张波;曹利;张天晓;朱彤;府伟灵
免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用,它具有特异性强、客观等优点,从而降低了急性白血病形态学的误诊率.但也应注意到,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响,如不进行监测有可能导致结果的失真.本文就流式细胞术(flow cyto metry,FCM)白血病免疫分型中CD45设门的重要性谈些体会.
作者:巩文玉 刊期: 2002年第04期
目的探讨尿中草酸钙结晶体对UF-100全自动尿沉渣分析仪测定红细胞结果的影响. 方法用确认的血尿、草酸钙结晶尿和血-草酸钙结晶混合尿分别作UF-100分析. 结果 UF- 100对单纯性血尿中的红细胞分辨力较高,不易误认为结晶,但草酸钙结晶易被误认为红细胞.结论草酸钙结晶影响UF-100对红细胞的检测结果,当红细胞的荧光强度<18( ch)或红细胞荧光分布宽度标准差>18(ch)时,需进行离心镜检,以提高尿液检验质量.
作者:武蓉珍;刘胜勇;徐丽珍;陈东红;吴日荷 刊期: 2002年第04期
检验报告单收受和操作的过程中易被污染,成为院内传染的媒介.甲醛熏蒸法消毒有强烈的刺激性,污染环境.微波在各种领域中已被广泛使用. 本文设计了微波处理检验单的有效方法,并与甲醛、臭氧相比较,结果报告如下.
作者:吴晓渊;张文海;侯超 刊期: 2002年第04期
我室在采用HK法测定AMI患者血中葡萄糖浓度时,曾发现与临床不符的低葡萄糖病例,经葡萄糖氧化酶法重测,证明为假性降低.我们相继积累了26例心肌酶不同程度升高的AMI患者标本进行了这项实验研究,现将结果报告如下.
作者:李立和 刊期: 2002年第04期
噬菌体显示技术是将化学合成的随机核苷酸序列与噬菌体外壳蛋白Ⅲ或Ⅷ进行融合,从而将各种短肽表达于不同的噬菌体表面.该技术已成功地应用于筛选能与特定的靶分子相结合的特异性短肽,如抗体分子、受体分子、核酸分子以及某些碳水化合物等.
作者:张明娟;杨军;吕卓人 刊期: 2002年第04期
血浆HBV核酸模板提取质量对HBV DNA定量检测起重要作用.本文参照文献[1] 建立了PEG沉淀提取制备HBV核酸模板方法,并用于HBV DNA荧光定量PCR检测.
作者:陈晓东;陶志华;王忠永;周武 刊期: 2002年第04期
Rhodococcus equi(马红球菌)于1923年首次发现并命名为Corynebacterium equi( 马棒状杆菌).后经细胞壁结构分析,发现本菌与棒状杆菌属有较大差异,因此将其归属为马红球菌.马红球菌是一种需氧、革兰阳性的多形性杆菌 ,对人类为机会致病菌,但近年来常有感染报道.本院从门诊和住院患者的标本中分离出26株马红球菌 .现将其鉴定及药敏结果报告如下.
作者:许美荣;胡丽萍;邓丽华 刊期: 2002年第04期
目的构建P-选择素凝集素样结构域与红色荧光蛋白融合基因(pDsRed1-N1/L),以进一步明确P-选择素不同表位与功能间的关系,为阐明P-选择素生理病理意义奠定基础.方法应用PCR技术扩增质粒pCDM1/cDNA凝集素样区,用T4连接酶将其插入载体pDsRed1-N1;经酶切和测序对插入片段进行分析、鉴定.结果通过酶切和序列分析确定重,组 pDsRed1/N1的片段为目的基因的核苷酸序列.结论应用基因工程技术构建pDsRed1-N1/L 融合基因成功,为红色荧光蛋白作为生物标记分子来研究P-选择素分子的构效关系打下基础.
作者:王丹艺;倪培华;宋巍;应雅韵;周同 刊期: 2002年第04期
免疫抑制剂FK506(tacrolimus,普乐可夏,他克莫司)是从土壤真菌提取的一种具有强大免疫抑制作用的大环内酯类新型免疫抑制剂[1].其免疫抑制作用是环孢菌素A(CsA)的1 0~100 倍,现已成功应用于肝脏、肾脏、心脏等实体器官移植[2,3],但该药具有类似Cs A的毒副作用.因此,FK506的血药浓度监测显得十分重要.本文采用酶联免疫分析(ELISA)检测心脏移植术后全血FK506的浓度,指导临床用药,以达到佳治疗效果.
作者:张波;曹利;张天晓;朱彤;府伟灵 刊期: 2002年第04期
目的建立血清中测定乙醇浓度的乙醇氧化酶法.方法基于乙醇氧化酶氧化乙醇产生乙醛和H2O2 ,偶联Trinder反应生成醌亚胺,可在500 nm波长比色测定,通过优化反应体系中各主要成分和测定条件,建立了本法.结果本法的灵敏度0.5 g/L时, A500 nm, 1 cm> 0.08; 线性范围0.125~5.0 g/L;批内CV为1.02 %, 批间CV为2.76 % ; 本法(Y)与气相色谱法 (X)比较;Y=1.06X+0.12,r=0.989.结论本法的灵敏度较高、线性范围宽、精密度和准确性均较好,适合临床实验室急诊测定用.
作者:王向阳 刊期: 2002年第04期
本文报告我科使用Abbott CD-3200五分类血细胞分析仪过程中,出现的几种图形异常原因分析及排除方法.
作者:王小卫;曾立明;朱平亚 刊期: 2002年第04期
目的建立操作简单、灵敏、特异的PCR-ELISA.方法采用短DNA片段扩增,其中上游引物5′端标记有生物素,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素,随着PCR反应的结束,P CR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交,形成杂交产物,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合,被固定在微孔板上,后用ELIS A 检测被固定的杂交产物.结果该方法可以检测出1×101拷贝的HBV DNA 模板,对100例乙型肝炎患者的血清进行检测,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清100%(30/3 0)检出HBV DNA;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清HBV DNA阳性为78.6%(22/28);HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清 HBV DNA阳性为66.7%(16/24),其余为阴性.非乙型肝炎血清的结果均为阴性. 结论该PCR-ELISA操作简单,方法灵敏、特异.
作者:郭晏海;张菊;崔大祥;赵锦荣;闫小君 刊期: 2002年第04期
目的提高骨髓涂片中马尔尼菲青霉菌、荚膜组织胞浆菌及黑热病病原体的诊断及鉴别诊断.方法播散性马尔尼菲青霉菌病、荚膜组织胞浆菌病及黑热病各一例骨髓涂片,用瑞氏-姬姆萨染色及糖原染色(高碘酸-雪夫反应,PAS)分析病原体形态.结果在骨髓涂片中三种病原体用常规瑞氏-姬姆萨染色不易区分,而在PAS染色下属于真菌的马尔尼菲青霉菌和荚膜组织胞浆菌胞壁染红色且清楚,胞内容物不着色;相反,黑热病杜利小体胞膜不着色或着色浅或颗粒状而不连续,而其胞内容物染红色,较胞膜着色深而清楚.PAS染色易将真菌与原虫区分,而两种真菌的区分主要靠繁殖方式不同,马尔尼菲青霉菌通过分裂繁殖 ,菌体变长呈腊肠状并形成横隔分裂成二,而荚膜组织胞浆菌则通过芽孢繁殖,形成单个窄颈芽孢.结论骨髓中PAS染色可鉴别马尔尼菲青霉菌、荚膜组胞浆菌及黑热病杜利小体.
作者:莫武宁;邓卓霖;甘宝文;李山 刊期: 2002年第04期
目的初步研究α-淀粉酶和门冬氨酸转移酶参考品活性浓度的赋值方法.方法两种酶的活性浓度用IFCC推荐的方法测定,由南京市内的8个实验室协助完成,在测定前进行生化分析仪实际K值的检测.结果瓶间变异CV小于1.1%.实验室间变异大于实验室日内或实验室日间变异.α-淀粉酶和门冬氨酸氨基转移酶的催化浓度以95%可信限赋值,复溶的冻干参考品分别为(1 048±42)U/L和(182±5)U/L;同样的液体参考品分别为(1 198±43)U/L和(17 2±3)U/L.将复溶型和液体型淀粉酶参考品用蒸馏水等量稀释,其值为(537 ±20)U/L和(598±22)U/L.结论此初步赋值对本品的试用和认证是有价值的.
作者:李勇;孟泽;史利宁;黄宇烽 刊期: 2002年第04期
多药耐药(multidrug resistance,MDR)导致的化疗失败是肿瘤治疗中亟待解决的问题.鉴于临床MDR的出现常与多药耐药基因(mdr1)过度表达有关,我们在Light-CyclePCR仪上对mdr1 定量的技术方法和临床应用进行了探讨.
作者:穆会君;谢平 刊期: 2002年第04期
乙型肝炎病毒(hepatitis virus B,HBV)的垂直传播是导致新生儿发育不良和死亡的重要因素,也是形成人群中众多慢性无症状携带者的重要原因[1].HBV DNA已被证明是H BV复制的标志[2,3].为了解胎儿心脏组织中是否有HBV DNA存在,我们进行了以下工作.
作者:刘伟;赵伟;罗婵;刘兰侠;王兰 刊期: 2002年第04期
血小板计数假性减低常见原因有采血不顺利,未及时混匀,血液分析仪不能准确分辨的过大、过小血小板,室温过低,EDTA依赖性凝集[1,2].在日常工作中发现,高血镁也能引起抗凝静脉血血小板计数结果假性降低.为研究其干扰程度及纠正方法,我们进行了体内外的实验,现报道如下.
作者:邱烨 刊期: 2002年第04期
目前,凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(F ib)试验的质控物主要依赖进口,其价格较贵.我们在德国Compact全自动血凝仪上利用前一天的正常血浆替代后一天的血凝质控物,同时可作PT、APTT、TT、Fib四项指标的检测,经近一年的临床应用,认为是目前一般实验室室内质量控制的一种简单易行的方法,现介绍如下.
作者:吴德祥;苏畅;张文昭 刊期: 2002年第04期
传统疟原虫检查法,薄血膜虫体形态完整,易辩认,但虫量太少,易漏检,且检查费时,厚血膜则溶血时间太长,虫体形态有所改变,很难辩认.而传统浓集法虽显著提高了检出率, 有利于虫种鉴别,但需抽取静脉血,操作较繁琐,不适于大规模普查,且其镜检范围只限于离心后的表层红细胞,易漏诊.微量浓集法则克服上述缺点,该法根据受间日疟侵袭的红细胞比正常红细胞轻,而受恶性疟、三日疟、卵形疟侵袭的红细胞则比正常红细胞略重的原理 ,用毛细管采血,通过高速离心分层,分别取离心后的底层血和与白细胞交界的表层红细胞,涂片染色镜检.现将操作方法简介如下:
作者:王成河 刊期: 2002年第04期
目的建立Rh血型系统C/c基因分型的方法,检测人群中C/c 基因频率.方法用快速盐析法抽提样本DNA,用PCR检测C/c基因型.结果本组RhD阳性人群中,C基因型频率为0.674,c基因型频率为0.326.RhD阴性人群中,C基因频率为0.234,c基因频率为0.7 66.结论 RhD阳性与阴性人群C和c基因频率存在明显的差异.RhD阳性人群以C为主,RhD阴性人群中以c为主.
作者:朱发明;严力行 刊期: 2002年第04期