黄一玲；田蕾；蒋娟娟；刘红；严岩；管晓媛；李一石
病毒感染的检测主要依靠病原学、免疫学和分子生物学的方法[1],近年来基因芯片和蛋白质芯片也应用于病毒感染的检测.蛋白质芯片与常规检验方法中的形态染色、分离培养、血清学鉴定及PCR技术相比具有大规模、高通量、多元化、快速检测、计算机自动分析结果等特点[2].
作者：余章斌；韩树萍；郭锡熔 刊期： 2009年第04期
目的 探讨Graves病(GD)患者糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA表达水平的变化及意义.方法 用实时荧光定量PCR法检测22例GD未治疗组、23例GD临床缓解组及18例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)GITR mRNA相对表达水平;用化学发光法测定各组血浆中甲状腺激素水平,并评价GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平与甲状腺激素水平的相关性.结果 GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平明显低于临床缓解组和健康时照组(χ2=18.48,P<0.01χ2=18.26,P<0.01),而GD临床缓解组与健康对照组差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05).GD未治疗组GITRmRNA相对表达水平与FT3、FT4水平均呈负相关(r=-0.509、r=-0.483,P均<0.05),而与TSH呈正相关(r=0.458,P<0.05).结论 GD的发生可能与GD患者体内GITR基因表达下调有关.
作者：王海生；王胜军；崔大伟；陈建国；柳迎昭；杨先知；史烨；仝佳；许化溪 刊期： 2009年第04期
目的 构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性.方法 用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达栽体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmidct-EGFP,转染昆虫Sf9细胞.结果 SDS-PAGE和westem blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白.以ELIA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应.阳性率为53.6%.结论 该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性.
作者：沈剑平；朱诗应 刊期： 2009年第04期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中分叉头框(forkhead box,FOX)转录因子-1 mRNA表达水平的变化,了解它在T2DM发病中的作用.方法 采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对62例T2DM患者和40例健康人检测PBMC中FOXO1 mRNA表达水平.结果 T2DM患者PBMC中FOX01 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.05).结论 T2DM患者的FOX01 mRNA表达较健康对照组表达增加.
作者：蔡惠芬；史进方；顾国浩；杨春香 刊期： 2009年第04期
目的 评价血浆B型钠尿肽(BNP)的化学发光免疫分析法(CLIA)以了解其检测性能,同时调查国人参考区间.方法 用Biosite公司的Triage BNP试剂盒,在Beckman coulter AccessⅡ上测定,参照EP文件,对该方法的线性、测定下限、灵敏度、精密度、抗干扰能力进行评价,观察BNP的体外稳定性;选择表观健康人共421名(男202名,女219名),按性别,以10岁为一个间隔分为6个年龄组,测定EDTA抗凝血浆中的BNP浓度,并确立各年龄和性别组的参考区间.结果 CLIA法测定人血浆BNP的线性范围15～5 040 ng/L,测定下限9.2 ng/L;灵敏度1.4 ng/L;CV 10%处为30 ng/L;胆红素<253μmol/L、Hb浓度<4 g/L、TG<12.88 mmol/L对BNP测定无影响.BNP在全血中室温可稳定8 h,4℃可稳定24 h;在血浆中室温可稳定6h,4℃可稳定8 h,-70℃稳定6个月.BNP随年龄逐渐升高,女性高于男性.<55岁者年龄差异无统计学意义(P>0.05),但性别差异有统计学意义(P<0.05),男性P97.5为34.5 ng/L,女性为57.8 ng/L;>55岁者性别间无差异(P>0.05),55～74岁P9563.6 ng/L,P95.5 96 ng/L;≥75岁者P95 99.7 ng/L,P97.5为100.7 ng/L.结论 测定BNP的CLIA法线性范围宽,灵敏度高,测定下限、检测精密度以及抗干扰能力均能满足临床要求;BNP在常规条件下保存时稳定性良好.建议采用单侧P97.5作为参考区间,<55岁男性为<34.5 ng/L,女性为<57.8 ng/L;55岁以上不分性别均为<100.4 ng/L.
作者：王学晶；徐国宾；李海霞；焦莉莉 刊期： 2009年第04期
目的 比较2型糖尿病(T2DM)肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异,建立T2DM肾病诊断模型,探讨此技术对该病诊断的价值.方法 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清,获得蛋白质指纹图谱.结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000～30 000范围内共检测到175个蛋白峰,其中有17个蛋白峰明显表达差异(P<0.01).筛选其中质荷比(m/z)分别为5 420、5 782、6 472、6666、10 277和11 770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型.利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测,结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81.0%和96.2%.结论 利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型,为该病诊断提供了新途径.
作者：黄波；黄文方；刘华；杨永长；肖代雯；姜伟；胡琦；冯文莉 刊期： 2009年第04期
引起原发性真菌性肺炎的大多是皮炎芽生菌、荚膜组织胞浆菌或粗球孢子菌,其次是申克孢子丝菌、隐球菌、曲菌或毛霉菌等菌属.由链格孢(Alternaria)真菌引起肺部感染的病例非常少见.本文报道链格孢真菌引起肺部感染病例1例.
作者：贾俊梅；张宁 刊期： 2009年第04期
为了解不同厂家甲苯胺红试验(TRUST)试剂的检测结果是否一致,我们选用使用较多的两家TRUST试剂进行比较.
作者：莫小辉；金月兰；杨阳；胡伟忠；顾伟鸣 刊期： 2009年第04期
目的 观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞与胃癌患者的关系,探讨其临床意义.方法 用流式细胞术分析胃癌患者外周血淋巴细胞中Treg细胞的表达.结果 胃癌患者手术前、后外周血淋巴细胞中Treg细胞比例分别为(6.35±1.85)和(4.54±1.42)%(P＜0.05),术后复发时比例为(7.17±1.55)%;化疗前、后分别为(6.47±1.97)%和(8.81±2.01)%(P＜0.05).早期胃癌Treg细胞为(5.88±1.54)%,明显低于进展期胃癌(7.04±1.66)%(P＜0.05).结论 胃癌患者外周血Treg细胞在术后1周比例减少,复发时比例上调,提示其参与了胃癌发生、发展的全过程.化疗后Treg细胞增加,可能与药物诱导的增值分化有关.不同进展期病人外周血中Treg细胞的水平有助于了解病情,判断预后.
作者：俞秋兴；唐军；顾爱萍 刊期： 2009年第04期
本文对我院近年引流置管感染的常见病原菌及其耐药情况进行分析,结果如下.
作者：张红升 刊期： 2009年第04期
目的 研究湖南地区革兰阴性菌中整合子的流行现状及其携带的耐药基因的特点.方法 收集183株革兰阴性菌,MIC法检测其药敏活性,利用不同的引物PCR筛查整合子的种类及整合子可变区,RFLP分析可变区,并测序确定其所携带的耐药基因盒内容.结果 细菌均为多重耐药菌;整合子检出率为54.6%,均为Ⅰ类整合子;携带5种整合子可变区,分别是0.75 kb,1.0 kb,1.8 kb,2.0 kb,3.0 kb;可变区内容为intI1-dfr15-aadA2-qac E△1-ampR,dhfrⅫ-orfF-aad A2,aacA4-catB8-aadA1,dhrfⅫ-aadA2,intI1-dfrA12-aadA2-qacE△1-sull-ISCR1-blaCTX-M-14-IS903.结论 Ⅰ类整合子广泛分布于我院分离的革兰阴性菌中,广泛携带氨基糖苷类和磺胺类耐药基因.氨基糖苷类耐药基因盒的高频出现与抗生素选择性压力无关.
作者：陈辉；李翔；伍勇；万向阳；漆涌；徐令清 刊期： 2009年第04期
目的 以国产电泳仪为平台,建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统.方法 用国产SH-2020电泳仪为平台建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统,以Hydurasys(Sebia)全自动电泳系统对照,对120例尿蛋白质阳性标本进行电泳、染色、程序扫描和结果分析.结果 非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统可有效地将尿蛋白质按分子量大小分离,结果与Hydrasys全自动电泳系统一致.结论 建立的非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统对尿蛋白质分离效果好,灵敏度高,可自动化操作,可取代进口设备,成本低廉.
作者：王永杰；马萍；王东来；李晓洲；骆晓梅；陶征中；高惠；张阳 刊期： 2009年第04期
绿色气球菌为条件致病菌,广泛分布于自然界,一般对人不致病,在机体免疫功能低下或婴幼儿免疫功能不健全等情况下可引起严重感染.2009年3月我们从本院食管癌术后患者切口分泌物和胸腔引流液中均培养出绿色气球菌.现报告如下.
作者：郭凤丽；周友全；顾瑛 刊期： 2009年第04期
临床形态学检验仍然是检验学科中基本的技能,也是临床实验室简便、快捷、经济实用的常规检验方法,其中革兰染色法,就是此类检验方法之一.为了探讨革兰染色的质量问题,我们设计了以下试验进行初步调查.
作者：刘瑾；徐志学 刊期： 2009年第04期
为了解本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床流行状况及产酶株的耐药情况,我们对2006～2007年间我院分离的两菌共181株进行了耐药性分析.
作者：孙振亚；郭强忠；张肆鹏；李文郎 刊期： 2009年第04期
在CAP(College of America Pathologists)实验室认证的Checklist中,对实验室仪器用水做出规定:Ⅰ类细菌数应少于10 CFU/ml,Ⅱ类应少于1 000 CFU/ml[1].同样在NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards)的GUIDLINE C3-A3中也有类似规定[2].我们对此进行了初步的调查,报道如下.
作者：徐宁；罗强；曹永坚 刊期： 2009年第04期
随着抗生素的广泛使用,细菌耐药菌株不断增多,从而使胆道感染的控制更趋复杂.本文回顾分析我院2007年1月至2008年8月肝胆外科送检胆汁的细菌培养计数、药敏试验和直接涂片结果.
作者：韦柳华；蒋利君；刘滨；莫善颖；陈翔 刊期： 2009年第04期
本研究旨在评价送检时间及运送条件对电化学发光免疫分析(ECLIA)检测甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)可能存在的影响.
作者：张宇；熊中云；邓智勇；安振梅 刊期： 2009年第04期
目的 克隆、表达及纯化梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白Tp 0319,并建立间接ELISA方法,探讨其在梅毒血清学诊断中的价值.方法 构建重组质粒PQE32/Tp 0319,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和western blot鉴定表达结果;Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,间接ELISA检测梅毒患者血清中特异性IgG抗体.结果 成功构建了PQE32/Tp 0319重组质粒;经SDS-PAGE检测,诱导产物显示有一条相对分子质量约为30 000的特异蛋白质条带,western blot分析证明其只与人抗Tp IgG发生特异性反应;将Tp 0139用于间接ELISA检测抗Tp抗体阴、阳性参比血清,特异性和敏感性均为100%;检测梅毒患者和健康献血者血清各150份,结果与TPPA法符合率为95.3%.结论 制备的Tp 0319重组蛋白有较好的免疫反应性,可望用于临床梅毒血清学诊断.
作者：肖勇健；伍宁；刘双全；赵飞俊；吴移谋 刊期： 2009年第04期
目的 探讨慢性肝炎患者6项指标用于肝纤维化评估的价值.方法 185例慢性肝炎患者行常规肝穿刺、组织病理学诊断,用ELISA法检测血清中结缔组织生长因子(CTGF)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)、转化生长因子-β1(TGF-β1),常规检测凝血酶原时间(PT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和血小板(PLT)及其计算指标APRI(AST/PLT),用ROC曲线评估这些指标在肝纤维化诊断中的价值.结果 血清CTGF、PDGF-BB、TIMP-1、TGF-β1、APRI、PT的ROC曲线下面积(AUC)分别为:0.833,0.811,0.669,0.529,0.809,0.625.联合CTGF和APRI可以明显提高诊断的准确性.结论 CTGF、PDGF-BB、APRI在肝纤维化评估中有较高的诊断价值,联合这些指标可以提高肝纤维化的诊断性能.
作者：张岱；王念跃；史玉领；房国祥 刊期： 2009年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
