许美荣;胡丽萍;邓丽华
多药耐药(multidrug resistance,MDR)导致的化疗失败是肿瘤治疗中亟待解决的问题.鉴于临床MDR的出现常与多药耐药基因(mdr1)过度表达有关,我们在Light-CyclePCR仪上对mdr1 定量的技术方法和临床应用进行了探讨.
作者:穆会君;谢平 刊期: 2002年第04期
免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用,它具有特异性强、客观等优点,从而降低了急性白血病形态学的误诊率.但也应注意到,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响,如不进行监测有可能导致结果的失真.本文就流式细胞术(flow cyto metry,FCM)白血病免疫分型中CD45设门的重要性谈些体会.
作者:巩文玉 刊期: 2002年第04期
血浆HBV核酸模板提取质量对HBV DNA定量检测起重要作用.本文参照文献[1] 建立了PEG沉淀提取制备HBV核酸模板方法,并用于HBV DNA荧光定量PCR检测.
作者:陈晓东;陶志华;王忠永;周武 刊期: 2002年第04期
我室在采用HK法测定AMI患者血中葡萄糖浓度时,曾发现与临床不符的低葡萄糖病例,经葡萄糖氧化酶法重测,证明为假性降低.我们相继积累了26例心肌酶不同程度升高的AMI患者标本进行了这项实验研究,现将结果报告如下.
作者:李立和 刊期: 2002年第04期
血细胞自动分析仪已在国内普及,成人血细胞各项参数正常参考值调查已有较多报道.然而 ,新生儿脐血细胞各项参数正常参考值调查至今报道尚少.我们在这方面做了一些工作,简报如下.
作者:尹卫东;刘克芹;刘晨;胡晓燕;商万军;李红丽 刊期: 2002年第04期
目的应用分子生物学方法快速鉴别结核、非结核分枝杆菌临床分离株.方法通过设计两对引物分别扩增16S rDNA两条片段,根据SSCP电泳图谱与结核分枝杆菌标准株的相似性鉴别结核、非结核分枝杆菌.结果 98株临床分离株中,经细菌学鉴定93 株为结核分枝杆菌复合群,5株非结核分枝杆菌.用引物Ⅰ、Ⅱ对结核分枝杆菌复合群进行PCR-SSCP分析, 有81株与标准株有相似图谱.用引物Ⅲ、Ⅳ对非结核分枝杆菌进行PCR-SSCP分析,均显示出与结核分枝杆菌标准株不同的电泳图谱.结论 PCR-SSCP可快速鉴别结核、非结核分枝杆菌.
作者:靳晓红;刘元东;彭佐林;苗仲水;吴雪琼;张俊仙;杨坤;程绪浩 刊期: 2002年第04期
乙型肝炎病毒(hepatitis virus B,HBV)的垂直传播是导致新生儿发育不良和死亡的重要因素,也是形成人群中众多慢性无症状携带者的重要原因[1].HBV DNA已被证明是H BV复制的标志[2,3].为了解胎儿心脏组织中是否有HBV DNA存在,我们进行了以下工作.
作者:刘伟;赵伟;罗婵;刘兰侠;王兰 刊期: 2002年第04期
检验报告单收受和操作的过程中易被污染,成为院内传染的媒介.甲醛熏蒸法消毒有强烈的刺激性,污染环境.微波在各种领域中已被广泛使用. 本文设计了微波处理检验单的有效方法,并与甲醛、臭氧相比较,结果报告如下.
作者:吴晓渊;张文海;侯超 刊期: 2002年第04期
目的建立操作简单、灵敏、特异的PCR-ELISA.方法采用短DNA片段扩增,其中上游引物5′端标记有生物素,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素,随着PCR反应的结束,P CR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交,形成杂交产物,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合,被固定在微孔板上,后用ELIS A 检测被固定的杂交产物.结果该方法可以检测出1×101拷贝的HBV DNA 模板,对100例乙型肝炎患者的血清进行检测,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清100%(30/3 0)检出HBV DNA;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清HBV DNA阳性为78.6%(22/28);HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清 HBV DNA阳性为66.7%(16/24),其余为阴性.非乙型肝炎血清的结果均为阴性. 结论该PCR-ELISA操作简单,方法灵敏、特异.
作者:郭晏海;张菊;崔大祥;赵锦荣;闫小君 刊期: 2002年第04期
目的探讨血清尿酸水平与非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者发生脑梗死的关系. 方法对正常人组、非NIDDM脑梗死组、NIDDM无脑梗死组、NIDDM脑梗死组 (全部受试者无肾病)进行血清尿酸、肌酐、血脂、纤维蛋白原等测定.结果 NIDDM脑梗死组血清尿酸水平明显高于其他三组(P<0.01),经多因素Logistic回归分析,OR=1.93,OR 95% CI为1.29~ 2.83.结论血清尿酸水平升高是NIDDM患者发生脑梗死的独立危险因素之一.
作者:闫卫利;曲荣美;董晖 刊期: 2002年第04期
目的探讨检测尿中核基质蛋白22(nuclear matrix proteins 22,NMP22 ) 含量对膀胱移行细胞癌(BTCC)诊断及检测复发的意义.方法用NMP22试剂盒(ELISA) 检测24例BTCC患者手术前、后48份尿标本及15份泌尿系良性疾病患者的尿标本. 结果 24例BTCC术前尿NMP22含量中位数为71.5 U/ml;15例泌尿系良性疾病对照组为11.0 U/ml,两者差异非常显著(P<0.01).以尿NMP22 18 U/ml为cut off值,诊断BTCC的灵敏度为 95.8% (23/24),特异性为 86.7% (13/15).24例BTCC患者术后尿NMP22 中位数为45.0 U/ml,与术前比较明显下降(P<0.01).随访发现术后肿瘤复发组和无复发组尿NMP22的中位数分别为60.0 U/ml和 12.0 U/ml,两组差异显著(P<0.01). 结论尿NMP22测定是一种无创伤性、灵敏度高、特异性好的BTCC辅助诊断指标,并可望用于判断术后有无复发.
作者:罗春丽;吴小候;蒲军;蔡小钟;陈宏础 刊期: 2002年第04期
随着检验技术的不断改善,巨分子酶的检出率越来越高,对临床检验结果所造成的干扰越来越明确.究竟巨分子酶是怎样一种物质?血清中出现巨分子酶有何临床意义?它们的出现与临床哪些疾病相联系?本文以作者检测出的巨肌酸激酶(CK)和巨乳酸脱氢酶(LD)为例,就上述问题进行回顾和探讨.
作者:王爱华;于嘉屏;顾鹏飞;陈军;樊笑霞 刊期: 2002年第04期
目的提高骨髓涂片中马尔尼菲青霉菌、荚膜组织胞浆菌及黑热病病原体的诊断及鉴别诊断.方法播散性马尔尼菲青霉菌病、荚膜组织胞浆菌病及黑热病各一例骨髓涂片,用瑞氏-姬姆萨染色及糖原染色(高碘酸-雪夫反应,PAS)分析病原体形态.结果在骨髓涂片中三种病原体用常规瑞氏-姬姆萨染色不易区分,而在PAS染色下属于真菌的马尔尼菲青霉菌和荚膜组织胞浆菌胞壁染红色且清楚,胞内容物不着色;相反,黑热病杜利小体胞膜不着色或着色浅或颗粒状而不连续,而其胞内容物染红色,较胞膜着色深而清楚.PAS染色易将真菌与原虫区分,而两种真菌的区分主要靠繁殖方式不同,马尔尼菲青霉菌通过分裂繁殖 ,菌体变长呈腊肠状并形成横隔分裂成二,而荚膜组织胞浆菌则通过芽孢繁殖,形成单个窄颈芽孢.结论骨髓中PAS染色可鉴别马尔尼菲青霉菌、荚膜组胞浆菌及黑热病杜利小体.
作者:莫武宁;邓卓霖;甘宝文;李山 刊期: 2002年第04期
传统疟原虫检查法,薄血膜虫体形态完整,易辩认,但虫量太少,易漏检,且检查费时,厚血膜则溶血时间太长,虫体形态有所改变,很难辩认.而传统浓集法虽显著提高了检出率, 有利于虫种鉴别,但需抽取静脉血,操作较繁琐,不适于大规模普查,且其镜检范围只限于离心后的表层红细胞,易漏诊.微量浓集法则克服上述缺点,该法根据受间日疟侵袭的红细胞比正常红细胞轻,而受恶性疟、三日疟、卵形疟侵袭的红细胞则比正常红细胞略重的原理 ,用毛细管采血,通过高速离心分层,分别取离心后的底层血和与白细胞交界的表层红细胞,涂片染色镜检.现将操作方法简介如下:
作者:王成河 刊期: 2002年第04期
脑脊液(CSF)病原菌的检测鉴定主要是通过培养和免疫学方法,但都存在明显的不足[1 ,2].目前,大多数致病菌的16S rRNA基因都已测序完成,采用PCR技术扩增16S rRNA基因,用于细菌的鉴别和分类,在脑脊液病原菌检测鉴定中的应用研究越来越多.本文就其近年来的应用作一综述.
作者:刘毅;韩金祥 刊期: 2002年第04期
目的建立Rh血型系统C/c基因分型的方法,检测人群中C/c 基因频率.方法用快速盐析法抽提样本DNA,用PCR检测C/c基因型.结果本组RhD阳性人群中,C基因型频率为0.674,c基因型频率为0.326.RhD阴性人群中,C基因频率为0.234,c基因频率为0.7 66.结论 RhD阳性与阴性人群C和c基因频率存在明显的差异.RhD阳性人群以C为主,RhD阴性人群中以c为主.
作者:朱发明;严力行 刊期: 2002年第04期
血小板计数假性减低常见原因有采血不顺利,未及时混匀,血液分析仪不能准确分辨的过大、过小血小板,室温过低,EDTA依赖性凝集[1,2].在日常工作中发现,高血镁也能引起抗凝静脉血血小板计数结果假性降低.为研究其干扰程度及纠正方法,我们进行了体内外的实验,现报道如下.
作者:邱烨 刊期: 2002年第04期
目的初步研究α-淀粉酶和门冬氨酸转移酶参考品活性浓度的赋值方法.方法两种酶的活性浓度用IFCC推荐的方法测定,由南京市内的8个实验室协助完成,在测定前进行生化分析仪实际K值的检测.结果瓶间变异CV小于1.1%.实验室间变异大于实验室日内或实验室日间变异.α-淀粉酶和门冬氨酸氨基转移酶的催化浓度以95%可信限赋值,复溶的冻干参考品分别为(1 048±42)U/L和(182±5)U/L;同样的液体参考品分别为(1 198±43)U/L和(17 2±3)U/L.将复溶型和液体型淀粉酶参考品用蒸馏水等量稀释,其值为(537 ±20)U/L和(598±22)U/L.结论此初步赋值对本品的试用和认证是有价值的.
作者:李勇;孟泽;史利宁;黄宇烽 刊期: 2002年第04期
一般情况下,Coulter STKS五分类血细胞分析仪能分出正常结果,而在感染,骨髓异常增生等时外周血粒细胞颗粒异常增多,分类结果假阳性率明显升高.现就所遇10例患者的情况进行分析.
作者:张杰;徐以南;钱敏;陆琳;周芸 刊期: 2002年第04期
噬菌体显示技术是将化学合成的随机核苷酸序列与噬菌体外壳蛋白Ⅲ或Ⅷ进行融合,从而将各种短肽表达于不同的噬菌体表面.该技术已成功地应用于筛选能与特定的靶分子相结合的特异性短肽,如抗体分子、受体分子、核酸分子以及某些碳水化合物等.
作者:张明娟;杨军;吕卓人 刊期: 2002年第04期