孙振亚；郭强忠；张肆鹏；李文郎
乙型肝炎的发生并不是由乙肝病毒(HBV)直接侵袭肝细胞引起,而是与病毒抗原和机体免疫系统相互作用有关.细胞因子在其中的作用越来越受到重视.本研究检测了不同临床类型HBV感染患者血清5种细胞因子的水平并探讨它们与HBV感染状态的联系.
作者：潘继承 刊期： 2009年第04期
目的 构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性.方法 用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达栽体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmidct-EGFP,转染昆虫Sf9细胞.结果 SDS-PAGE和westem blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白.以ELIA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应.阳性率为53.6%.结论 该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性.
作者：沈剑平；朱诗应 刊期： 2009年第04期
为了解不同厂家甲苯胺红试验(TRUST)试剂的检测结果是否一致,我们选用使用较多的两家TRUST试剂进行比较.
作者：莫小辉；金月兰；杨阳；胡伟忠；顾伟鸣 刊期： 2009年第04期
目的 以国产电泳仪为平台,建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统.方法 用国产SH-2020电泳仪为平台建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统,以Hydurasys(Sebia)全自动电泳系统对照,对120例尿蛋白质阳性标本进行电泳、染色、程序扫描和结果分析.结果 非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统可有效地将尿蛋白质按分子量大小分离,结果与Hydrasys全自动电泳系统一致.结论 建立的非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统对尿蛋白质分离效果好,灵敏度高,可自动化操作,可取代进口设备,成本低廉.
作者：王永杰；马萍；王东来；李晓洲；骆晓梅；陶征中；高惠；张阳 刊期： 2009年第04期
临床形态学检验仍然是检验学科中基本的技能,也是临床实验室简便、快捷、经济实用的常规检验方法,其中革兰染色法,就是此类检验方法之一.为了探讨革兰染色的质量问题,我们设计了以下试验进行初步调查.
作者：刘瑾；徐志学 刊期： 2009年第04期
目的 研究湖南地区革兰阴性菌中整合子的流行现状及其携带的耐药基因的特点.方法 收集183株革兰阴性菌,MIC法检测其药敏活性,利用不同的引物PCR筛查整合子的种类及整合子可变区,RFLP分析可变区,并测序确定其所携带的耐药基因盒内容.结果 细菌均为多重耐药菌;整合子检出率为54.6%,均为Ⅰ类整合子;携带5种整合子可变区,分别是0.75 kb,1.0 kb,1.8 kb,2.0 kb,3.0 kb;可变区内容为intI1-dfr15-aadA2-qac E△1-ampR,dhfrⅫ-orfF-aad A2,aacA4-catB8-aadA1,dhrfⅫ-aadA2,intI1-dfrA12-aadA2-qacE△1-sull-ISCR1-blaCTX-M-14-IS903.结论 Ⅰ类整合子广泛分布于我院分离的革兰阴性菌中,广泛携带氨基糖苷类和磺胺类耐药基因.氨基糖苷类耐药基因盒的高频出现与抗生素选择性压力无关.
作者：陈辉；李翔；伍勇；万向阳；漆涌；徐令清 刊期： 2009年第04期
目的 探讨Graves病(GD)患者糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA表达水平的变化及意义.方法 用实时荧光定量PCR法检测22例GD未治疗组、23例GD临床缓解组及18例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)GITR mRNA相对表达水平;用化学发光法测定各组血浆中甲状腺激素水平,并评价GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平与甲状腺激素水平的相关性.结果 GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平明显低于临床缓解组和健康时照组(χ2=18.48,P<0.01χ2=18.26,P<0.01),而GD临床缓解组与健康对照组差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05).GD未治疗组GITRmRNA相对表达水平与FT3、FT4水平均呈负相关(r=-0.509、r=-0.483,P均<0.05),而与TSH呈正相关(r=0.458,P<0.05).结论 GD的发生可能与GD患者体内GITR基因表达下调有关.
作者：王海生；王胜军；崔大伟；陈建国；柳迎昭；杨先知；史烨；仝佳；许化溪 刊期： 2009年第04期
在CAP(College of America Pathologists)实验室认证的Checklist中,对实验室仪器用水做出规定:Ⅰ类细菌数应少于10 CFU/ml,Ⅱ类应少于1 000 CFU/ml[1].同样在NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards)的GUIDLINE C3-A3中也有类似规定[2].我们对此进行了初步的调查,报道如下.
作者：徐宁；罗强；曹永坚 刊期： 2009年第04期
目的 观察应用诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)靶向阻断信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对肝癌细胞Hep G2的影响,初步探讨其中的分子机制.方法 体外合成的STAT3 decoy ODNs在脂质体的介导下转染Hep G2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率;通过细胞生长曲线观察对细胞增殖的影响;annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;实时定量PCR检测STAT3下游基因bcl-xL、cyclin D1和c-myc的表达.结果 荧光显微镜和流式细胞仪检测表明decoy ODNs能有效转染Hep G2细胞,转染效率达90.2%;生长曲线显示decoy ODNs有效抑制Hep G2细胞增殖;decoy ODNs处理细胞48 h后,流式细胞仪annexin-V/PI染色检测到早期细胞凋亡率为(22.86±2.63)%,晚期细胞凋亡率为(23.00±2.76)%;实时定量PCR证实decoy ODNs下调bcl-xL、cyclin D1和c-myc mRNA表达.结论 STAT3 decoy ODNs能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调STAT3下游bcl-xL、cyclin D1和c-myc基因的表达相关.
作者：史梅；史伟峰；魏江 刊期： 2009年第04期
目的 克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值.方法 构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体.结果 成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%.结论 制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断.
作者：肖勇健；伍宁；刘双全；赵飞俊；吴移谋 刊期： 2009年第04期
目的 探讨3-硝基酪氨酸(3-NT)在2型糖尿病(T2DM)患者血清中的水平及其与血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及糖化血红蛋白(HbA1c)的关联性.方法 随机选择T2DM患者38例,健康人对照38例,测定血清中3-NT、MDA、SOD和HbA1c,用SPSS 13.0统计软件进行t检验、相关分析和多元回归等分析.结果 患者3-NT(3.38±1.11)nmol/L、MDA(5.10 ±1.73)nmoL/ml、SOD(88.18±27.14)U/ml,与健康人对照组(1.26±0.49)nmol/L、(4.16±1.05)nmol/ml、(103.66±21.51)U/ml相比均有统计学意义(P<0.01);患者血清3-NT与血清MDA、HbA1c为正相关(P<0.05),与血清SOD为负相关,但无显著意义(P=0.106).多元线性逐步回归分析显示3-NT与MDA、HbA1c呈明显关联性(P<0.05).结论 T2DM患者血清中3-NT水平比健康人显著增高,3-NT与脂质过氧化、HbA1c之间的关系较密切.
作者：马邵；武传龙 刊期： 2009年第04期
本文报告我院2008年2月20日收治艾滋病合并新型隐球菌败血症及新型隐球菌胸膜炎1例.
作者：张米；杨绍敏 刊期： 2009年第04期
人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)是一种少见的条件致病菌.我院于2009年3月自一幼年特发性关节炎患儿血液中分离出1株,现报告如下.
作者：谈华；王惠云；迟富丽；刘雪梅 刊期： 2009年第04期
目的 分析液-质串联质谱检测干血滤纸片氨基酸水平的影响因素,寻找消除这些影响因素的方法.方法 设立3个影响因素组:①不同打孔位置组;②4℃条件下,不同滤纸片保存时间组;③室温条件下,不同放置时间组.比较在上述条件下检测干血滤纸片的氨基酸水平.结果 不同的打孔位置对于19种氨基酸的测定没有明显的影响.不同的纸片保存时间对多数氨基酸的测定没有明显的影响,但是Glu、Gly、Pro、Ser 4种氨基酸的水平随着纸片保存时间的不同而发生了明显的变化;不同的放置时间对多数氨基酸的测定没有明显影响,但是Arg、Gln、Glu、Lys、Tyr 5种氨基酸的水平随着放置时间的不同而发生了明显的变化.结论 在使用串联质谱法检测干血滤纸片上的氨基酸水平时应使用新鲜纸片,及时进行预处理,从而保证结果的稳定性和准确性.
作者：李启亮；宋文琪；徐樨巍；周敏；金芳 刊期： 2009年第04期
目的 比较2型糖尿病(T2DM)肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异,建立T2DM肾病诊断模型,探讨此技术对该病诊断的价值.方法 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清,获得蛋白质指纹图谱.结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000～30 000范围内共检测到175个蛋白峰,其中有17个蛋白峰明显表达差异(P<0.01).筛选其中质荷比(m/z)分别为5 420、5 782、6 472、6666、10 277和11 770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型.利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测,结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81.0%和96.2%.结论 利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型,为该病诊断提供了新途径.
作者：黄波；黄文方；刘华；杨永长；肖代雯；姜伟；胡琦；冯文莉 刊期： 2009年第04期
目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)基因第1外显子+869T/C多态性与原发性高血压的关系.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术,检测118例原发性高血压患者和130例健康对照者TGF-β1的基因多态性.结果 TGF-β1基因+869T/C多态性在两组人群中的分布存在显著性差异(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,C等位基因携带者患原发性高血压的风险是T等位基因的1.624倍(OR=1.624,95%CI:1.134～2.324);携带C等位基因的原发性高血压患者收缩压水平显著高于不携带者[(162.9±18.2)mmHg与(155.1±16.8)mmHg,P<0.05].结论 TGF-β1基因+869T/C多态性与原发性高血压的发病相关,其中C等位基因可能是原发性高血压的遗传易感基因;携带C等位基因的个体可能因收缩压的升高增加了原发性高血压的发病风险.
作者：唐任光；韦叶生；黄照河 刊期： 2009年第04期
本文旨在探讨应用TDx和Viva ETM分析系统测定地高辛和环孢霉素的血药浓度,对2种方法结果的可比性进行评估,以确定本实验室2种方法的差异,为指导临床合理用药提供依据.
作者：黄一玲；田蕾；蒋娟娟；刘红；严岩；管晓媛；李一石 刊期： 2009年第04期
为了解本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床流行状况及产酶株的耐药情况,我们对2006～2007年间我院分离的两菌共181株进行了耐药性分析.
作者：孙振亚；郭强忠；张肆鹏；李文郎 刊期： 2009年第04期
目的 研究[间隙]连接蛋白37(Cx37)基因C1019T多态性与急性心肌梗死(AMI)相关生化指标变化的关系.方法 用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术结合琼脂糖凝胶电泳,研究283例(病例组136例,健康对照组147例)受试者Cx37 C1019T多态性位点的基因型,并分析研究对象血清中cTnI、CK-MB、CRP、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA I、apoB和Lp(a)的含量与Cx37基因C1019T多态性的关系.结果 在病例组和对照组之间,CC、CT和TT基因型受试者cTnI、CK-MB和CRP水平存在显著差异(P<0.05),CT型和TT型受试者LDL-C水平有显著差异(P值分别为0.030和0.026),3种基因型的TC、TG、HDL-C、apoA Ⅰ、apoB和Lp(a)水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 LDL-C水平差异可能是导致Cx37基因C1019T多态性具不同的AMI患病风险因素之一.
作者：张成禄；王前；谢健敏；郑磊；于新发；曾方银；吴焱贤；莫海鹰 刊期： 2009年第04期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中分叉头框(forkhead box,FOX)转录因子-1 mRNA表达水平的变化,了解它在T2DM发病中的作用.方法 采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对62例T2DM患者和40例健康人检测PBMC中FOXO1 mRNA表达水平.结果 T2DM患者PBMC中FOX01 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.05).结论 T2DM患者的FOX01 mRNA表达较健康对照组表达增加.
作者：蔡惠芬；史进方；顾国浩；杨春香 刊期： 2009年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
