冯馨园；张婷；崔戈；王旗春；钱乙；蔡莹；仰舒静；张梦荧；姚嘉诚
目的:探讨RNA干扰(RNAi)技术沉默Nrf2基因对煤焦沥青烟提取物(CTPE)致人支气管上皮细胞(BEAS-2B)发生恶性转化过程中的作用,为肺癌的发生机制提供线索.方法:应用RNAi技术建立Nrf2基因沉默的BEAS-2B细胞稳定表达株;设立二甲基亚砜(DMSO)阴性对照组、苯并(a)芘[B(a)P]阳性对照组、CTPE组、RNAi组;采用软琼脂克隆形成实验分析细胞恶变情况;采用RT-PCR法检测Nrf2和NQO1 mRNA的表达;Western blot法检测Nrf2和NQO1蛋白的表达.结果:20代以后,B(a)P组、CTPE组和RNAi组的克隆形成率高于DMSO组(P＜0.001);而RNAi组的克隆形成率高于B(a)P组和CTPE组(P＜0.001).B(a)P组和CTPE组Nrf2 mRNA和蛋白表达水平均较DMSO组增加(P ＜0.001),B(a)P组、CTPE组和RNAi组NQO1 mRNA和蛋白水平均较DMSO组上调,RNAi组的表达量低于B(a)P组和CTPE组(P ＜0.001);诱导后(CTPE组)第10代、20代、30代细胞中Nrf2与NQO1的蛋白表达呈正相关(r=0.913,P＜0.001).结论:Nrf2可能通过上调NQO1的表达对抗CTPE对BEAS-2B细胞的毒性作用从而抑制细胞恶化;Nrf2和NQO1在BEAS-2B细胞癌前病变阶段已呈现较明显表达,这可能有助于接触CTPE高危人群罹患肺癌的预警及筛查.
作者：曹会敏；倪静；玉崧成；冯斐斐；吴拥军 刊期： 2018年第01期
目的:分析骨髓增生异常综合征(MDS)与再生障碍性贫血(AA)骨髓细胞形态学表现的差异.方法:回顾性收集首诊确诊为MDS(423例)与AA(383例)病例的资料,比较两者骨髓细胞形态学表现.结果:MDS患者骨髓中早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、中性杆状核粒细胞、中性分叶核粒细胞、早幼红细胞、中幼红细胞、晚幼红细胞比例均高于AA患者,而淋巴细胞、成熟单核细胞、成熟浆细胞比例低于AA患者(P＜0.05).MDS患者多表现为骨髓细胞三系增生、病态造血或原始细胞比例增高,粒系红系增生伴巨核系增生减低或原始细胞比例增高,而AA患者多表现为三系增生减低或原始细胞比例减低(P＜0.05).MDS比AA更多地表现为病态造血.结论:MDS与AA在骨髓细胞形态学方面存在明显差异.
作者：张晓雅；汪可可；周莹；王国立；尹素凤；刘斌；袁欣；王倩；曹英志；宋宇；武建辉 刊期： 2018年第01期
镜面右位心发病率很低,约为1/12 000[1],这些患者当中3％～5％会存在心脏功能的异常[2],并且一些患者在成年时期需要手术治疗[3].2017年6月,郑州大学第一附属医院对1位镜面右位心患者实施了镜面右位心双瓣置换术,术后患者恢复顺利,现将结果报道如下.
作者：惠云生；冯涛；梅魁魁；文冰；赵文增 刊期： 2018年第01期
目的:探讨缺氧条件下神经生长因子受体(p75 NGFR)在不同组织来源膀胱癌细胞株中表达的变化及生物学特性的变化.方法:选取不同膀胱癌组织来源的鳞癌细胞株SCaBER和中分化的移行细胞癌细胞株5637.采用免疫荧光细胞化学染色及RT-PCR检测常氧和缺氧24、48、72 h2个膀胱癌细胞系中p75 NGFR蛋白和mRNA的表达情况,流式细胞术检测缺氧l、3、5、7d膀胱癌细胞凋亡情况,MTT法检测丝裂霉素(MMC)处理24、48、72 h对缺氧条件下膀胱癌细胞的抑制率的影响.结果:p75 NGFR蛋白及mRNA表达在2个细胞系缺氧24、48 h有所下降,但与常氧组相比差异无统计学意义(P＞0.05);在72 h有显著降低,与其余各组相比差异有统计学意义(P＜0.05).膀胱癌SCaBER、5637细胞在缺氧第3天开始凋亡率低于常氧组(P＜0.05);缺氧48、72 h后MMC对膀胱癌细胞的抑制率低于常氧组(P＜0.05).结论:缺氧条件下,p75 NGFR在膀胱癌细胞的表达随时间逐渐降低,膀胱癌细胞的凋亡率降低,MMC对膀胱癌细胞的抑制率下降.
作者：樊长晖；许长宝；赵兴华；郝斌；吴国清 刊期： 2018年第01期
本研究组利用全基因组关联分析和全基因组外显子测序技术发现核黄素转运基因2(riboflavin transporter gene 2,RFT2;又称C20orf54、SLC52A2、RFVT3)是食管鳞状细胞癌(简称鳞癌)重要易感基因[1],NOTCH1基因突变是食管癌变的重要分子事件[2].这些发现引发学者对RFT2和NOTCH1与肿瘤发生和发展的关系进行深入研究.
作者：王立东；杜丹凤；宋昕；赵学科；胡守佳；周福有；毛伟敏；李秀敏 刊期： 2018年第01期
目的:结合紫癜性肾炎(HSPN)肾脏病理分型,评价尿小分子蛋白α1微球蛋白(α1m)、视黄醇结合蛋白(RBP)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)是否能及时反映HSPN肾小管的损伤.方法:选取33例正常儿童、99例单纯过敏性紫癜(HSP)患儿、101例HSPN患儿(Ⅱa型21例、Ⅱb型13例、Ⅲa型41例、Ⅲb型26例).HSPN患儿肾组织行HE、PAS、PASM、Masson染色,显微镜下观察评估肾小球、小管间质病变;用免疫比浊方法检测3组儿童尿标本α1m、RBP,用酶比色法检测尿NAG酶.结果:病理形态结果显示,HSPNⅡ型未见明显肾小管间质病变,HSPNⅢ型病理上可见散在肾小管上皮细胞肿胀、脱落,肾小管间质炎细胞浸润和灶性肾小管萎缩,多为轻度病变.与正常对照和HSP患儿比较,HSPNⅡ型患儿尿α1m[(1.591 ±1.365) g/mol]、RBP[(4.583 ±3.576)g/mol]和NAG酶[(20.321 ±11.262)U/g]均升高(P＜0.01).与HSPNⅡ型相比,HSPNⅢ型尿α1m[(2.032±1.811)g/mol]、RBP[(8.102 ±7.193) g/mol]和NAG酶[(31.236±24.985) U/g]的水平进一步升高(P＜0.01),且尿α1m和尿RBP的水平呈正相关(r=0.513),尿NAG酶与肾小球新月体百分比呈正相关(r=0.331).与Ⅲa型相比,HSPNⅢb型患儿尿α1m、RBP均升高(P＜0.05),尿NAG酶的水平两组间差异无统计学意义.结论:尿α1m、RBP和NAG酶联合检测有助于早期评价HSPN肾小管损伤的状态和程度,其敏感性高于肾组织病理检测.新月体形成可加重肾小管上皮细胞的损伤.
作者：杨晓青；黄岩杰；张龙真；李静；梅晓峰；李金刚；毕亮亮；翟文生；宋纯东 刊期： 2018年第01期
目的:采用超高效液相色谱-质谱联用技术,考察胃癌患者与健康志愿者血浆代谢谱的差异,并筛查胃癌的生物标志物,为胃癌发病机制的探究和胃癌的初步诊断提供依据.方法:运用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术对30例胃癌患者及30名健康志愿者的血浆样本进行代谢组学分析,采用正交偏小二乘判别分析法对数据进行模式识别,分析胃癌患者与健康志愿者间的代谢谱差异,并筛选出胃癌患者的差异代谢物.结果:胃癌患者血浆中脯氨酸、苯丙氨酸等8种代谢物浓度上升,亮氨酸、赖氨酸等5种代谢物浓度下降;而精氨酸和脯氨酸代谢、苯丙氨酸代谢等代谢通路均发生明显重编程,提示胃癌患者体内形成了新的代谢调控网络.结论:代谢通路的显著变化可能与胃癌的发病机制有关,筛选出的差异代谢物有望作为胃癌患者的潜在生物标志物.
作者：王维嘉；杜鹃；赵春临 刊期： 2018年第01期
目的:构建一种新型的双荧光素酶报告基因表达载体.方法:设计并扩增海肾荧光素酶基因hRLUC,将其插入到双酶切的含有萤火虫荧光素酶报告基因(Firefly)的载体pGI4.10中,得到pGL4.10-hRLUC;使用lipofectamine3000将pGL4.10和pGL4.10-hRLUC分别转染入HEK293细胞,检测细胞中荧光素酶活性,以未转染细胞作对照.结果:使用PCR方法获得hRLUC表达单元(2 350 bp);双荧光素酶报告基因表达载体pGL4.10-hRLUC经酶切和测序鉴定,插入正确.转染pGL4.10组荧光素酶活性相对值为(220.311 ±2.082);转染pGL4.10-hRLUC的细胞中荧光素酶活性低于pGI4.10转染细胞,高于未转染细胞(P＜0.05).结论:成功构建了双荧光素酶报告基因(hRLUC和Firefly)表达载体.
作者：冯龙；马云云；曹珊；李晓娟；王媛媛；陈肖楠；孙倩倩；吴建博；赵国强 刊期： 2018年第01期
目的:探讨EZH2抑制剂DZNep对裸鼠Eca109细胞移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响.方法:将Eca109细胞接种于15只裸鼠右侧背部皮下构建裸鼠移植瘤模型后分为3组,每组5只,其中2组分别腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU)、DZNep治疗2周,另外1组腹腔注射生理盐水作为对照组.观察肿瘤生长情况,采用Western blot检测肿瘤组织中EZH2、SAHH、组蛋白甲基化相关蛋白及mTOR/p70S6K信号通路相关蛋白、Caspase-3、E-cadherin的表达情况,并通过TUNEL法检测肿瘤组织中细胞的凋亡,计算细胞凋亡率.结果:DZNep组肿瘤块质量小于对照组(P＜0.05).与对照组比较,DZNep组肿瘤组织中Caspase-3和E-eadherin表达水平增高,细胞凋亡率升高(P＜0.05).另外,与对照组相比,DZNep组H3 K27 me3表达降低,PTEN表达升高,mTOR和p-p70S6K表达均下降(P＜0.05).结论:DZNep可抑制食管鳞癌移植瘤增长,并诱导肿瘤细胞凋亡;其机制可能是通过对EZH2的抑制增强PTEN的表达,从而抑制mTOR/p70S6K信号通路的激活.
作者：张乐；李庆华；杨璐；朱立强；张彦婷；关方霞 刊期： 2018年第01期
目的:探讨术前外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)、预后营养指数(PNI)等炎症标志物与乙肝病毒(HBV)相关原发性肝癌患者根治性切除术后预后的关系.方法:回顾性分析接受根治性切除术的331例HBV相关原发性肝癌患者的临床及随访资料,计算NLR、PLR、MLR、PNI值.采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析影响患者生存的因素.结果:NLR、PLR、MLR、PNI的界值分别为2.41、106.80、0.24、45.根据界值将患者分为高低两组.多因素分析显示,门静脉癌栓、术前AFP、AST、肝内播散及NLR是影响HBV相关原发性肝癌患者根治术后生存的独立危险因素,HR(95％ CI)分别为2.652(1.863 ～3.776)、1.476(1.027 ～2.120)、1.437(1.047～1.972)、1.596(1.065 ～2.390)和1.563(1.077 ～2.268),PNI是此类患者术后生存的保护因素,HR(95％ CI)为0.657(0.468 ～0.922)(P均＜0.05).结论:术前NLR及PNI与HBV相关原发性肝癌患者术后生存有关,低NLR及高PNI的患者预后较好.
作者：崔晗；朱艺伟；游杰；姚明解；薄亚聪；张玲；赵二江；崔玲玲；吕全军 刊期： 2018年第01期
目的:采用正交设计典型状态基于标准赌博法(SG)探索构建欧洲生命质量量表(EQ-5D)评分体系.方法:采用分层整群随机抽样的方法,从医学院校按年级、专业分层抽取在校大学生250人,选取L18(2*3^7)正交设计表得到18个标准状态.应用STATA/SE 12.0构建9个加权小二乘多元线性回归模型,模型包括11个哑变量.结果:总体水平上以中位数为基础构建的WLS回归模型(模型AMWls00)优,该模型无常数项、无交互作用N3变量,具有简洁、高效的特点,其调整后决定系数为0.998 8,平均绝对误差为0.031 5,18状态的预测值与均值相关系数为0.976 0,逻辑错误数为0.且生命质量评分曲线具有明显的中国人文化特征.结论:总体水平上以中位数为基础无N3、无常数项的WLS回归模型(AMWls00)是优模型,该建模方法为合理.
作者：卓琳；王国威；叶静陶；贡佳慧；刘毅；徐玲；汪秀英 刊期： 2018年第01期
目的:观察小分子甾族多取代苯胺化合物2,6-二氰基-3-吡啶基-5-雄甾烯基苯胺(简称4d)对食管癌EC109细胞增殖、周期、凋亡的影响.方法:MTT法检测0.40～100.00 μmol/L的4d作用于正常的食管上皮细胞Her-1a或食管癌细胞EC109 48 h或72 h后,对正常细胞及癌细胞的增殖抑制作用,筛选出4d对食管癌细胞佳作用时间及浓度;4d作用24 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;4d作用6h后,使用JC-1染料染色,采用高通量筛选系统检测细胞线粒体膜电位;4d作用24 h后,采用Western blot法检测Bel-2家族中Bcl-2、Mcl-1、Bax蛋白表达的变化.结果:4.0 μmol/L 4d能引起EC109细胞凋亡率升高,S期阻滞,线粒体功能障碍,Mcl-1表达下降(P＜0.05).结论:4d能抑制EC109细胞增殖,诱导细胞凋亡,引起S期阻滞;其机制可能与Bel-2凋亡家族介导的线粒体功能障碍有关.
作者：石晓丽；徐晓微；秦甜甜；刘卫华；张秀娟；周凯瑞；霍金玲；杨腾蛟；王淙 刊期： 2018年第01期
目的:探讨APTO-253对紫杉醇或顺铂处理的卵巢癌SKOV3及OVCAR3细胞凋亡及细胞周期的影响.方法:①培养SKOV3和OVCAR3细胞,分别加入5μmol/L APTO-253、4 mg/L顺铂或40 nmol/L紫杉醇、5μmol/LAPTO-253联合4 mg/L顺铂或40 nmol/L紫杉醇,用Caspase-3/7活性方法检测细胞凋亡情况,用Western blot方法测定Cleaved-PARP及Cleaved-Caspase-3蛋白的表达水平.②用5μmol/L APTO-253处理SKOV3和OVCAR3细胞24 h,采用流式细胞仪检测细胞周期的变化,采用Western blot方法于不同作用时间点(0、1、3、6、12、24 h)测定细胞周期相关蛋白CDK6、cMyc及P21的表达水平.结果:①在SKOV3和OVCAR3细胞中,与APTO-253、紫杉醇或顺铂相比,经APTO-253联合化疗药物处理后细胞凋亡增加(P ＜0.001),并且Cleaved-PARP及Cleaved-Caspase-3蛋白的表达水平均增加.②在SKOV3和OVCAR3细胞中,APTO-253可导致G1期阻滞、S期和G2/M期细胞减少(P＜0.05).并且随着作用时间的延长,细胞周期相关蛋白CDK6和cMyc表达下降,而P21表达升高.结论:APTO-253能够促进SKOV3及OVCAR3细胞的凋亡,阻滞细胞周期,提高癌细胞对紫杉醇及顺铂的敏感性.
作者：王宝金；申爱荣；付喜玲；李霞；王新月；任琛琛 刊期： 2018年第01期
目的:探讨CNRIP1启动子区去甲基化对结肠癌细胞糖酵解途径、细胞增殖及迁移活性的影响.方法:采用5-氮杂胞苷(5-azaC)降低结肠癌细胞SW620 CNRIP1启动子区甲基化水平,以未干预细胞作对照.用亚硫酸盐测序法检测细胞CNRIP1启动子区甲基化水平;分别采用qRT-PCR、Western blot法检测细胞中CNRIP1、糖酵解途径关键酶HK2、PKM2、LDH-A mRNA及蛋白表达水平,生化法检测细胞培养液中乳酸水平;分别采用CCK-8比色法、Transwell法检测细胞增殖及迁移能力.结果:与未干预组细胞相比,5-azaC干预组细胞CNRIP1启动子区甲基化水平降低,CNRIP1 mRNA及蛋白表达升高,HK2、PKM2、LDH-A mRNA和蛋白表达水平及细胞培养液中乳酸水平均降低,细胞增殖及迁移能力均减弱(P均＜0.05).结论:CNRIP1去甲基化可抑制糖酵解途径,从而降低结肠癌细胞的增殖及迁移能力.
作者：冯馨园；张婷；崔戈；王旗春；钱乙；蔡莹；仰舒静；张梦荧；姚嘉诚 刊期： 2018年第01期
目的:探讨尖锐湿疣(CA)组织中促凋亡蛋白Bad和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其可能意义.方法:采用免疫组化SP法分别检测53例CA和28例正常包皮上皮组织中Bad和PCNA蛋白的表达情况.结果:53例CA组织中Bad和PCNA蛋白的阳性表达率分别为69.8％ (37/53)和86.8％ (46/53),而在正常包皮上皮组织中的阳性表达率均为28.6％ (8/28)和39.3％ (11/28),CA组织中Bad和PCNA阳性表达强度均在++～H+,而包皮上皮组织中Bad和PCNA阳性表达强度均在+～H;CA和正常包皮上皮组织中Bad、PCNA蛋白的表达强度差异有统计学意义(ZBad=3.805,ZPCNA=5.426,P＜0.001).CA组织中Bad和PCNA蛋白的表达呈正相关(rp =0.134,P=0.325).结论:Bad和PCNA蛋白的过表达可能对CA的发生和发展有一定的促进作用.
作者：夏仙仙；蔡丙杰；沙珂；潘信心；尹光文 刊期： 2018年第01期
目的:测定冠心病患者血浆Jagged1与血管内皮生长因子(VEGF)水平,分析二者的关系并探讨其临床意义.方法:采用酶联免疫吸附法测定85例冠心病患者(稳定性心绞痛30例、不稳定性心绞痛29例、急性心肌梗死26例)以及30例对照(冠状动脉造影未见异常)血浆Jagged1和VEGF水平,并分析Jagged1与VEGF的关系.结果:稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组血浆Jagged1和VEGF水平均高于对照组,且血浆Jagged1和VEGF的水平在稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组逐渐升高(P均＜0.05).冠心病患者血浆Jagged1与VEGF水平呈正相关(r=0.708,P＜0.01).结论:Jagged1与冠心病关系密切.
作者：刘存存；杨国杰；李栋博；李国栋；秦鹏；WEI Zihan 刊期： 2018年第01期
肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy,ALD)是一组遗传性脂质代谢病,属于过氧化物酶体病范畴,其中X连锁肾上腺脑白质营养不良(X-linked adrenoleukodystrophy,X-ALD)较为多见,与ATP结合转运子超家族成员D1 (ATP binding cassette subfamily D member 1,OMIM:300100)基因突变相关,导致极长链脂肪酸(very long-chain fattyacids,VLCFA)代谢障碍,其中儿童脑型X-ALD(cerebral ALD,CALD)又为常见,其临床表现多样,早期误诊率高,病情进展较快,治疗手段有限,整体预后不良.
作者：张继要；和宁辛；罗强 刊期： 2018年第01期
慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(chronic inflammatory demyelinating polyradiculoneuropathy,CIDP),也称慢性吉兰巴雷综合征,是一组以细胞免疫和体液免疫异常共同介导的周围神经炎性脱髓鞘疾病.该病起病隐匿,多以对称性肢体迟缓性肌无力为首发症状,病程呈慢性进展或缓解复发.目前,合并肾病综合征而以双下肢水肿症状为首发的CIDP国内尚未见相关报道.现将郑州大学第一附属医院近期收治的一例以双下肢水肿为首发症状的CIDP合并肾病综合征患者的资料分析报道如下.
作者：余梦嫣；王亚丽；连亚军；刘洪波；魏建科；李英娇；谢南昌 刊期： 2018年第01期
目的:探讨新型冬凌草甲素衍生物OP16和mTOR抑制剂雷帕霉素对人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长和凋亡的影响及可能的分子机制.方法:建立人食管鳞癌EC9706细胞的裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、OP16组、雷帕霉素组和联合治疗组,每组10只.观察经过治疗后荷瘤裸鼠的肿瘤生长情况,使用TUNEL法检测各组肿瘤组织中细胞凋亡情况,并使用Western blot法检测裸鼠肿瘤组织中PI3 K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达情况.结果:OP16和雷帕霉素单独给药均能抑制肿瘤的生长,二者联用抑制效果更为明显(FoP16=17.562,F雷帕霉素=18.302,F姬=20.716,P＜0.001).TUNEL结果表明OP16和雷帕霉素单独给药均能促进肿瘤细胞凋亡,且二者联用时促凋亡能力增强(FOP16=209.515,F露帕霉素=230.235,F交互=445.186;P ＜0.001).Western blot结果表明,OP16可以显著抑制雷帕霉素引起的PI3K/Akt负反馈激活(P＜O.O1),且二者联用可以协同抑制mTOR的表达及磷酸化激活(P＜0.05).结论:OP16与雷帕霉素联用具有较好的协同抑制肿瘤生长以及促进肿瘤细胞凋亡的作用,其分子机制可能与对PI3K/Akt/mTOR信号通路的抑制作用有关.
作者：李浩男；彭柯峥；师莹莹；刘小林；曹燕君；郝雨桐；覃佳宁；侯桂琴 刊期： 2018年第01期
目的:构建以假设状态为基础的欧洲生命质量量表(EQ-5D)拓展模型.方法:采用分层整群随机抽样的方法,抽取200名在校医学生作为应答者.利用L18(2 ×37)正交设计表选取18个假设健康状态;健康状态的评分采用视觉标尺法;在五因素EQ-5D模型(ModelA#)的基础上加入性别、年龄、经济状况3个因素,构建EQ-5D拓展模型(ModelA);采用广义小二乘回归法进行数据拟合,构建模型.通过模型逆回归构建以实际体验为基础的五因素EQ-5D模型(ModelSun#)和拓展模型(ModelSun).分别用这4个模型对22个典型健康状态进行评分.结果:ModelA的模型系数均为负值,与ModelSun系数方向一致,大小略有不同.ModelA#与ModelSun评分的相关系数为0.870 3,ModelA与ModelSun评分的相关系数为0.968 8,较前者提高.结论:ModelA模型合理,预测精度较ModelA#提高,应用范围扩大.
作者：叶静陶；卓琳；王国威；贡佳慧；刘毅；徐玲；卓朗 刊期： 2018年第01期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
