张成禄；王前；谢健敏；郑磊；于新发；曾方银；吴焱贤；莫海鹰
目的 探讨Graves病(GD)患者糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA表达水平的变化及意义.方法 用实时荧光定量PCR法检测22例GD未治疗组、23例GD临床缓解组及18例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)GITR mRNA相对表达水平;用化学发光法测定各组血浆中甲状腺激素水平,并评价GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平与甲状腺激素水平的相关性.结果 GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平明显低于临床缓解组和健康时照组(χ2=18.48,P<0.01χ2=18.26,P<0.01),而GD临床缓解组与健康对照组差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05).GD未治疗组GITRmRNA相对表达水平与FT3、FT4水平均呈负相关(r=-0.509、r=-0.483,P均<0.05),而与TSH呈正相关(r=0.458,P<0.05).结论 GD的发生可能与GD患者体内GITR基因表达下调有关.
作者：王海生；王胜军；崔大伟；陈建国；柳迎昭；杨先知；史烨；仝佳；许化溪 刊期： 2009年第04期
目的 利用大肠埃希菌体外表达系统克隆、表达解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)多条带抗原(MB抗原)并对其抗原性进行分析.方法 将MB抗原基因的5'端保守性序列克隆到Gateway系统表达载体pDEST17上,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达.通过载体携带的6×His标签,纯化体外表达重组蛋白.并将重组蛋白与临床感染Uu的患者血清反应检测重组蛋白的抗原性.结果 DNA序列分析证明MB抗原基因5'端414 bp的保守序列成功克隆至表达载体上,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达的重组蛋白与MB抗原大小符合.免疫印迹结果表明,体外重组表达的MB抗原能够与Uu感染的患者血清反应,提示其抗原性良好.结论 解脲脲原体MB抗原的体外表达及其良好的抗原性,有助于建立Uu感染的血清学检测方法.
作者：孙竞；吴鹏；李蓓；吴均竹 刊期： 2009年第04期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中分叉头框(forkhead box,FOX)转录因子-1 mRNA表达水平的变化,了解它在T2DM发病中的作用.方法 采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对62例T2DM患者和40例健康人检测PBMC中FOXO1 mRNA表达水平.结果 T2DM患者PBMC中FOX01 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.05).结论 T2DM患者的FOX01 mRNA表达较健康对照组表达增加.
作者：蔡惠芬；史进方；顾国浩；杨春香 刊期： 2009年第04期
目的 建立检测免疫复合物(IC)中抗氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDL-Ab)的ELISA 法.方法 以Cu2+-ox-LDL包被固相板,70 g/L聚乙二醇(PEG)沉淀免疫复合物(ox-LDL-IC),测定冠心病各组与对照组的ox-LDL-Ab,与检测ox-LDL-Ab的某试剂盒测定结果进行比较.结果 抗原佳包被浓度为7.5 mg/L;血清佳加样量为200μl;酶标抗体工作浓度为1∶6 000;灵敏度18.5 mU/ml;批内变异系数3.6%、批间变异系数8.2%.平均回收率97.1%.对稳定型心绞痛(SAP)组和不稳定型心绞痛(UAP)组测定结果与某试剂盒测定的ox-LDL-Ab水平差异无统计学意义(P>0.05),而用本法测定IC中ox-LDL-Ab水平UAP组比SAP组显著增高(P<0.01).结论 测定IC中的ox-LDL-Ab有利于区分UAP组和SAP组患者.
作者：田刚；杨志伟；王金良；王学谦 刊期： 2009年第04期
病毒感染的检测主要依靠病原学、免疫学和分子生物学的方法[1],近年来基因芯片和蛋白质芯片也应用于病毒感染的检测.蛋白质芯片与常规检验方法中的形态染色、分离培养、血清学鉴定及PCR技术相比具有大规模、高通量、多元化、快速检测、计算机自动分析结果等特点[2].
作者：余章斌；韩树萍；郭锡熔 刊期： 2009年第04期
目的 探讨抗SP100抗体与核点型抗核抗体对原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床意义.方法 选取PBC患者100例,60例自身免疫性肝炎(AIH)患者、50例慢性乙型肝炎(HB)患者和50例慢性丙型肝炎(HC)患者作为疾病对照组,50例献血员(BD)作为健康人对照组.间接免疫荧光法(IFA)检测自身抗体,免疫印迹法检测抗SP100抗体.结果 IFA法检测结果,抗核抗体(ANA)阳性57例,抗线粒体抗体(AMA)阳性100例,抗平滑肌抗体(SMA)阳性3例,细胞骨架抗体(CS)阳性5例.免疫印迹法检测PBC患者抗SP100阳性16例(阳性率16.0%),AIH患者抗SP100阳性4例(6.7%),HB、HC、BD对照均阴性.PBC患者抗SP100阳性组与阴性组ANA滴度比较,差异无统计学意义;抗SP100阳性组93.8%(15/16)表现核点型ANA,其次表现核点合并核膜型,而抗SP100阴性组主要表现核膜型(70.7%),其次为着丝点型、颗粒型等.PBC患者抗SP100阳性患者与阴性患者AIT、AST、TBil、GGT、ALP、Igc、IgA、IgM水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论 抗SP100抗体阳性同时ANA为核点型有助于PBC患者的诊断.
作者：刘妍；闫惠平；檀玉芬；张海萍；赵艳；张欣；冯霞 刊期： 2009年第04期
目的 构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性.方法 用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达栽体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmidct-EGFP,转染昆虫Sf9细胞.结果 SDS-PAGE和westem blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白.以ELIA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应.阳性率为53.6%.结论 该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性.
作者：沈剑平；朱诗应 刊期： 2009年第04期
目的 比较间接免疫荧光(IIF)、免疫印迹(WB)和ELISA3种检测方法测定抗dsDNA、抗核小体抗体(AnuA)和抗dsDNA核小体复合物(dsDNA-NcX)抗体结果,评价其对SLE诊断的价值.方法 用3种方法测定87例SLE患者,98例疾病对照患者和50例健康人血清中的抗dsDNA,AnuA和抗dsDNA-NcX抗体水平,用ROC曲线分析它们的诊断性能.结果 SLE患者检查抗dsDNA抗体三法中以ELISA法敏感性高(57.5%),其次为WB法(47.5%),IIF法敏感性低(43.7%),但均显著高于各自的疾病对照和正常对照组(P<0.01).同一方法所测AnuA(WB法)或抗dsDNA-NcX抗体(ELISA法)对SLE诊断敏感性和特异性均高于抗dsDNA抗体.3种方法所测抗体结果对SLE诊断准确性均为中等水平,但相对以抗dsDNA-NcX抗体(ELISA法)的诊断准确性高(AUC值0.865).3种方法联合检测,可提高对SLE的诊断敏感性(72.4%),但特异性却有所降低(85.9%),其对SLE的诊断准确性无明显改善.抗核抗体(ANA)核均质型者与抗dsDNA/AnuA/或抗dsDNA-NcX抗体阳性结果间具有显著相关性(χ2=52.225,P=0.000),因其对SLE特异性和阳性预测值低(分别为72.3%和0.658),故仅具有筛查价值.结论 3种方法所测抗dsDNA,AnuA和抗dsDNA-NcX抗体对SLE敏感性不尽相同,但均具有中等水平的诊断准确性和较好特异性,其中以ELISA法所测抗dsDNA-NcX抗体的诊断效果较佳.
作者：杨林；虞伟 刊期： 2009年第04期
为了解本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床流行状况及产酶株的耐药情况,我们对2006～2007年间我院分离的两菌共181株进行了耐药性分析.
作者：孙振亚；郭强忠；张肆鹏；李文郎 刊期： 2009年第04期
医学检验论文中,同一医学名词在不同刊物上常常使用不同的译名;甚至同一刊物前后所译名也不一致.
作者：武建国 刊期： 2009年第04期
本文旨在探讨应用TDx和Viva ETM分析系统测定地高辛和环孢霉素的血药浓度,对2种方法结果的可比性进行评估,以确定本实验室2种方法的差异,为指导临床合理用药提供依据.
作者：黄一玲；田蕾；蒋娟娟；刘红；严岩；管晓媛；李一石 刊期： 2009年第04期
目的 评价血浆B型钠尿肽(BNP)的化学发光免疫分析法(CLIA)以了解其检测性能,同时调查国人参考区间.方法 用Biosite公司的Triage BNP试剂盒,在Beckman coulter AccessⅡ上测定,参照EP文件,对该方法的线性、测定下限、灵敏度、精密度、抗干扰能力进行评价,观察BNP的体外稳定性;选择表观健康人共421名(男202名,女219名),按性别,以10岁为一个间隔分为6个年龄组,测定EDTA抗凝血浆中的BNP浓度,并确立各年龄和性别组的参考区间.结果 CLIA法测定人血浆BNP的线性范围15～5 040 ng/L,测定下限9.2 ng/L;灵敏度1.4 ng/L;CV 10%处为30 ng/L;胆红素<253μmol/L、Hb浓度<4 g/L、TG<12.88 mmol/L对BNP测定无影响.BNP在全血中室温可稳定8 h,4℃可稳定24 h;在血浆中室温可稳定6h,4℃可稳定8 h,-70℃稳定6个月.BNP随年龄逐渐升高,女性高于男性.<55岁者年龄差异无统计学意义(P>0.05),但性别差异有统计学意义(P<0.05),男性P97.5为34.5 ng/L,女性为57.8 ng/L;>55岁者性别间无差异(P>0.05),55～74岁P9563.6 ng/L,P95.5 96 ng/L;≥75岁者P95 99.7 ng/L,P97.5为100.7 ng/L.结论 测定BNP的CLIA法线性范围宽,灵敏度高,测定下限、检测精密度以及抗干扰能力均能满足临床要求;BNP在常规条件下保存时稳定性良好.建议采用单侧P97.5作为参考区间,<55岁男性为<34.5 ng/L,女性为<57.8 ng/L;55岁以上不分性别均为<100.4 ng/L.
作者：王学晶；徐国宾；李海霞；焦莉莉 刊期： 2009年第04期
为了解不同厂家甲苯胺红试验(TRUST)试剂的检测结果是否一致,我们选用使用较多的两家TRUST试剂进行比较.
作者：莫小辉；金月兰；杨阳；胡伟忠；顾伟鸣 刊期： 2009年第04期
本文报告我院2008年2月20日收治艾滋病合并新型隐球菌败血症及新型隐球菌胸膜炎1例.
作者：张米；杨绍敏 刊期： 2009年第04期
目的 研究[间隙]连接蛋白37(Cx37)基因C1019T多态性与急性心肌梗死(AMI)相关生化指标变化的关系.方法 用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术结合琼脂糖凝胶电泳,研究283例(病例组136例,健康对照组147例)受试者Cx37 C1019T多态性位点的基因型,并分析研究对象血清中cTnI、CK-MB、CRP、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA I、apoB和Lp(a)的含量与Cx37基因C1019T多态性的关系.结果 在病例组和对照组之间,CC、CT和TT基因型受试者cTnI、CK-MB和CRP水平存在显著差异(P<0.05),CT型和TT型受试者LDL-C水平有显著差异(P值分别为0.030和0.026),3种基因型的TC、TG、HDL-C、apoA Ⅰ、apoB和Lp(a)水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 LDL-C水平差异可能是导致Cx37基因C1019T多态性具不同的AMI患病风险因素之一.
作者：张成禄；王前；谢健敏；郑磊；于新发；曾方银；吴焱贤；莫海鹰 刊期： 2009年第04期
引起原发性真菌性肺炎的大多是皮炎芽生菌、荚膜组织胞浆菌或粗球孢子菌,其次是申克孢子丝菌、隐球菌、曲菌或毛霉菌等菌属.由链格孢(Alternaria)真菌引起肺部感染的病例非常少见.本文报道链格孢真菌引起肺部感染病例1例.
作者：贾俊梅；张宁 刊期： 2009年第04期
微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长度为19～24个核苷酸的非编码单链核糖核酸分子,体内已发现600多种.这些miRNA能够调控高达30%的蛋白质编码基因的表达[1].miRNA通过与靶mRNA 3'端非翻译序列完全或部分互补结合,导致靶mRNA降解或转录后翻译抑制从而调控靶基因的表达[2].miRNA在细胞凋亡、分化、增殖等重要的生理病理过程中发挥重要作用[3-5].研究发现,在一些病理过程中人血清/血浆miRNA表达谱会发生特征性的改变,这些改变有助于对疾病进行早期诊断和预后判断.
作者：严其容；王成；张春妮 刊期： 2009年第04期
目的 观察应用诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)靶向阻断信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对肝癌细胞Hep G2的影响,初步探讨其中的分子机制.方法 体外合成的STAT3 decoy ODNs在脂质体的介导下转染Hep G2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率;通过细胞生长曲线观察对细胞增殖的影响;annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;实时定量PCR检测STAT3下游基因bcl-xL、cyclin D1和c-myc的表达.结果 荧光显微镜和流式细胞仪检测表明decoy ODNs能有效转染Hep G2细胞,转染效率达90.2%;生长曲线显示decoy ODNs有效抑制Hep G2细胞增殖;decoy ODNs处理细胞48 h后,流式细胞仪annexin-V/PI染色检测到早期细胞凋亡率为(22.86±2.63)%,晚期细胞凋亡率为(23.00±2.76)%;实时定量PCR证实decoy ODNs下调bcl-xL、cyclin D1和c-myc mRNA表达.结论 STAT3 decoy ODNs能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调STAT3下游bcl-xL、cyclin D1和c-myc基因的表达相关.
作者：史梅；史伟峰；魏江 刊期： 2009年第04期
目的 克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值.方法 构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体.结果 成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%.结论 制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断.
作者：肖勇健；伍宁；刘双全；赵飞俊；吴移谋 刊期： 2009年第04期
在CAP(College of America Pathologists)实验室认证的Checklist中,对实验室仪器用水做出规定:Ⅰ类细菌数应少于10 CFU/ml,Ⅱ类应少于1 000 CFU/ml[1].同样在NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards)的GUIDLINE C3-A3中也有类似规定[2].我们对此进行了初步的调查,报道如下.
作者：徐宁；罗强；曹永坚 刊期： 2009年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
