学术投稿

细胞因子诱导的杀伤细胞体外逆转K562/ADR细胞株多药耐药性观察

蒋东霞;何琳;徐虹;胡杰英;买玲;宋永平;杨萍

关键词:细胞因子, 杀伤细胞, DC细胞, K562/ADR细胞株, 多药耐药
摘要:目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)体外逆转K562/ADR细胞株多药耐药(MDR)的可行性.方法:在含细胞因子(人重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激冈子、人重组白细胞介索-1、人重组白细胞介素-4和人重组肿瘤坏死因子-a)的RPMI 1640完全培养液中诱导K562细胞株、K562/ADR耐药细胞株分化成树突状细胞(DC).正常人外周血单个核细胞(PBMC)在上述细胞因子诱导下培养成CIK,与成熟的DC共培养成CIK+K562/ADR.DC.应用流式细胞术检测CIK及CIK+K562/ADR-DC的细胞表型.MTT法测定CIK和K562/ADR-DC对K562/ADR的细胞毒作用,流式细胞仪检测CIK组和CIK+K562/ADR-Dc组细胞中糖蛋白(P-gP)、阿霉素(ADR)的含量,RT-PCR检测mdr-1基因表达.结果:CIK、CIK+K562/ADR-Dc细胞经流式细胞仪检测.均具有自己独特的表型.PBMC诱导培养4 d后,CIK开始增殖,第7-9天细胞数量明显增多.K562/ADR来源的Dc和CIK共培养后.细胞增殖速度明显加快,9 d以后与CIK相比2组细胞的增殖速度呈现明显差异.CIK+K562/ADR-DC细胞对K562/ADR的细胞毒作用在效靶比20:1范围内明显高于CIK细胞(P<0.05).CIK组和CIK+K562/ADR-DC组细胞的P-gP和Mdr-1与对照组相比显著降低(P<0.05),ADR表达明显升高.结论:CIK+K562/ADR-Dc对高表达P-gp的K562/ADR耐药细胞株表现出了特异性细胞毒作用,有效提高了细胞内ADR的含量,下调了P-gp蛋白和mdr-1基因的表达,从而使免疫效应细胞体外逆转MDR的效果得以显现.
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 司坦唑醇联合三氧化二砷治疗骨髓增生异常综合征38例

    骨髓增生异常综合征(MDS)是一组尚无特效治疗方法的造血干细胞恶性克隆性疾病.2004年7月至2007年10月.作者采用司坦唑醇联合三氧化二砷治疗38例MDS,取得了较好疗效,报道如下.

    作者:刘林湘;梅瞬喜;张秋堂;王芳;马杰 刊期: 2008年第05期

  • 小脑发育不良性节细胞瘤5例MRI表现

    小脑发育不良性节细胞瘤(dysplastie gangliocy-toma of the crebellum)也称Lhermitter-Duelos disease (LDD)病,是十分少见的小脑肿瘤,病理学上认为它可能属于迷芽瘤或错构瘤性质,为一种低级小脑新生物,WHO将其定为I级肿瘤,该类病变以单侧小脑皮质缓慢进展的占位性病变为特征[1].

    作者:张继良;李永丽;徐俊玲;史大鹏 刊期: 2008年第05期

  • 人口腔鳞状细胞癌组织中 COX-2、Bcl-2和Ki-67蛋白的表达

    目的:探讨正常口腔黏膜、不典型增生性口腔白斑、口腔鳞状细胞癌组织中环氧合酶-2(COX-2)、Bcl-2和Ki-67蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学PV-9000两步法检测12例正常口腔黏膜组织、33例不典型增生性口腔白斑和42例口腔鳞状细胞癌组织中COX-2、Bcl-2蛋白的表达情况和Ki-67增殖指数.结果:正常口腔黏膜组织、不典型增生性口腔白斑组织、口腔鳞状细胞癌组织中COX-2(8.3%、45.5%、76.2%)、Bcl-2(0%、12.2%、54.8%)蛋白的阳性表达率逐渐升高,3组相比差异均有统计学意义(χ2分别为18.722,21.968,P<0.05).口腔鳞状细胞癌组织中Ki-67增殖指数高于正常口腔黏膜组织和不典型增生性白斑组织(F=280.019,P(0.05).口腔鳞状细胞癌组织中COX-2蛋白的表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关(χ2=6.402,r=0.390,P<0.05),COX-2蛋白表达阳性组Ki-67增殖指数明显高于COX-2蛋白表达阴性组(t=6.99,P<0.05).结论:COX-2和Ki-67参与口腔鳞状细胞癌的发生发展,可作为口腔鳞状细胞癌早期诊断的分子指标之一.Bcl-2在口腔鳞状细胞癌形成的早期阶段可能并不发挥主要作用,但对临床监测不典型增生的转归有一定的意义.

    作者:肖燕;毛红丽;李道明;石爱梅 刊期: 2008年第05期

  • 真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达

    目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达.方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达.结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功.该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达.

    作者:艾敏;张巧;赵国强;杨胜利 刊期: 2008年第05期

  • 郑州集餐饮、洗浴、娱乐、住宿一体的大型会所室内卫生状况调查

    目的:了解郑州市集餐饮、洗浴、娱乐、住宿为一体的大型会所公共场所室内卫生质量的状况.方法:2005年3月至12月采用单纯随机抽样方法,从郑州市6个市辖区(中原区、二七区、管城回族区、金水区、上街区、惠济区)、1个县(中牟县)、5个县级市(巩义市、荥阳市、新街市、新郑市、登封市)营业面积3 000 m2以上的200余家大型会所中采用单纯随机抽样的方法抽取66家为调查对象,设计调查表格,统一调查标准,由专职公共场所卫生监督监测人员逐家调查、监测并登记人册.分别检测66家会所的餐厅、休息大厅、客房及娱乐场所室内的照度、噪声、温度、湿度、空气质量(一氧化碳浓度、二氧化碳浓度、可吸人性颗粒物情况及空气细菌总数);并根据相关的国家标准计算各指标的合格率.结果:郑州市大型会所室内的温度、湿度合格率均较高,而餐厅、休息大厅、娱乐场所等处可吸人颗粒物、细菌总数和二氧化碳浓度合格率较低.目餐厅和娱乐场所的噪声指标合格率较低.结论:郑州市大型会所室内卫生质量总体上较好,建议针对不合格的主要原因(室内可吸入颗粒物不合格)对消费者进行相应的宣传教育,使群众认识到公共场所卫生与人体健康的关系,自觉养成不随地吐痰、不吸烟等良好的卫生习惯,从而全面提高郑州市公共场所卫生水平.

    作者:程桂平;田红宇 刊期: 2008年第05期

  • 郑州地区4种尸食性苍蝇线粒体DNA中细胞色素氧化酶亚基基因序列检测

    目的:通过检测尸食性苍蝇线粒体DNA(mtDNA)中细胞色素氧化酶亚基(CO I)中305 bp基因序列,鉴定尸食性苍蝇的种类,解决依据形态学不能鉴定苍蝇幼虫种类的难题.方法:随机采集郑州市区、郊区等不同放置地点的实验动物尸体上的2科4种共17个苍蝇的成虫、蛹、卵为样本,提取上述样本的mtDNA进行PCR扩增,产物检测与纯化、正反双向测序,并使用相关软件进行序列拼接、比对及进化距离分析,并构建种内和种间的系统发育树.结果:种内进化分歧均数小于1%,种间进化分歧均数大于1%,具有统计学意义.结论:尸食性苍蝇mtD-NA中CO I序列分析能有效地对尸食性苍蝇的种类进行鉴定,该方法简便、快捷、准确,可作为法医鉴别尸食性苍蝇种类的可靠依据.

    作者:闫红涛;王旭东;朱运良;曾昭书;郭克民;张广政 刊期: 2008年第05期

  • 宫颈腺癌组织中细胞周期素D1和P27蛋白的表达

    目的:检测人宫颈腺癌组织中细胞周期素D1(CyelinDl)和P27蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测56例宫颈腺癌组织、30例官颈腺上皮内肿瘤(CGIN)和24例正常宫颈腺上皮缉织中CyclinD1和P27蛋白的表达;分析其与宫颈腺癌组织学分级、临床分期和淋巴结转移的关系.结果:宫颈腺癌、CGIN和正常宫颈腺上皮组织中CyelinD1的阳性表达率分别为62.50%、26.67%和0,3组间相比差异有统计学意义(P<0.05).上述3种组织中P27的阳性表达率分别为30.36%、53.33%和91.67%,3组间相比差异有统计学意义(P<0.05).官颈腺癌组织中CyclinD1与P27的异常表达与组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关(P均<0.05).宫颈腺癌组织中CyclinD1与P27的表达呈负相关(rs=-0.451,P<0.05).结论:CyclinD1的高表达和P27的低表达与宫颈腺癌的发生、发展密切相关.

    作者:李素琴;李文才;黄明;王冠男 刊期: 2008年第05期

  • 思他宁治疗门静脉高压食管胃底静脉曲张破裂大出血30例

    2002年3月至2007年4月,作者采用思他宁治疗门静脉高压食管胃底静脉曲张破裂大出血30例,并与垂体后叶素联合硝酸甘油相比较,报道如下.

    作者:段德霞 刊期: 2008年第05期

  • 泛发性脓疱型银屑病46例临床分析

    泛发性脓疱型银屑病(psoriasis pustuiosa,PP)是一种以全身泛发无菌性脓疱伴严重全身症状为特征的银屑病,病情危重,诊治不及时可危及患者生命.2002年1月至2007年6月,作者诊治了46例PP患者,现将46例的临床资料分析报道如下.

    作者:曹鸿玮;郑晓红;王瑞;杨俊亚 刊期: 2008年第05期

  • 含人DNA聚合酶β基因启动子萤光素酶报告载体的构建

    目的:构建含人DNA聚合酶B(DNA polymerase beta,polβ)基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3polβ/promoter.方法:利用PCR技术扩增人类polβ基因启动子的核心片段,克隆至含新霉素抗性的萤光素酶表达载体pGL3-Neo-enhancer,构建含DNA polβ启动子的萤光素酶表达载体pGLpolβ/promoter,重组子经双酶切、PCR及测序鉴定.将构建的载体用脂质体转染体外培养的食管癌EC-1细胞株,应用萤光素酶测定系统检测萤光素酶的表达活性.结果:测序结果表明,克隆获得的polβ基因启动子序列与GenBank报道的一致,且插入方向正确.pGL3polβ/promoter组萤光素酶的表达活性(2 207 348.000±71 626.763)与空白组(451.670±23.347)和pGL3.Neo-enhancer组(4 884.330±1 623.047)相比,差异有统计学意义(F=5 681.596,P<0.05).结论:成功构建了含人DNA polβ基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3polβ/promoter.

    作者:李月白;张贵星;于雅丽;赵国强;王欢;董子明 刊期: 2008年第05期

  • 老年无症状性脑梗死患者血清同型半胱氨酸水平和颈动脉粥样硬化的关系

    目的:探讨老年无症状性脑梗死(ACI)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平与颈动脉粥样硬化的关系.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定183例ACI患者和185例健康人血清Hcy水平;对183例ACI患者进行颈动脉彩色多普勒超声检测,并根据Hcy水平将ACl分为Hcy正常组(Hey≤20 μmol/L)和Hcy升高组(Hcy>20μmol/L).结果:ACI组血清Hcy水平(25.3 ±8.6)μmol/L高于对照组((15.3 ±5.6)μmol/L,(P<0.01).Hcy升高的ACI患者其颈动脉粥样硬化及中重度粥样硬化的发生率分别为68.8%和46.9%.高于Hcy正常的ACI患者(分别为30.9%和16.4%,P均<0.01).Hcy升高的ACI患者其颈动脉狭窄和中重度狭窄的发生率分别为70.3%和46.9%,高于Hcy正常组(27.3%和9.1%,P均<0.01).结论:老年ACI患者血清Hcy水平与颈动脉粥样硬化有关.

    作者:马建军;张连仲;李学;冯艳;袁丽品;徐军 刊期: 2008年第05期

  • 高龄食管癌患者217例围手术期处理体会

    随着社会人口的老龄化,高龄食管癌患者的发病率有升高的趋势.目前食管癌的首选治疗仍以手术为主,如何降低并发症与死亡率,提高治愈率,围手术期管理至关重要.1998年6月至2007年6月,本科共手术治疗高龄食管癌患者217例,死亡11例,现将围手术期处理体会总结如下.

    作者:杨玉 刊期: 2008年第05期

  • 头部药物注射疗法对大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞和神经胶质细胞的影响

    目的:探讨维生素B1和维生素B12位点注射疗法对缺氧缺血性腩损伤(HIBD)后大鼠神经细胞和神经胶质细胞的影响.方法:选取27只Wistar大鼠制成HIBD动物模型.20 d后随机分为A、B、C 3组(n=9),同时设D组(不构建模型)为正常对照组(n=5).A组固定于额顶叶处注射维生素B1及维牛素B12,1次/d,共25 d;B组功能训练(鲍巴斯法);C组不予处理.观察各组动物的一般情况,50 d后处死动物取脑进行电镜观察.结果:D组一般情况正常,A、B、C组大鼠体质量增长迟缓,皮毛干燥无光泽,出现行为能力障碍,如过度兴奋、惊吓、易激惹等.电镜下可见A组神经细胞结构较好,星形细胞足突空泡变性与膜破坏及小血管变化较轻.B组神经细胞轻度变性,星形细胞足突空泡变性与膜破坏及小血管变化较明显.C组神经细胞重度变性,早现重度暗细胞表现,星形细胞足突空泡变性与膜破坏及小血管变化明显.结论:HIBD模型可产生类似脑瘫的病理改变,维生素B.和维生素B12:位点注射有改善神经细胞和星形胶质细胞的作用,具有修复功能.

    作者:刘素芳;万国兰;朱登纳;王军;闫丙川;钟延丰 刊期: 2008年第05期

  • 脑卒中后抑郁患者血浆、脑脊液中神经递质含量的高效液相色谱法测定

    目的:探讨脑卒中后抑郁患者血浆、脑脊液中神经递质及其代谢产物同时测定的方法.方法:采用高效液相色谱/电化学法分别同时测定血浆、脑脊液中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、多巴胺(DA)、高香草酸(HAV)、5.羟吲哚乙酸(5-HIAA)、5-羟色胺(5-HT)的含量.结果及结论:该方法快速、简便、分离良好,回收率为90%~107%,线性范围3.0~720μg/L,检出限为0.04 ng(S/N=3).通过在脑卒中抑郁状态患者的血浆、脑脊液单胺类神经递质测定中的应用,显示本方法能满足检测要求.

    作者:郑惠良;杨莹;齐伟 刊期: 2008年第05期

  • 妊娠性牙龈炎180例临床分析

    妇女妊娠期间因内分泌影响而发生机会性感染的牙龈炎称妊娠性牙龈炎.通常表现为口腔有异味,牙龈红肿,遇刺激易出血,甚至牙龈乳头形成瘤样病变(即牙龈瘤).2003年3月至2005年8月,本院产科和妇幼保健门诊接诊的1 560例孕妇中有牙龈炎者180例,作者对该类患者进行孕期口腔保健和健康教育,收到了明显效果,报道如下.

    作者:赵学萍 刊期: 2008年第05期

  • β淀粉样蛋白诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αmRNA的表达

    目的:研究不同浓度的β淀粉样蛋白(AB1-42)诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αmRNA表达的变化.方法:小胶质细胞株复苏培养后分为2组:Aβ1-42组和抗CD14加Aβ1-42组.抗CD14加Aβ1-42组使用抗CD14抗体拮抗CD14的表达,再分别用不同浓度的AB的(0、62.5 nmol/L、125 nmol/L、250 nmoL/L)进行干预,2组均在Aβ1-42干预2h后用RT-PCR法检测CD14及TNF-α mRNA表达的量.结果:不同浓度的Aβ1-42干预小胶质细胞2h后,62.5 nmoL/L与0 nmol/L Aβ1-42组CD14 mRNA的表达相比较,差异无统计学意义.当Aβ1-42浓度为125 nmol/L和250 nmol/L时,CD14 mRNA的表达逐渐增加(P<0.05).使用CD14抗体后,抗CD14加Aβ1-42组中CD14 mRNA的表达与Aβ1-42组比降低(P<0.05).Aβ1-42组TNF-α mRNA的表达随Aβ1-42的浓度增加而增加(P<0.05),与Aβ1-42组相比,抗CD14加Aβ1-42组中TNF-α mRNA的表达在Aβ1-42浓度为125 nmol/L开始明显受到抑制(P<0.05).结论:Aβ1-42诱导的小胶质细胞可通过脂多糖受体CD14使TNF-α mRNA的表达增加,且与Aβ1-42的作用浓度呈正相关.

    作者:葛继晖;索爱琴;许予明;李玮;朱良付;张杰文;成巧梅;苗成 刊期: 2008年第05期

  • 某城市社区居民高血压患病率、知晓率、治疗率和控制率调查

    目的:了解某城市社区40岁以上居民高血压的患病率、知晓率、治疗率和控制率,为人群高血压的防治提供依据.方法:采取随机整群抽样方法,选择安阳钢铁公司社区40岁以上居民作为研究对象,进行高血压患病率、知晓率、治疗率和控制率的横断面研究.结果:本研究共调查40岁以上居民1 789人,其中男738人,女1 051人.高血压的患病率为49.25%,用2000年全国第五次人口普查资料进行标化后,标化率为45.34%.按照JNC-7对血压进行分级后,高血压前期占36.84%.高血压患者中高血压的知晓率为62.43%,治疗率为49.38%,控制率为13.51%.结论:该城市社区40岁以上居民高血压患病率高,知晓率、治疗率和控制率均偏低.迫切需要开展高血压的一级和二级预防工作.

    作者:孙献周;丁亚兴;韩晓燕;刘俊伟;张卫东;张梅喜;郗园林;胡东生 刊期: 2008年第05期

  • 替米沙坦与贝那普利对原发性高血压病患者肾功能的影响

    目的:研究替米沙坦与贝那普利对原发性高血压病患者血压和肾功能的影响.方法:80例1级、2级高血压病患者随机分为治疗组(40例,口服替米沙坦80 mg/d,晨顿服)和对照组(40例,口服贝那普利10~20 mg/d,1次/d).测定2组患者用药前后血压的变化情况以及尿微蛋白排泄率、内生肌酐清除率、血和尿β2微球蛋白和N-乙酰-B-D氨基葡萄糖苷酶水平.结果:与治疗前相比,治疗12周后2组降压效果、尿微蛋白排泄率、血和尿β2微球蛋白和N-乙酰-B-D氨基葡萄糖苷酶均显著下降,内生肌酐清除率明显升高(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05);2组不良反应发生率分别为5%和13%,组问比较有显著差异(P<0.05).结论:替米沙坦对高血压病1级、2级患者早期肾损害不仅有保护作用,而且不良反应轻、给药方便、依从性高.

    作者:郝铁来;刘英洁 刊期: 2008年第05期

  • 子宫内膜癌50例MRI表现

    子宫内膜癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,治疗前对病变的准确分期有助于临床选择合理的治疗方案及评估预后.MRI作为一种无创伤且具有极高软组织分辨率的检查方法,在子宫内膜癌术前诊断中的应用越来越多.作者回顾分析了经手术病理证实的50例子宫内膜癌的MRI表现,报道如下.

    作者:连建敏;李永丽;徐俊玲;史大鹏 刊期: 2008年第05期

  • 儿童哮喘症状类型和表现形式对哮喘分级评估的影响

    2005年3月份以来,作者对在本院哮喘门诊就诊的196例哮喘息儿进行有关哮喘症状和活动受限方面的问卷调查,以评估这些儿童的哮喘症状负荷和表现形式对哮喘严重程度分级的影响.

    作者:葛秋生;张双船;陈金玉;徐颂周 刊期: 2008年第05期

郑州大学学报(医学版)杂志

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