莫耀南；赵贵森；郑海燕；刘良；杨渝珍
目的:克隆黑色素瘤抗原-1(MAGE-1)基因并进行序列分析.方法:从人肝细胞性肝癌(HCC)组织中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出MAGE-1基因,酶切鉴定后将其插入pGEM-T easy载体,对其进行序列测定并与GenBank中已知序列进行同源性分析.结果:所克隆的MAGE-1基因与GenBank 中的MAGE-1基因序列相比较,仅有4个碱基存在差异,同源性为99.7%,而且仅有1处碱基差异引起了氨基酸改变.结论:从人HCC组织中成功克隆了MAGE-1基因.
作者：何炜；李克；朱涵；樊青霞 刊期： 2008年第01期
妊娠期肝病是产科高危妊娠之一,母婴死亡率高,孕产妇的死亡率在80%以上.常见的妊娠期肝病有妊娠期病毒性肝炎、妊娠期肝内胆汁淤积综合征(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)、妊娠期急性脂肪肝(acute fatty liver in pregnancy,AFLP)和妊娠高血压疾病肝损害[1-3].作者对本院2000年以来收治的50例妊娠合并肝病的病例进行回顾性分析,探讨妊娠合并肝病对母婴的影响.
作者：韩丽萍；尤小燕 刊期： 2008年第01期
目的:探讨Duchenne型肌营养不良症(DMD)基因缺失突变的类型,建立基因诊断技术平台.方法:应用寡核苷酸引物扩增DMD基因18个外显子区域,对27例家系32例DMD患者进行基因缺失分析,用4对二核苷酸重复序列多态引物对DMD家系进行扩增片段长度多态性连锁分析.并对10例先证者有DMD基因缺失的家系进行产前诊断.结果:27例DMD家系中19例(70.4%)有至少1个外显子缺失,且缺失热点区域集中在外显子12、13、45、47、48、49和50,所有携带者至少有1个或1个以上多态性位点为杂合态,缺失诊断结合多态分析进行诊断,10例男性胎儿中2例具有外显子缺失.结论:基因缺失诊断结合连锁分析可快速、准确地进行DMD的产前诊断.
作者：孔祥东；史惠蓉；常青；王怀立；王慧玲 刊期： 2008年第01期
目的:测定经超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B (SEB)和结肠癌肿瘤抗原联合修饰树突状细胞(DC)的活性.方法:结肠癌手术标本体外培养出结肠癌细胞并鉴定之,冻融法制备肿瘤抗原;同一患者外周血分离出单个核细胞,以细胞因子诱导为DC;尼龙棉柱过滤获取T淋巴细胞;肿瘤抗原和不同质量浓度的SEB联合修饰DC;以联合抗原修饰后的DC为刺激细胞,自体T淋巴细胞为效应细胞,相同时间下以不同比例共同孵育后,采用MTT法检测对结肠癌细胞的体外杀伤效果.结果:诱导出表达CD11c,CD80,HLA-DR分子的DC,经结肠癌肿瘤抗原和SEB联合修饰后,上述分子表达上调.联合抗原修饰DC的T细胞活化作用强于单独使用结肠癌肿瘤抗原修饰DC的T细胞活化作用.100 μg/L SEB 和肿瘤抗原联合修饰的DC以1GA6FA100比例与T淋巴细胞共孵后的杀伤肿瘤细胞效应强.结论:SEB和肿瘤抗原联合修饰DC的活性明显强于单用肿瘤抗原修饰DC的活性.
作者：宋辉；杨伟明；焦保庭；贺子彪 刊期： 2008年第01期
目的:检测人肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,了解对肺癌患者术后生存情况及其影响因素.方法:运用实时定量PCR技术测定60例肺癌患者的癌组织及配对的癌旁组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,采用Kaplan-Meier单因素与Cox多元回归进行生存分析.结果:肺癌组织中Atrogin-1 mRNA表达水平(-8.15±3.94)显著高于其配对的癌旁组织(-10.39±4.35)(t=3.873,P =0.000),其中71.67%(43/60)患者Atrogin-1 mRNA高表达,28.33%(17/60)患者低表达.Kaplan-Meier法生存分析结果显示:Atrogin-1的表达水平、淋巴结转移、家族史、病理分级与患者的生存率显著相关.Cox回归分析结果显示:Atrogin-1 mRNA表达水平、淋巴结转移、病理分级和吸烟是影响肺癌患者生存率的独立危险因素.结论:肺癌组织中Atrogin-1 的高表达可能影响肺癌患者术后的生存,其可作为肺癌患者预后的一个评价指标,并可能成为基因治疗的一个作用靶点.＃
作者：崔玲玲；张晓峰；谢东；王旗；李文杰；赵松；赵高峰；秦建军；陈萍萍 刊期： 2008年第01期
目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性.方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor-Gene 3 000实时定量PCR仪进行扩增和链融解,分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素.结果:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,不仅可以区分甲基化与非甲基化,而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异;主要的影响因素有升温幅度、缓冲液离子强度、产物浓度等.结论:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,可以集扩增和链融解于一体,是一种经济简便的甲基化分析技术,可用于样品的甲基化筛选.
作者：莫耀南；赵贵森；郑海燕；刘良；杨渝珍 刊期： 2008年第01期
目的:探讨睾酮改善心力衰竭(心衰)可能的分子生物学机制.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、心衰组和心衰睾酮干预组(给予生理剂量的睾酮补充),后2组建立心衰模型,饲养观察3个月后处死动物,取心脏,剥离左心室,用半定量RT-PCR检测心肌组织中Fas、SERCA-2a mRNA含量的变化.结果:睾酮干预组Fas mRNA相对表达量较心衰组显著降低(0.535±0.041 vs 0.570±0.060,P＜0.05) ,但仍高于假手术组(0.431±0.056,P＜0.05);睾酮干预组SERCA-2a mRNA相对表达量较心衰组升高(0.516±0.075 vs 0.428±0.062 P＜0.05 ),但依然低于假术手组(0.572±0.063,P＜0.05).结论:睾酮可使心肌组织Fas含量下降、SERCA-2a mRNA含量上升,睾酮补充疗法可能是改善心衰的分子机制之一.
作者：曹占伟；张彦周；张澎湃；邢晓雯 刊期： 2008年第01期
目的:探讨小鼠肝癌细胞H22培养上清液对鼠L929细胞细胞周期、CyclinD1、P27蛋白表达的影响.方法:采用肝癌细胞H22的培养上清液诱导正常成纤维细胞L929,诱导细胞为L929-H22.采用流式细胞术检测L929细胞与L929-H22细胞细胞周期分布,免疫细胞化学方法检测2种细胞中CyclinD1、P27蛋白的表达.结果:与L929相比,L929-H22G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(P＜0.05),增殖指数PI明显升高(P＜0.05);CyclinD1的表达增强(P＜0.05),P27的表达减弱(P＜0.05).结论:小鼠肝癌细胞培养上清液诱导的细胞CyclinDl、P27的表达及细胞周期分布与正常细胞不同,CyclinDl表达增强和P27表达减弱可能在细胞恶性转化过程中发挥作用.
作者：张晓艳；付旭东；汤为学 刊期： 2008年第01期
目的:检测胰腺癌组织中胰腺星状细胞(PSC)活化的标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白(desmin)及基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达.方法:应用免疫组织化学染色法分别检测40例胰腺癌、10例正常胰腺组织中α-SMA、desmin及MMP2的表达.结果:胰腺癌组织中α-SMA的阳性表达率为67.5%,desmin的阳性表达率为55.0%,均高于正常胰腺组织(20.0%和30.0%).胰腺癌组织中MMP2的阳性表达率为55%,高于正常胰腺组织(15%).胰腺癌组织中MMP2的阳性表达率与淋巴结转移和向周围组织器官浸润有关(P＜0.01).PSC活化(α-SMA与desmin均为阳性)与淋巴结转移有关.α-SMA与desmin的共表达与MMP2的表达相关(P＜0.05).结论:胰腺癌组织中存在PSC的活化,PSC的活化及MMP2的表达的上调可能参与胰腺癌的浸润转移.
作者：李月光；马波；李文林；洪亮；冯留顺 刊期： 2008年第01期
幽门螺杆菌(Hp)是一种寄生在胃黏膜上皮与黏膜间微需氧的革兰阴性杆菌,通过黏液性足突,牢固地附着在胃黏膜细胞表面,破坏细胞,引起炎症反应.Hp感染是慢性活动性胃炎、十二指肠溃疡的病因,也是胃腺癌的第一类致癌因子[1].
作者：汪群英；李建生 刊期： 2008年第01期
目的:寻找高压静脉注射造影剂时局部疼痛程度轻的注射部位.方法:将4 062例行增强CT检查的患者按静脉穿刺部位分为A组(肘正中静脉组)、B组(前臂头静脉组)、C组(前臂贵要静脉组)、D组(前臂掌侧下段静脉组)和E组(手背静脉组).静脉穿刺均采用直刺法,分别观察各组注射部位局部疼痛程度.结果:不同注射部位疼痛程度差异有统计学意义(P＜0.05 ).A组局部疼痛轻,其次为B、C和E组,D组局部疼痛程度重.结论:高压静脉注射造影剂时,应尽可能选用血管部位较深、管腔较大和侧支分流量较大的血管,以减轻注射时局部疼痛程度.
作者：王超琴；刘延锦；李素兰；谢静 刊期： 2008年第01期
目的:对郑州市主要生活饮用水源中微囊藻细胞进行分离培养和毒性鉴定.方法:采用改进的96孔板分离技术对郑州市2个主要生活饮用水源西流湖和黄河花园口段某调蓄池中采集的浮游藻类进行分离培养;全细胞PCR测定藻青蛋白基因中间序列(PC-IGS)和微囊藻毒素合成酶基因(mcyB);ELISA检测毒素浓度.结果:应用96孔板结合极限稀释法成功得到了所要分离微囊藻细胞的单克隆;所分离3株微囊藻细胞PC-IGS基因序列和mcyB基因序列扩增结果均为阳性;ELISA检测3株微囊藻细胞干粉的产毒量分别为1.07 mg/g、4.70 mg/g、4.71 mg/g.结论:改进的96孔板分离技术能够简便、快速地分离各种藻细胞;所分离的3株微囊藻细胞均为蓝藻种属,且能够产毒.
作者：杨松芹；巴月；张慧珍；程学敏；崔留欣 刊期： 2008年第01期
目的:探讨人表皮生物工程的适宜条件.方法:以NIH-3T3细胞作为滋养层,以热溶素分离表皮与真皮,将表皮应用4组不同质量浓度的胰蛋白酶(T)和EDTA(E)的消化液(A组:0.5 g/L T加0.2 g/L E,B组:2.5 g/L T加0.2 g/L E,C组:0.5 g/L T加1 g/L E,D组:2.5 g/L T加1 g/L E)消化为单个细胞.表皮细胞接种于含8种成分的DMEM-F12的完全培养液中.记录接种表皮细胞的克隆形成率、扩增倍数以及融合时间.结果:接种表皮细胞的克隆形成率和扩增倍数分别是:A组为(10.00±0.09)%和(500.00±9.63)倍,B组为(7.00±0.12)%和(350.00±6.16)倍,C组为(17.00±0.18)%和(850.00±8.83)倍,D组为(14.00±0.19)%和(700.00±9.55)倍,4组间差异均有统计学意义(P＜0.05).接种表皮细胞的融合时间:A组为第(10.00±0.82)天,B组为第(10.00±0.82)天,C组为第(11.50±1.29)天,D组为第(12.00±2.45)天.4组的接种表皮细胞克隆形成率与融合时间无关.结论:同一质量浓度的EDTA作用下,0.5 g/L胰蛋白酶组比2.5 g/L胰蛋白酶组更有利于表皮细胞克隆的形成和融合.
作者：杨小静；李红文；郑乃刚；王一菱；吴景兰 刊期： 2008年第01期
目的:研究转化生长因子;GAAB2;β1;(TGF;GAAB2;β1)对新生大鼠大脑皮层星形胶质细胞表达结缔组织生长因子(CTGF) 的影响.方法:体外培养的新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞分为对照组:无血清培养基(FSM) 培养; 实验组:分别用含1 μg /L,2 μg /L,4 μg /L TGF-β1的FSM培养,24 h后,分别用RT-PCR和Western Blot检测2组细胞中CTGF mRNA和蛋白的表达.结果:对照组CTGF mRNA和蛋白表达均为阴性;实验组CTGF mRNA和蛋白表达皆呈阳性,且随着TGF-β1质量浓度的增加,2者的表达量有增高的趋势(F=80.889和200.300,P均＜0.01).结论:TGF-β1 能上调星形胶质细胞中CTGF的表达.
作者：李彤；袁彬；邹飞 刊期： 2008年第01期
目的:掌握河南省学生发育现状及趋势,为政府部门制定相关政策提供依据.方法:依据全国学生体质调研细则的统一要求和标准,分层整群抽取河南15市154所中小学、4所大学,按照＜2005年全国学生体质健康调研工作手册＞的要求,对学生进行身体形态、机能指标测定(监测指标:身高、体质量、胸围、肺活量、脉搏、血压、握力等).获有效卡46 801张,其中城市学生23 392人,乡村学生23 409人;男生23 405人,女生23 396人.结果:①多数形态发育指标较往年有所增长,少数指标呈负增长.城市男生身高比2000年增高0.11 cm,城市女生比2000年降低0.24 cm,城市男、女生体质量分别比2000年增加0.79 kg和0.27 kg; 乡村男生、乡村女生身高比2000年分别增高0.23 cm和0.45 cm,乡村男生体质量减轻了0.03 kg,乡村女生增加了0.22 kg.②体质量指数(BMI,kg/m2)比2000年增加了0.05至0.37.③肺活量平均下降了170 mL.④乡村学生的多数形态指标低于城市学生,特别是6～11岁男女生身高分别比同龄同性别城市学生低3.0～4.5 cm、2.5～3.5 cm.结论:河南学生的形态发育水平较往年有所提高,营养状况进一步改善;但机能指标下降.乡村小学生的发育水平远低于城市小学生.
作者：张德甫；李岚；郭蔚蔚；娄晓民；杨汴生；李然；宋长安 刊期： 2008年第01期
目的:探讨奥曲肽对于人肺癌细胞株A549生长的抑制作用.方法:以体外培养的人肺癌细胞株A549为靶细胞,运用四氮唑盐法(MTT法)观察奥曲肽作用48 h后对于人肺癌细胞株生长的影响.以流式细胞仪分析其对细胞周期的影响.结果:MTT法结果显示奥曲肽作用48 h可抑制A549的生长, 并呈剂量依赖性, IC50=1.62 mg/L.流式细胞仪测定结果显示:G0/G1期细胞比例增加,G2/M期细胞比例减少,且奥曲肽质量浓度增高到1.60 mg/L以上时,G2/M期比例均降为0,细胞周期直接阻滞在G0/G1期,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:奥曲肽可抑制体外培养的人肺癌细胞株A549增殖,机制可能是将肺癌细胞阻滞于G0/G1期.
作者：田春桃；韩利艳；范慧娟 刊期： 2008年第01期
目的:观察冠心病患者外周血内皮祖细胞(EPCs)数量与心血管危险因素之间的关系.方法:选择20例冠心病患者(G1组,n=20)和10例非冠心病患者(G2组,n=10),分别抽取外周血进行EPCs 的分离培养,于第10天对EPCs进行鉴定,并于倒置相差显微镜下计数内皮祖细胞克隆形成单位(EPC-CFU),评估外周血EPCs水平.分析外周血EPCs数量与心血管的各个危险因素(高血压、糖尿病、血清低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇、高敏C反应蛋白(hsCRP)水平)及整体危险性(用Framingham危险积分定量评估)的关系.结果:G1组外周血EPCs数量较G2组明显减少(10.3±2.5 vs 17.7±2.2),差异有统计学意义(P＜0.05).冠心病患者外周血EPCs数量与Framingham危险积分、高血压、血清LDL、hsCRP水平呈负相关.结论:冠心病患者外周血EPCs数量减少,并与Framingham危险积分呈负相关.
作者：张金盈；张力；厉菁；梁莹；李丹娜；李蒙；韩雪飞 刊期： 2008年第01期
房间隔缺损(ASD) 是常见的先天性心脏病.经胸超声心动图(TTE)评价ASD经济、无创、操作简便,在ASD的介入性治疗中逐渐得到重视和肯定.2003年1月至2006年1月,作者在45例ASD封堵术中应用了TTE,现将TTE在ASD封堵术前病例筛选、术中监测以及疗效评价中的价值总结如下.
作者：张瑞芳 刊期： 2008年第01期
目的:探讨使用突变分析和连锁分析进行X-连锁无汗性外胚层发育不良(XLHED)产前诊断的方法.方法:提取1例XLHED患儿和患儿母亲的外周血DNA及男性胎儿羊水细胞DNA,扩增ED1基因所有8个外显子并直接测序检测突变,采用PCR方法检测与ED1基因紧密连锁的DXS337位点的多态性.结果:先证者ED1未检测出突变,多态分析发现男性胎儿未携带风险X染色体.结论:ED1基因突变检测结合基因连锁分析的方法能准确地对XLHED进行产前诊断.
作者：常青；孔祥东；史惠蓉；郭红军；张颖莹 刊期： 2008年第01期
目的:考察知母中总皂苷的提取工艺.方法:以知母中菝葜皂苷元为定量检测指标,HPLC法测定菝葜皂苷元的含量; 通过正交实验考察了3个因素(提取溶剂的浓度,固液体积比和提取时间)对知母中总皂苷提取率的影响.结果:标准曲线线性范围为0.10～1.10 g/L(r=0.999 8),平均回收率(98.00±3.43)%.采用索氏提取法筛选的知母中总皂苷的佳提取工艺为:提取剂为体积分数50%的乙醇,固液体积比为1GA6FA10,提取时间为4 h.结论:所确定的知母总皂苷的提取工艺合理可行,值得进一步向工业化生产推广.
作者：胡玉荣；郭新红；蔡中琴；刘世龙；张振中 刊期： 2008年第01期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
