%;实时定量PCR证实decoy ODNs下调bcl-xL、cyclin D1和c-myc mRNA表达.结论 STAT3 decoy ODNs能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调STAT3下游bcl-xL、cyclin D1和c-myc基因的表达相关.
作者：史梅；史伟峰；魏江 刊期： 2009年第04期
目的 评价血浆B型钠尿肽(BNP)的化学发光免疫分析法(CLIA)以了解其检测性能,同时调查国人参考区间.方法 用Biosite公司的Triage BNP试剂盒,在Beckman coulter AccessⅡ上测定,参照EP文件,对该方法的线性、测定下限、灵敏度、精密度、抗干扰能力进行评价,观察BNP的体外稳定性;选择表观健康人共421名(男202名,女219名),按性别,以10岁为一个间隔分为6个年龄组,测定EDTA抗凝血浆中的BNP浓度,并确立各年龄和性别组的参考区间.结果 CLIA法测定人血浆BNP的线性范围15～5 040 ng/L,测定下限9.2 ng/L;灵敏度1.4 ng/L;CV 10%处为30 ng/L;胆红素<253μmol/L、Hb浓度<4 g/L、TG<12.88 mmol/L对BNP测定无影响.BNP在全血中室温可稳定8 h,4℃可稳定24 h;在血浆中室温可稳定6h,4℃可稳定8 h,-70℃稳定6个月.BNP随年龄逐渐升高,女性高于男性.<55岁者年龄差异无统计学意义(P>0.05),但性别差异有统计学意义(P<0.05),男性P97.5为34.5 ng/L,女性为57.8 ng/L;>55岁者性别间无差异(P>0.05),55～74岁P9563.6 ng/L,P95.5 96 ng/L;≥75岁者P95 99.7 ng/L,P97.5为100.7 ng/L.结论 测定BNP的CLIA法线性范围宽,灵敏度高,测定下限、检测精密度以及抗干扰能力均能满足临床要求;BNP在常规条件下保存时稳定性良好.建议采用单侧P97.5作为参考区间,<55岁男性为<34.5 ng/L,女性为<57.8 ng/L;55岁以上不分性别均为<100.4 ng/L.
作者：王学晶；徐国宾；李海霞；焦莉莉 刊期： 2009年第04期
目的 以国产电泳仪为平台,建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统.方法 用国产SH-2020电泳仪为平台建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统,以Hydurasys(Sebia)全自动电泳系统对照,对120例尿蛋白质阳性标本进行电泳、染色、程序扫描和结果分析.结果 非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统可有效地将尿蛋白质按分子量大小分离,结果与Hydrasys全自动电泳系统一致.结论 建立的非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统对尿蛋白质分离效果好,灵敏度高,可自动化操作,可取代进口设备,成本低廉.
作者：王永杰；马萍；王东来；李晓洲；骆晓梅；陶征中；高惠；张阳 刊期： 2009年第04期
目的 克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值.方法 构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体.结果 成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%.结论 制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断.
作者：肖勇健；伍宁；刘双全；赵飞俊；吴移谋 刊期： 2009年第04期
微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长度为19～24个核苷酸的非编码单链核糖核酸分子,体内已发现600多种.这些miRNA能够调控高达30%的蛋白质编码基因的表达[1].miRNA通过与靶mRNA 3'端非翻译序列完全或部分互补结合,导致靶mRNA降解或转录后翻译抑制从而调控靶基因的表达[2].miRNA在细胞凋亡、分化、增殖等重要的生理病理过程中发挥重要作用[3-5].研究发现,在一些病理过程中人血清/血浆miRNA表达谱会发生特征性的改变,这些改变有助于对疾病进行早期诊断和预后判断.
作者：严其容；王成；张春妮 刊期： 2009年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
