学术投稿

胰酶快速消化大鼠皮层神经细胞原代培养方法分析

谭少华;徐安定;苗海锋;吴宜娟

关键词:神经细胞, 原代培养, 胰酶
摘要:目的 探索更简易可行的原代神经细胞培养方法.方法 在文献报道方法的基础上,注射器抽吸制备神经细胞匀浆,0.125%胰酶(含0.2‰EDTA)短时消化脑组织3~5 min,加入含10% 胎牛血清的DMEM培养液,接种于经多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)预处理的六孔板上,24 h后加入终浓度为10 μM的阿糖胞苷(arabinofuranoside cytosine,Ara-C) 抑制胶质细胞生长,48 h后更换培养液终止Ara-C的作用.以后每2~3 d更换培养液,神经细胞在含95% CO2培养箱中培养7 d后,用神经元特异烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)染色鉴定神经元纯度.结果 培养细胞成熟后,神经细胞生长良好,NSE染色鉴定证实,神经元纯度超过95%.结论 改良后的胰酶快速消化原代神经细胞培养方法,可减少实验动物用量,减少细胞损伤及污染机会,方法确切可行.
中国实用神经疾病杂志相关文献
  • 自发性颈动脉海绵窦瘘误诊为眼型Grave's病1例报告

    颈动脉海绵窦瘘(carotid cavernous fistula,CCF)由Baron在1835年首次报告,是指海绵窦段的颈内动脉本身或其在海绵窦段的分支破裂,造成与海绵窦之间形成异常的动、静脉沟通[1].大约80%由外伤所致,称为创伤性颈动脉海绵窦瘘(traumatic carotid cavernous fistula,TCCF),少部分CCF病因不明,称为自发性颈动脉海绵窦瘘(spontaneous carotid cavernous fistula,SCCF).SCCF临床较为少见且病因较为复杂,由于眼部症状突出常首诊于眼科,临床上容易与一些眼科常见疾病相混淆造成误诊、漏诊,本文就1例SCCF误诊为眼型Grave's病的病例进行分析,现报告如下.

    作者:赵博;聂鹏;刘扬;杨彬;黄雪桃 刊期: 2013年第08期

  • 颞部直切口小骨窗微创清除基底节区血肿的临床观察

    目的 研究显微镜下颞部直切口小骨窗微创清除脑基底节区血肿术的有效性和安全性,为高血压脑出血手术治疗开辟新的途径.方法 2010-07-2012-08我们对102例出血量25~100 mL的基底节区脑出血患者行早期血肿清除术:53例(治疗组)采用颞部直切口镜下小骨窗微创术,与49例应用去大骨瓣开颅清除并减压术患者(对照组)进行回顾性比较.结果 治疗组术后并发症少(24.52%<对照组的81.63%)、恢复快、住院时间短、费用低,且不需后期二次手术颅骨修补;预后良好率57.3%,优于对照组的30.2%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 颞部直切口小骨窗镜下微创清除术是急诊治疗高血压性脑出血安全可靠的外科方法,对减少脑基底节区血肿治疗中的并发症及提高预后具有重要临床意义.

    作者:王万卿;任增玺;段素蕾 刊期: 2013年第08期

  • 脑胶质瘤术后复发再手术的疗效观察

    目的 对脑胶质瘤术后复发再手术的临床疗效进行分析,为今后的临床治疗工作提供可靠的参考依据.方法 随机抽取2009-01-2012-12我院收治的复发性脑胶质瘤患者56例,回顾性分析再次手术后的临床疗效.结果 首次术后距复发时间越长者再次手术后生存期也越长;术前病理分级越低者,复发后再次手术生存期也越长.结论 对复发性脑胶质瘤患者行再次手术治疗过程中,首次手术距复发时间、术前病理分型以及首次手术切除情况等因素会对再次手术的临床疗效产生影响,值得关注.

    作者:张忠普 刊期: 2013年第08期

  • 医院精神抑郁/焦虑量表在住院期间孕妇心理评估及干预中的应用

    目的 探讨医院抑郁/焦虑量表用于住院孕妇心理评估中的应用及针对干预的效果.方法 选取2012年在我院住院的968例孕妇,年龄21~40岁,孕周28~41周,随机分为实验组和对照组,2组分别在孕期24、38周接受HAD问卷调查,并制订相关的方案.孕妇分娩后,对照组接受常规方案,而实验组接受针对性影响因素的方案,并在产后1、2、4周分别进行HAD问卷调查,收集数据进行统计分析.结果 文化程度、职业和居住条件对于孕妇的抑郁焦虑发生不产生影响(P>0.05),而孕妇抑郁焦虑的产生可能和产前并发症、夫妻关系、异常孕产、医护关系和医务人员态度具有一定的关联度(P<0.05).第4周可产生治疗效果,而在抑郁指标中,第2周即可产生治疗效果.结论 医院抑郁/焦虑量表可有效用于住院孕妇心理评估中的应用及干预.

    作者:张彩霞;刘新新;杨静静 刊期: 2013年第08期

  • 血塞通注射液治疗急性脑梗死的观察与护理

    目的 探讨血塞通注射液治疗急性脑梗死的病情观察及护理体会.方法 选择2009-02-2012-03我院神经内科收治的急性脑梗死患者194例,随机分成治疗组(106例)与对照组(88例),2组患者均常规治疗,治疗组106例加用血塞通注射液及密切观察患者的病情变化和护理干预,观察2组的临床疗效.结果 治疗组总有效率为96.2%,对照组总有效率为84.1%,治疗组的临床疗效明显优于对照组(P<0.05).结论 应用血塞通注射液及护理干预治疗急性脑梗死,疗效满意,值得临床广泛应用.

    作者:李学敏 刊期: 2013年第08期

  • 脑血管病偏瘫后遗症的康复干预模式分析

    目的 分析脑血管病患者在偏瘫之后,对后遗症的康复干预的效果.方法 2011-05-2012-03我院采用康复干预治疗28例脑血管偏瘫患者,观察患者的恢复情况.结果 28例患者在接受康复干预治疗后均有了不同程度的恢复,其神经系统、上肢活动、下肢活动等都有了显著的恢复,生活基本正常.结论 康复干预治疗是一种帮助因脑血管病导致的偏瘫后遗症的患者恢复其自主能力,可以恢复其基本生活能力,有效减轻了患者的痛苦,减轻了患者家属的经济负担,有望临床实践治疗中推广应用.

    作者:谢静 刊期: 2013年第08期

  • 椎动脉夹层介入治疗中累及小脑后小动脉开口1例随访分析并文献复习

    椎动脉夹层动脉瘤(dissecting aneurysms of the vertebral antery, DAVA)是一种少见疾病,发病率为1/10万[1],支架辅助弹簧圈治疗椎动脉夹层是近年来研究的热点[2-4],其中小脑后下动脉的保护是介入治疗的关键技术.2012-07我们收治1例右侧椎动脉夹层动脉瘤患者,在介入治疗中弹簧圈的1.5个环突入到小脑后下动脉开口处,术后并发一过性失语及偏瘫,经过对症治疗,4个月后随访,效果良好,现报道如下.

    作者:朱青峰;王国芳;周志国 刊期: 2013年第08期

  • 肺性脑病患者的护理

    肺性脑病是因呼吸功能不全导致缺氧和二氧化碳潴留而引起的神经、精神障碍.轻型患者有头痛、神经恍惚、白天嗜睡、夜间失眠、兴奋;中型出现谵妄、躁动、肌肉抽搐、球结膜水肿、生理反射迟钝;重型患者呈昏迷状态,可癫痫样抽搐、生理反射消失、巴宾斯基征阳性[1].

    作者:董娟娟 刊期: 2013年第08期

  • 低分子肝素联合阿司匹林治疗短暂性脑缺血发作疗效观察

    目的 探讨低分子肝素联合阿司匹林治疗短暂性脑缺血发作的临床疗效及安全性.方法 回顾性分析2010-06-2012-05我院收治的136例TIA患者的临床资料,将136例患者随机分为治疗组及对照组,对照组给予阿司匹林等治疗,治疗组患者在对照组的基础上给予低分子肝素,比较2组患者TIA停止时间、治疗前后纤维蛋白原、出、凝血时间变化及不良反应发生情况.结果 治疗组患者速效、显效、总有效率均优于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后患者纤维蛋白原降低以治疗组明显,组间比较差异显著(P<0.05),2组患者出、凝血时间无明显差异(P>0.05),均无明显不良反应发生.结论 低分子肝素、阿司匹林联合治疗TIA安全、有效,临床应严格适应证选择,个体化治疗.

    作者:陈金喜;沈杰 刊期: 2013年第08期

  • 心理干预对小儿鼾症围术期的影响

    小儿鼾症在儿童中的发病率为1%~3%,其主要症状为鼻堵、呼吸不畅、张口呼吸;表现为注意力不集中、多动、学习成绩下降、认知障碍等[1],给患儿及家属带来沉重的心理负担.由于患儿大多为学龄期或学龄前期的儿童,面临陌生的环境,容易产生紧张、不安、依赖等心理,表现为哭闹、烦躁、不愿配合,影响手术的进行及术后的康复[2].2011-06-2012-08我科对150例小儿鼾症患儿及家属围术期采取相应的心理干预措施,效果满意,现报道如下.

    作者:冯瑞玲 刊期: 2013年第08期

  • 石杉碱甲治疗血管性痴呆临床观察

    目的 观察石杉碱甲片治疗血管性痴呆的临床效果和安全性.方法 将80例血管性痴呆患者随机分为对照组和治疗组,每组各40例.治疗组给予石杉碱甲0.1 mg,2次/d,连用8周;对照组用吡拉西坦片800 mg,3次/d,连用8周.采用简易智能量表(MMSE)、日常生活自理量表(ADL)对2组患者治疗前后进行评分.结果 治疗8周后,治疗组MMSE、ADL评分均较治疗前和对照组改善,差异有统计学意义(P<0.05).结论 石杉碱甲片治疗血管性痴呆患者有较好的疗效,安全性好.

    作者:张慧萍;袁树华 刊期: 2013年第08期

  • 丁苯酞治疗急性脑梗死患者的临床疗效及对血清NSE、S-100B蛋白的影响

    目的 观察丁苯酞软胶囊(NBP)治疗急性脑梗死的临床疗效和对血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100B蛋白的影响.方法 将收治的80例急性脑梗死病人随机分为对照组和治疗组,各40例.对照组给予银杏叶提取物注射液20 mL静滴,1次/d;阿司匹林100 mg口服,1次/d,疗程2周.治疗组在对照组的基础上给予NBP 200 mg/次口服,3次/d,疗程2周.分别于治疗前、治疗后3 d、7 d、14 d进行神经功能缺损评分及血清NSE、S-100B蛋白含量的测定.结果 与对照组比较,治疗组在治疗后7 d、14 d神经功能缺损评分较对照组降低(P<0.01),治疗后3 d、7 d、14 d血清NSE、S-100B蛋白含量明显下降 (P<0.05).结论 丁苯酞软胶囊可以保护神经细胞,改善急性脑梗死病人的神经功能.

    作者:任新光;李昕 刊期: 2013年第08期

  • 吉兰-巴雷综合征合并呼吸肌麻痹1例护理体会

    吉兰-巴雷综合征是神经系统常见的严重疾病之一,其主要病变发生在脊神经根和脊神经,可累及脑神经.其病因可能与病毒感染或自身免疫反应有关,患者多为青壮年男性.呼吸肌麻痹是吉兰-巴雷综合征主要的致死原因,呼吸肌麻痹的抢救成功是提高吉兰-巴雷综合征的治愈率,降低病死率的关键[1].我科于2012-05收治1例吉兰-巴雷综合征合并呼吸肌麻痹至呼吸衰竭患者,经积极抢救及护理,患者康复出院.现将护理体会报告如下.

    作者:王曦堃 刊期: 2013年第08期

  • 显微血管减压术治疗三叉神经痛临床应用研究

    目的 探讨改良微骨孔完全显微血管减压术治疗三叉神经痛的临床疗效及并发症.方法 将本院收治124例三叉神经痛患者随机分为改良手术组和常规手术组,改良手术组患者给予微骨孔完全显微血管减压,常规手术组患者给予传统的显微血管减压术治疗.记录2组患者手术时间、住院天数,并比较2组患者有效率、并发症发生率,随访观察2组患者的复发情况.结果 2组有效率比较差异无统计学意义(P>0.05),改良手术组手术时间、住院天数、并发症发生率、复发率均显著低于常规手术组(P<0.05).结论采用微骨孔完全显微血管减压治疗三叉神经痛疗效确切,且能够减少手术及住院时间、降低术后并发症发生率,值得临床推广应用.

    作者:王宇飞;杨云华;李栋平 刊期: 2013年第08期

  • 个性化健康教育在提高颅底骨折病人满意度中的应用

    目的 探讨个性化健康教育在提高颅底骨折病人护理满意度中的应用及效果.方法 将86例颅底骨折的患者随机分为观察组和对照组各43例,对照组给予颅脑外科常规健康教育,观察组在此基础上结合CT三维重建图像结果,为患者制定个性化的健康教育方案,实施个性化健康教育,比较2组病人的平均住院时间及满意度.结果 观察组住院时间明显少于对照组(P<0.05),满意率明显高于对照组(P<0.05).结论 结合CT颅底三维重建图像结果,制定个性化健康教育应用于颅底骨折患者,可以缩短平均住院时间,减轻患者负担,明显提高病人满意度,提高护理质量.

    作者:庄文燕;仪立志;李银优;龙芝灵;孔文龙;周秀红 刊期: 2013年第08期

  • NMDA受体NR2A亚单位在凝血酶诱导的大鼠脑出血后脑损伤作用机制的研究

    目的 探讨N-甲基-D天冬氨酸受体(NMDA)受体NR2A亚单位在凝血酶诱导的大鼠脑出血后脑损伤中的作用机制.方法 将健康雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组、凝血酶组、凝血酶+阿加曲班组,建立大鼠脑出血模型.造模后48 h,采用伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)的通透性,干-湿重法测脑组织的含水量.采用Western-blot方法观察出血后各时间点(0 h、0.5 h、6 h、24 h、72 h、120 h)血肿周围脑组织NR2A分布及动态变化规律.结果 (1)阿加曲班可以明显改善大鼠脑出血BBB通透性(P<0.05),血肿周围脑水肿明显减轻(P<0.05).(2)Western-blot结果显示,NR2A在6 h时开始增加,72 h达到高峰,在120 h时基本恢复.阿加曲班可以明显减少NR2A在72 h时的表达(P<0.05).结论 (1)NR2A参与了凝血酶诱导的脑出血后脑损伤的病理生理过程.(2)凝血酶可能通过上调NR2A表达引起脑出血后脑组织的损伤.

    作者:侯玉超;沈霞;吴保鑫;孙秀娟;花放;叶新春;齐素华;崔桂云 刊期: 2013年第08期

  • 妊娠高血压合并可逆性后部白质脑病综合征12例护理体会

    可逆性后部白质脑病综合征(reversible posterior leukoencephalopathy syndrome,RPLS)是一组近才被明确定义的神经系统综合征,临床表现为迅速进展的颅高压、癫、失明、意识障碍等,影像学表现为可逆性的大脑后部白质损害,诱因有高血压、应用免疫抑制剂和细胞毒性药物等,尤其常见于患有妊娠高血压的孕妇[1].我科自2005-01至今共收治妊娠高血压合并RPLS患者12例,经及时诊治、精心护理产妇和婴儿均全部存活出院,现将护理体会报告如下.

    作者:赵辉 刊期: 2013年第08期

  • 度洛西汀治疗脑卒中后抑郁症疗效分析

    目的 探讨度洛西汀治疗脑卒中后抑郁症的疗效和安全性.方法 回顾分析我院2009-2012年应用度洛西汀治疗的75例脑卒中后抑郁症患者的临床资料,应用汉密顿抑郁量表(HAMD)于治疗前和治疗结束后进行疗效判定,并分析不良反应.结果 75例患者中痊愈26例,明显改善33例,改善10例,无效6例,治愈率78.7%,有效率92.0%.治疗过程中出现不良反应5例(6.7%),均不影响继续服药,并于服药1周后自行消失.结论 应用度洛西汀治疗脑卒中后抑郁安全有效.

    作者:常景环 刊期: 2013年第08期

  • 原发性舌咽神经痛手术患者的护理体会

    原发性舌咽神经痛是指在舌咽神经感觉分布区域发生的剧烈疼痛[1].临床少见,好发于左侧[2].疼痛常由进食、吞咽等诱发,表现为咽喉部或耳内发作性剧痛,偶伴晕厥、心律失常和心搏骤停[3].药物治疗效果不佳,常需手术治疗[4].我院2007-09-2011-04采用颈侧入路经颈静脉孔舌咽神经切断术治疗17例原发性舌咽神经痛患者,收到较好效果,现将护理体会报告如下.

    作者:闵双凤;娄卫华;郑琰 刊期: 2013年第08期

  • 理疗结合针刺治疗神经根型颈椎病疗效分析

    目的 观察应用综合疗法对神经根型颈椎病的治疗效果.方法 150例神经根型颈椎病患者随机分为对照组和治疗组.对照组75例给予常规治疗,治疗组75例在对照组基础上给予综合治疗(牵引+针刺+中频电).结果 2组总有效率分别为82.7%、98.7%,治疗组效果明显优于对照组(P<0.05).结论综合治疗神经根型颈椎病疗效显著,值得临床推广应用.

    作者:陆保全;卢爱玲 刊期: 2013年第08期

中国实用神经疾病杂志

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