李坤；孙丽洲；吴恒芳；杨笛；张寄南
目的:建立溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,研究溃克灵(KKL)对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及对血清白细胞介素-8(IL-8)产生和表达的影响,探讨KKL防治溃疡性结肠炎的作用机制.方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)法(100 mg/kg TNBS+50%的乙醇0.25ml)灌肠复制出溃疡性结肠炎大鼠模型.将72只大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶(SASP)组、KKL大、中、小剂量组,观察结肠大体形态损伤、组织学变化,ELISA法测定各组大鼠血清IL-8水平.结果:与模型组相比,KKL各组、SASP组结肠大体形态损伤、组织学变化显著改善,血清IL-8水平显著降低(P<0.01).结论:溃克灵对大鼠UC有显著的治疗作用,抑制促炎因子IL-8的产生和表达可能是其治疗机制之一.
作者：周红光；陈海彬；徐肇敏；于成功 刊期： 2009年第04期
目的:微小RNA(microRNA)异常在肿瘤发生发展中起重要作用,本研究探讨microRNA mir219在肝细胞癌中的异常甲基化和异常表达,可能参与肝细胞癌的发生发展过程.方法:采用pyrosequence、TA克隆测序等方法检测正常肝组织、肝细胞癌细胞株和肝癌标本中mir219上游预测启动子区域甲基化,Taqman实时定量Rt-PCR测定肿瘤组织表达.结果:与正常肝脏组织相比,肝癌细胞株、肝癌标本中mir219上游预测启动子区域中茎环区和上游1kb区域的CpG岛存在高度甲基化.肝癌细胞株、肝癌标本中mir219表达显著下调,与其异常甲基化相关.结论:肝癌中微小RNA mir219茎环序列上游1094 bp区域存在启动子区异常甲基化,表达下调,提示mir219异常可能在肝细胞癌发生发展巾起重要作用,是潜在的抑癌基因.
作者：韩蓓；钱祝银；高文涛 刊期： 2009年第04期
目的:检测肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织中波形蛋白(vimentin)的表达,研究其表达水平与肿瘤临床病理特征及临床转归的相关性.方法:收集行肾根治性切除术并经病理证实为肾细胞癌的103例病例(92例为透明细胞癌,11例为乳头状细胞癌),平均随访时间为51.2个月,通过Western Blot检测肿瘤标本中vimentin蛋白的表达情况,对肿瘤大小、分期、分级、转移及生存率等临床病理资料与vimentin表达水平的相关性行统计学分析.结果:肾癌中vimentin蛋白的表达水平与非肿瘤组织相比显著增加,并且与肿瘤大小(P=0.002)、转移(P<0.001)、pT分期(P<0.001)、分级(P<0.001)、存活率(95.8%vs72.7%,P=0.002)有相关性.单变量分析显示vimentin的表达水平对肾细胞癌发展及预后具有预测意义(P<0.05).结论:本研究的结果显示vimentin的高表达与肾细胞癌的进展呈正相关,检测vimentin表达水平可用于肾癌分期、分级及预后判断.
作者：李普；秦超；殷长军；孟小鑫；杨健；朱建 刊期： 2009年第04期
目的:分离,克隆编码β-Smac的基因,观察胃癌细胞SGC7901中β-Smac基闪过表达对顺铂敏感性的影响.方法:从胃癌细胞株SGC7901扩增β-Smac的cDNA.构建含β-Smac基因cDNA的表达载体pcDNA3.1-β-Smac.将pcDNA3.1-β-Smac质粒转入SGC7901细胞;用RT-PCR、Western blot分别从核酸和蛋白水平检测外源基因的表达情况.选用顺铂(0、2、8、12 μg/ml)处理转染pcDNA3.1(对照组)或pcDNA3.1-β-Smac(实验组)48 h后的SGC7901细胞24 h,流式细胞仪分析细胞凋亡百分率.结果:成功构建了含β-Smac基闽的表达质粒,核酸序列分析显示克隆的β-Smac基因序列与GeneBank中登记的β-Smac基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确.同对照组比较,实验组转染24 h后,SGC7901细胞β-Smac mRNA水平明显增高,48 h后Western blot在β-Smac预期位置检测到Flag蛋白特异性条带.顺铂处理24 h后,仅2 μg/ml组显示出实验组和对照组细胞凋亡差异有显著性(P=0.009),而其余各组间均未显示有统计学差异.结论:成功构建含β-Smac基因序列的重组质粒并转染靶细胞,外源性β-Smac基因过表达后,未显示能显著提高人胃癌细胞株SGC7901对顺铂的敏感性.
作者：洪婷婷；陆明洁；葛红梅；束永前；刘平 刊期： 2009年第04期
目的:比较胰腺癌患者与健康志愿者血清蛋白的差异以寻找候选血清肿瘤标志物,为胰腺癌早期诊断提供依据.方法:通过免疫亲合柱去除丰度高的14种血清蛋白,用双向电泳分离蛋白并比较差异.选取在胰腺癌患者血清中明显差异表达蛋白点,行质谱鉴定和生物信息学分析.结果:建立了稳定性、重复性良好的凝胶蛋白图谱.对筛选出的在胰腺癌患者血清中明显差异表达的78个蛋白点,共有54个蛋白点被成功鉴定,其中胰腺癌患者血清中高表达者29个,低表达者25个.结论:胰腺癌患者、健康志愿者血清蛋白之间存在明显差异,通过蛋白质组学方法可筛选并鉴定出这些差异蛋白,后者有望为早期诊断胰腺癌提供依据.
作者：徐树建；徐泽宽；王富强；朱毅；苗毅 刊期： 2009年第04期
目的:观察医用臭氧不同注射方式对兔腰椎间盘正常髓核的作用以及安全性.方法:家兔20只,于透视下用20 G儿童穿刺针刺入家兔腰椎间盘中心部,抽取5 ml浓度为40 μg/ml臭氧,经穿刺针注入3 ml,在椎间孔处将剩余气体注入椎旁组织.其中L4～5为椎间盘内单点注射,L5～6为椎间盘内多点注射,以L3～4椎间盘作为正常对照.20只兔注射臭氧1次,分别在术后1、2、3、4周后处死取标本,将实验和正常对照标本中椎间盘髓核作大体、光镜下观察,并对光镜下髓核内细胞计数行统计学分析.结果:术后实验动物均无严重的行为异常.各手术腰椎间盘术后1周腰椎间盘髓核水分明显减少,外形萎缩,4周髓核干涸,完全呈灰白色干酪样.多点注射组髓核内细胞计数比较单点注射组明显减少,两者差异具有显著性.结论:本研究显示椎间盘内40 μg/ml臭氧注射安全性较好,臭氧对髓核缓慢萎缩作用多点注射强于单点注射方式,为该技术在临床的应用提供了实验依据.
作者：姜建威；吴清华；吴震海；李新胜；成岗；顾琛 刊期： 2009年第04期
目的:评价氟比洛芬酯超前镇痛联合异丙酚、瑞芬太尼静脉麻醉在小儿疝修补术中的麻醉效果.方法:年龄3～7岁、拟择期行疝修补术的患儿90例,ASA I级,随机分为氯胺酮组(K组)、丙泊酚复合瑞芬太尼组(P组)和氟比洛芬酯超前镇痛联合异丙酚、瑞芬太尼组(F组),每组30例.记录术前、切皮、缝合皮肤时的心率(HR),记录患儿停药后清醒时间,随访术后2 h烦躁发生率.结果:K组患儿切皮和缝合皮肤时心率较切皮前增高,同时亦高于同时点的P组和F组心率(P<0.05).停药后P组、F组苏醒时间短于K组(P<0.05).在术后2 h,P组烦躁发生率较K组、F组增高(P<0.05).结论:氟比洛芬酯超前镇痛联合异丙酚、瑞芬太尼麻醉用于小儿疝修补术,苏醒快,术后烦躁发生率低,可以常规使用.
作者：姚乃修；颜学军 刊期： 2009年第04期
目的:建立用微波消解-冷原子吸收法测定螺旋藻粉中的痕量汞的方法.方法:螺旋藻粉样品经过微波消解后,其中的汞被氧化为离子状态的汞,利用冷原子吸收测汞仪对样品进行测定.结果:汞浓度在0～5.00 μg/L的范围内具有较好的线性,相关系数达到0.9999,方法检出限为0.013 μg/L,且对国家一级标准物质贻贝(GBW08571)的验证结果与标准值吻合,回收率为90%-108%,样品测定相对标准偏差为4.7%.结论:微波消解-冷原子吸收法灵敏度高,操作简单快捷,结果可靠,适合于测定螺旋藻粉中的痕量汞.
作者：杨俊；毛丽莎；姜杰；陈裕华；黎雪慧；张慧敏 刊期： 2009年第04期
目的:筛选心肌缺血相关的蛋白质,以期发现心肌缺血特征性的差异蛋白质或蛋白质群.方法:对模型动物小型猪施行冠脉Ameroid环缩术,通过对模型动物的动态观察,综合评价,并参照WHO冠心病心绞痛诊断标准,明确术后28天符合心肌缺血诊断.术后28天,动物前腔静脉取血,血样处理后进行荧光差异蛋白电泳(2D-DIGE),对差异蛋白点进行MALDI-TOF/TOF分析,获取蛋白样品的肽质量指纹图.结果:共筛选出31个差异表达蛋白质点,其中17个蛋白质点在4周模型组中下调,14个蛋白点上调.对其中15个蛋白点采用质谱技术成功鉴定.白蛋白、血红素蛋白、烟酸受体在4周模型组中低表达,CH4 and secrete domain of Swine IgM、mutated immunoglobulin heavy chain、肌球蛋白、磷脂酶C、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸相关蛋白-1、Ig gamma 4 chain constant region在4周模型组中高表达.结论:初步发现碱性磷酸酶、肌球蛋白、白细胞抗原相关酪蛋白磷酸酶相关蛋白、磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白1、血红素蛋白、烟酸受体可能与心肌缺血发生发展相关.
作者：刘蕾；王伟；宋剑南；郭淑贞；马雅銮；陈冰；许文玉 刊期： 2009年第04期
目的:探讨细胞游离DNA含量及DNA完整性在良恶性胸腹水中的临床意义.方法:应用实时ALU-qPCR(115 bp、247 bp)方法分析28例良性胸腹水患者和38例恶性胸腹水患者的胸腹水中细胞游离DNA含量以及DNA完整性的情况.结果:ALU247片段含量在良恶性胸腹水组中有统计学差异(P<0.05),但ALU115片段在两组中并无统计学差异(P>0.05);恶性胸腹水中DNA完整性明显高于良性对照组(P<0.05).DNA完整性的ROC曲线下面积为0.716(P<0.01).结论:恶性胸腹水有较高的ALU247片度含量以及DNA完整性,其中DNA完整性可能是一个很有价值的诊断指标.
作者：殷霞丽；谢丽；禹立霞；钱晓萍；刘宝瑞 刊期： 2009年第04期
目的:运用二维超声斑点追踪技术评价经皮室间隔封堵术前后患者心脏扭转运动的变化.方法:检测18例室间隔缺损患者封堵术前、术后第3天、术后1个月、术后3个月的常规心脏二维多普勒超声参数,并运用二维斑点追踪技术对患者的左心室旋转及扭转运动进行分析,以探讨室间隔缺损封堵术对其心脏扭转运动的影响.结果:封堵术后第3天,舒张期末左室内径(LVEDd)、左室舒张末容积(LVEDV)较术前减低较明显,左心室的基底部、心尖部的旋转角度及整体的扭转运动的角度较术前稍有减低.术后1个月、术后3个月,LVEDd、LVEDV较术前仍有降低,但降低的程度有减小的趋势;而左心室的基底部、心尖部的旋转角度及整体的扭转运动的角度仍有降低,降低的程度以术后1个月明显,以后降低程度减小.患者封堵术前、术后第3天、术后1个月、术后3个月的LVEF稍有改变,但差异尤统计学意义.无论是封堵术前、术后第3天、术后1个月、还是术后3个月有,病人的左心室的基底部、心尖部的旋转角度峰值及整体的扭转运动的角度峰值均和LVEF呈线性相关,且以左室整体的扭转运动的角度峰值和LVEF的相关性好.结论:经皮室间隔缺损封堵术通过逆转左室的重构而改善左室的扭转运动,且左室整体的扭转运动与LVEF的相关性好.
作者：庄燕；许迪；雍永宏；陈银花；李晓飞 刊期： 2009年第04期
目的:研究新型ATP敏感性钾通道开放剂埃他卡林(IVT)对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:雄性SD大鼠36只随机分成对照组、HPH模型组、IPT干预组,每组12只.IPT干预组给予IPT1.5 mg/(kg·d)灌胃,对照组及HPH模型组给予0.9%NaCl 5 ml/(kg·d)灌胃.HPH组及IPT干预组在(10.0 ±0.5)%氧浓度下饲养,每天8 h.每周6天,4周时测定平均肺动脉压(mPAP)、RV/(LV+S),逆转录聚合酶链式反应(Rr-PCR)和Western-blot技术检测各组肺动脉主干VEGF mRNA和蛋白的表达.结果:①HPH模型组大鼠mPAP和RV/(LV+S)显著高于对照组(P<0.01),IPT干预组mPAP和RV/(LV+S)较HPH模型组显著下降(P<0.01).②HPH模型组大鼠肺动脉VEGF mRNA及蛋白表达高于对照组,两者具有显著统计学意义(P<0.01),IPT干预组与HPH模型组比较,VEGF mRNA及蛋白表达均下降(P<0.01);IPT干预组与对照组比较,VEGF mRNA及蛋白表达差异无显著性(P>0.05).结论:HPH模型大鼠肺动脉VEGF mRNA及蛋白表达增加,IPT可明显抑制慢性低氧大鼠肺动脉VEGF mRNA和蛋白的表达.
作者：王珏；陈建波；解卫平；金宇；王虹 刊期： 2009年第04期
目的:研究β2肾上腺素受体阻滞剂对雌激素刺激大鼠成骨细胞分化与增殖的影响.方法:将不同浓度的β2肾上腺素受体阻滞剂(ICI118551)加入含雌激素(17β-E2)培养的第2代大鼠成骨细胞中,分别于培养3、6、9、12天时,使用PNPP法和放免方法检测成骨细胞培养基中的碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素含量,并用MTT法检测成骨细胞的增殖率.结果:ICI118551可提高雌激素刺激成骨细胞培养上清中碱性磷酸酶浓度促进细胞增殖,尤其当其浓度为10-5及10-6mol/L时,但对成骨细胞培养上清中骨钙素水平的影响不显著.结论:β2肾上腺素受体阻滞剂能够显著促进雌激素刺激大鼠成骨细胞的释放和增殖作用.
作者：程庆华；余利鹏；刘锋；胡安全 刊期： 2009年第04期
目的:探讨孕早期胎儿颈部透明层(NT)增厚在产前超声筛查染色体异常(特别是21-三体综合征)中的价值.方法:检索Cochrane图书馆、PubMed、OVID、Springer数据库、中国期刊网和中国生物医学文献数据库(1990年1月至2008年8月)中的中英文文献,按照诊断试验的纳入标准筛选文献,收集所有相关的诊断试验文献,应用Meta-DiSc 1.4软件对符合条件的研究结果进行Meta分析.结果:共纳入文献14篇,检查胎儿共计162 992人.11篇文献对孕早期胎儿NT≥第95百分位对染色体异常的诊断价值进行了分析,汇总灵敏度、特异性和曲线下面积(AUC)分别为78.8%、92.1%和0.891;12篇文献对孕早期胎儿NT≥第95百分位对21-三体综合征的诊断价值进行了分析,汇总灵敏度、特异性和AUC分别为81.3%、92.6%和0.883.结论:孕早期NT增厚对染色体异常(特别是21-三体综合征)产前诊断的敏感性、特异性和诊断的准确性均较高,可用于孕早期染色体异常的产前筛查.
作者：余章斌；韩树萍；郭锡熔 刊期： 2009年第04期
目的:观察安博立酸(Ambrolic acid,AmbA)对人胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响,初步探讨AmbA对胃癌的体外抗肿瘤活性.方法:将AmbA作用于SGC-7901细胞株,MTT法测定AmbA对SGC-7901细胞增殖的抑制率;光学显微镜观察AmbA作用引起的细胞形态变化;流式细胞仪检测AmbA作用后细胞凋亡情况及进行细胞周期分析.结果:MTT实验结果表明,AmbA对SGC-7901细胞增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖性;流式细胞仪检测分析表明.AmbA可使细胞阻滞于S期,其作用呈剂量依赖性.结论:AmbA对SGC-7901人胃癌细胞的生长具有明显的抑制作用,其作用的主要途径可能是使细胞阻滞于S期并诱导细胞凋亡.
作者：施建民；孙婧；张国铎；禹立霞；钱晓萍；刘宝瑞 刊期： 2009年第04期
目的:用目前常用的干细胞分离方法对正常SD大鼠的胰腺成体干细胞进行分离、培养和鉴定,为胰腺癌干细胞的进一步研究奠定基础.方法:选取正常SD大鼠胰腺用胶原酶P消化分离,并用低血清无糖培养基纯化胰腺细胞,以RT-PCR,免疫组化和Western blot方法鉴定胰腺成体干细胞标志物巢蛋白(nestin)并通过RT-PCR证明细胞中存在ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member 2).结果:成功分离到所需胰腺成体干细胞,并通过以上3种方法证明分离所得细胞表达巢蛋白.结论:以胶原酶P作为消化液,低血清无糖培养作为分离方法能够成功的从正常胰腺中分离得胰腺成体干细胞.
作者：张烨；任华健；卫积书；吴峻立；徐泽宽；苗毅 刊期： 2009年第04期
目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用.方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Westem-blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况.结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-87 24 h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72 h,抑制作用逐渐增强.流式细胞术结果显示RAD001作用24 h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0～G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感.Western-blot结果显示RAD001作用24 h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化.结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用.
作者：刘莹；朱祖安；崔涛 刊期： 2009年第04期
目的:探讨高糖对大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1表达的影响及Resveratrol的干预作用.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞.①分为正常对照组(NC组,匍萄糖浓度5.6 mmol/L)、高糖组(HG组,葡萄糖浓度30 mmol/L),分别观察24、48、72 h;②分为NC组、HC组、Resveratrol组(Res组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L+Resvemtrol 20 μmol/L)和高糖+Rcsvcratrol组(HG+Res 组,葡萄糖浓度30 mmol/L+Resveratrol浓度分别为5、10、15、20 μmol/L),各组细胞分別培养48 h.用半定量RT-PCR和Western blotting法检测细胞内TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化.结果:①与NC组相比,HG刺激后大鼠系膜细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达明显增加,差异均有显著性,P值均<0.01;②与HC组相比,HG+Resveratrol干预后,大鼠系膜细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性减少,差异均有显著性(P值分别为<0.05,<0.01).Res组和NC组之间TGF-β1 mRNA和蛋白表达的差异无显著性(P>0.05).结论:高糖能上调大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达,Resveratrol可能通过抑制高糖引起的系膜细胞TGF-β1高表达而在糖尿病肾病中起治疗作用.
作者：胡爱平；游娜；徐家蓉；蒋秀琴；缪珩；鲁一兵 刊期： 2009年第04期
目的:探讨阴道超声测量子宫内膜厚度对预测异位妊娠的应用价值.方法:采用阴道超声及血p2HCG对626例异位妊娠疑似患者随访比较,同时观察子宫内膜厚度.结果:626例异位妊娠疑似患者中427例确诊为异位妊娠,97例为自然流产,102例为宫内孕.测得异位妊娠、自然流产及正常宫内孕内膜厚度分别为(7.95 ± 1.12)mm、(11.16±1.89)mm、(12.15±1.65)mm,异位妊娠与宫内孕分别相比,子宫内膜厚度之间差异有统计学意义(P<0.05),而其他内部比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:超声测定子宫内膜厚度对预测异位妊娠患者具有参考价值.
作者：金艳；丁竹筠 刊期： 2009年第04期
目的:研究食管鳞癌中ITGA6(integrin α6)、CTHRC1(collagen triple helix repeat containing 1)基因的表达,并探讨其与食管鳞癌临床病理参数之间的关系.方法:应用免疫组化S-P法分析46例人食管鳞癌组织及10例食管正常组织中ITGA6、CTHRC1蛋白的表达情况.结果:①ITGA6、CTHRC1在食管鳞癌组织中有增强表达,表达率分别为71.7%(33/46)和56.5%(26/46),而在10例正常食管组织中均未见表达.②ITGA6、CTHRC1在淋巴结转移组中的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(P<0.05).③ITGA6、CTHRC1表达与年龄、性别、肿瘤大小及病理类型无明显相关性(P>0.05).结论:ITGA6、CTHRC1可能与食管鳞癌侵袭、转移相关,有望成为食管鳞癌新的治疗靶点.
作者：刘伟；施瑞华；朱宏；郝波 刊期： 2009年第04期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
