学术投稿

中药饮片耐热菌微生物类群的分析

甘永琦;农浚;樊兰艳;零文超;朱斌;张涛

关键词:中药饮片, 耐热菌微生物多样性, MALDI-TOF-MS, Illumina Miseq, 高通量测序, 16S rRNA, 芽孢杆菌属, 蜡样芽孢杆菌
摘要:探索污染中药饮片的耐热菌微生物组成和多样性特征.以9个品种中药饮片为研究对象,采用MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱技术和Illumina Miseq的16S rRNA宏基因组高通量测序技术对样品的耐热菌微生物群落进行分析.茎类饮片(鸡血藤、通草、小通草)的污染菌检出率高,种类多;而果实类饮片(南五味子)检出率低,污染菌种类少;根类饮片中,广山药和熟地黄的污染菌检出率和种类偏低.耐热菌微生物类群以芽胞杆菌科和类芽孢杆菌科为主;其中检出率高的菌属为芽孢杆菌属,还包括短小芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属、土壤芽胞杆菌属,高通量测序注释的其他菌属为肠杆菌属、短波单胞菌属、明串珠菌属、甲基杆菌属、脱氯单胞菌、泛菌属、克雷伯菌属和欧文氏菌属等.中药饮片的耐热菌微生物群落潜在危害因子,应完善其微生物限度标准,严格控制产品中的致病菌,加强中药饮片在生产和流通环节的监督管理.
中国中药杂志相关文献
  • 丹参常见病害的病原、发病规律及综合防治

    丹参是多年生草本植物,根部入药,是我国大宗中药材.近年来,随着市场需求逐步增加,种植面积不断扩大,丹参病害发生日益严重,已成为丹参产量和品质的重要威胁.其中,以根部病害为害为严重.丹参根腐病是生产中的重要病害,其次为丹参枯萎病,叶部病害以叶斑病为严重.目前生产上对丹参病害的防治主要以化学防治为主,辅助以生防制剂.该文对丹参根腐病、枯萎病、白绢病、根结线虫病、叶斑病、红叶病及病毒病丹参常见7种病害的为害症状、病原菌、发生规律以及防治措施等进行了总结,旨在为丹参生产中病害辨识、病原物的分离鉴定及科学用药,正确防治各病害提供指导.

    作者:王铁霖;关巍;孙楷;王升;池秀莲;郭兰萍 刊期: 2018年第11期

  • 中药饮片耐热菌微生物类群的分析

    探索污染中药饮片的耐热菌微生物组成和多样性特征.以9个品种中药饮片为研究对象,采用MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱技术和Illumina Miseq的16S rRNA宏基因组高通量测序技术对样品的耐热菌微生物群落进行分析.茎类饮片(鸡血藤、通草、小通草)的污染菌检出率高,种类多;而果实类饮片(南五味子)检出率低,污染菌种类少;根类饮片中,广山药和熟地黄的污染菌检出率和种类偏低.耐热菌微生物类群以芽胞杆菌科和类芽孢杆菌科为主;其中检出率高的菌属为芽孢杆菌属,还包括短小芽孢杆菌属、类芽孢杆菌属、土壤芽胞杆菌属,高通量测序注释的其他菌属为肠杆菌属、短波单胞菌属、明串珠菌属、甲基杆菌属、脱氯单胞菌、泛菌属、克雷伯菌属和欧文氏菌属等.中药饮片的耐热菌微生物群落潜在危害因子,应完善其微生物限度标准,严格控制产品中的致病菌,加强中药饮片在生产和流通环节的监督管理.

    作者:甘永琦;农浚;樊兰艳;零文超;朱斌;张涛 刊期: 2018年第11期

  • 红芪多糖的复合酶联合超声提取工艺、理化特性及抗氧化活性的研究

    利用复合酶联合超声波提取技术(MC),以红芪多糖得率和含量为综合指标,通过单因素和正交试验,筛选优提取组合,并分析了复合酶联合超声提取多糖(HPS-MC)的不同组分和热水浸提多糖(HPS-R)的物理化学特性及体外抗氧化活性.结果表明,复合酶配比对红芪多糖得率和含量影响均达到显著效应,而超声功率能显著提高红芪多糖含量;佳工艺参数为复合酶配比1:1、超声功率105 W、超声时间60 min、酶解pH 5,多糖得率和质量分数分别为(14.01±0.64)%,(92.45±1.47)%;与HPS-R相比,HPS-MC的相对分子质量、绝对黏度和蛋白质含量均降低,而糖醛酸含量增加;抗氧化体系中,多糖质量浓度在1~7g·L-1时,HPS-MC比HPS-R的抗氧化活性高,且相对分子质量低的HPS-MC(80%)随试验浓度的增大呈显著量效关系.综上所述,MC是一种简单方便、经济环保的提取技术,该法提取的HPS具有明显的抗氧化活性.

    作者:杨秀艳;薛志远;杨亚飞;方瑶瑶;周湘琳;赵良功;封士兰 刊期: 2018年第11期

  • 醋炙降低芫花二氯甲烷部位对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6毒性的研究

    该实验以大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6为研究对象,比较醋炙前后芫花二氯甲烷部位对IEC-6细胞的毒性差异,初步探讨芫花醋炙减毒的机制.通过MTT法筛选芫花各极性部位对于IEC-6细胞毒性,比较醋炙前后芫花毒性部位对IEC-6细胞活性的影响;通过测定IEC-6细胞中的乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶,Ca2+-Mg2+-ATP酶等酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量评价IEC-6细胞氧化损伤程度;使用流式细胞术检测IEC-6细胞的细胞周期和细胞凋亡情况.结果表明芫花二氯甲烷部位为致IEC-6细胞的毒性部位,醋炙后二氯甲烷部位毒性显著降低(P<0.01).与空白组相比,芫花二氯甲烷部位可显著降低IEC-6细胞中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SOD活力(P<0.01),显著提高细胞上清液LDH,MDA含量,显著降低细胞中GSH的含量(P<0.01).同时,芫花二氯甲烷部位能显著提高IEC-6细胞的早期与晚期凋亡率,显著降低G1期细胞百分比,增加S与M期细胞百分比(P<0.01).醋炙后,与相应芫花生品二氯甲烷组相比,醋芫花二氯甲烷组可显著提高IEC-6细胞内Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2-ATP酶、SOD活力(P<0.01),显著降低细胞中LDH,MDA含量(P<0.01),显著提高细胞中GSH含量(P<0.01).显著降低IEC-6细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率(P<0.01),显著增加G1期细胞百分比,减少S与M期细胞百分比(P<0.01).提示醋炙可降低芫花二氯甲烷部位致IEC-6细胞的毒性,其可能机制为提高细胞中抗氧化酶的活性与细胞膜的通透性,降低氧化损伤而实现.

    作者:周琴蓉;肖林焱;刘其南;孙盼盼;张丽 刊期: 2018年第11期

  • 异丁酰紫草素通过PI3K/Akt/m-TOR通路靶向抑制结肠癌细胞增殖的研究

    探讨异丁酰紫草素对结肠癌细胞体外生长抑制作用及其对PI3K/Akt/m-TOR通路的影响.MTT法检测不同浓度(0,6.25,12.5,25,50,100 mg·L-1)异丁酰紫草素处理人结肠癌HT29细胞24,48 h的增殖抑制率;CCK-8法检测异丁酰紫草素作用人结肠癌细胞HT29,HCT116,DLD-1,Caco-2 48 h的增殖抑制率;Annexin V/PI双标记流式细胞术检测24,48 h异丁酰紫草素对HT29细胞凋亡的影响;细胞周期检测试剂盒检测48 h异丁酰紫草素对HT29细胞周期变化的影响;Western blot及RT-PCR法检测异丁酰紫草素对HT29细胞PI3K,p-PI3K,Akt,pAkt,m-TOR蛋白水平和mRNA水平的变化.结果显示,异丁酰紫草素可抑制人结肠癌细胞生长、增殖,抑制率呈浓度依赖性;异丁酰紫草素促进细胞凋亡,且主要集中在早期凋亡,阻滞细胞于G0/G1期或G2/M期;异丁酰紫草素浓度依赖性下调HT29细胞PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt,m-TOR蛋白及PI3K,Akt,m-TOR mRNA水平.结果表明,异丁酰紫草素能显著抑制人结肠癌细胞增殖,诱导早期凋亡,改变细胞的周期分布,这种生物学效应可能与PI3K/Akt/m-TOR信号通路受到抑制有关.

    作者:钟宇;郑学宝;蔡康荣;黄琼林;叶华;黄哲;王永存;朱宇珍 刊期: 2018年第11期

  • 遗传和环境对唐古特大黄功效成分含量的影响研究

    以采自青海省6个唐古特大黄种源为材料,采用随机区组设计,分别在四川若尔盖、甘肃宕昌和河北沽源3个试验点布置种源试验,采用HPLC测定功效成分含量.探讨遗传与环境及互作效应对唐古特大黄游离蒽醌类、结合蒽醌类、酚酸类和二蒽酮苷类4类功效组分(包含14种功效成分)含量的影响,为大黄人工栽培中优质产地和种源选择提供依据.多点种源试验结果表明遗传和环境对唐古特大黄各功效成分含量影响均达到显著水平(P<0.05).其中酚酸类成分含量主要受环境因素的影响,其他3类成分含量受环境和遗传共同影响,其中环境因素所占比重较大.提示优质唐古特大黄的栽培应优先考虑环境,再选择种源.四川产地环境可能有利于唐古特大黄结合蒽醌类成分含量的积累,甘肃产地种植环境可能有利于游离蒽醌类、酚酸类和二蒽酮苷类成分含量的积累.根据功效组分含量和比例初步推断,种源T4可作为潜在的清热解毒和逐瘀通经专用药材的种质,种源T3和T6可作为潜在的泻下攻积专用药材的种质,该研究结果对大黄精准药材生产具有一定的指导意义.

    作者:商彤;胡会娟;孟磊;丁一明;李永杰;张明明;李莉;魏胜利 刊期: 2018年第11期

  • 基于网络药理学方法研究补阳还五汤治疗脑梗死的作用机制

    该研究采用网络药理学的方法,对补阳还五汤治疗脑梗死的作用机制进行探讨和研究.首先,通过TCMSP数据库、DrugBank数据库和PharmMapper服务器,以口服生物利用度和类药性为限定条件对补阳还五汤所含化学成分进行筛选并预测作用靶点;然后,利用Cytoscape 3.5.1软件构建成分-靶点网络、成分靶蛋白相互作用网络和脑梗死相关靶点蛋白相互作用网络,以及进行网络合并获取补阳还五汤治疗脑梗死的作用靶标;后,通过DAVID在线分析工具和KOBAS 3.0软件对靶标进行基因本体(GO)功能富集分析和KEGG通路分析.虚拟实验预测得到补阳还五汤150个化合物和232个靶点;通过网络合并终确定了208个补阳还五汤治疗脑梗死的候选靶标.结果表明,补阳还五汤可能通过药物的反应、老化、对缺氧的反应、血液凝固等生物过程,并涉及蛋白质结合、酶结合和丝氨酸型内肽酶活性等分子功能发挥治疗脑梗死的作用;其作用机制可能与PI3K-Akt,TNF,HIF-1,cAMP等信号通路有关,其中PI3K-Akt信号通路的调控可能是关键机制之一.

    作者:刘楠;姜云耀;黄婷婷;侯金才;刘建勋 刊期: 2018年第11期

  • 石韦黄酮组分改善糖尿病肾病病理及减轻炎症反应作用研究

    糖尿病肾病(DN)与免疫介导的炎性损伤密切相关.石韦为一味对泌尿系统疾病具有较好功效的药材,其含有较为丰富黄酮组分(SWHT).该研究探讨SWHT对DN及炎症反应的改善作用.该研究以高效液相色谱法(HPLC)分析、鉴定SWHT中的主要活性成分,分析结果显示SWHT主要含有芒果苷和异芒果苷.采用高糖高脂饲料和STZ诱导大鼠DN模型,大鼠随机分为对照组、DN模型组、阳性对照组、SWHT组(50,100,200 mg· kg-1,ig).给予药物干预12周后,采用ELISA检测血清中AGEs,RAGE含量;采用试剂盒检测血肌酐、血尿素氮、尿总蛋白水平;并采用HE染色和透射电镜观察肾组织病理变化和结构;应用Western blot和ELISA法检测肾组织IL-6,TNF-α,IL-1β的蛋白表达及含量.研究结果显示,与模型组相比,SWHT组分显著降低DN大鼠血清中AGEs和RAGE水平;可降低DN大鼠血肌酐、血尿素氮、尿总蛋白水平;改善肾组织病理损伤,降低基底膜增厚;并下调炎症介质IL-6,TNF-α,IL-1β的蛋白表达水平.研究结果提示,SWHT组分具有潜在的抗糖尿病肾病活性,其改善糖尿病肾病的病理损伤与其减轻炎症损伤有关,这为中医临床科学、合理应用石韦药材提供依据,也为进一步开发糖尿病肾病组分中药提供活性组分.

    作者:刘绪林;刘文萍;王丽丽;封亮 刊期: 2018年第11期

  • 鸡血藤的本草沿革与黄酮类成分及其药理学研究进展

    鸡血藤为豆科植物密花豆的干燥藤茎,具有补血活血,调经止痛,舒筋活络的功效,在中国及东南亚国家有广泛应用.通过查阅本草及地方志文献记载,对鸡血藤基原及其药用沿革进行考证,研究不同历史时期品种的变迁情况.黄酮类化合物作为鸡血藤主要的活性成分,据文献统计,迄今已有60个黄酮类化合物被分离得到,按其基本骨架,主要分为异黄酮类、二氢黄酮类、黄烷(醇)类、二氢黄酮醇类、原花青素类、查尔酮类、紫檀烷类、异黄酮醇类、异黄烷类以及橙酮类.现代药理学研究表明,这些黄酮类成分具有调节血液系统、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗菌、抑制黑色素沉着等多种药理活性.通过对鸡血藤的本草沿革、黄酮类成分及其药理活性等方面进行综述,旨在为鸡血藤资源的可持续利用和产业发展提供参考.

    作者:秦双双;朱艳霞;韦坤华;李明杰;缪剑华;张重义 刊期: 2018年第11期

  • 基于“劳则气耗”理论研究气虚证动物模型的建立方法

    该研究根据“劳则气耗”理论,旨在通过比较“神劳”与“体劳”2种因素研究气虚证大鼠模型的建立方法与系统评价体系.分别以水环境睡眠剥夺的“神劳”与以负重力竭游泳的“体劳”为干预因素,按“拟临床研究”的原则建立气虚证动物模型,实验分为正常组、力竭游泳组、睡眠剥夺组与复合组(力竭游泳复合睡眠剥夺),力竭游泳采用负重5%进行,每日1次直至力竭;睡眠剥夺采用水环境多平台睡眠剥夺法,每日随机14 ~ 16 h,复合组则2种方法联合应用,实验周期为6周.采用开场实验观察运动总路程、平均速度、活动时间以及进入中央区域次数,游泳力竭法检测力竭游泳时间,超声心动图检测心功能(LVEF,CO,FS,LVDd),舌象采集分析舌面色彩饱和度,小动物无创脉搏血氧仪测定脉搏幅度,ELISA法检测血清中ATP,ADP含量,血凝仪检测凝血四项.结果显示,睡眠剥夺组自主活动、体质量、运动能力降低明显,神经功能损伤明显,心功能下降,舌面色彩呈现淡白,ATP含量显著降低,ADP显著升高,脉搏幅度显著降低.通过采用“四诊合参”系统评价体系比较“神劳”与“体劳”2种干预因素,以“神劳”为特征的睡眠剥夺方法更适于建立拟临床的气虚证动物模型.

    作者:陈进成;刘建勋;林成仁;任钧国;李磊;郭浩 刊期: 2018年第11期

  • 基于文献挖掘技术研究气虚证的证候特征谱

    作为中医学的一个基本证候,气虚证的证候特征谱研究对于临床诊断的标准化以及现代物质基础研究有重要的意义.该研究采用频数统计、关联规则、复杂网络的文献挖掘方法,选择适宜的算子和算法,利用中国中医科学院中医药信息研究所开发的数据挖掘工具,从中文临床与基础研究的文献中研究疾病、证候、症状、检测指标以及病因之间的关系,挖掘出气虚证的相关特征,研究气虚证候的特征谱.结果发现疲劳、饮食因素为气虚证形成的主要证素;冠心病、心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病、糖尿病、脑卒中等疾病的主要病机为气虚证;乏力、神疲、气短、舌淡等是气虚证的主要临床表现;气虚证相关的生物学指标集群与血脂,心电图,血液流变学,炎症反应,NO,ET,NF-κB信号通路等生物学指标有相关性.气虚证的证候特征谱 利用文献关联规则的方法得到了一定的辨识,为气虚证物质基础研究、诊断标准研究、证候模型的研究、病证结合研究、方药的作用机制研究提供可靠性的特征性、指导性数据.

    作者:陈进成;刘建勋;任钧国;雷蕾;亢力;林成仁 刊期: 2018年第11期

  • 天麻加工炮制、成分分析与体内代谢研究进展

    蒸制法是天麻的传统加工炮制方法,目前对于天麻蒸制机制的研究结果主要集中在便于软化切片,破坏β-糖苷键酶以降低天麻苷分解(杀酶保苷)层面上,炮制机制研究不完善,揭示分析活性成分在体内的代谢过程是阐明中药炮制机制的重要渠道和崭新模式,该文查阅近几年国内外相关文献,对天麻药材的加工炮制、成分分析方法及体内代谢的研究情况进行简要综述,以期为天麻炮制机制的深入研究提供参考.

    作者:杨飞;王信;马传江;陈雅慧;孙爱萍;贾静;曹广尚;辛义周;张学顺 刊期: 2018年第11期

  • 多花蒿中愈创木内酯类成分研究

    采用多种色谱技术对多花蒿干燥地上部分95%乙醇提取物进行化学成分研究,得到10个愈创木内酯类化合物,通过理化数据和波谱分析鉴定其结构分别为多花蒿内酯E(1),tanaphillin (2),1β,10β-epoxydehydroleucodin (3),5-hydroxyleucodin (4),dehydrocostuslactone(5),3-O-methyl-iso-secotanapartholide(6),roxbughianin A(7),dehydroleucodin(8),arglabin (9),8α-acetoxyarglabin(10).化合物1为新化合物,2~7为首次从该植物中分离得到.化合物3对人肝癌细胞Bel-7402较强的细胞毒活性,IC50为5.35 μmol·L-1,化合物6对人胃癌细胞(BGC-823)有较强的细胞毒活性,IC50为2.68 μmol·L-1.

    作者:昝珂;陈筱清;屠鹏飞 刊期: 2018年第11期

  • 北京地区侵染菘蓝的黄瓜花叶病毒分子鉴定

    为了鉴定中国医学科学院药用植物研究所栽培地中菘蓝花叶病样品中可能的病毒,采用反转录(reverse transcription,RT)-PCR方法,以马铃薯Y病毒属Potyvirus、马铃薯卷叶病毒属Polerovirus和烟草花叶病毒属Tobamovirus的通用检测引物,蚕豆萎蔫病毒2号(broad bean wilt virus 2,BBWV2)和黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)的特异检测引物进行分子检测.结果表明,用CMV特异引物扩增到1条657个核苷酸(nt)的条带,测序后经BLAST分析发现,该条带与CMV-Vi的核苷酸相似度高达99%,氨基酸相似度为100%,命名为CMV菘蓝分离物(CMV-It).根据CMV CP基因的核苷酸序列构建系统发育进化树表明,CMV-It与CMV-K分离物的亲缘关系较近,属于CMV I亚组.该研究首次用RT-PCR方法鉴定了菘蓝花叶病样品被CMV侵染,并分析了其CP基因序列特征,为菘蓝病毒病的研究及田间防治提供了依据.

    作者:董佳莉;王蓉;刘琨;李勇;丁万隆 刊期: 2018年第11期

  • 普洱茶素Ⅰ改善糖脂代谢紊乱的药效评价及作用机制研究

    普洱茶是以云南特产的普洱茶Camellia assamica的干燥嫩叶为原料,加工而成的微生物后发酵茶.普洱茶素类化合物是微生物发酵过程中产生的特征性成分.该文探讨了普洱茶素Ⅰ(puerin Ⅰ,P1)对糖脂代谢紊乱ApoE-/-小鼠的治疗效果及作用机制.结果显示,P1能显著降低高脂高糖诱导的ApoE-/-小鼠的血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和空腹血糖(FBG),改善小鼠的注射胰岛素耐量(ITT)和注射葡萄糖糖耐量(IPGTT).进一步实验证明P1可分别通过抑制肠道α-葡萄糖苷酶活性和激活肝细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达降低空腹血糖和血浆总胆固醇含量.该研究确认了普洱茶特征性成分P1对糖尿病并发高脂血症ApoE-/-小鼠的治疗作用,并阐明其作用机制,旨在为普洱茶的药物研发提供有益探索.

    作者:顾小盼;吴臻;靳凤玉;潘勃;赵云芳;李军;郑姣;屠鹏飞 刊期: 2018年第11期

  • HPLC特征指纹图谱结合化学计量学比较川牛膝及其混淆品、掺混品化学成分差异

    川牛膝的主要混淆品为同属植物头花杯苋的根,研究报道其在性味和药理活性上存有明显差异,仅可作为地方习惯用药,不得代替川牛膝入药.但因头花杯苋外观形态上与川牛膝十分相似,且杯苋甾酮含量也能达到现行药典限量,导致市场上多以冒充或掺混形式出售,这严重地影响了川牛膝的临床用药安全和道地药材开发.鉴于此,该文采用HPLC特征指纹图谱技术试图揭示川牛膝、混淆品头花杯苋、掺混川牛膝在多组分下的化学特征成分差异,以期为川牛膝区别用药和真伪鉴别提供有力支撑.通过测得川牛膝及其混淆品、掺混品色谱图,得出65个不同组分,以建立26×65的峰面积数据矩阵,并进行特征峰差异分析、相似度分析、聚类分析和主成分分析.特征峰差异分析得出头花杯苋及其掺混品特征峰较川牛膝多且响应值高,筛选出的9个特征峰用以鉴别伪品头花杯苋,其中2个可用以鉴别出掺混5%川牛膝,且9个特征峰的光谱图大多类似于皂苷类成分的末端吸收光谱图,表明头花杯苋可能含有大量皂苷类成分.以建立的川牛膝特征指纹图谱为参照,相似度分析得出川牛膝相似度均大于0.942,而头花杯苋、掺混川牛膝相似度分别小于0.383,0.399.聚类分析树状图和主成分得分三维图均能将川牛膝、头花杯苋、掺混川牛膝明显的分为3类.以上研究结果均表明川牛膝、头花杯苋、掺混川牛膝在化学组分上表现出明显的差异,当区别用药,不可混昆淆.

    作者:施崇精;王姗姗;程中琴;刘小妹;袁强华;刘莉;呼梅;宋英 刊期: 2018年第11期

  • 沙苑子总黄酮对肾阳虚高脂血症模型大鼠ERα介导的调脂作用机制研究

    绝经期妇女随着卵巢功能衰退,体内雌激素水平下降明显,出现脂代谢紊乱.现代临床上多采用雌激素替代疗法,长期使用该疗法,易出现多种严重并发症,中医常采用温补肾阳,化浊降脂的治法.课题组前期研究亦表明中药传统温阳药物沙苑子具有良好的调节血脂的作用,而肝脏是体内调节脂肪代谢主要的器官,在脂代谢紊乱中发挥重要作用.故该实验以观察沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症模型大鼠肝脂以及对肝脏雌激素受体的影响为切入点,探讨沙苑子调脂作用的物质基础及机制,阐明中药调脂的优势和特色.该实验采用双侧卵巢切除术联合6周喂养高脂饲料制备肾阳虚高脂血症大鼠模型,假手术组和模型组灌胃浓度0.9%生理盐水;雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg·kg-1);沙苑子低、中、高剂量组灌胃剂量分别为28.5,57,114 mg·kg-1(相当于正常成人沙苑子生药量的7.5,15,30 g),用药体积按每100 g体质量灌胃1 mL计算,持续给药8周后取材.检测肝脏TG,TC,LDL-C,HDL-C水平、肝脏质量、肝脏指数、子宫质量、子宫指数、血清雌激素水平、FSH水平以及肝脏病理切片、肝脏雌激素受体表达水平.与模型组相比,沙苑子总黄酮高剂量组大鼠肝脏TG,TC,LDL-C水平显著降低(P<0.001,P<0.05),肝脏HDL-C水平显著升高(P<0.05).与模型组相比,雌激素组大鼠血清激素水平显著升高(P<0.001),血清FSH水平显著降低(P<0.001).与假手术组相比,PCR结果显示模型组大鼠ERα mRNA表达量显著减少(P<0.01);与模型组相比,雌激素组大鼠ERα mRNA表达量显著增加(P<0.001),沙苑子总黄酮中、高剂量组大鼠ERα mRNA表达量均增加(P <0.01,P<0.001).该实验研究结果表明,沙苑子总黄酮是沙苑子发挥调脂作用的主要有效成分,其调脂作用机制可能是通过增强雌激素受体的敏感性或增加雌激素受体的数量,放大雌激素受体后传导的信号,产生调脂作用.

    作者:唐潇然;王景霞;付璐;姚骏凯;李思明;高学敏;张建军 刊期: 2018年第11期

  • 3种温郁金根茎炮制品的UPLC指纹图谱与多成分含量测定研究

    建立UPLC同时测定温郁金根茎3种炮制品中5种倍半萜类化合物含量的方法,分别构建3种炮制品的UPLC指纹图谱,用于3种温郁金根茎炮制品的质量分析;采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),乙腈-水梯度洗脱,体积流量0.3 mL· min-1;柱温30℃;检测波长214 nm;进样量1μL进行含量测定;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)进行相似度评价,并使用simca-p14.1软件进行HCA,PCA与OPLS-DA分析,寻找3种饮片的差异成分.莪术二酮、莪术醇、吉马酮、呋喃二烯、β-榄香烯分别在10.8 ~ 320 mg·L-1(r =0.999 9),10.36 ~ 259 mg·L-1(r=0.998 1),10.54 ~263.5 mg·L-1(r=0.999 3),30.2 ~755 mg·L-1(r =0.999 6),34.38 ~862 mg·L-1(r =0.999 9)时与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.75%,98.69%,98.63%,99.76%,99.57%,RSD分别为2.7%,1.5%,1.3%,2.5%,0.87%.30批样品相似度>0.9,表明样品一致性良好,进一步对样品进行模式识别,可以明显归为3类,并分别找出了3种饮片之间的差异色谱峰.结果表明,温郁金根茎经炮制加工后物质基础发生明显变化,为3种饮片临床合理用药及质量标准的制定提供研究依据.

    作者:郝敏;陆兔林;毛春芹;季德;李林;苏联麟;顾丽亚;李平;秦思睿 刊期: 2018年第11期

  • 益气活血方对糖尿病GK大鼠肾脏保护作用的研究

    研究益气活血方对糖尿病GK大鼠肾脏保护作用.通过8只雄性Wistar大鼠作为正常对照组,16只雄性GK大鼠按体质量、血糖值随机分为模型组、益气活血方组,每组8只,连续给药6周.每周称大鼠体质量,并测空腹血糖(FBG);第3,6周末检测糖化血红蛋白值(HbALc)与24h代谢值并收集尿液,生化法检测尿糖(U-GLU)、尿肌酐(U-CREA)、尿蛋白总量(U-TP),计算24h蛋白排泄率(UAER);6周末,麻醉处死大鼠,心脏取血,生化法检测血清中肌酐(CREA)、尿酸(UA)及总胆固醇(CHOL),手工法检测血清谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px);取双肾,称重,计算肾肥大指数,将肾置中性甲醛,PAS染色,光镜下观察病理变化.结果显示,与正常组相比,模型组FBG,HbALc,24 h代谢值,U-GLU,UAER,血清CREA,UA,CHOL,肾肥大指数均显著性升高(P<0.05),体质量增长速度、血清GSH-Px均显著性降低(P<0.05),模型组大鼠肾病理切片有明显肾小球损伤及结构改变;与模型组相比,给药组大鼠血清GSH-Px显著性升高(P<0.05),FBG,HbALc,24 h代谢值,U-GLU,UAER,血清CREA,UA,CHOL,肾肥大指数显著性降低(P<0.05),给药组大鼠肾病理切片的肾小球损伤及结构改变有所改善.结果表明益气活血方可明显升高糖尿病GK大鼠的血清GSH-Px,降低FBG,HbALc,24h代谢值,U-GLU,UAER,血清CREA,UA,CHOL,肾肥大指数,改善肾脏病理.

    作者:邓九零;陈亮;寿旗扬;骆启晗;王慧铭;王辉 刊期: 2018年第11期

  • 黄花蒿CMK基因的克隆与功能分析

    青蒿素是治疗疟疾的首选药物,黄花蒿为其唯一的药源植物.该研究首次从黄花蒿中克隆到青蒿素生物合成关键基因AaCMK,其cDNA全长为1 462 bp,ORF 1 197 bp,编码399个氨基酸.研究表明:AaCMK在黄花蒿各部位中均有表达,但在腺毛体中表达量极高,且该基因的表达受外源MeJA的强烈诱导;亚细胞定位结果显示该基因定位于叶绿体中;在过表达AaCMK拟南芥中,叶绿素a,叶绿素b及类胡萝卜素的含量极显著提高,证明AaCMK是利用代谢工程技术提高萜类物质青蒿素生物合成的一个重要候选基因,为利用代谢工程提高青蒿素含量奠定了基础.

    作者:范雨芳;张曼;向礼恩;张芳源;兰小中;廖志华;杨春贤 刊期: 2018年第11期

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