蔡惠芬;史进方;顾国浩;杨春香
目的 观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞与胃癌患者的关系,探讨其临床意义.方法 用流式细胞术分析胃癌患者外周血淋巴细胞中Treg细胞的表达.结果 胃癌患者手术前、后外周血淋巴细胞中Treg细胞比例分别为(6.35±1.85)和(4.54±1.42)%(P<0.05),术后复发时比例为(7.17±1.55)%;化疗前、后分别为(6.47±1.97)%和(8.81±2.01)%(P<0.05).早期胃癌Treg细胞为(5.88±1.54)%,明显低于进展期胃癌(7.04±1.66)%(P<0.05).结论 胃癌患者外周血Treg细胞在术后1周比例减少,复发时比例上调,提示其参与了胃癌发生、发展的全过程.化疗后Treg细胞增加,可能与药物诱导的增值分化有关.不同进展期病人外周血中Treg细胞的水平有助于了解病情,判断预后.
作者:俞秋兴;唐军;顾爱萍 刊期: 2009年第04期
目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)基因第1外显子+869T/C多态性与原发性高血压的关系.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术,检测118例原发性高血压患者和130例健康对照者TGF-β1的基因多态性.结果 TGF-β1基因+869T/C多态性在两组人群中的分布存在显著性差异(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,C等位基因携带者患原发性高血压的风险是T等位基因的1.624倍(OR=1.624,95%CI:1.134~2.324);携带C等位基因的原发性高血压患者收缩压水平显著高于不携带者[(162.9±18.2)mmHg与(155.1±16.8)mmHg,P<0.05].结论 TGF-β1基因+869T/C多态性与原发性高血压的发病相关,其中C等位基因可能是原发性高血压的遗传易感基因;携带C等位基因的个体可能因收缩压的升高增加了原发性高血压的发病风险.
作者:唐任光;韦叶生;黄照河 刊期: 2009年第04期
目的 建立检测免疫复合物(IC)中抗氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDL-Ab)的ELISA 法.方法 以Cu2+-ox-LDL包被固相板,70 g/L聚乙二醇(PEG)沉淀免疫复合物(ox-LDL-IC),测定冠心病各组与对照组的ox-LDL-Ab,与检测ox-LDL-Ab的某试剂盒测定结果进行比较.结果 抗原佳包被浓度为7.5 mg/L;血清佳加样量为200μl;酶标抗体工作浓度为1∶6 000;灵敏度18.5 mU/ml;批内变异系数3.6%、批间变异系数8.2%.平均回收率97.1%.对稳定型心绞痛(SAP)组和不稳定型心绞痛(UAP)组测定结果与某试剂盒测定的ox-LDL-Ab水平差异无统计学意义(P>0.05),而用本法测定IC中ox-LDL-Ab水平UAP组比SAP组显著增高(P<0.01).结论 测定IC中的ox-LDL-Ab有利于区分UAP组和SAP组患者.
作者:田刚;杨志伟;王金良;王学谦 刊期: 2009年第04期
临床形态学检验仍然是检验学科中基本的技能,也是临床实验室简便、快捷、经济实用的常规检验方法,其中革兰染色法,就是此类检验方法之一.为了探讨革兰染色的质量问题,我们设计了以下试验进行初步调查.
作者:刘瑾;徐志学 刊期: 2009年第04期
目的 探讨抗SP100抗体与核点型抗核抗体对原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床意义.方法 选取PBC患者100例,60例自身免疫性肝炎(AIH)患者、50例慢性乙型肝炎(HB)患者和50例慢性丙型肝炎(HC)患者作为疾病对照组,50例献血员(BD)作为健康人对照组.间接免疫荧光法(IFA)检测自身抗体,免疫印迹法检测抗SP100抗体.结果 IFA法检测结果,抗核抗体(ANA)阳性57例,抗线粒体抗体(AMA)阳性100例,抗平滑肌抗体(SMA)阳性3例,细胞骨架抗体(CS)阳性5例.免疫印迹法检测PBC患者抗SP100阳性16例(阳性率16.0%),AIH患者抗SP100阳性4例(6.7%),HB、HC、BD对照均阴性.PBC患者抗SP100阳性组与阴性组ANA滴度比较,差异无统计学意义;抗SP100阳性组93.8%(15/16)表现核点型ANA,其次表现核点合并核膜型,而抗SP100阴性组主要表现核膜型(70.7%),其次为着丝点型、颗粒型等.PBC患者抗SP100阳性患者与阴性患者AIT、AST、TBil、GGT、ALP、Igc、IgA、IgM水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论 抗SP100抗体阳性同时ANA为核点型有助于PBC患者的诊断.
作者:刘妍;闫惠平;檀玉芬;张海萍;赵艳;张欣;冯霞 刊期: 2009年第04期
痰液细胞学检查对肺癌的诊断具有重要意义.痰液细胞病理学检查特异性高,但由于肿瘤细胞少且有大量炎性细胞混杂,敏感性较低.为了提高痰标本检查的阳性率,本文比较了高渗盐水雾化吸入诱导痰离心沉淀涂片、常规咳痰以及纤维支气管镜(纤支镜)检查癌细胞3种方法,探讨诱导痰技术在肺癌细胞筛查中的应用价值.
作者:汪洪杰;潘敏;朱延龄;孟德娣;吕莉萍 刊期: 2009年第04期
微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长度为19~24个核苷酸的非编码单链核糖核酸分子,体内已发现600多种.这些miRNA能够调控高达30%的蛋白质编码基因的表达[1].miRNA通过与靶mRNA 3'端非翻译序列完全或部分互补结合,导致靶mRNA降解或转录后翻译抑制从而调控靶基因的表达[2].miRNA在细胞凋亡、分化、增殖等重要的生理病理过程中发挥重要作用[3-5].研究发现,在一些病理过程中人血清/血浆miRNA表达谱会发生特征性的改变,这些改变有助于对疾病进行早期诊断和预后判断.
作者:严其容;王成;张春妮 刊期: 2009年第04期
本研究旨在评价送检时间及运送条件对电化学发光免疫分析(ECLIA)检测甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)可能存在的影响.
作者:张宇;熊中云;邓智勇;安振梅 刊期: 2009年第04期
为了解本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床流行状况及产酶株的耐药情况,我们对2006~2007年间我院分离的两菌共181株进行了耐药性分析.
作者:孙振亚;郭强忠;张肆鹏;李文郎 刊期: 2009年第04期
目的 利用大肠埃希菌体外表达系统克隆、表达解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)多条带抗原(MB抗原)并对其抗原性进行分析.方法 将MB抗原基因的5'端保守性序列克隆到Gateway系统表达载体pDEST17上,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达.通过载体携带的6×His标签,纯化体外表达重组蛋白.并将重组蛋白与临床感染Uu的患者血清反应检测重组蛋白的抗原性.结果 DNA序列分析证明MB抗原基因5'端414 bp的保守序列成功克隆至表达载体上,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达的重组蛋白与MB抗原大小符合.免疫印迹结果表明,体外重组表达的MB抗原能够与Uu感染的患者血清反应,提示其抗原性良好.结论 解脲脲原体MB抗原的体外表达及其良好的抗原性,有助于建立Uu感染的血清学检测方法.
作者:孙竞;吴鹏;李蓓;吴均竹 刊期: 2009年第04期
本文对我院近年引流置管感染的常见病原菌及其耐药情况进行分析,结果如下.
作者:张红升 刊期: 2009年第04期
目的 探讨Graves病(GD)患者糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA表达水平的变化及意义.方法 用实时荧光定量PCR法检测22例GD未治疗组、23例GD临床缓解组及18例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)GITR mRNA相对表达水平;用化学发光法测定各组血浆中甲状腺激素水平,并评价GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平与甲状腺激素水平的相关性.结果 GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平明显低于临床缓解组和健康时照组(χ2=18.48,P<0.01χ2=18.26,P<0.01),而GD临床缓解组与健康对照组差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05).GD未治疗组GITRmRNA相对表达水平与FT3、FT4水平均呈负相关(r=-0.509、r=-0.483,P均<0.05),而与TSH呈正相关(r=0.458,P<0.05).结论 GD的发生可能与GD患者体内GITR基因表达下调有关.
作者:王海生;王胜军;崔大伟;陈建国;柳迎昭;杨先知;史烨;仝佳;许化溪 刊期: 2009年第04期
为了解不同厂家甲苯胺红试验(TRUST)试剂的检测结果是否一致,我们选用使用较多的两家TRUST试剂进行比较.
作者:莫小辉;金月兰;杨阳;胡伟忠;顾伟鸣 刊期: 2009年第04期
目的 观察应用诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)靶向阻断信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对肝癌细胞Hep G2的影响,初步探讨其中的分子机制.方法 体外合成的STAT3 decoy ODNs在脂质体的介导下转染Hep G2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率;通过细胞生长曲线观察对细胞增殖的影响;annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;实时定量PCR检测STAT3下游基因bcl-xL、cyclin D1和c-myc的表达.结果 荧光显微镜和流式细胞仪检测表明decoy ODNs能有效转染Hep G2细胞,转染效率达90.2%;生长曲线显示decoy ODNs有效抑制Hep G2细胞增殖;decoy ODNs处理细胞48 h后,流式细胞仪annexin-V/PI染色检测到早期细胞凋亡率为(22.86±2.63)%,晚期细胞凋亡率为(23.00±2.76)%;实时定量PCR证实decoy ODNs下调bcl-xL、cyclin D1和c-myc mRNA表达.结论 STAT3 decoy ODNs能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调STAT3下游bcl-xL、cyclin D1和c-myc基因的表达相关.
作者:史梅;史伟峰;魏江 刊期: 2009年第04期
乙型肝炎的发生并不是由乙肝病毒(HBV)直接侵袭肝细胞引起,而是与病毒抗原和机体免疫系统相互作用有关.细胞因子在其中的作用越来越受到重视.本研究检测了不同临床类型HBV感染患者血清5种细胞因子的水平并探讨它们与HBV感染状态的联系.
作者:潘继承 刊期: 2009年第04期
目的 比较2型糖尿病(T2DM)肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异,建立T2DM肾病诊断模型,探讨此技术对该病诊断的价值.方法 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清,获得蛋白质指纹图谱.结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000~30 000范围内共检测到175个蛋白峰,其中有17个蛋白峰明显表达差异(P<0.01).筛选其中质荷比(m/z)分别为5 420、5 782、6 472、6666、10 277和11 770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型.利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测,结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81.0%和96.2%.结论 利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型,为该病诊断提供了新途径.
作者:黄波;黄文方;刘华;杨永长;肖代雯;姜伟;胡琦;冯文莉 刊期: 2009年第04期
在CAP(College of America Pathologists)实验室认证的Checklist中,对实验室仪器用水做出规定:Ⅰ类细菌数应少于10 CFU/ml,Ⅱ类应少于1 000 CFU/ml[1].同样在NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards)的GUIDLINE C3-A3中也有类似规定[2].我们对此进行了初步的调查,报道如下.
作者:徐宁;罗强;曹永坚 刊期: 2009年第04期
目的 构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性.方法 用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达栽体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmidct-EGFP,转染昆虫Sf9细胞.结果 SDS-PAGE和westem blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白.以ELIA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应.阳性率为53.6%.结论 该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性.
作者:沈剑平;朱诗应 刊期: 2009年第04期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中分叉头框(forkhead box,FOX)转录因子-1 mRNA表达水平的变化,了解它在T2DM发病中的作用.方法 采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法对62例T2DM患者和40例健康人检测PBMC中FOXO1 mRNA表达水平.结果 T2DM患者PBMC中FOX01 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P<0.05).结论 T2DM患者的FOX01 mRNA表达较健康对照组表达增加.
作者:蔡惠芬;史进方;顾国浩;杨春香 刊期: 2009年第04期
目的 以国产电泳仪为平台,建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统.方法 用国产SH-2020电泳仪为平台建立非浓缩尿蛋白质全自动SDS-AGE电泳系统,以Hydurasys(Sebia)全自动电泳系统对照,对120例尿蛋白质阳性标本进行电泳、染色、程序扫描和结果分析.结果 非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统可有效地将尿蛋白质按分子量大小分离,结果与Hydrasys全自动电泳系统一致.结论 建立的非浓缩尿蛋白质SH-2020全自动SDS-AGE电泳系统对尿蛋白质分离效果好,灵敏度高,可自动化操作,可取代进口设备,成本低廉.
作者:王永杰;马萍;王东来;李晓洲;骆晓梅;陶征中;高惠;张阳 刊期: 2009年第04期