学术投稿

EC9706肿瘤条件培养基对树突状细胞的影响

路静;江亚南;杨洪艳;黄幼田;秦珍珠;白睿华;郑智敏;赵明耀;董子明

关键词:食管癌, 树突状细胞, 肿瘤条件培养基
摘要:目的:探讨食管癌EC9706细胞肿瘤条件培养基模拟的体外肿瘤微环境对人单核细胞来源的树突状细胞(DC)分化发育的影响.方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入含rhGM-CSF和rhIL-4的RPMI 1640培养液诱导DC.第2天对照组同前培养,实验组在此基础上加入含rhGM-CSF、rhIL-4的EC9706肿瘤条件培养基;第4天加入超声破碎法制备的EC9706抗原;第6天加入脂多糖.第8天收集对照组正常成熟DC和实验组肿瘤相关DC(TADC),显微镜观察其形态,流式细胞仪检测其免疫表型,RT-PCR检测CD1a基因的表达,混合淋巴细胞反应及体外杀伤活性实验检测其诱导的细胞毒T细胞(CTL)的增殖能力及对EC9706细胞的杀伤能力.结果:第8天,与正常成熟DC相比,TADC细胞呈发育迟缓状态,CD86、CD1a及CD11c表达降低(P<0.01),CD1a基因不表达(正常DC较强表达),TADC体外刺激形成的CTL增殖率及对EC9706细胞的杀伤率均降低(P<0.01).结论:EC9706肿瘤条件培养基所模拟的微环境对DC的诱导分化及功能有明显的抑制作用,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一.
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 上皮性卵巢癌组织中组织激肽释放酶15的表达

    目的:研究上皮性卵巢癌组织中人类组织激肽释放酶15(KLK15)蛋白的表达.方法:应用免疫组化SP法,检测60例上皮性卵巢癌组织、20例上皮性良性卵巢肿瘤组织、10例正常卵巢组织中KLK15蛋白的表达情况.结果:卵巢癌组织中KLK15的表达阳性率(45/60,75%)高于正常(1/10,10%)及良性卵巢组织(8/20,40%)(P<0.01),在后2者中的表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05).KLK15表达阳性率随卵巢癌细胞分化程度降低而增高(P<0.05),随临床分期增加而增高(P<0.05);伴有区域淋巴结转移者,其表达阳性率增高(P<0.05).KLK15阴性表达者生存时间较KLK15阳性者延长(P<0.05),KLK15表达与卵巢癌患者生存时间相关(χ2=5.96,P=0.014 6).结论:KLK15表达与上皮性卵巢癌的进展密切相关,可作为判断卵巢癌恶性程度及评估不良预后的重要指标.

    作者:王巍;史惠蓉;纪妹;卫玲 刊期: 2008年第06期

  • Turner 综合征环状X染色体1例

    Turner综合征(特纳氏综合征)又称性腺发育不全、先天性卵巢发育不良综合征.文献报道新生儿发病率为1/1 000[1],在女婴中发生率为1/2 500[2].国外报道本病环状X染色体发生率为2%~11%[3],国内曾有报道在97例特纳氏综合征中仅1例为环状X染色体[4].该综合征常在青春期因生长发育迟缓而被发现.现报道本科收治的1例患者.

    作者:李静;冯刚;梅晓峰;白洁 刊期: 2008年第06期

  • 3种玻璃化冷冻小鼠生发泡期卵母细胞效果比较

    目的:比较3种玻璃化冷冻对小鼠生发泡期卵母细胞的存活及胚胎发育潜能的影响.方法:将小鼠生发泡期卵丘复合物(n=175、177、190)和裸卵(n=150、149、150)分别随机分为3组:采用一步乙二醇法、乙二醇加二甲基亚砜法、三步乙二醇法进行冷冻保存.解冻存活体外培养成熟后行卵胞浆内单精子显微注射受精,进一步评价胚胎发育潜能.结果:冻融小鼠生发泡期卵丘复合物,三步乙二醇法与一步乙二醇法的存活率、成熟率、受精率均高于乙二醇加二甲基亚砜组(P均<0.05);三步乙二醇法的优质胚胎和囊胚率均高于一步乙二醇法和乙二醇加二甲基亚砜法(P均<0.05).冻融小鼠生发泡期裸卵,三步乙二醇法的存活率及三步乙二醇法、一步乙二醇法的受精率及卵裂率均高于乙二醇加二甲基亚砜法(P均<0.05).三步乙二醇法中,卵丘复合物组的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及优质胚胎率均高于裸卵组(P均<0.05).结论:3种玻璃化冷冻中,三步乙二醇法可以获得高质量的冻融小鼠生发泡期卵母细胞,是一种理想的冷冻方法;带完整卵丘颗粒细胞的生发泡期卵母细胞的冻融效果更佳.

    作者:宋文妍;孙莹璞;金海霞;辛志敏;苏迎春;郭艺红;陈子江 刊期: 2008年第06期

  • 急性髓系白血病细胞β-catenin和MMP-7的表达

    目的:探讨急性髓系白血病细胞中β-catenin和MMP-7表达的意义.方法:急性髓系白血病患者21例(病例组),非恶性血液病患者14例(对照组),采用免疫组织化学SP法测定骨髓单个核细胞(BMMNC) β-catenin和MMP-7的表达水平,记录免疫积分和表达阳性率.结果:病例组BMMNC中β-catenin和MMP-7的免疫积分分别为(88.17±36.58)和(74.79±35.39),阳性率分别为(50.75±34.78)%和(46.42±26.14)%,均高于对照组(P<0.05).病例组β-catenin和MMP-7的免疫积分和阳性率均呈正相关关系(r分别为0.576,0.593,P均<0.05).病例组伴有肝脾淋巴结肿大的患者β-catenin和MMP-7的免疫积分和阳性率均高于无肝脾淋巴结肿大者(P<0.05).结论:急性髓系白血病细胞中β-catenin和MMP-7的表达呈正相关,2者与急性髓系白血病细胞髓外浸润有关.

    作者:王石松;刘延方;张秋堂;王冲;陈胜梅;朱娟;梁利杰;孙玲;孙慧 刊期: 2008年第06期

  • 苦参素注射液对Eca-109细胞周期及CyclinD1、CDK4蛋白表达的影响

    目的:探讨苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖周期的影响及其机制.方法:将体外培养的人食管癌Eca-109细胞分为苦参素组(1、2 mg/L)、阳性对照组(氟尿嘧啶)和阴性对照组(等体积的培养液),分别培养24 h后收集细胞,运用流式细胞术检测细胞周期变化和调控细胞增殖周期的相关蛋白CyclinD1和CDK4的表达.结果:苦参素对Eca-109细胞持续作用24 h后,细胞周期结果显示,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,CyclinD1和CDK4蛋白表达量降低,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论:苦参素可以将Eca-109细胞阻滞于G0/G1期,其主要机制可能与CyclinD、CDK4的低表达有关.

    作者:朱艳琴;王凯娟 刊期: 2008年第06期

  • 烟嘧磺隆原药的急性毒性评价

    目的:评价烟嘧磺隆原药的急性毒性,为烟嘧磺隆原药的安全使用提供毒理学依据.方法:急性经口、经皮毒性试验,眼、皮肤刺激试验以及皮肤过敏试验均按照我国现行<农药登记毒理学试验方法>规定方法进行.结果:烟嘧磺隆原药急性经口半数致死量(LD50)>5 000 mg/kg,经皮LD50 >2 000 mg/kg,经口、经皮均属低毒,对兔眼及豚鼠皮肤无刺激性,对豚鼠致敏率为0,致敏率强度1级,属于弱致敏物.结论:烟嘧磺隆原药对人畜较为安全.

    作者:赵士光;张巧;陈小玉 刊期: 2008年第06期

  • 急性髓系白血病细胞淋巴系分化抗原的表达

    目的:探讨急性髓系白血病(AML)中淋巴系分化抗原(LyAg)的表达情况.方法:475例AML患者,FAB分型:AML-M0 31例,AML-M1 45例,AML-M2 218例,AML-M3 54例,AML-M4 18例,AML-M5 101例,AML-M6 4例,AML-M7 4例.采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:在475例AML患者中,38.95%表达LyAg,其中T细胞相关抗原CD7表达常见(27.58%),其在AML各亚型的表达依次为AML-M0 61.29%、AML-M1 40.00%、AML-M2 34.86%、AML-M5 16.83%.B细胞相关抗原CD19表达于少数AML患者(7.37%),主要是AML-M1(11.11%)、AML-M2(10.55%)和AML-M0(9.68%)患者.结论:CD7和CD19是AML常表达的LyAg,其与AML-M0、AML-M1、AML-M2有关,与AML-M3关系不明显.

    作者:时艳荣;梁利杰;张秋堂;刘延方;孙慧;孙玲;刘林湘;刘少君 刊期: 2008年第06期

  • 形觉剥夺性近视雏鸡眼细胞凋亡情况观察

    目的:以雏鸡形觉剥夺性近视(FDM)模型,探讨细胞凋亡与形觉剥夺性近视的关系.方法:健康雄性海兰雏鸡20只,半透明眼罩遮盖右眼,左眼为对照眼.遮盖7 d去除眼罩,检影验光,测2只眼的眼轴长及赤道径;HE染色观察视网膜及巩膜的形态学变化;采用TUNEL技术检测视网膜细胞的凋亡.结果:①遮盖眼形成近视,表现为屈光度、眼轴长及赤道径均较对照眼增大(P<0.05).②遮盖眼视网膜较对照眼普遍变薄,以内核层、内丛状层、神经纤维层明显;后极部巩膜软骨层变厚,纤维层变薄.③遮盖眼内核层、神经节细胞层凋亡细胞数增多,与对照眼相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:细胞凋亡参与形觉剥夺性近视的形成.

    作者:李秀娟;张金嵩 刊期: 2008年第06期

  • 近红外光谱法检测连翘药材中水分含量

    目的:运用近红外光谱技术建立一种连翘药材水分含量测定的新方法.方法:以药典法测定87个不同产地连翘药材中的水分含量,并用其中65个样品建立近红外光谱定量分析模型,22个样品来验证.结果:65个样品经内部交叉验证建立预测模型,内部交叉验证决定系数(R2)= 0.991,内部交叉验证均方差(RMSECV)=0.277.用22个样品进行外部验证,预测值与真实值之间的相关系数(R2)为0.986,回收率中位数为101.36%.结论:近红外漫反射光谱法具有快速、无损、准确的特点,能满足生产中连翘药材水分检测的精度要求,对于其他中药材的水分测定也有一定的参考价值.

    作者:白雁;王星;陈志红 刊期: 2008年第06期

  • 全反式维甲酸对EC9706细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用

    目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞体外增殖抑制及诱导凋亡的作用.方法:应用不同浓度(1×10-6、1×10-5、5×10-5 mol/L)ATRA体外处理人食管癌细胞EC9706(ATRA1、ATRA2、ATRA3组),并设不加ATRA的对照组,倒置显微镜下观察细胞的生长状态,HE染色后光镜下观察细胞结构的改变,应用MTT法测定细胞生长抑制率,免疫组织化学技术检测凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达情况.结果:经ATRA处理后,ATRA3组与对照组比较,细胞生长速度减慢,群体倍增时间延长(P均<0.05);光镜下可见细胞形态趋向良性分化,细胞质内成熟细胞器增多,生长抑制率增加(P<0.05).与对照组比较,3个ATRA组细胞Bax蛋白表达增加、Bcl-2蛋白表达下降(P<0.01),且以ATRA2、ATRA3组为明显(P<0.05).结论:ATRA能有效抑制EC9706细胞增殖,其机制与Bax及Bcl-2蛋白表达调控有关.

    作者:路太英;杨成梁;王留兴;王瑞林;陆士新;高冬玲;张岚;樊青霞 刊期: 2008年第06期

  • 氯化锰对去势雄性SD大鼠生殖内分泌功能的影响

    目的:观察氯化锰(MnCl2)对去势大鼠生殖内分泌功能的影响,探讨MnCl2的抗雄激素样作用.方法:采用Hershberger体内筛检实验.对大鼠行睾丸摘除术去势,7 d后随机分为6组进行实验,溶剂对照组皮下注射玉米油,余5组大鼠皮下注射丙酸睾酮(TP)1.0 μg/只,阴性对照组、低、中、高剂量染毒组同时腹腔注射MnCl2 0、7.5、15.0、30.0 mg/kg,阳性对照组经口灌胃氟他胺,每 d 1次,连续7 d.7 d 后,用放射免疫方法测定血清睾酮(T)浓度,免疫放射法测定前列腺特异抗原(PSA)含量;分离雄激素依赖器官称量,计算脏器系数.结果:去势后7 d, 各组大鼠恢复良好,未观察到明显中毒症状.各实验组大鼠体质量变化与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).氯化锰30 mg/kg剂量组的腹侧前列腺和精囊腺脏器系数低于阴性对照组 (P<0.05).染毒组去势大鼠血清T、PSA水平高于阳性对照组(P<0.05),与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:氯化锰在30 mg/kg此剂量下可能具有抗雄激素作用.

    作者:尚平平;常树丽;赵士光;陈小玉 刊期: 2008年第06期

  • 十二指肠乳头肿瘤67例手术治疗体会

    十二指肠乳头肿瘤是肝胆外科常见的肿瘤,起病隐匿,临床症状不典型,就诊时多已至晚期.但随着十二指肠镜技术及影像技术的发展,越来越多的十二指肠乳头肿瘤被发现,使得早期治疗成为可能.手术是十二指肠乳头肿瘤的主要治疗手段,但应选择合理的手术方式,作者回顾分析本院1996年7月至2006年11月手术治疗的67例十二指肠乳头肿瘤的临床资料,报道如下.

    作者:范正军;郭广成;赵守魁;王陆林 刊期: 2008年第06期

  • 城乡夫妻个体婚姻资源量对其婚姻质量及身心健康影响的对比

    目的:通过分析城乡夫妻个体婚姻资源量的差异,研究其对城乡夫妻婚姻质量及身心健康的影响.方法:使用SCL-90和婚姻质量问卷对458名大学生父母进行婚姻质量和心理健康的调查和分析,比较城乡夫妻个体婚姻资源量的差异及对其婚姻质量及身心健康水平的影响.结果:城乡夫妻个体婚姻资源量在居住地、文化水平和职业方面存在差异(P均<0.05);城乡夫妻婚姻稳定度与美满度比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);农村夫妻与城市夫妻SCL-90评分比较,其中躯体化、睡眠、精神紧张、恐惧感、孤独感5个因子差异有统计学意义(P均<0.05);个体婚姻资源量与心理健康部分因子成负相关(P<0.05或0.01).结论:城乡夫妻个体婚姻资源量差异对其婚姻质量有一定程度的影响;夫妻双方心理健康水平与个体婚姻资源量之间存在着一定的相关关系.

    作者:张萍;李春霖;郝申强;田庆丰 刊期: 2008年第06期

  • 2型糖尿病并冠心病患者血清脂联素水平测定

    目的:探讨脂联素(ADPN)与2型糖尿病并发冠心病的关系.方法:采用ELISA法测定35 例健康体检者(正常对照组)、40例单纯2型糖尿病(T2DM组)及37例糖尿病并冠心病患者(DM-CHD组)血清ADPN及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:正常对照组、T2DM组和DM-CHD组血清ADPN水平分别为(10.51±2.77),(7.51±3.19)和(4.94±3.57) mg/L,依次降低(P<0.05);TNF-α水平分别为(0.96±0.27),(1.20±0.22)和(1.54±0.30) ng/L,依次升高(P<0.01).糖尿病并冠心病患者ADPN水平与TNF-α水平呈负相关(r=-0.228,P<0.05).多因素非条件Logisitic回归分析显示,ADPN水平减低是糖尿病并发冠心病的独立危险因素(OR=0.561,P=0.02).结论:血清ADPN水平降低与糖尿病并发冠心病有关.

    作者:张苏河;李青菊;辛雅萍;陈璐璐 刊期: 2008年第06期

  • 颈内动脉狭窄支架辅助血管成形术死亡7例原因分析

    支架辅助血管成形术,对于药物治疗无效的症状性颅内外动脉狭窄有明确疗效,可明显改善临床预后[1-3].但是,支架置入术中及术后有可能出现各种并发症如导丝穿孔、血管破裂、支架移位、血栓形成等,严重者导致死亡.作者对首都医科大学宣武医院2001年以来开展支架辅助血管成形术治疗颈内动脉狭窄所致死亡病例进行了原因分析.

    作者:孙石磊;缪中荣;李慎茂;凌峰 刊期: 2008年第06期

  • 脂质体介导寡脱氧核糖核苷酸转染人视网膜色素上皮细胞的转染率及分布测定

    目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000 介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布.方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转入人RPE细胞中,荧光显微镜下观察转染后20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h其在细胞内的分布,流式细胞仪检测其在RPE细胞中的转染效率;并用MTT法检测脂质体处理组、脂质体-ODNs复合物处理组和正常对照组的细胞增生活性,观察脂质体的毒性.结果:LipofectamineTM 2000能迅速将FAM-ODNs转入人RPE细胞的胞质和胞核内,4~6 h达高峰,转染效率高达(85.85±5.75)%,与其他时点比较差异有统计学意义(P<0.05),24 h后其转染率还有(70.11±5.81)%;且脂质体对RPE细胞无明显细胞毒性,3组间细胞增生活性比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:LipofectamineTM 2000能有效地将FAM-ODNs转入人RPE细胞中,可作为一种安全有效的基因转移载体用于基因治疗.

    作者:李晓青;曾水清;徐莉莉 刊期: 2008年第06期

  • 改进胃管插入长度和体位对洗胃效果的影响

    口服、误服毒物以及食物中毒是急诊科常见急症,洗胃是抢救中毒和减少毒物吸收直接、快速、有效的方法之一[1].体位、胃管插入长度是否合适是取得佳洗胃效果的关键环节.2007年2月至2008年2月,作者对洗胃患者的体位、胃管插入长度进行了改进,收到满意效果,现报道如下.

    作者:岳瑞改 刊期: 2008年第06期

  • 宫颈鳞癌组织中Snail mRNA和蛋白的表达

    目的:检测宫颈鳞癌组织中Snail mRNA和蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学及RT-PCR法,检测宫颈鳞癌组织(n=141、48)、癌旁组织(n=48、48)及正常宫颈组织(n=48、48)中Snail蛋白及mRNA的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系.结果:宫颈鳞癌、癌旁组织中Snail mRNA的阳性表达率高于正常组织(P均<0.05),且癌组织中Snail mRNA阳性表达率与淋巴结转移情况有关(P<0.05),但与肿瘤的分化程度、FIGO分期无关(P均>0.05).3组组织中Snail mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05).宫颈鳞癌及癌旁组织中Snail蛋白的阳性表达率高于正常宫颈组织(P<0.05),且癌组织中Snail蛋白阳性表达率与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移情况有关(P均<0.05).结论:宫颈鳞癌的癌变、侵袭、转移可能与Snail蛋白及mRNA的高表达有关,Snail可作为预测宫颈鳞癌预后的指标之一.

    作者:阎爱华;孙洋;王靖;李珊珊;王小军 刊期: 2008年第06期

  • 乌司他丁对梗阻性黄疸大鼠肠氧化应激的影响

    目的:探讨乌司他丁(UTI)对梗阻性黄疸肠氧化应激的影响.方法:取雄性SD大鼠72只,随机均分为假手术组(A组)、梗阻性黄疸组(B组)、UTI干预组(C组).B组、C组采用胆总管结扎法建立梗阻性黄疸模型,C组从术后第1天开始腹腔注射UTI 40 000 IU/(kg·d),A组和B组注射等量生理盐水.术后3、5、7、10 d,每组各取6只大鼠,取肠组织测丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,血浆内毒素水平,光镜观察末端回肠黏膜形态学改变,用病理图像分析系统测量肠绒毛高度及黏膜厚度.结果:与A组比较,B组各时间点和C组术后5、7、10 d时肠组织MDA含量及血浆内毒素水平升高,SOD含量降低(P均<0.01).C组各时间点肠组织MDA含量及血内毒素水平较B组降低,SOD含量较B组升高(P均<0.05).C组肠组织MDA和SOD含量、血浆内毒素水平与A组术后3 d时比较,差异无统计学意义(P>0.05).B组术后第3天即见肠黏膜受损改变,随时间推移进行性加重;C组较B组肠黏膜病理改变明显减轻.B组各时间点及C组术后5、7、10 d时小肠绒毛高度、黏膜厚度均低于A组(P<0.01),C组则较B组升高(P<0.05),C组与A组术后3 d时比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:UTI可通过抗肠氧化应激保护梗阻性黄疸大鼠肠屏障功能,减轻内毒素血症,且对早期病变效果更好.

    作者:田延锋;李勇;赵增仁;赵群;范立侨;宋振川;张学明;李芳 刊期: 2008年第06期

  • 国产非离子型造影剂应用效果观察

    进口非离子型造影剂(优维显)显影效果好、副作用小,具有低渗性和稳定的水溶性,但价格昂贵,难以在临床全面推广,尤其在经济落后的地区.作者对国产非离子型造影剂(欧苏)用于经皮冠状动脉介入术中显影效果与药物副反应发生情况进行分析,并与优维显进行比较,报道如下.

    作者:刘淑婧;张超红;柳玉花 刊期: 2008年第06期

郑州大学学报(医学版)杂志

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