学术投稿

乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞凋亡和培养上清液中的细胞因子水平测定

王宏伟;申保生;莫清江

关键词:外周血单个核细胞, 凋亡, 干扰素-γ, 白细胞介素-4, 乙型肝炎病毒, 慢性化
摘要:目的:探讨外周血单个核细胞(PBMc)凋亡和Th1/Th2型细胞因子(干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4))表达在乙型肝炎病毒慢性化中的作用.方法:分离21例健康人、45例慢性乙型肝炎病毒携带者PBMc,植物血凝素(PHA-P)刺激培养72 h后,以ELISA法检测细胞培养上清液中的IL-4和IFN-γ水平,流式细胞仪以膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素-碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)法检测PBMc凋亡率.结果:慢性乙型肝炎病毒携带者PBMc凋亡率明显高于对照组(P<0.01);培养上清液IFN-γ水平低于对照组(P<0.01),且与PBMc凋亡率呈负相关(r=-0.647,P<0.01);IL4水平高于正常对照组(P<0.01),且与PBMc凋亡率正相关(r=0.598.P<0.01).结论:淋巴细胞凋亡和Th1/Th2的失衡在乙型肝炎病毒慢性化中起一定的作用.
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • β淀粉样蛋白诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αmRNA的表达

    目的:研究不同浓度的β淀粉样蛋白(AB1-42)诱导大鼠小胶质细胞脂多糖受体CD14和肿瘤坏死因子-αmRNA表达的变化.方法:小胶质细胞株复苏培养后分为2组:Aβ1-42组和抗CD14加Aβ1-42组.抗CD14加Aβ1-42组使用抗CD14抗体拮抗CD14的表达,再分别用不同浓度的AB的(0、62.5 nmol/L、125 nmol/L、250 nmoL/L)进行干预,2组均在Aβ1-42干预2h后用RT-PCR法检测CD14及TNF-α mRNA表达的量.结果:不同浓度的Aβ1-42干预小胶质细胞2h后,62.5 nmoL/L与0 nmol/L Aβ1-42组CD14 mRNA的表达相比较,差异无统计学意义.当Aβ1-42浓度为125 nmol/L和250 nmol/L时,CD14 mRNA的表达逐渐增加(P<0.05).使用CD14抗体后,抗CD14加Aβ1-42组中CD14 mRNA的表达与Aβ1-42组比降低(P<0.05).Aβ1-42组TNF-α mRNA的表达随Aβ1-42的浓度增加而增加(P<0.05),与Aβ1-42组相比,抗CD14加Aβ1-42组中TNF-α mRNA的表达在Aβ1-42浓度为125 nmol/L开始明显受到抑制(P<0.05).结论:Aβ1-42诱导的小胶质细胞可通过脂多糖受体CD14使TNF-α mRNA的表达增加,且与Aβ1-42的作用浓度呈正相关.

    作者:葛继晖;索爱琴;许予明;李玮;朱良付;张杰文;成巧梅;苗成 刊期: 2008年第05期

  • 葡萄糖酸锑钠对NK92mi细胞杀伤和蛋白酪氨酸磷酸酶-1活性的影响

    目的:探讨葡萄糖酸锑钠(SSG)对NK92mi细胞的杀伤活性和蛋白酪氨酸磷酸酶-1(SliP-1)活性的影响.方法:取对数生长期的NK92mi细胞,随机分为SSG处理组和未处理组,SSG处理组在含有不同质量浓度SSG的培养基中培养16 h,用乳酸脱氢酶释放法检测NK92mi细胞对K562细胞的杀伤活性,并用蛋白酪氨酸磷酸酶活性分析法检测经SSG处理后NK92mi细胞中SHP-1的活性.结果:未处理组NK92mi细胞的杀伤活性为(163.12±35.42)Lu,经过与1 mg/L,10 mg/L和100 mg/L SSG共同培养后,NK92mi细胞的杀伤活性分别为(210.53±38.35),(353.25±31.99)Lu和(771.03±24.80)LU,NK92mi细胞的杀伤活性随SSG质量浓度的增加而显著增高(F=210.16,P<0.05);经1 mg/L,10 mg/L和100 mg/L的SSG处理后,NK92mi细胞中的SHP-1的活性分别降低到未处理组的(57.9±6.3)%,(23.1±5.7)%和(5.2 4-2.8)%,SHP-1活性随着SSG质量浓度的增加而显著降低(F=81.12,P<0.05).结论:SSG可能通过降低NK92mi细胞内的SHP-1活性来提高其杀伤活性.

    作者:朱娟;刘延方 刊期: 2008年第05期

  • 托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43 mRNA和蛋白表达的影响

    目的:观察托吡酯(TPM)对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43(GAP-43)蛋白和mRNA表达的影响.方法:健康成年雄性sD大鼠40只,随机分为4组,每组10只.模型对照组大鼠灌胃给予生理盐水(10 mL/kg),低、高剂量TPM组分别按40 mg/kg和100 mg/kg给予10g/L TPM生理盐水溶液,空白对照组给予等量生理盐水,1h后,前3组大鼠腹腔注射10g/L戊四氮(35 ms/kg)建立戊四氮点燃大鼠癫痫模型,空白对照组给予等量生理盐水.当模型对照组大鼠行为达到点燃时,应用RT-PCR方法半定量检测GAP-43 mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测齿状回、海马CA3区和CA1区内GAP-3蛋白的表达强度.结果:与空白对照组相比,模型对照组,低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回与CA3区的GAP-43 mRNA和蛋白表达强度升高(P<0.05);与模型对照组相比,低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43 mRNA和蛋白表达强度降低(P<0.05).结论:戊四氮点燃大鼠海马GAP-43表达增强,表明突触重建参与了癫痫发生的病理过程.TPM可抑制GAP-43的过表达,2种剂量的抑制作用无差异.

    作者:郑得义;连亚军;张宏伟 刊期: 2008年第05期

  • 沐舒坦防治早产儿肺透明膜病63例疗效观察

    2003年8月至2006年8月,本院新生儿科共收治早产患儿126例,对其中63例早期给予沐舒坦防治肺透明膜病(HMD),疗效满意,现报道如下.

    作者:张彦伦;李建业;徐呜浩;丁晓霞;钮宜文;周俊华;葛太岭 刊期: 2008年第05期

  • 某城市社区居民高血压患病率、知晓率、治疗率和控制率调查

    目的:了解某城市社区40岁以上居民高血压的患病率、知晓率、治疗率和控制率,为人群高血压的防治提供依据.方法:采取随机整群抽样方法,选择安阳钢铁公司社区40岁以上居民作为研究对象,进行高血压患病率、知晓率、治疗率和控制率的横断面研究.结果:本研究共调查40岁以上居民1 789人,其中男738人,女1 051人.高血压的患病率为49.25%,用2000年全国第五次人口普查资料进行标化后,标化率为45.34%.按照JNC-7对血压进行分级后,高血压前期占36.84%.高血压患者中高血压的知晓率为62.43%,治疗率为49.38%,控制率为13.51%.结论:该城市社区40岁以上居民高血压患病率高,知晓率、治疗率和控制率均偏低.迫切需要开展高血压的一级和二级预防工作.

    作者:孙献周;丁亚兴;韩晓燕;刘俊伟;张卫东;张梅喜;郗园林;胡东生 刊期: 2008年第05期

  • 人趋化因子受体5基因5'侧翼区功能分析

    目的:分析人趋化因子受体5(CCR5)基因5'侧翼区的调控序列.方法:构建CCR5基因不同长度5'侧翼区的萤光素酶报告基因载体,分别转染入Jurkat细胞中,检测分析其萤光素酶活性.结果:CCR5基因5'侧翼区-1 006 bp至-1 bp、-804 bp至-1 bp、-586 bp至-1 bp和-478 bp至-1 bp区段的pGL3重组质粒在Jurkat细胞中能表现出明显的萤光素酶活性.结论:CCR5基因5'侧翼区-478 bp至-1 bp序列中存在基因转录的主要上调元件.

    作者:靳静;赵国新;冯龙;马云云;卫艳萍;赵国强 刊期: 2008年第05期

  • 格林巴利综合征患者磁刺激运动诱发电位检测

    2006年2月至2007年11月,作者采用磁刺激脊髓的运动诱发电位(MEP)技术测定了30例急性格林巴利综合征(GBS)患者发病初期的脊髓神经根功能,现将结果报道如下.

    作者:王少平;李增富;冯堃 刊期: 2008年第05期

  • 热疗与紫杉醇联合应用对H446细胞生长和MMP-2 mRNA表达的影响

    目的:探讨单纯热疗、单纯化疗以及热化疗联合应用对H446细胞生长及MMP-2 mRNA表达的影响.方法:以不同温度(39℃、40℃、41℃、42 oC、43℃和44℃)、不同剂量紫杉醇(30μg/L、60μg/L、120μg/L、240μg/L和480μg/L)及热化疗联合的方法处理H446细胞.同时设对照组(0μg/L紫杉醇,37℃),每组又分为3个热疗时间(30 min、60 min和90 min),观察热疗、化疗和热化疗联合对H446细胞生长抑制率的影响;另取H446细胞.分为单纯热疗组(43℃,90 min),单纯紫杉醇化疗组(60μg/L、120μg/L和240 μs/L),43℃热疗90 min联合紫杉醇组(60μg/L、120μg/L和240μg/L),对照组(0μg/L、37℃),采用RT-PCR检测各组细胞MMP-2 mRNA的表达.结果与结论:单纯热疗与紫杉醇均可抑制H446细胞的生长,热疗不同程度地增强r紫杉醇对H446细胞的增殖抑制率,热化疗联合对H446细胞生长抑制的优组合是43℃热疗90 min联合120μg/L紫杉醇化疗,在此条件下,H446细胞MMP-2 mRNA的表达明显降低,提示热化疗联合对H446细胞增殖的抑制作用可能是通过降低MMP-2 mRNA的表达,从而抑制肿瘤细胞的侵袭和转移而实现.

    作者:张瑞芳;王琳;吴卫东;吴逸明 刊期: 2008年第05期

  • 乳癌组织中BI-1、Bcl-2和Bcl-xl蛋白的表达

    目的:检测乳癌组织中Bax inhibitor-1(BI-1)、Bcl-2和Bcl-xl蛋白的表达,探讨可能的抗凋亡机制.方法:采用Western blot检测42例乳癌及配对正常乳腺组织中BI-1蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测42例乳癌组织中Bcl-2与Bcl-xl的表达.结果:乳癌组织中BI-1蛋白的相对表达量明显高于配对正常乳腺组织,P<0.05;乳癌组织中BI-1的表达与Bel-2和Bcl-xl均呈正相关(r=0.356和0.375,P均<0.05).结论:Bl-1的过度表达可能促进了乳癌的发生.Bcl-2和Bcl-xl均参与了,BI-1的抗凋亡过程.

    作者:李靖若;李孟圈;冯宗刚;李建章 刊期: 2008年第05期

  • 过敏性紫癜患儿66例血清食物不耐受特异性IgG抗体检测

    过敏性紫癜(allergic purpura)是一种血管变态反应性疾病,以儿童和青少年多见,其病因难以确定,与感染、食物、药物等因素有关.目前,临床尚无满意的治疗方法,常易复发.近年来研究发现,IgG介导的食物不耐受,也称慢性食物过敏,可导致机体慢性免疫性损伤,症状涉及全身各系统,却常常被临床忽视[1].

    作者:孙改河 刊期: 2008年第05期

  • 人趋化因子受体5基因的克隆及原核表达

    目的:构建人趋化因子受体5(CCR5)原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达.方法:从健康人外周血单个核细胞提取总RNA,以RT-PCR获得CCR5基因全长1 059 bp的完整编码序列;将其克隆入载体pGEM-T中,经限制性内切酶和菌落PCR分析并测序;再将阳性重组子中的CCR5片段与表达载体pQE80L连接并转化大肠杆菌DH5a,进行诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定.结果:SDS-PAGE和Western Blot分析表明,在30℃以IPTG诱导获得相对分子质量为41 000的CCR5重组蛋白表达带,诱导4 h后此蛋白表达量约为全菌总蛋白的25%.结论:成功获得人CCR5重组蛋白.

    作者:赵国新;靳静;冯龙;马云云;卫艳萍;赵国强 刊期: 2008年第05期

  • 泛发性脓疱型银屑病46例临床分析

    泛发性脓疱型银屑病(psoriasis pustuiosa,PP)是一种以全身泛发无菌性脓疱伴严重全身症状为特征的银屑病,病情危重,诊治不及时可危及患者生命.2002年1月至2007年6月,作者诊治了46例PP患者,现将46例的临床资料分析报道如下.

    作者:曹鸿玮;郑晓红;王瑞;杨俊亚 刊期: 2008年第05期

  • 听神经瘤48例显微手术治疗体会

    2003年2月至2007年1月,作者采用显微外科技术切除听神经瘤48例,疗效满意.现从手术入路、神经电生理检测、面听神经保护、内听道肿瘤处理等方面回顾分析如下.

    作者:郭孝龙;吴进松;程小兵;赵勇刚 刊期: 2008年第05期

  • 不同剂量HgCl2与CdCl2联合对去卵巢大鼠的雌激素样作用

    目的:探讨不同剂量Hgcl2与CdCI:联合对去卵巢大鼠的雌激素样作用.方法:66只雌性去卵巢SD大鼠随机分为11组.每组6只,分别给予低、中、高剂量的HgCl2(0.04 mg/kg、0.20 mg/kg和1.00 mg/kg)和CdCI,(0.08 mg/kg、0.40 mg/kg和2.00 mg/kg)及低剂量HgCl2联合低、中、高剂量的CdCl2,阴性对照组给予蒸馏水,阳性对照组给予雌二醇,连续3 d,检测各组大鼠的子宫脏器系数和嗜银染色颗粒数.结果:与阴性对照组比较,高剂量HgCI2组、高剂量CdCI2组及低剂量HgCI2与低、高剂量CdCl2联合组大鼠的子宫脏器系数升高,Ag-NORs颗粒数增加(P<0.05);与对应剂量CdCl2组比较,低剂量HgCl2与低剂量CdCI2联合组的子宫脏器系数升高,Ag-NORs颗粒数增加(P<0.05).结论:低剂量HgCI2与CdCl2联合可能具有雌激素样作用.

    作者:付远辉;王思华;汤晓阳;吴逸明;陈小玉 刊期: 2008年第05期

  • 肺血减少型复杂先天性心脏病19例治疗体会

    利用搏动性双向腔静脉-肺动脉吻合术(Glenn手术)治疗难以一期于术矫治的肺血减少型复杂先天性心脏病是一种行之有效的方法,它可以作为Fontan手术的过渡手术,同时也是一些肺血减少型复杂先心病的终减状手术[1].2000年3月至2005年4月,作者对19例复杂先天性心脏病患者进行了保留奇静脉的搏动性双向Glenn手术,疗效满意,现报道如下.

    作者:李刚;荣金明;柴文祥;杨巧玲;梁宝成 刊期: 2008年第05期

  • 含人DNA聚合酶β基因启动子萤光素酶报告载体的构建

    目的:构建含人DNA聚合酶B(DNA polymerase beta,polβ)基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3polβ/promoter.方法:利用PCR技术扩增人类polβ基因启动子的核心片段,克隆至含新霉素抗性的萤光素酶表达载体pGL3-Neo-enhancer,构建含DNA polβ启动子的萤光素酶表达载体pGLpolβ/promoter,重组子经双酶切、PCR及测序鉴定.将构建的载体用脂质体转染体外培养的食管癌EC-1细胞株,应用萤光素酶测定系统检测萤光素酶的表达活性.结果:测序结果表明,克隆获得的polβ基因启动子序列与GenBank报道的一致,且插入方向正确.pGL3polβ/promoter组萤光素酶的表达活性(2 207 348.000±71 626.763)与空白组(451.670±23.347)和pGL3.Neo-enhancer组(4 884.330±1 623.047)相比,差异有统计学意义(F=5 681.596,P<0.05).结论:成功构建了含人DNA polβ基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3polβ/promoter.

    作者:李月白;张贵星;于雅丽;赵国强;王欢;董子明 刊期: 2008年第05期

  • 真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达

    目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达.方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达.结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功.该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达.

    作者:艾敏;张巧;赵国强;杨胜利 刊期: 2008年第05期

  • 子宫内膜异位症异位内膜组织中内皮型一氧化氮合成酶、血管内皮生长因子和CD34的表达

    目的:探讨子宫内膜异位症(Ems)异位内膜组织中内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的表达情况.方法:采用免疫组织化学方法分别测定38例Ems异位内膜与40例正常对照组子宫内膜组织中eNOS、VEGF和CD34的表达,分析异位内膜组织中eNOS、VEGF表达的相关性.结果:Ems异位内膜组织中eNOS、VEGF和CD34的表达较正常内膜组织的表达明显增高;在Ems异位子宫内膜组织中,eNOS和VEGF的表达成正相关(r=0.984,P<0.05).结论:异位内膜组织的侵袭力增强及血管生成可能与eNOS、VEGF高表达有关.

    作者:王晓娟;吴惠琰 刊期: 2008年第05期

  • 急性白血病患者骨髓Livin、Smac mRNA的表达

    目的:研究急性白血病(AL)患者凋亡蛋白抑制因子Livin及其促凋亡因子Smae基因的表达及临床意义.方法:选取52例AL患者(初治组.化疗1疗程后.52例AL患者中有28例达完全缓解(缓解组),其中6例于观察期间复发(复发组))和10名健康人(正常对照组).取骨髓液并分离单个核细胞,提取细胞总RNA,并以白血病HL-60细胞株为阳性对照,采用RT-PCR方法检测Livin、Smac mRNA表达情况.分析Livin和Smac mRNA表达的相关性和2者的表达与AL缓解率的关系.结果:初治组中Livin、Smac mRNA的阳性表达率(40.3%、59.6%)较正常对照组(0%、10.0%)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).缓解组中Livin mRNA的阳性表达率(0%)与复发组的阳性率(50.0%)相比,差异有统计学意义(r=9.769,P<0.05).缓解组中Smae mRNA阳性表达率(14.2%)与复发组的阳性率(60.7%)相比差异有统计学意义(χ2=4.905,P<0.05).AL患者Livin、Smac mRNA的表达具有关联性(r=0.267 χ2=4.020,P=0.045).在初治组中,Livin、Smac mRNA表达阳性患者的完全缓解率均低于表达阴性的患者.44例可进行疗效评估的患者中,Livin mRNA表达阳性者与表达阴性者完全缓解率相比差异有统计学意义(χ2=4.762,P=0.029).Smac mRNA表达阴性者与表达阳性者完伞缓解率相比差异有统计学意义(χ2=5.135,P=0.023).结论:Livin、Smae mRNA过度表达和急性白血病的发病呈正相关;Livin、Smac高表达的患者完全缓解率低,预后不良.

    作者:王娴静;孙慧;王桂叶;范清堂 刊期: 2008年第05期

  • 子宫内膜癌50例MRI表现

    子宫内膜癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,治疗前对病变的准确分期有助于临床选择合理的治疗方案及评估预后.MRI作为一种无创伤且具有极高软组织分辨率的检查方法,在子宫内膜癌术前诊断中的应用越来越多.作者回顾分析了经手术病理证实的50例子宫内膜癌的MRI表现,报道如下.

    作者:连建敏;李永丽;徐俊玲;史大鹏 刊期: 2008年第05期

郑州大学学报(医学版)杂志

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主管:河南省教育厅

主办:郑州大学