学术投稿

PCR-RFLP法检测肿瘤坏死因子受体基因多态性

王小飞;钱绩虎;王惠民

关键词:肿瘤坏死因子受体, 多态性, 聚合酶链反应限制性片段长度多 态性分析
摘要:目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP) 检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNF R2)第6外显子基因多态性的方法.方法用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA,PCR扩增其TNF R2包括编码196位氨基酸残基在内的第6外显子基因,扩增产物用限制性内切酶NIa Ⅲ酶切后干含溴化乙锭的35 g/L琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下直接观察 TNF R2的基因型.结果通过观察电泳条带可确定TNF R2的三种基因型,196R/R纯合子、196M/M纯合子、196M/R杂合子分别出现一、二、三条条带;江苏地区健康汉族人TNF R2第6外显子各基因型的频率为:196M/M 61.6%,196R/R 5.6%,196M/R 32.8%;等位基因的频率为196M 77 .9%,196R 22.1%.结论 RCR-RFLP是一种高效敏感、简单快速、准确可靠的分析TNF R2基因多态性的方法,适于普通实验室开展.
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  • 用新的水溶性吡啶偶氮染料作显色剂自动分析血清铁

    我们以水溶性新吡啶偶氮染料2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[(N,N-二羧基甲基)氨基] 苯酚(5-Br-PADCAP)为显色剂,建立了血清铁自动化比色测定的新方法.临床应用表明, 该法快速、简便,使用的水溶性吡啶偶氮染料不污染生化分析仪管道,适合全自动分析.

    作者:连国军;孟东娅;胡晓芳;李宝青 刊期: 2002年第04期

  • 用健康人血浆替代血凝质控物的探讨

    目前,凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(F ib)试验的质控物主要依赖进口,其价格较贵.我们在德国Compact全自动血凝仪上利用前一天的正常血浆替代后一天的血凝质控物,同时可作PT、APTT、TT、Fib四项指标的检测,经近一年的临床应用,认为是目前一般实验室室内质量控制的一种简单易行的方法,现介绍如下.

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    目的探讨尿中草酸钙结晶体对UF-100全自动尿沉渣分析仪测定红细胞结果的影响. 方法用确认的血尿、草酸钙结晶尿和血-草酸钙结晶混合尿分别作UF-100分析. 结果 UF- 100对单纯性血尿中的红细胞分辨力较高,不易误认为结晶,但草酸钙结晶易被误认为红细胞.结论草酸钙结晶影响UF-100对红细胞的检测结果,当红细胞的荧光强度<18( ch)或红细胞荧光分布宽度标准差>18(ch)时,需进行离心镜检,以提高尿液检验质量.

    作者:武蓉珍;刘胜勇;徐丽珍;陈东红;吴日荷 刊期: 2002年第04期

  • 噬菌体肽文库的筛选方法

    噬菌体显示技术是将化学合成的随机核苷酸序列与噬菌体外壳蛋白Ⅲ或Ⅷ进行融合,从而将各种短肽表达于不同的噬菌体表面.该技术已成功地应用于筛选能与特定的靶分子相结合的特异性短肽,如抗体分子、受体分子、核酸分子以及某些碳水化合物等.

    作者:张明娟;杨军;吕卓人 刊期: 2002年第04期

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    作者:刘毅;韩金祥 刊期: 2002年第04期

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    目的初步研究α-淀粉酶和门冬氨酸转移酶参考品活性浓度的赋值方法.方法两种酶的活性浓度用IFCC推荐的方法测定,由南京市内的8个实验室协助完成,在测定前进行生化分析仪实际K值的检测.结果瓶间变异CV小于1.1%.实验室间变异大于实验室日内或实验室日间变异.α-淀粉酶和门冬氨酸氨基转移酶的催化浓度以95%可信限赋值,复溶的冻干参考品分别为(1 048±42)U/L和(182±5)U/L;同样的液体参考品分别为(1 198±43)U/L和(17 2±3)U/L.将复溶型和液体型淀粉酶参考品用蒸馏水等量稀释,其值为(537 ±20)U/L和(598±22)U/L.结论此初步赋值对本品的试用和认证是有价值的.

    作者:李勇;孟泽;史利宁;黄宇烽 刊期: 2002年第04期

  • 巨分子酶与临床疾病的关联

    随着检验技术的不断改善,巨分子酶的检出率越来越高,对临床检验结果所造成的干扰越来越明确.究竟巨分子酶是怎样一种物质?血清中出现巨分子酶有何临床意义?它们的出现与临床哪些疾病相联系?本文以作者检测出的巨肌酸激酶(CK)和巨乳酸脱氢酶(LD)为例,就上述问题进行回顾和探讨.

    作者:王爱华;于嘉屏;顾鹏飞;陈军;樊笑霞 刊期: 2002年第04期

  • 微波法消毒检验报告单的评价

    检验报告单收受和操作的过程中易被污染,成为院内传染的媒介.甲醛熏蒸法消毒有强烈的刺激性,污染环境.微波在各种领域中已被广泛使用. 本文设计了微波处理检验单的有效方法,并与甲醛、臭氧相比较,结果报告如下.

    作者:吴晓渊;张文海;侯超 刊期: 2002年第04期

  • 急性溶组织阿米巴痢疾并发细菌性痢疾一例报告

    2001年7月24日,我们从一例急性溶组织阿米巴痢疾的粪便中培养分离出福氏2a型志贺菌, 现报道如下.

    作者:白丽 刊期: 2002年第04期

  • 褥疮感染阿柏丁沙门菌1例

    我室于2001年8月从一位高位截瘫患者的褥疮感染分泌物中分离出1株阿柏丁沙门菌,现报告如下.

    作者:刘长生 刊期: 2002年第04期

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    目的探讨血清尿酸水平与非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者发生脑梗死的关系. 方法对正常人组、非NIDDM脑梗死组、NIDDM无脑梗死组、NIDDM脑梗死组 (全部受试者无肾病)进行血清尿酸、肌酐、血脂、纤维蛋白原等测定.结果 NIDDM脑梗死组血清尿酸水平明显高于其他三组(P<0.01),经多因素Logistic回归分析,OR=1.93,OR 95% CI为1.29~ 2.83.结论血清尿酸水平升高是NIDDM患者发生脑梗死的独立危险因素之一.

    作者:闫卫利;曲荣美;董晖 刊期: 2002年第04期

  • 死胎心脏组织中HBV DNA表达的初步研究

    乙型肝炎病毒(hepatitis virus B,HBV)的垂直传播是导致新生儿发育不良和死亡的重要因素,也是形成人群中众多慢性无症状携带者的重要原因[1].HBV DNA已被证明是H BV复制的标志[2,3].为了解胎儿心脏组织中是否有HBV DNA存在,我们进行了以下工作.

    作者:刘伟;赵伟;罗婵;刘兰侠;王兰 刊期: 2002年第04期

  • 肿瘤坏死因子及其受体基因多态性与系统性红斑狼疮

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    作者:鞠少卿;钱绩虎;王惠民 刊期: 2002年第04期

  • 荧光定量RT-PCR检测白血病多耐药基因及其临床意义

    多药耐药(multidrug resistance,MDR)导致的化疗失败是肿瘤治疗中亟待解决的问题.鉴于临床MDR的出现常与多药耐药基因(mdr1)过度表达有关,我们在Light-CyclePCR仪上对mdr1 定量的技术方法和临床应用进行了探讨.

    作者:穆会君;谢平 刊期: 2002年第04期

  • 流式细胞术白血病免疫分型中CD45设门的重要性

    免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用,它具有特异性强、客观等优点,从而降低了急性白血病形态学的误诊率.但也应注意到,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响,如不进行监测有可能导致结果的失真.本文就流式细胞术(flow cyto metry,FCM)白血病免疫分型中CD45设门的重要性谈些体会.

    作者:巩文玉 刊期: 2002年第04期

  • PCR-RFLP法检测肿瘤坏死因子受体基因多态性

    目的建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP) 检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNF R2)第6外显子基因多态性的方法.方法用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA,PCR扩增其TNF R2包括编码196位氨基酸残基在内的第6外显子基因,扩增产物用限制性内切酶NIa Ⅲ酶切后干含溴化乙锭的35 g/L琼脂糖凝胶中电泳,紫外灯下直接观察 TNF R2的基因型.结果通过观察电泳条带可确定TNF R2的三种基因型,196R/R纯合子、196M/M纯合子、196M/R杂合子分别出现一、二、三条条带;江苏地区健康汉族人TNF R2第6外显子各基因型的频率为:196M/M 61.6%,196R/R 5.6%,196M/R 32.8%;等位基因的频率为196M 77 .9%,196R 22.1%.结论 RCR-RFLP是一种高效敏感、简单快速、准确可靠的分析TNF R2基因多态性的方法,适于普通实验室开展.

    作者:王小飞;钱绩虎;王惠民 刊期: 2002年第04期

  • 双歧杆菌单因子血清的制备和鉴定

    Bifidobacterium(双歧杆菌)作为人体肠道中的生理性菌群,在婴幼儿保健以及调整肠道菌群失调和治疗某些疾病方面所起的作用已受到普遍重视.关于双歧杆菌对机体的免疫调节作用,尤其在抗肿瘤方面的作用,近年来国内外也有一些报道,但从分子水平及分子模拟机制激活、调节免疫应答来防治肿瘤的研究,还较罕见.我们拟通过制备双歧杆菌单因子血清研究双歧杆菌和人体免疫活性细胞分子作用规律,探讨双歧杆菌抗肿瘤分子机制.本文对制备合格双歧杆菌单因子血清作一报道.

    作者:王钦富;韩慧;赵彩红;张丹;张丽娟 刊期: 2002年第04期

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