李启亮；宋文琪；徐樨巍；周敏；金芳
目的 利用大肠埃希菌体外表达系统克隆、表达解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)多条带抗原(MB抗原)并对其抗原性进行分析.方法 将MB抗原基因的5'端保守性序列克隆到Gateway系统表达载体pDEST17上,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达.通过载体携带的6×His标签,纯化体外表达重组蛋白.并将重组蛋白与临床感染Uu的患者血清反应检测重组蛋白的抗原性.结果 DNA序列分析证明MB抗原基因5'端414 bp的保守序列成功克隆至表达载体上,SDS-PAGE显示在大肠埃希菌中表达的重组蛋白与MB抗原大小符合.免疫印迹结果表明,体外重组表达的MB抗原能够与Uu感染的患者血清反应,提示其抗原性良好.结论 解脲脲原体MB抗原的体外表达及其良好的抗原性,有助于建立Uu感染的血清学检测方法.
作者：孙竞；吴鹏；李蓓；吴均竹 刊期： 2009年第04期
目的 研究[间隙]连接蛋白37(Cx37)基因C1019T多态性与急性心肌梗死(AMI)相关生化指标变化的关系.方法 用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术结合琼脂糖凝胶电泳,研究283例(病例组136例,健康对照组147例)受试者Cx37 C1019T多态性位点的基因型,并分析研究对象血清中cTnI、CK-MB、CRP、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA I、apoB和Lp(a)的含量与Cx37基因C1019T多态性的关系.结果 在病例组和对照组之间,CC、CT和TT基因型受试者cTnI、CK-MB和CRP水平存在显著差异(P<0.05),CT型和TT型受试者LDL-C水平有显著差异(P值分别为0.030和0.026),3种基因型的TC、TG、HDL-C、apoA Ⅰ、apoB和Lp(a)水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 LDL-C水平差异可能是导致Cx37基因C1019T多态性具不同的AMI患病风险因素之一.
作者：张成禄；王前；谢健敏；郑磊；于新发；曾方银；吴焱贤；莫海鹰 刊期： 2009年第04期
本文对我院近年引流置管感染的常见病原菌及其耐药情况进行分析,结果如下.
作者：张红升 刊期： 2009年第04期
目的 构建含截短的HCV核心蛋白基因和绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒表达载体,探讨其在Sf9细胞中的表达和抗原性.方法 用PCR法扩增截短的HCV核心蛋白基因片段(Ct)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,将其插入转座子载体pFastBac1,构建成重组表达栽体pFastCt-EGFP,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmidct-EGFP,转染昆虫Sf9细胞.结果 SDS-PAGE和westem blot鉴定表明成功表达了分子量约40 000的融合蛋白.以ELIA法检测发现该融合蛋白能与28份抗HCV抗体阳性血清中的15份发生反应.阳性率为53.6%.结论 该融合蛋白在昆虫Sf 9细胞中成功表达并具有一定的抗原性.
作者：沈剑平；朱诗应 刊期： 2009年第04期
目的 探讨Graves病(GD)患者糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA表达水平的变化及意义.方法 用实时荧光定量PCR法检测22例GD未治疗组、23例GD临床缓解组及18例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)GITR mRNA相对表达水平;用化学发光法测定各组血浆中甲状腺激素水平,并评价GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平与甲状腺激素水平的相关性.结果 GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平明显低于临床缓解组和健康时照组(χ2=18.48,P<0.01χ2=18.26,P<0.01),而GD临床缓解组与健康对照组差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05).GD未治疗组GITRmRNA相对表达水平与FT3、FT4水平均呈负相关(r=-0.509、r=-0.483,P均<0.05),而与TSH呈正相关(r=0.458,P<0.05).结论 GD的发生可能与GD患者体内GITR基因表达下调有关.
作者：王海生；王胜军；崔大伟；陈建国；柳迎昭；杨先知；史烨；仝佳；许化溪 刊期： 2009年第04期
引起原发性真菌性肺炎的大多是皮炎芽生菌、荚膜组织胞浆菌或粗球孢子菌,其次是申克孢子丝菌、隐球菌、曲菌或毛霉菌等菌属.由链格孢(Alternaria)真菌引起肺部感染的病例非常少见.本文报道链格孢真菌引起肺部感染病例1例.
作者：贾俊梅；张宁 刊期： 2009年第04期
目的 探讨慢性肝炎患者6项指标用于肝纤维化评估的价值.方法 185例慢性肝炎患者行常规肝穿刺、组织病理学诊断,用ELISA法检测血清中结缔组织生长因子(CTGF)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)、转化生长因子-β1(TGF-β1),常规检测凝血酶原时间(PT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和血小板(PLT)及其计算指标APRI(AST/PLT),用ROC曲线评估这些指标在肝纤维化诊断中的价值.结果 血清CTGF、PDGF-BB、TIMP-1、TGF-β1、APRI、PT的ROC曲线下面积(AUC)分别为:0.833,0.811,0.669,0.529,0.809,0.625.联合CTGF和APRI可以明显提高诊断的准确性.结论 CTGF、PDGF-BB、APRI在肝纤维化评估中有较高的诊断价值,联合这些指标可以提高肝纤维化的诊断性能.
作者：张岱；王念跃；史玉领；房国祥 刊期： 2009年第04期
目的 观察应用诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)靶向阻断信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)对肝癌细胞Hep G2的影响,初步探讨其中的分子机制.方法 体外合成的STAT3 decoy ODNs在脂质体的介导下转染Hep G2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率;通过细胞生长曲线观察对细胞增殖的影响;annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;实时定量PCR检测STAT3下游基因bcl-xL、cyclin D1和c-myc的表达.结果 荧光显微镜和流式细胞仪检测表明decoy ODNs能有效转染Hep G2细胞,转染效率达90.2%;生长曲线显示decoy ODNs有效抑制Hep G2细胞增殖;decoy ODNs处理细胞48 h后,流式细胞仪annexin-V/PI染色检测到早期细胞凋亡率为(22.86±2.63)%,晚期细胞凋亡率为(23.00±2.76)%;实时定量PCR证实decoy ODNs下调bcl-xL、cyclin D1和c-myc mRNA表达.结论 STAT3 decoy ODNs能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调STAT3下游bcl-xL、cyclin D1和c-myc基因的表达相关.
作者：史梅；史伟峰；魏江 刊期： 2009年第04期
本研究旨在评价送检时间及运送条件对电化学发光免疫分析(ECLIA)检测甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)可能存在的影响.
作者：张宇；熊中云；邓智勇；安振梅 刊期： 2009年第04期
医学检验论文中,同一医学名词在不同刊物上常常使用不同的译名;甚至同一刊物前后所译名也不一致.
作者：武建国 刊期： 2009年第04期
痰液细胞学检查对肺癌的诊断具有重要意义.痰液细胞病理学检查特异性高,但由于肿瘤细胞少且有大量炎性细胞混杂,敏感性较低.为了提高痰标本检查的阳性率,本文比较了高渗盐水雾化吸入诱导痰离心沉淀涂片、常规咳痰以及纤维支气管镜(纤支镜)检查癌细胞3种方法,探讨诱导痰技术在肺癌细胞筛查中的应用价值.
作者：汪洪杰；潘敏；朱延龄；孟德娣；吕莉萍 刊期： 2009年第04期
目的 探讨抗SP100抗体与核点型抗核抗体对原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床意义.方法 选取PBC患者100例,60例自身免疫性肝炎(AIH)患者、50例慢性乙型肝炎(HB)患者和50例慢性丙型肝炎(HC)患者作为疾病对照组,50例献血员(BD)作为健康人对照组.间接免疫荧光法(IFA)检测自身抗体,免疫印迹法检测抗SP100抗体.结果 IFA法检测结果,抗核抗体(ANA)阳性57例,抗线粒体抗体(AMA)阳性100例,抗平滑肌抗体(SMA)阳性3例,细胞骨架抗体(CS)阳性5例.免疫印迹法检测PBC患者抗SP100阳性16例(阳性率16.0%),AIH患者抗SP100阳性4例(6.7%),HB、HC、BD对照均阴性.PBC患者抗SP100阳性组与阴性组ANA滴度比较,差异无统计学意义;抗SP100阳性组93.8%(15/16)表现核点型ANA,其次表现核点合并核膜型,而抗SP100阴性组主要表现核膜型(70.7%),其次为着丝点型、颗粒型等.PBC患者抗SP100阳性患者与阴性患者AIT、AST、TBil、GGT、ALP、Igc、IgA、IgM水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论 抗SP100抗体阳性同时ANA为核点型有助于PBC患者的诊断.
作者：刘妍；闫惠平；檀玉芬；张海萍；赵艳；张欣；冯霞 刊期： 2009年第04期
本文旨在探讨应用TDx和Viva ETM分析系统测定地高辛和环孢霉素的血药浓度,对2种方法结果的可比性进行评估,以确定本实验室2种方法的差异,为指导临床合理用药提供依据.
作者：黄一玲；田蕾；蒋娟娟；刘红；严岩；管晓媛；李一石 刊期： 2009年第04期
临床形态学检验仍然是检验学科中基本的技能,也是临床实验室简便、快捷、经济实用的常规检验方法,其中革兰染色法,就是此类检验方法之一.为了探讨革兰染色的质量问题,我们设计了以下试验进行初步调查.
作者：刘瑾；徐志学 刊期： 2009年第04期
目的 分析液-质串联质谱检测干血滤纸片氨基酸水平的影响因素,寻找消除这些影响因素的方法.方法 设立3个影响因素组:①不同打孔位置组;②4℃条件下,不同滤纸片保存时间组;③室温条件下,不同放置时间组.比较在上述条件下检测干血滤纸片的氨基酸水平.结果 不同的打孔位置对于19种氨基酸的测定没有明显的影响.不同的纸片保存时间对多数氨基酸的测定没有明显的影响,但是Glu、Gly、Pro、Ser 4种氨基酸的水平随着纸片保存时间的不同而发生了明显的变化;不同的放置时间对多数氨基酸的测定没有明显影响,但是Arg、Gln、Glu、Lys、Tyr 5种氨基酸的水平随着放置时间的不同而发生了明显的变化.结论 在使用串联质谱法检测干血滤纸片上的氨基酸水平时应使用新鲜纸片,及时进行预处理,从而保证结果的稳定性和准确性.
作者：李启亮；宋文琪；徐樨巍；周敏；金芳 刊期： 2009年第04期
绿色气球菌为条件致病菌,广泛分布于自然界,一般对人不致病,在机体免疫功能低下或婴幼儿免疫功能不健全等情况下可引起严重感染.2009年3月我们从本院食管癌术后患者切口分泌物和胸腔引流液中均培养出绿色气球菌.现报告如下.
作者：郭凤丽；周友全；顾瑛 刊期： 2009年第04期
病毒感染的检测主要依靠病原学、免疫学和分子生物学的方法[1],近年来基因芯片和蛋白质芯片也应用于病毒感染的检测.蛋白质芯片与常规检验方法中的形态染色、分离培养、血清学鉴定及PCR技术相比具有大规模、高通量、多元化、快速检测、计算机自动分析结果等特点[2].
作者：余章斌；韩树萍；郭锡熔 刊期： 2009年第04期
目的 比较2型糖尿病(T2DM)肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异,建立T2DM肾病诊断模型,探讨此技术对该病诊断的价值.方法 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清,获得蛋白质指纹图谱.结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证.结果 在相对分子量2 000～30 000范围内共检测到175个蛋白峰,其中有17个蛋白峰明显表达差异(P<0.01).筛选其中质荷比(m/z)分别为5 420、5 782、6 472、6666、10 277和11 770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型.利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测,结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81.0%和96.2%.结论 利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型,为该病诊断提供了新途径.
作者：黄波；黄文方；刘华；杨永长；肖代雯；姜伟；胡琦；冯文莉 刊期： 2009年第04期
目的 评价血浆B型钠尿肽(BNP)的化学发光免疫分析法(CLIA)以了解其检测性能,同时调查国人参考区间.方法 用Biosite公司的Triage BNP试剂盒,在Beckman coulter AccessⅡ上测定,参照EP文件,对该方法的线性、测定下限、灵敏度、精密度、抗干扰能力进行评价,观察BNP的体外稳定性;选择表观健康人共421名(男202名,女219名),按性别,以10岁为一个间隔分为6个年龄组,测定EDTA抗凝血浆中的BNP浓度,并确立各年龄和性别组的参考区间.结果 CLIA法测定人血浆BNP的线性范围15～5 040 ng/L,测定下限9.2 ng/L;灵敏度1.4 ng/L;CV 10%处为30 ng/L;胆红素<253μmol/L、Hb浓度<4 g/L、TG<12.88 mmol/L对BNP测定无影响.BNP在全血中室温可稳定8 h,4℃可稳定24 h;在血浆中室温可稳定6h,4℃可稳定8 h,-70℃稳定6个月.BNP随年龄逐渐升高,女性高于男性.<55岁者年龄差异无统计学意义(P>0.05),但性别差异有统计学意义(P<0.05),男性P97.5为34.5 ng/L,女性为57.8 ng/L;>55岁者性别间无差异(P>0.05),55～74岁P9563.6 ng/L,P95.5 96 ng/L;≥75岁者P95 99.7 ng/L,P97.5为100.7 ng/L.结论 测定BNP的CLIA法线性范围宽,灵敏度高,测定下限、检测精密度以及抗干扰能力均能满足临床要求;BNP在常规条件下保存时稳定性良好.建议采用单侧P97.5作为参考区间,<55岁男性为<34.5 ng/L,女性为<57.8 ng/L;55岁以上不分性别均为<100.4 ng/L.
作者：王学晶；徐国宾；李海霞；焦莉莉 刊期： 2009年第04期
目的 比较间接免疫荧光(IIF)、免疫印迹(WB)和ELISA3种检测方法测定抗dsDNA、抗核小体抗体(AnuA)和抗dsDNA核小体复合物(dsDNA-NcX)抗体结果,评价其对SLE诊断的价值.方法 用3种方法测定87例SLE患者,98例疾病对照患者和50例健康人血清中的抗dsDNA,AnuA和抗dsDNA-NcX抗体水平,用ROC曲线分析它们的诊断性能.结果 SLE患者检查抗dsDNA抗体三法中以ELISA法敏感性高(57.5%),其次为WB法(47.5%),IIF法敏感性低(43.7%),但均显著高于各自的疾病对照和正常对照组(P<0.01).同一方法所测AnuA(WB法)或抗dsDNA-NcX抗体(ELISA法)对SLE诊断敏感性和特异性均高于抗dsDNA抗体.3种方法所测抗体结果对SLE诊断准确性均为中等水平,但相对以抗dsDNA-NcX抗体(ELISA法)的诊断准确性高(AUC值0.865).3种方法联合检测,可提高对SLE的诊断敏感性(72.4%),但特异性却有所降低(85.9%),其对SLE的诊断准确性无明显改善.抗核抗体(ANA)核均质型者与抗dsDNA/AnuA/或抗dsDNA-NcX抗体阳性结果间具有显著相关性(χ2=52.225,P=0.000),因其对SLE特异性和阳性预测值低(分别为72.3%和0.658),故仅具有筛查价值.结论 3种方法所测抗dsDNA,AnuA和抗dsDNA-NcX抗体对SLE敏感性不尽相同,但均具有中等水平的诊断准确性和较好特异性,其中以ELISA法所测抗dsDNA-NcX抗体的诊断效果较佳.
作者：杨林；虞伟 刊期： 2009年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
