学术投稿

鱼精蛋白和肝素预处理ELISA检测抗双链DNA抗体的研究

徐兵;陈怡;黄毅;马晓宁;潘晨;伍严安

关键词:系统性红斑狼疮(SLE), 抗dsDNA抗体, ELISA, 鱼精蛋白, 肝素
摘要:目的 建立一种特异性好的检测抗双链DNA抗体的ELISA.方法 先用鱼精蛋白再用DNA依次包被反应板,建立鱼精蛋白包被ELISA(P-ELISA);再用肝素封闭未与DNA结合的鱼精蛋白位点,建立肝素封闭P-ELISA.用P-ELISA、肝素封闭P-ELISA和生物薄片免疫荧光法(BC-IF)对照检测了53例活动性SLE,44例非活动性SLE和27例其他AID患者的抗dsDNA抗体.结果 在P-ELISA检出的57例抗dsDNA抗体阳性中,有11例(活动性SLE 5例,非活动性SLE 6例)在肝素封闭P-ELISA检测为阴性,这11例经BC-IF验证全部为阴性;而在肝素封闭P-ELISA检出的46例阳性中,仅1例(非活动性SLE)与BC-IF不符.结论肝素封闭P-ELISA可降低P-ELISA检测抗dsDNA抗体的假阳性率.
临床检验杂志相关文献
  • 炎症因子在脊髓损伤SD大鼠脑脊液和血液中表达的比较研究

    目的 探讨脊髓损伤后脑脊液和外周血中TNF-α、IL-6和IL-10的表达水平及其动态变化.方法 采用成年SD大鼠重击法脊髓损伤模型,用ELISA方法测定脊髓损伤急性期内炎症因子在脑脊液和血液中相对含量和动态变化;同时用免疫组织化学方法,观察炎症因子在脊髓神经细胞和胶质细胞表达情况.结果 ELISA测定结果显示炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10在脊髓损伤大鼠脑脊液内有较强表达,而在血液中表达很低.免疫组织化学染色显示脊髓组织中神经细胞和神经胶质细胞大量表达炎症因子.结论脊髓损伤的急性期内,神经细胞和神经胶质细胞是脊髓损伤急性期内炎症因子的主要来源,神经细胞和胶质细胞直接参与了损伤局部组织的固有免疫反应.

    作者:吕志刚;孙湘兰;许燕;龚爱华;梁燕;崔颜红;陈静;张志坚 刊期: 2008年第05期

  • 连云港地区儿童微量营养素缺乏的状况分析

    1992年的<世界营养宣言>(世界营养会议,罗马)指出,有20亿以上的人口(主要是妇女和儿童)患有一种或多种微量营养素缺乏症.我国是锌、铁等多种微量营养元素不足十分普遍的国家[1].为了解连云港地区婴幼儿(0.6~6岁)的微量营养素缺乏(或超标)现状,我们进行了调查分析,报告如下.

    作者:王刚;宋继成;王艳娟;宋传涛;钱俊楠;范永桥 刊期: 2008年第05期

  • COBA E601电化学发光检测系统测定β-HCG的分析测量范围和临床可报告范围的验证

    目的 验证罗氏COBAS E601电化学发光检测系统检测β-绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的分析测量范围(AMR)和临床可报告范围(ERR).方法 按照NCCLS EP6-A文件要求,对本实验室Roche公司COBAS E601电化学发光检测系统检测β-HCG进行AMR和CRR的验证实验.结果 β-HCG的功能灵敏度为0.117 mIU/ml;AMR在0.14~9763.0 mIU/ml;CRR在0.117~1 952 600 mIU/ml之间.结论 COBAS E601电化学发光检测系统测定β-HCG的AMR和CRR能满足临床要求,但各实验室不可盲目采信厂家提供的参数.

    作者:邱方;张世忠;冯涛 刊期: 2008年第05期

  • Testsimplets染色玻片法与改良巴氏染色法分析精子形态的比较

    目的 了解Testsimplets染色玻片法分析精子形态的临床应用价值.方法 将240例男性不育患者随机分为精子Testsimplets染色玻片组(120例)和改良巴氏染色法组(120例),进行精子形态学分析.比较两法的操作时间、条件、试剂配制和着色效果等指标.结果 Testsimpte协染色玻片法无需配制试剂、反复冲洗等繁琐工序,操作时间远远短于改良巴氏染色法;精子轮廓清晰,非精子细胞成分易于判读,效果与改良巴氏染色法相似.结论 Testsimplets染色玻片法操作简便,效果肯定,无需特殊设备即可进行精子形态评估.

    作者:刁英;杨智敏;谭兵兵;张明哲 刊期: 2008年第05期

  • 铜绿假单胞菌高突变株检测及耐药分析

    目的 了解铜绿假单胞菌高突变菌株的分离情况及其耐药性.方法 对分离的细菌用API 20NE系统鉴定,药敏试验用K-B法,结果按NCCLS/CLSI规定判断,采用高浓度利福平耐药生长试验检测高突变菌株.结果 在100株铜绿假单胞菌中,高突变菌株的分离率为37.0%.高突变菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的耐药率以及多重耐药率均显著高于非高突变菌株.结论高突变铜绿假单胞菌主要来源于慢性呼吸道感染,且对多种抗生素高度耐药和多重耐药,应加强监控,防止其在院内流行.

    作者:曹伟;姚冬梅;郑荣 刊期: 2008年第05期

  • 血小板输注无效与抗HLA抗体相关性

    目的 研究抗HLA抗体与血小板输注无效的关系.方法 用流式细胞术检测患者抗HLA抗体,并通过检测输注血小板前后的血小板数量计算出血小板增加校正值(CCI)来分析抗HLA抗体与血小板输注无效的关系.结果 25名患者中抗HLA抗体阳性16例,占64%;血小板输注无效16例中,抗HLA抗体阳性15例,阴性1例.抗HLA抗体阳性患者血小板输注无效率显著高于抗HLA抗体阴性患者.结论多次输血患者体内易产生抗血小板抗体,导致血小板榆注无效,其中抗HLA抗体是引起血小板输注无效的重要原因之一.

    作者:林军;杨欢;王文伟 刊期: 2008年第05期

  • 嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株的脉冲场凝胶电泳基因分型

    目的 应用脉冲场凝胶电泳技术对嗜麦芽窄食单胞菌(SMA)进行基因分型研究,探讨本菌的医院感染特征.方法 对2004~2007年分离的165株SMA进行纸片扩散法药敏试验,用PCR的方法进行耐消毒剂基因的检测,脉冲场凝胶电泳(PF-GE)全DNA指纹图谱技术进行分子分型.结果 SMA肺部感染占全部病例的87.9%.对SMA敏感率在80%以上的有米诺环素、左氧氟沙星、复方新诺明;60株SMA耐消毒剂基因的阳性株数为8株(13.3%);11株SMA进行PFGE同源性分析,结果表明在呼吸ICU和急诊ICU分别有同一克隆株的传播,在呼吸ICU和急诊ICU之间也有同一克隆株的传播.结论 SMA是一种重要的医院感染病原菌,由于它的多重耐药性及同克隆株的传播,临床应加强消毒灭菌及患者的隔离.

    作者:时东彦;赵建宏;李仲兴;姜慧卿 刊期: 2008年第05期

  • 新疆维吾尔族人群血管紧张素转换酶基因多态性分析

    目的 研究新疆维吾尔族人群血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失多态性分布情况.方法 采用PCR技术,对新疆地区维吾尔族健康人群和汉族人作ACE I/D基因型检测,分类计数进行统计学分析.结果 维吾尔族人群ACE基因频率DD型,DI型和D等位基因频率高于本地区汉族人群,种族内ACE基因多态性的分布与性别无关.结论维吾尔族人群ACE基因I/D多态性与本地区汉族人群和日本人群不同,与欧美人群相近.

    作者:江雪萍;冯秀丽;杨忠伟;肖白;梁晓安 刊期: 2008年第05期

  • 不稳定心绞痛患者CRP、IL-6和Fib动态测定结果及临床意义

    目的 对不稳定性心绞痛(UAP)患者动态测定CRP、白细胞介素6(IL-6)和纤维蛋白原(Fib)水平并探讨其临床意义.方法 将75例(UAP)患者分为低、中、高危险组作为观察组、30例体检健康人为对照组,分别在入院和出院时取血测定CRP、IL-6和Fib,观察各组结果,并于出院后对UAP患者随访3个月,观察心脏事件发生情况.结果 UAP患者入院时CRP、IL-6和Fib水平明显高于对照组(P<0.01),且随UAP患者危险分级递增而递增(P<0.05或P<0.01);出院时CRP、IL-6和Fib升高组心脏事件发生率分别高于正常组(P<0.01);对预测近期心脏事件发生,CRP、IL-6和Fib有较高的敏感性,但特异性及阳性预测值较低.结论 CRP、IL-6和Fib 3种炎症反应标志物水平的变化可反映UAP患者的病情及预后.

    作者:邹德学;吴志成;李卫宁;唐晖 刊期: 2008年第05期

  • 血清碱性磷酸酶红腰豆凝集素结合率测定在肝癌诊断中的意义

    目的 观察血清碱性磷酸酶L型红腰豆凝集素(L-PHA)结合率测定在肝癌诊断中的意义.方法 采用凝集素亲和层析法测定50例正常人、103例原发性肝癌、22例肝硬化、36例慢性肝炎、18例急性肝炎和13例消化道肿瘤患者的血清碱性磷酸酶L-PHA结合率.结果 原发性肝癌患者血清碱性磷酸酶L-PHA结合率(16.01±5.42)%明显高于正常对照组(7.50±2.53)%(P<0.01),且与肿瘤大小、AFP水平呈显著性正相关(P<0.01).肝硬化、慢性肝炎和消化道肿瘤组轻度增高,而急性肝炎组未见显著性改变.结论血清碱性磷酸酶L-PHA结合率测定有助于原发性肝癌的实验诊断.

    作者:陈国千;王春新;胡志刚;陈筱菲 刊期: 2008年第05期

  • 改良巴氏涂片法在宫颈病变筛查中的应用分析

    传统巴氏涂片法在宫颈病变筛查中具有公认的成本低廉优势,但其检出率低是一个亟待解决的问题.我们对传统的巴氏涂片法从采样、固定、染色、报告方式等各方面进行了改良,并与传统法结果比较,效果满意.

    作者:蔡虹;郭利鸿;关婷;洪寞 刊期: 2008年第05期

  • 流式荧光免疫法检测多种肿瘤标志物的方法学评价

    流式荧光免疫法可同时对多种肿瘤标志物进行检测,为了解本法是否能在临床常规检测中应用,我们进行了方法学考核,并以AFP、CA125、CEA、CA19-9、PSA 5种肿瘤标志物为例,与Roche公司2010电化学发光仪测定结果进行了相关性分析.报告如下.

    作者:徐京昕;鲁劲松;张宏印 刊期: 2008年第05期

  • 痰液中分离出1株蕈状芽胞杆菌

    2007年12月我们从1例肺炎儿童痰中分离出1株蕈状芽胞杆菌(Bacillus mycoides),报道如下.

    作者:苏燕;胡琼 刊期: 2008年第05期

  • P-选择素测定在急性心肌梗死患者溶栓治疗中的应用价值

    我们采用ELISA双抗体夹心法动态测定接受溶栓治疗的急性心肌梗死(AMI)患者血浆中血小板α-颗粒膜蛋白(P-选择素,又称GMP-140)含量变化,以探讨其临床应用价值,现报道如下.

    作者:耿美容;辛晓敏 刊期: 2008年第05期

  • 孕早期绒毛膜细胞原位培养法用于地中海贫血的产前诊断

    目的 探讨孕早期绒毛膜细胞原位培养及在地中海贫血(简称地贫)产前诊断中的应用价值,评价其在产前诊断中的可行性.方法 用COOK公司的绒毛活检吸管,经宫颈吸取绒毛膜细胞(chorionic villus samplings,CVS)标本,分两组:1组直接行地贫基因诊断,另1组进行绒毛膜细胞原位培养,收获细胞后行地贫基因诊断.结果 取材手术69例,64例取材成功,63例绒毛膜细胞原位培养成功,1例培养失败,培养成功率为98.44%.64例中有6例绒毛取材量极少,无法直接提取DNA行地贫基因诊断,经培养后完成基因诊断.产前诊断结果:63例中29例正常儿,异常34例,其中:Bart's胎儿2例,HbH胎儿1例,α地贫基因携带者12例,HbCS胎儿2例,β地贫纯合子3例,β重型地贫6例,β地贫基因携带者5例,α+β复合地贫纯合子1例,α+β复合地贫杂合子2例.结论孕早期绒毛膜细胞原位培养方法简单易行,技术稳定,需标本量少,安全,结果可靠.可应用于地贫的产前诊断.

    作者:黄莉;何冰;谢丹尼;陈一君;吕福通;檀大羡;莫璐 刊期: 2008年第05期

  • 老年甲状腺功能异常者高半胱氨酸测定的临床意义

    目的 了解老年甲状腺功能异常患者血清总高半胱氨酸(homocysteine,HCY)水平,探讨其与甲状腺功能及在心血管疾病中的相关性.方法 收集30例甲状腺功能亢进(甲亢)、29例甲状腺功能减退(甲减)老年患者及36例体检健康人员的血清,用ELISA法测定血清HCY,酶法测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C,电化学发光法测定甲状腺功能指标FT3、FT4.结果 老年甲减组HCY高于对照组(P<0.01),甲亢组HCY低于时照组(P<0.01);甲减组HCY与TG水平呈正相关且甲减组、甲亢组HCY与FT3、FT4均呈负相关.结论老年患者血清总HCY水平与甲状腺功能存在相关性,可作为甲减患者并发冠心痛的危险因素的监测指标.

    作者:朱建一 刊期: 2008年第05期

  • 新疆哈萨克及维吾尔族SLE和RA患者MBL基因多态性调查

    目的 对新疆哈萨克及维吾尔族人群中系统性红斑狼疮(SLE)及类风湿关节炎(RA)患者甘露糖结合凝集素基因54位密码子点突变进行测定并分析.方法 PCR-RFLP.结果 42例哈萨克族SLE患者基因频率:0.536(GGC),0.464(GAC);24例维吾尔族SLE患者基因频率:0.667(GGC),0.333(GAC);22例哈萨克族RA患者基因频率:0.614(GGC),0.386(GAC);15例维吾尔族RA患者基因频率:0.733(GGC),0.267(GAC).结论 MBL不同的基因型和这些疾病发生可能存在相关.

    作者:张红梅;班谦;赵宗胜;曹旭东;丁进;王丽娅;程江 刊期: 2008年第05期

  • 鱼精蛋白和肝素预处理ELISA检测抗双链DNA抗体的研究

    目的 建立一种特异性好的检测抗双链DNA抗体的ELISA.方法 先用鱼精蛋白再用DNA依次包被反应板,建立鱼精蛋白包被ELISA(P-ELISA);再用肝素封闭未与DNA结合的鱼精蛋白位点,建立肝素封闭P-ELISA.用P-ELISA、肝素封闭P-ELISA和生物薄片免疫荧光法(BC-IF)对照检测了53例活动性SLE,44例非活动性SLE和27例其他AID患者的抗dsDNA抗体.结果 在P-ELISA检出的57例抗dsDNA抗体阳性中,有11例(活动性SLE 5例,非活动性SLE 6例)在肝素封闭P-ELISA检测为阴性,这11例经BC-IF验证全部为阴性;而在肝素封闭P-ELISA检出的46例阳性中,仅1例(非活动性SLE)与BC-IF不符.结论肝素封闭P-ELISA可降低P-ELISA检测抗dsDNA抗体的假阳性率.

    作者:徐兵;陈怡;黄毅;马晓宁;潘晨;伍严安 刊期: 2008年第05期

  • 消化道肿瘤患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的检测

    CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T,Treg)是一类维持机体免疫动态平衡的T淋巴细胞亚群,具有免疫无能性和免疫抑制性特点[1-2].

    作者:毛朝明;王胜军;蒋茜;徐庆雷;仝佳;马洁;许文荣;许化溪 刊期: 2008年第05期

  • 肝癌患者血浆apoM水平与其他脂类的相关性研究

    目的 分析肝癌患者血浆中载脂蛋白M(apoM)的水平,阐明apoM与其他脂蛋白或载脂蛋白的关系.方法 应用dot-blotting技术检测36例肝癌患者及64名健康人血浆中apoM的水平,酶法及比浊法检测肝癌患者血浆中TG、TC、apoAI、apoB、Lp(a)、HDL-C、LDL-G;比较原发性肝细胞癌患者和健康人血浆中apoM的水平,并对apoM与其他脂蛋白的关系进行相关性分析.结果 血浆apoM水平肝癌组(712.87±345.98)INT/mm2明显高于健康人组(433.70±79.53)INT/mm2(t=3.399,P<0.05),差异具有统计学意义.肝癌患者血浆中的TG、HDL-C、apoA Ⅰ和Lp(a)水平明显低于健康人,而TC、apoB和LDL-C水平与健康人差异无统计学意义(P>0.05).以Pearson相关分析法检测健康人组血浆apoM与Lp(a)呈正相关(r=0.6275,P=0.0005),与HDL-C呈负相关(r=-0.4587,P=0.0161),与其他血脂成分无明显的相关性.肝癌患者血浆apoM与血脂参数无相关性.结论肝癌患者血浆apoM水平明显高于健康人,apoM分析有可能作为判断肝癌受损程度的一种辅助指标.

    作者:蒋敬庭;张晓膺;吴昌平;秦锡虎;罗光华;邓海峰;陆明洋;徐斌;郑璐;石亮荣;李敏;季枚;王赫;Ning XU 刊期: 2008年第05期

临床检验杂志

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主办:江苏省医学会