吴晓渊；张文海；侯超
我们以水溶性新吡啶偶氮染料2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[(N,N-二羧基甲基)氨基] 苯酚(5-Br-PADCAP)为显色剂,建立了血清铁自动化比色测定的新方法.临床应用表明, 该法快速、简便,使用的水溶性吡啶偶氮染料不污染生化分析仪管道,适合全自动分析.
作者：连国军；孟东娅；胡晓芳；李宝青 刊期： 2002年第04期
目的提高骨髓涂片中马尔尼菲青霉菌、荚膜组织胞浆菌及黑热病病原体的诊断及鉴别诊断.方法播散性马尔尼菲青霉菌病、荚膜组织胞浆菌病及黑热病各一例骨髓涂片,用瑞氏-姬姆萨染色及糖原染色(高碘酸-雪夫反应,PAS)分析病原体形态.结果在骨髓涂片中三种病原体用常规瑞氏-姬姆萨染色不易区分,而在PAS染色下属于真菌的马尔尼菲青霉菌和荚膜组织胞浆菌胞壁染红色且清楚,胞内容物不着色;相反,黑热病杜利小体胞膜不着色或着色浅或颗粒状而不连续,而其胞内容物染红色,较胞膜着色深而清楚.PAS染色易将真菌与原虫区分,而两种真菌的区分主要靠繁殖方式不同,马尔尼菲青霉菌通过分裂繁殖 ,菌体变长呈腊肠状并形成横隔分裂成二,而荚膜组织胞浆菌则通过芽孢繁殖,形成单个窄颈芽孢.结论骨髓中PAS染色可鉴别马尔尼菲青霉菌、荚膜组胞浆菌及黑热病杜利小体.
作者：莫武宁；邓卓霖；甘宝文；李山 刊期： 2002年第04期
血小板计数假性减低常见原因有采血不顺利,未及时混匀,血液分析仪不能准确分辨的过大、过小血小板,室温过低,EDTA依赖性凝集[1,2].在日常工作中发现,高血镁也能引起抗凝静脉血血小板计数结果假性降低.为研究其干扰程度及纠正方法,我们进行了体内外的实验,现报道如下.
作者：邱烨 刊期： 2002年第04期
免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用,它具有特异性强、客观等优点,从而降低了急性白血病形态学的误诊率.但也应注意到,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响,如不进行监测有可能导致结果的失真.本文就流式细胞术(flow cyto metry,FCM)白血病免疫分型中CD45设门的重要性谈些体会.
作者：巩文玉 刊期： 2002年第04期
目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP) 检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNF R2)第6外显子基因多态性的方法.方法用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA,PCR扩增其TNF R2包括编码196位氨基酸残基在内的第6外显子基因,扩增产物用限制性内切酶NIa Ⅲ酶切后干含溴化乙锭的35 g/L琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下直接观察 TNF R2的基因型.结果通过观察电泳条带可确定TNF R2的三种基因型,196R/R纯合子、196M/M纯合子、196M/R杂合子分别出现一、二、三条条带;江苏地区健康汉族人TNF R2第6外显子各基因型的频率为:196M/M 61.6%,196R/R 5.6%,196M/R 32.8%;等位基因的频率为196M 77 .9%,196R 22.1%.结论 RCR-RFLP是一种高效敏感、简单快速、准确可靠的分析TNF R2基因多态性的方法,适于普通实验室开展.
作者：王小飞；钱绩虎；王惠民 刊期： 2002年第04期
血细胞自动分析仪已在国内普及,成人血细胞各项参数正常参考值调查已有较多报道.然而 ,新生儿脐血细胞各项参数正常参考值调查至今报道尚少.我们在这方面做了一些工作,简报如下.
作者：尹卫东；刘克芹；刘晨；胡晓燕；商万军；李红丽 刊期： 2002年第04期
Bifidobacterium(双歧杆菌)作为人体肠道中的生理性菌群,在婴幼儿保健以及调整肠道菌群失调和治疗某些疾病方面所起的作用已受到普遍重视.关于双歧杆菌对机体的免疫调节作用,尤其在抗肿瘤方面的作用,近年来国内外也有一些报道,但从分子水平及分子模拟机制激活、调节免疫应答来防治肿瘤的研究,还较罕见.我们拟通过制备双歧杆菌单因子血清研究双歧杆菌和人体免疫活性细胞分子作用规律,探讨双歧杆菌抗肿瘤分子机制.本文对制备合格双歧杆菌单因子血清作一报道.
作者：王钦富；韩慧；赵彩红；张丹；张丽娟 刊期： 2002年第04期
目的建立血清中测定乙醇浓度的乙醇氧化酶法.方法基于乙醇氧化酶氧化乙醇产生乙醛和H2O2 ,偶联Trinder反应生成醌亚胺,可在500 nm波长比色测定,通过优化反应体系中各主要成分和测定条件,建立了本法.结果本法的灵敏度0.5 g/L时, A500 nm, 1 cm＞ 0.08; 线性范围0.125～5.0 g/L;批内CV为1.02 %, 批间CV为2.76 % ; 本法(Y)与气相色谱法 (X)比较;Y=1.06X+0.12,r=0.989.结论本法的灵敏度较高、线性范围宽、精密度和准确性均较好,适合临床实验室急诊测定用.
作者：王向阳 刊期： 2002年第04期
目的构建P-选择素凝集素样结构域与红色荧光蛋白融合基因(pDsRed1-N1/L),以进一步明确P-选择素不同表位与功能间的关系,为阐明P-选择素生理病理意义奠定基础.方法应用PCR技术扩增质粒pCDM1/cDNA凝集素样区,用T4连接酶将其插入载体pDsRed1-N1;经酶切和测序对插入片段进行分析、鉴定.结果通过酶切和序列分析确定重,组 pDsRed1/N1的片段为目的基因的核苷酸序列.结论应用基因工程技术构建pDsRed1-N1/L 融合基因成功,为红色荧光蛋白作为生物标记分子来研究P-选择素分子的构效关系打下基础.
作者：王丹艺；倪培华；宋巍；应雅韵；周同 刊期： 2002年第04期
传统疟原虫检查法,薄血膜虫体形态完整,易辩认,但虫量太少,易漏检,且检查费时,厚血膜则溶血时间太长,虫体形态有所改变,很难辩认.而传统浓集法虽显著提高了检出率, 有利于虫种鉴别,但需抽取静脉血,操作较繁琐,不适于大规模普查,且其镜检范围只限于离心后的表层红细胞,易漏诊.微量浓集法则克服上述缺点,该法根据受间日疟侵袭的红细胞比正常红细胞轻,而受恶性疟、三日疟、卵形疟侵袭的红细胞则比正常红细胞略重的原理 ,用毛细管采血,通过高速离心分层,分别取离心后的底层血和与白细胞交界的表层红细胞,涂片染色镜检.现将操作方法简介如下:
作者：王成河 刊期： 2002年第04期
随着检验技术的不断改善,巨分子酶的检出率越来越高,对临床检验结果所造成的干扰越来越明确.究竟巨分子酶是怎样一种物质?血清中出现巨分子酶有何临床意义?它们的出现与临床哪些疾病相联系?本文以作者检测出的巨肌酸激酶(CK)和巨乳酸脱氢酶(LD)为例,就上述问题进行回顾和探讨.
作者：王爱华；于嘉屏；顾鹏飞；陈军；樊笑霞 刊期： 2002年第04期
2001年7月24日,我们从一例急性溶组织阿米巴痢疾的粪便中培养分离出福氏2a型志贺菌, 现报道如下.
作者：白丽 刊期： 2002年第04期
肿瘤坏死因子(TNF)是体内具有多种生物活性的细胞因子,并通过与其相应受体CD120a(p55) 或CD120b(p75)结合,发挥抗肿瘤、抗病毒感染的作用,诱发炎症反应以及刺激某些正常细胞的生长.TNF基因与MHC基因紧密连锁,编码TNF的基因位于HLA-B以及HLA-C2位点之间的 HL A-Ⅲ抗原基因簇内,包含若干多态性位点.
作者：鞠少卿；钱绩虎；王惠民 刊期： 2002年第04期
目的应用分子生物学方法快速鉴别结核、非结核分枝杆菌临床分离株.方法通过设计两对引物分别扩增16S rDNA两条片段,根据SSCP电泳图谱与结核分枝杆菌标准株的相似性鉴别结核、非结核分枝杆菌.结果 98株临床分离株中,经细菌学鉴定93 株为结核分枝杆菌复合群,5株非结核分枝杆菌.用引物Ⅰ、Ⅱ对结核分枝杆菌复合群进行PCR-SSCP分析, 有81株与标准株有相似图谱.用引物Ⅲ、Ⅳ对非结核分枝杆菌进行PCR-SSCP分析,均显示出与结核分枝杆菌标准株不同的电泳图谱.结论 PCR-SSCP可快速鉴别结核、非结核分枝杆菌.
作者：靳晓红；刘元东；彭佐林；苗仲水；吴雪琼；张俊仙；杨坤；程绪浩 刊期： 2002年第04期
乙型肝炎病毒(hepatitis virus B,HBV)的垂直传播是导致新生儿发育不良和死亡的重要因素,也是形成人群中众多慢性无症状携带者的重要原因[1].HBV DNA已被证明是H BV复制的标志[2,3].为了解胎儿心脏组织中是否有HBV DNA存在,我们进行了以下工作.
作者：刘伟；赵伟；罗婵；刘兰侠；王兰 刊期： 2002年第04期
脑脊液(CSF)病原菌的检测鉴定主要是通过培养和免疫学方法,但都存在明显的不足[1 ,2].目前,大多数致病菌的16S rRNA基因都已测序完成,采用PCR技术扩增16S rRNA基因,用于细菌的鉴别和分类,在脑脊液病原菌检测鉴定中的应用研究越来越多.本文就其近年来的应用作一综述.
作者：刘毅；韩金祥 刊期： 2002年第04期
噬菌体显示技术是将化学合成的随机核苷酸序列与噬菌体外壳蛋白Ⅲ或Ⅷ进行融合,从而将各种短肽表达于不同的噬菌体表面.该技术已成功地应用于筛选能与特定的靶分子相结合的特异性短肽,如抗体分子、受体分子、核酸分子以及某些碳水化合物等.
作者：张明娟；杨军；吕卓人 刊期： 2002年第04期
目的初步研究α-淀粉酶和门冬氨酸转移酶参考品活性浓度的赋值方法.方法两种酶的活性浓度用IFCC推荐的方法测定,由南京市内的8个实验室协助完成,在测定前进行生化分析仪实际K值的检测.结果瓶间变异CV小于1.1%.实验室间变异大于实验室日内或实验室日间变异.α-淀粉酶和门冬氨酸氨基转移酶的催化浓度以95%可信限赋值,复溶的冻干参考品分别为(1 048±42)U/L和(182±5)U/L;同样的液体参考品分别为(1 198±43)U/L和(17 2±3)U/L.将复溶型和液体型淀粉酶参考品用蒸馏水等量稀释,其值为(537 ±20)U/L和(598±22)U/L.结论此初步赋值对本品的试用和认证是有价值的.
作者：李勇；孟泽；史利宁；黄宇烽 刊期： 2002年第04期
目的探讨尿中草酸钙结晶体对UF-100全自动尿沉渣分析仪测定红细胞结果的影响. 方法用确认的血尿、草酸钙结晶尿和血-草酸钙结晶混合尿分别作UF-100分析. 结果 UF- 100对单纯性血尿中的红细胞分辨力较高,不易误认为结晶,但草酸钙结晶易被误认为红细胞.结论草酸钙结晶影响UF-100对红细胞的检测结果,当红细胞的荧光强度＜18( ch)或红细胞荧光分布宽度标准差＞18(ch)时,需进行离心镜检,以提高尿液检验质量.
作者：武蓉珍；刘胜勇；徐丽珍；陈东红；吴日荷 刊期： 2002年第04期
目的建立操作简单、灵敏、特异的PCR-ELISA.方法采用短DNA片段扩增,其中上游引物5′端标记有生物素,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素,随着PCR反应的结束,P CR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交,形成杂交产物,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合,被固定在微孔板上,后用ELIS A 检测被固定的杂交产物.结果该方法可以检测出1×101拷贝的HBV DNA 模板,对100例乙型肝炎患者的血清进行检测,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清100%(30/3 0)检出HBV DNA;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清HBV DNA阳性为78.6%(22/28);HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清 HBV DNA阳性为66.7%(16/24),其余为阴性.非乙型肝炎血清的结果均为阴性. 结论该PCR-ELISA操作简单,方法灵敏、特异.
作者：郭晏海；张菊；崔大祥；赵锦荣；闫小君 刊期： 2002年第04期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
