李志勤;余祖江;武淑环;孙长宇;江河清;潘延凤
目的:研究热化疗对人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响及其可能机制.方法:H446细胞分为单纯化疗组(单纯使用120 μg/L紫杉醇处理细胞)、热化联合组(采用43 ℃加热联合120 μg/L紫杉醇处理细胞)、抑制荊组(采用43 ℃加热联合120μg/L紫杉醇及1 μmol/L Akt特异抑制剂wortmannin处理细胞),以未处理的H446细胞作对照.应用MTT法检测各组细胞增殖率的变化,采用Western Blot检测各组细胞磷酸化Akt水平.结果:对照组、单纯化疗组、热化联合组和抑制剂组细胞增殖率分别为(100.00 ± 0.00)%、(69.16 ± 2.95)%,(59.83 ±3.36)%和(40.65 ± 0.14)%,磷酸化AKt水平分别为(1.52 ± 0.01),(1.04 ± 0.42),(0.69 ± 0.03)和(0.00 ±0.00),4组细胞增殖率及磷酸化Akt水平相比,差异均有统计学意义(F=68.231和6.232,P均<0.05).与对照组和单纯化疗组相比,热化联合组细胞增殖率及磷酸化Akt水平均降低(P<0.05),wortmannin可进一步抑制H446细胞的磷酸化,且降低细胞的增殖串(P<0.05).结论:热化疗联合应用可抑制H446细胞增殖,其作用可能是通过抑制Akt信号转导通路实现的.
作者:王琳;徐春燕;刘新奎;师国珍 刊期: 2010年第03期
子宫内膜异位症是生育期妇女常见病,也是引起女性不孕的常见原因之一.近年来,其发病率有逐年升高的趋势[1].2002年1月至2004年12月,郑州大学第三附属医院妇产科共收治56例卵巢子宫内膜异位囊肿患者,现将治疗体会总结如下.
作者:赵倩;边爱平;许雅娟 刊期: 2010年第03期
目的:观察预防性应用卡维地洛对肺动脉高压致右心衰竭幼鼠血流动力学、右心室功能及血浆B型脑钠肽(BNP)的影响.方法:取44只SD幼鼠. I:取18只幼鼠.模型1组(M1组)10只,腹腔注射10g/L野百合碱溶液诱发肺动脉高压致右心衰竭模型;正常对照1组(N1组)8只,同法给予等体积生理盐水.4周末测定幼鼠血流动力学指标包括中心静脉压(pCV)、右心室收缩压(pRVS)、右心室压大上升速率(+RVdp/dt)、平均主动脉压(pMA)和左心室压大上升速率(+LVdp/dt)及右心功能包括右室肥厚指数[(RV/(LV+S)]和左室质量与体质量的比值(LV/BW).Ⅱ:余26只随机分为3组,模型2组(M2组,n=8)和卡维地洛组(C组,n=10)同上建立右心衰竭模型,C组于腹腔注射野百合碱溶液后2周给予卡维地洛4周,正常对照2组(N2组,n=8)仅给予等体积生理盐水4周.6周末同上测定幼鼠血流动力学指标与右心功能,采用ELISA法测定幼鼠血浆 BNP水平.结果:I:与N1组相比,M1组pCV与pRVS升高,+RVdp/dt降低,RV/(LV+S)增加(t=9.213、5.127、7.720和10.265,P均<0.05).Ⅱ:C组、M2组和N2组pCV、pRVS、+REdp/dt、RV/(LV+S)及血浆BNP水乎相比,差异均有统计学意义(F=19.086、8.359、8.166、11.810和10.057,P均<0.05).C组pCV与pRVS低于M2组,+RVdp/dt高于M2组,RV/(LV+S)低于M2组,血浆BNP水平低于M2组(P均<0.05).结论:预防性应用卡维地洛能减缓肺动脉高压所致右心衰竭的形成和发展.
作者:梁芳;安金斗 刊期: 2010年第03期
目的:研究成人脂肪间充质干细胞(hAD-MSC)体外诱导分化为视网膜色素上皮细胞(RPE)、光感受器细胞和血管内皮细胞的情况.方法:分离、培养和鉴定hAD-MSC,用血管内皮生长因子和成纤维细胞生长因子诱导hAD-MSC向血管内皮细胞分化,并检测血管内皮细胞标志物血管内皮细胞Ⅷ因子(vWF)的表达情况.制备hAD-MSC体外诱导液,用诱导剂和诱导液共同诱导hAD-MSC向视网膜细胞分化,采用免疫荧光法检测hAD-MSC经诱导后表达光感受器细胞标志物视紫红质(Rhodopsin)和RPE细胞标志细胞角蛋白(Pan-CK)的表达情况.结果:免疫荧光法证实,分离培养的hAD-MSC经体外诱导后可表达RPE、光感受器细胞和血管内皮细胞的标志Pan-CK、Rhodopsin和vWF.结论:hAD-MSC经过体外诱导可以向视网膜RPE、光感受器细胞和血管内皮细胞分化.
作者:晁炜静;李康华;戴荣平;韩钦;闫曦;赵潺;于伟泓;董方田;赵春华 刊期: 2010年第03期
目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体.方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的oligoDNA,退火形成双链DNA,与经Xba I和XhoⅡ酶切后的pFLRu-GFP载体连接构建成pFLRu-U6-shPTEN慢病毒载体.在此基础上,引入外源设计的PTEN mRNA,与经EcoR I和BamH I酶切后的pFLRu-U6-shPTEN载体连接,从而产生在同一个载体内兼有人PTEN基因shRNA及其救援cDNA同时表达的RESC慢病毒载体pFLRu-U6-rrshPTEN.2者均转入到大肠杆菌XL10感受态细胞,制备质粒并用酶切及测序鉴定.分别用pFLRu-U6-shPTEN、pFLRu-U6-rrshPTEN与pCMV-dR8.2ΔR和pCMV-VSV-G质粒共转染293/包装细胞,包装产生2种慢病毒,收集病毒上清,系列稀释法检测病毒悬液的滴度.结果:氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆、酶切鉴定、U6前引物测序鉴定结果显示pFLRu-U6-shPTEN和pFLRu-U6-rrshPTEN均为阳性克隆,且2种慢病毒的滴度分别为6.6 × 105和5.6 × 105pfu/mL.结论:成功构建出人PTEN基因RNAi及其RESC慢病毒载体.有效地避免了由于脱靶效应所引起的假阳性结果对实验的干扰,为研究PTEN基因功能提供了稳定的转染细胞载体.
作者:王玉梅;盛光耀 刊期: 2010年第03期
目的:检测子痫前期患者胎盘组织中Endoglin、血管内皮生长因子(VEGF)及其跨膜型受体(Flt-1)的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测45例子痫前期患者(轻度子痫前期患者15例、重度30例)及同期足月妊娠分娩孕妇20例胎盘组织中Endoglin、VEGF及Fit-1的表达.结果:对照组、轻度和重度子痫前期组胎盘组织中Endoglin的相对表达量分别为(86.88 ± 6.80)、(99.45±6.88)和(118.88±6.13,3者相比,差异有统计学意义(F=69.683,P<0.001);VEGF的相对表达量分别为(133.70±6.08)、(117.57±6.44)和(104.60±4.98),3者相比,差异有统计学意义(F=68.877,P<0.001);Fit-1的相对表达量分别为(129.00±5.76)、(142.30±4.55)和(154.32±5.16),3者相比,差异有统计学意义(F=66.555,P<0.001);随着病情的加重,胎盘组织Endoglin与Flt-1蛋白的表达水平升高,VEGF的表达水平降低(P<0.05).子痫前期患者胎盘组织中VEGF的表达与Flt-1的表达呈负相关(r=-0.653,P=0.001).结论:子痫前期患者胎盘组织中Endoglin与Flt-1的高表达及VEGF的低表达可能参与了子痫前期的发病.
作者:赵先兰;孙亚兰;张连琴 刊期: 2010年第03期
目的:检测胃癌组织中Pokemon和半乳糖凝集素-3(Galectin-3)蛋白的表达情况.方法:采用免疫组织化学SP法检测76例胃癌组织和16例正常胃黏膜组织中Pokemon和Galectin-3的表达,并分析其与临床病理特征的关系.结果:胃癌组织中Pokemon蛋白阳性表达率为59.2%(45/76),Galectin-3蛋白阳性表达率为82.9%(63/76),均高于正常胃黏膜组织的18.8%(3/16)和12.5%(2/16)(χ2=8.671,P=0.003;χ2=28.284,P<0.001).胃癌组织中Pokemon与Galectin-3的阳性表达与淋巴结转移(χ2分别为10.787和11.626,P均=0.001)、pTNM分期(χ2=12.903,P<0.0010;χ2=6.435,P=0.011)和浸润深度(χ2分别为11.849和11.701,P均=0.003)有关,且Pokemon与Galectin-3表达有关联(χ2=5.253,rP=0.254,P=0.022).结论:Pokemon及Galectin-3与胃癌的侵袭、转移有关.
作者:李志猛;乔军波;张谢夫;赵春临 刊期: 2010年第03期
目的:观察β-榄香烯乳联合照射是否能提高人舌鳞癌裸鼠移植瘤的治疗效果及对肿瘤细胞凋亡和外周血白细胞的影响.方法:建立人舌鳞状细胞癌裸鼠移植瘤动物模型(40只),随机分为5组,每组8只:空白组、单纯药物组、单纯照射组、药物(1 h)+照射组和药物(2 h)+照射组.观察肿瘤生长时间、肿瘤细胞凋亡率和外周血白细胞总数.结果:人组40只移植瘤裸鼠实验期间无死亡.空白组、单纯药物组、单纯照射组、药物(1 h)+照射组和药物(2 h)+照射组肿瘤生长时间分别为(8.62±3.81)、(15.13±6.60)、(22.00±6.32)、(29.00±5.68)和(40.00±4.41)d;药物(1h)+照射组:药物和照射无交互作用(F=0.015,P=0.902);药物(2 h)+照射组:药物和照射有交互作用(F=9.002,P=0.006).空白组、单纯药物组、单纯照射组、药物(1 h)+照射组和药物(2 h)+照射组凋亡率分别为(5.00±2.05)%、(11.99±2.47)%、(19.88±2.83)96、(27.11±4.84)%和(34.84±4.62)%;药物(1 h)+照射组:药物和照射无交互作用(F=0.012,P=0.915);药物(2 h)+照射组:药物和照射有交互作用(F=12.837,P=0.001).结论:β-榄香烯乳联合照射能提高人舌鳞状细胞癌裸鼠移植瘤的放射治疗效果,照射前2 h应用能起到放射增敏作用;联合作用能有效诱导细胞凋亡,且对白细胞没有抑制作用.
作者:吴大鹏;卢红;张洪志 刊期: 2010年第03期
目的:研究香青兰提取物对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及机制.方法:提取香青兰的有效成分,用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立H/R的损伤模型,实验分6组:正常对照组、H/R组、总提取物组、氯仿组、乙酸乙酯组及正丁醇组.采用MTT法测定细胞的存活率,乳酸脱氢酶试剂盒(LDH)测定培养液中LDH的含量,黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及硫代巴比妥酸显色法测定活细胞丙二醛(MDA)的含量.结果:各组细胞活力、吸光度值以及LDH、MDA和SOD含量伺比较,差异均有统计学意义(F=102.312、51.007、24.136、70.281和14.335,P<0.05).与正常对照组比较,模型组LDH、MDA的含量及细胞活力明显升高,SOD活性降低(P<0.05);与模型组比较,香青兰提取物各组的细胞活力降低,LDH和MDA含量增加;氯仿和乙酸乙酯组的吸光度值升高;氯仿、乙酸乙酯和正丁醇组的SOD含量增加(P均<0.05).结论:香青兰提取物对H/R心肌细胞的损伤具有保护作用,此作用可能与抑制脂质过氧化和减少心肌细胞的凋亡有关.
作者:赵杰;薛文华;梁淑红 刊期: 2010年第03期
由于婴儿(0~6个月)ABO血型抗原发育不成熟、抗体量少,导致ABO血型鉴定困难[1-2].作者对2 881例婴儿脐血标本进行ABO血型常规定型,对正反定型不符的1 815例采用凝聚胺方法增强凝集强度,效果良好,报道如下.
作者:吕先萍;胡利亚;李建英;张克勤 刊期: 2010年第03期
目的:研究雷公藤多糖甙(GTW)对脑缺血/再灌注损伤的影响.方法:132只Wistar大鼠分为4组,每组33只:Ⅰ组为假手术组,Ⅱ组为手术组,Ⅲ组为生理盐水治疗组,Ⅳ组为GTW治疗组.Ⅳ组于实验前3 d开始灌胃给30 mg/kg GTW.Ⅲ组给予等体积生理盐水.各组大鼠分别于灌胃后1、3、6、12及24 h时间点处死6只,留取血清用放射免疫法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.每组3只缺血1 h/再灌注24 h后,取脑制作病理组织切片观察各组脑组织形态变化.结果:Ⅳ组多数神经元结构完整的,形态相对正常,间质水肿轻.再灌注3、6、12及24h,Ⅳ组较Ⅱ、Ⅲ2组TNF-α含量降低(F=58.971,113.639,68.395和60.011.P<0.001).结论:GTW对大鼠及局灶性脑缺血/再灌注损伤有保护作用.
作者:方莉;李庆军;方树友 刊期: 2010年第03期
目的:观察醋酸铅对体外培养大鼠睾丸支持细胞活性和抑制素B(INH B)mRNA水平的影响.方法:建立大鼠睾丸支持细胞体外培养模型,分别给予不同浓度(0、10-8、10-7、10-6和10-5 mol/L)的醋酸铅处理细胞,培养24 h后采用MTT法测定细胞活性;同法分组,采用RT-PCR检测INH B mRNA的表达.结果:各组细胞活性比较,差异无统计学意义(F=2.451,P=0.064);各组细胞INH B mRNA的相对表达量比较,差异有统计学意义(F=9984.370,P<0.001),醋酸铅浓度在10-8和10-7mol/L时,皋丸支持细胞细胞INH B mRNA的表达水平低于对照组(P<0.05).结论:醋酸铅对大鼠睾丸支持细胞可能有毒性作用.
作者:苏晓东;李春阳;高慧艳;赵士光;陈小玉 刊期: 2010年第03期
儿童术后疼痛可引起应激反应,导致儿童生理和心理发生变化,对心身、家庭及社会带来负面影响.舒芬太尼镇痛作用强、不良反应少,因其脂溶性高,术后静脉镇痛用药较硬膜外途经方便高效,用于儿童术后静脉镇痛日渐增多[1].但对舒芬太尼用于儿童术后患者静脉自控镇痛(patient controlled intravenous analgesia,PCIA)的佳剂量尚无定论,为此,作者进行了如下研究.
作者:王培山;孙振涛 刊期: 2010年第03期
食管癌是一种严重威胁人类健康和生命的恶性肿瘤,河南省林县是其高发区之一.研究[1]显示随着人们生活水平的提高和生活方式的改变,食管癌的危险因素也发生了变化.据统计[2]在食管癌引起的死亡中约有35%的患者膳食结构不合理,主要为少食新鲜蔬菜、水果,喜食腌制及烟熏食物等.为研究林县食管癌与膳食营养素的关系,由经过统一培训的人员于2007至2009年在林县对当地居民进行了膳食频率问卷调查.
作者:崔艳玲;陈萍萍;韩洁;刘艳华;张静;吕全军 刊期: 2010年第03期
蝶骨嵴脑膜瘤毗邻颅底的重要神经血管结构,与颈内动脉及其分支、下丘脑及视神经等关系密切,临床治疗较为棘手,合并重度脑水肿时,手术风险更高,难度更大.2006年9月至2008年12月作者采用显微手术治疗重度脑水肿蝶骨嵴脑膜瘤17例,效果满意,报道如下.
作者:庞长河;龙江;孙剑瑞;魏新亭;宋来君 刊期: 2010年第03期
目的:研究颈静脉孔区神经、血管的行程及毗邻关系.方法:对10例(20侧)经体积分数为10%甲醛固定及乳胶灌注头颈标本模拟经颈-乳突人路,观测颈静脉孔区神经、血管的位置、走行及毗邻关系.结果:颈静脉球位于颈静脉孔内,是介于乙状窦和颈内静脉之间的移行部分,兼具2者特点;舌咽神经以单独筋膜包绕经颈静脉孔出颅,与其他3对颅神经(迷走神经、副神经和舌下神经)有一定间距.结论:熟悉颈静脉孔区的显微解剖有利于手术中保护重要的神经和血管.
作者:韩云志;游言文;娄卫华;陈四清 刊期: 2010年第03期
目的:观察5-氟尿嘧啶固体脂质纳米粒(5-FU-SLNs)在小鼠体内的分布特征.方法:取42只小鼠分为2组,分别以60 mg/kg的剂量尾静脉注射5-FU-SLNs和游离5-FU,于给药后不同时间采用高效液相色谱法测定心、肝、胃、肺和肾等组织中5-FU的浓度,对5-FU-SLNs在小鼠体内组织的分布特征进行评价.结果:与游离5-FU相比,5-FU-SLNs在肾和肺中的总靶向效率分别从(20.42±0.08)%和(21.29±0.23)%增至(34.34±0.02)%和(23.29±0.03)%(t=21.760和11.656,P均<0.05),在心、肝和胃中的分布无明显变化(t=8.043,36.097和7.457,P>0.05).结论:5-FU-SLNs可改变小鼠体内药物的分布,对肺和肾具有亲和性和靶向作用.
作者:曹钰然;李赢;王舒雨;仝留良;王萍;张萍;杜斌 刊期: 2010年第03期
目的:在全基因组中查找能够在世界各大人群中通用的高个体识别力单核苷酸多态性(SNPs)位点,以期为SNPs应用于法医学个体识别奠定基础.方法:从国际人类基因组单体型图计划(HapMap)数据库下载270名个体各约4 000 000个全基因组SNPs分型数据,运用自主编写的计算机程序,按照较小等位基因频率(MAF)≥0.45的原则提取在中国北京汉族人群、日本东京人群、尼日利亚约鲁巴人群以及美国白人人群中同时存在的SNPs,以焦磷酸测序技术对其中的rs4607417和n749305在河南汉族人群(n=144)中进行群体遗传学调查,计算Hardy-Weinberg平衡概率(HWP)、杂合度(Het)、多态信息含量(PIC)和个体识别力(DP),并与HapMap的数据(n=45)进行比较.结果:共找到1 439个通用的SNPs.在河南汉族人群中,rs4607417和rs749305的HWP分别为0.872和0.423,Het分别为0.476和0.524,PIC分别为0.384和0.388,DP分别为0.616和0.612.与4个人群相比,仅在rs4607417上其等位基因频率与日本东京人群差异有统计学意义(χ2=5.068,P=0.024).结论:rs4607417和rs749305是通用的高个体识别力SNPs;前述筛选获得的1 439个SNPs具有高度可靠性和可信度,可用作在世界各人群中通用的个体识别核心SNPs.
作者:曾昭书;王黎;方宇;张书红;张广政;郭克民 刊期: 2010年第03期
目的:建立一种新的蔬菜、水果中多菌灵的超高效液相色谱-质谱/质谱测定方法.方法:多菌灵通过Oasis HLB固相萃取柱分离浓缩后,采用超高效液相色谱-质谱/质谱仪的正离子模式电离和多反应离子检测模式进行测定,同时对诸如流动相的种类、色谱柱类型、锥孔电压和碰撞能量等参数进行了研究.结果:多菌灵在0.005~1.000 mg/L范围内对响应值具有良好线性关系;样品的加标回收率为87.3%~105.6%,相对标准偏差小于15%(n=6);方法检出限为1.0μg/L.结论:该方法测定特异性好、灵敏度高,定性定量准确,可用于实际样品测定.
作者:苏永恒;张榕杰;冶保献 刊期: 2010年第03期
Pilon骨折是指累及胫骨下关节面的胫骨下端骨折,可能伴有内、外或后踝骨折.其显著特点是粉碎性骨折、明显不稳定、关节受到破坏和预后不肯定.Pilon骨折约占下肢骨折的1%,胫骨骨折的3%~10%,临床上处理比较棘手,并发症多,病残率高.2001年3月至2007年3月,作者用切开复位内固定结合外固定治疗Pilon骨折68例,报道如下.
作者:康智;王琦;洪云飞;杜志军 刊期: 2010年第03期