李善文；甘卫华；陈荣华；张爱青；潘晓勤；费莉
目的:探讨Runx1基因mRNA表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展的关系.方法:取37例NSCLC标本,10例肺良性病变旁正常肺组织,应用逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测NSCLC中Runx1的mRNA表达水平,进行统计分析.结果:肺癌肿瘤组织中Runx1基因表达水平显著低于肺良性病变旁正常肺组织(P＜0.01),肺癌组织中Runx1基因表达水平降低与淋巴结转移相关(P＜0.05),与肺癌组织学类型、细胞分化程度以及患者的年龄、性别无关(P＞0.05).结论:与良性病变旁正常肺组织相比,Runx1基因的mRNA水平在肿瘤组织中表达下降,并且与淋巴结转移相关,提示其可能参与肺癌的发生发展过程.
作者：吴卫兵；陈亮；王俊；陈广明 刊期： 2009年第05期
目的:观察奥沙利铂(OXA)联合氟尿嘧啶(5-Fu)、亚叶酸钙(CF)组成的FOLFOX7方案治疗晚期胃癌的疗效和不良反应.方法:43例晚期胃癌患者接受奥沙利铂130 mg/m2第1天静脉滴注3 h;亚叶酸钙400 mg/m2,第1天静脉滴注2 h;氟尿嘧啶2 400 mg/m2,静脉持续滴注46 h,14天为1周期,应用2个周期后评价疗效.结果:43例共完成178个周期化疗,中位数4个周期(1～6个周期).41例可评价疗效,总有效率(ORR)48.7%(20/41),完全缓解(CR)4.8%(2/41),部分缓解(PR)43.9%(18/41),稳定(SD)41.4%(17/41),进展(PD)9.7%(4/41).1年生存率为43.9%(18/41).43例可评价毒性,主要的不良反应为胃肠道反应,发生率88.3%(38/41),白细胞减少39.6%(17/43),神经毒性11.6%(5/43).结论:FOLFOX7方案治疗晚期胃癌不良反应可耐受.
作者：姜洪心；薛景；吴锦昌 刊期： 2009年第05期
目的:探讨SLC26A5基因IVS2-2A＞G突变与中国汉族非综合征型感音神经性聋的相关性.方法:收集南京市聋校非综合征型感音神经性聋患者120例及同地区听力正常人100例外周血样本,常规方法提取DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增SLC26A5 IVS2-2区域,对PCR产物直接测序进行突变性质的鉴定.结果:所有研究对象的基因区域均扩增成功,序列分析在120名散发聋患者及100例听力正常人中均未检测到SLC26A5基因IVS2-2位点任何形式的碱基变异.结论:SLC26A5 IVS2-2A＞G在中国汉族非综合征耳聋及听力正常人群中携带率较低或无突变,其与遗传聋的相关性需进一步研究评价.
作者：刘丽君；魏钦俊；陈智斌；鲁雅洁；曹新；邢光前 刊期： 2009年第05期
目的:构建针对大鼠ATF3(activating transcription factor 3,ATF3)基因的特异性短发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒.方法:用DNA重组技术将针对大鼠ATF3基因不同位点所设计的5个shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中.在酶切分析及序列测定后,用脂质体将5个shRNA分别转染至大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC),随后用Western blot检测蛋白的相对表达量来筛选佳沉默效率的shRNA.结果:限制性酶切及核酸序列分析证明重组质粒构建正确.Western blot证实在重组质粒中,shATF3-1具有佳的沉默效率.结论:成功构建了针对ATF3基因的shRNA的真核表达质粒,并且该shRNA可以特异性地降低大鼠肾小球系膜细胞ATF3的蛋白表达.
作者：任琎；姜孝明；夏梅；赵聃；王迎伟 刊期： 2009年第05期
目的:探讨Rac1、HIF-1α mRNA和蛋白在缺氧的人食管鳞癌Eca109细胞株中的表达及其对细胞增殖水平的影响.方法:应用半定量RT-PCR、Western blot法检测缺氧条件下Eca109细胞株Rac1、HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平;应用半定量RT-PCR和MTT法检测常氧和缺氧下Rac1特异性抑制剂NSC23766处理后人食管鳞癌Eca109细胞株HIF-1α的mRNA表达水平和细胞增殖水平.结果:缺氧条件下,人食管鳞癌Eca109细胞株中Rac1、HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平均明显增高,约24 h到达高峰.用NSC23766处理人食管鳞癌Eca109细胞株后,HIF-1α mRNA表达水平降低,细胞增殖明显受到抑制.结论:Rac1和HIF-1α在缺氧状态下被激活,且可能均与缺氧诱导的肿瘤增殖相关.
作者：刘梅芳；施瑞华；张国新；郝波；朱宏；周希乔 刊期： 2009年第05期
目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用.方法:10 μmol/L LPA孵育MDA-MB-231细胞4 h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布改变;用二维电泳法分离并比较细胞内骨架组分及胞浆组分中磷酸化和非磷酸化的肌动蛋白含量.结果:10 μmol/L浓度的LPA可明显增加MDA-MB-231细胞迁移速度.LPA处理后细胞内F-肌动蛋白含量明显增加,而肌动蛋白总量并未出现明显变化.此外,LPA处理还可明显升高细胞内胞浆组分中磷酸化的肌动蛋白量;在骨架组分中,肌动蛋白仅以磷酸化的形式存在,且含量在LPA刺激前后无明显差异.结论:LPA可促进乳腺癌细胞的迁移能力及细胞骨架发生聚合,其作用可能与其改变细胞胞浆中肌动蛋白的磷酸化水平有关.
作者：杜军；杨郁；戈应滨；顾洛 刊期： 2009年第05期
目的:本文研究黄连素治疗2型糖尿病的适合人群.方法:72例糖尿病分为2组:肥胖组40例,非肥胖组32例.采用黄连素0.02 g/(kg.d),分3次口服,治疗观察8～10周,观察治疗前后的体质指数(BMI)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、血总胆固醇(TC)、血甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、肝功(ALT、AST、GGT、B-T)及肾功(BUN、Cr).利用稳态模式胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(HOMA-IAI)评价治疗前后胰岛素抵抗及胰岛素敏感性.结果:所有病例经黄连素(BBR)治疗后,FPG、HbA1c、IR、BMI、TC、TG、LDL均明显下降,治疗前后具有显著性差异(P≤0.001).肥胖组较非肥胖组存在更明显的胰岛素抵抗(P＜0.01),经BBR治疗后所有病例胰岛素抵抗均有显著改善(P＜0.001).肥胖组与非肥胖组相比,治疗前后BMI下降幅度有显著性差异(P＜0.05).相关分析提示FPG下降与IR改善具有显著相关性(P＜0.001).同时发现BBR可显著改善肝功能(ALT、AST、GGT)(P＜0.01),而对肾功能的影响没有显著性意义.结论:BBR具有显著的降糖疗效,改善高胰岛素血症,调节血脂,减轻体重,具有良好的改善胰岛素抵抗作用,更适用于治疗以胰岛素抵抗为优势的糖尿病前期和2型糖尿病早期阶段.
作者：吴丹；魏敬 刊期： 2009年第05期
目的:探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)在正常小鼠体内从皮下向不同器官迁移的能力.方法:从β半乳糖苷酶(β-gal+)转基因小鼠分离骨髓细胞,经贴壁和传代培养获得第3代β-gal+ BM-MSCs,皮下注射给正常6周龄C57BL/6J野生型小鼠.8周后通过LacZ染色示踪β-gal+ BM-MSCs在受体小鼠不同组织器官的分布,并对供体第3代β-gal+ BM-MSCs基质金属蛋白酶(MMPs)的基因表达水平进行检测.结果:β-gal转基因小鼠来源的供体第3代BM-MSCs呈现LacZ染色阳性.第3代的β-gal阳性BM-MSCs皮下注射8周后,在受体小鼠肺、脑、心、肝、肾内检测到LacZ染色阳性的细胞.第3代β-gal+ BM-MSCs表达MMPs基因.结论:皮下注射的BM-MSCs能够在正常小鼠体内经血液循环迁移到不同器官,并可能分化成为不同器官的终末分化细胞,参与正常组织的自我更新.
作者：靳建亮；苗登顺 刊期： 2009年第05期
目的:本文通过观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)影响肾小管上皮细胞转分化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)的作用,以及和转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)作用的关系,探讨Ang Ⅱ参与肾小管间质纤维化的作用机制.方法:以人肾小管上皮细胞株(human kidney cell)HKC细胞为研究对象,采用蛋白印迹等方法,观察Ang Ⅱ(10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L),及其与TGF-β1共同作用对该细胞表达α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的影响.明胶酶谱法检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2和MMP-9)的变化,Boyden小室检测HKC细胞的迁移能力.结果:①单独应用Ang Ⅱ不能够造成HKC细胞E-cadherin表达的变化,也不能诱导α-SMA表达,但是却能上调FN的表达;②与TGF-β1共同作用时能够加强TGF-β1影响E-cadherin,α-SMA和FN表达的作用;③Ang Ⅱ能够增加HKC生成MMP-2和MMP-9;④Ang Ⅱ能够(10-7和10-6 mol/L)增加HKC细胞迁移至Boyden小室膜下侧面的数目.结论:①Ang Ⅱ可以参与EMT过程,但不是导致EMT的关键因素;②Ang Ⅱ能够以协同的方式参与TGF-β1导致的EMT,可能以此方式加重肾小管间质的纤维化.
作者：高雯；狄佳；闻萍；江蕾；熊明霞；杨俊伟 刊期： 2009年第05期
目的:将已制备的抗Met单链抗体基因与人IgG Fc基因片段融合,表达有活性的融合蛋白分子,以增强单链抗体的可溶性.方法:从人淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增并制备人IgG的Fc基因片段,并克隆于已构建好的pBAD-scFv原核表达载体中,转化大肠杆菌Top10,经阿拉伯糖诱导表达融合蛋白scFv-Fc.所表达的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE、Western blot分析鉴定,并用ELISA检测抗体效价.结果:序列分析表明重组质粒pBAD-scFv-Fc基因序列正确;SDS-PAGE分析表明,scFv-Fc融合蛋白分子量为60 ku,且为可溶性蛋白;该蛋白经过His亲和层析纯化、ELISA检测,结果表明,该融合蛋白能够与抗原分子Met特异性结合.结论:改造后的抗体融合蛋白scFv-Fc能与人Met特异性结合,增加了抗体蛋白溶解度,有利于抗体的大量制备.
作者：熊林；张爱霞；李芸茜；张大为；曹伯良；朱进；唐荣才 刊期： 2009年第05期
目的:通过研究过氧化物酶体增生物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)激动剂吡格列酮对前脂肪细胞(3T3-L1)分化过程中盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor,MR)表达的影响,探讨PPARγ在肥胖及胰岛素抵抗中的作用机制.方法:用吡格列酮对小鼠前脂肪细胞3T3-L1进行刺激,利用实时定量PCR,检测在前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的过程中,盐皮质激素受体及其相关基因的mRNA表达量.结果:前脂肪细胞分化过程中,给予吡格列酮刺激后细胞分化效率明显增加的同时,盐皮质激素受体及11β-羟化类固醇脱氢酶1(11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1)的表达量增加.结论:PPARγ在促进前脂肪细胞的分化的同时,明显增加盐皮质激素受体的表达.
作者：狄文娟；刘娟；程鹏；丁国宪 刊期： 2009年第05期
目的:建立稳定转染人宫颈癌癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)siRNA真核表达质粒的人胰腺癌PANC1细胞株,探讨siRNA干扰HCCR的表达后对人胰腺癌PANC1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:通过脂质体转染法将含HCCRsiRNA的真核表达质粒pGCsi-HCCR稳定转染至人胰腺癌细胞株PANC1,抗生素G418筛选获得稳转细胞株;Western blot检测PANC1细胞中HCCR的表达,同时检测肿瘤相关基因p53蛋白表达的变化;流式细胞仪检测PANC1细胞的细胞周期和凋亡率变化;MTT比色法检测siRNA干扰后对PANC1细胞增殖能力的影响:Transwell侵袭实验观察siRNA干扰后对PANC1细胞侵袭能力的影响.结果:Western blot证实siRNA稳转组的PANC1细胞株和空载体稳转组比较HCCR蛋白表达水平下调,稳转细胞株建立成功.siRNA稳转组p53蛋白表达下降.siRNA稳转组的S期细胞数目减少而G0/G1期细胞数目增加,细胞凋亡增加.MTT结果显示siRNA稳转组1和稳转组2细胞吸光度分别为空载体组细胞的0.65倍和0.68倍,细胞增殖能力下降.Transwell侵袭实验显示siRNA稳转组细胞和空载体组细胞穿膜数分别为24.4±9.9和49.1±15.4(P＜0.01),稳转组细胞侵袭能力下降.结论:siRNA干扰HCCR的表达后能抑制胰腺癌PANC1细胞增殖和侵袭,促进其凋亡.
作者：蒋佳凯；张翼；张国新；苗毅；徐泽宽 刊期： 2009年第05期
目的:为了检测活性维生素D缺乏及其母乳成分的改变是否影响小鼠下颌骨以及牙齿的发育.方法:通过采用X线摄影、微CT和组织学等方法比较分析25羟维生素D3的1α羟化酶杂合子[1α(OH)ase+/-]和纯合子[1α(OH)ase-/-]母鼠所喂养的纯合子和杂合子小鼠下颌骨以及牙齿的表型差异.结果:母乳中的钙水平在1α(OH)ase-/-母鼠较1α(OH)ase+/-母鼠为低.1α(OH)ase-/-仔鼠的牙量和骨量较同窝1α(OH)ase+/-仔鼠明显下降,而由1α(OH)ase-/-母鼠所喂养仔鼠的牙量和下颌骨骨量比由1α(OH)ase+/-母鼠喂养的仔鼠要低.由1α(OH)ase+/-母鼠所喂养的1α(OH)ase+/-仔鼠牙量和下颌骨量高,而由1α(OH)ase-/-母鼠所喂养的1α(OH)ase-/-仔鼠牙量和下颌骨量低.结论:活性维生素D和高乳钙摄入各自具有刺激下颌骨和牙齿矿化和发育的作用,又具有协同作用.
作者：王骞；苗登顺 刊期： 2009年第05期
目的:对腹腔镜和开腹行结直肠癌根治术的治疗效果进行临床对照研究.方法:选择2004年5月～2008年2月本科行腹腔镜结直肠癌病例120例及开腹结直肠癌根治术病例310例,比较术中及术后情况.结果:腹腔镜组手术时间为(165.3±32.4)min,开腹手术组手术时间为(140.5±31.8)min,差异有显著性(P＜0.01);腹腔镜组术后并发症发生率为6.67%(8/120),开腹组为4.83%(15/310);腹腔镜组术中出血为(82.0±22.5)ml,开腹组为(156.2±42.4)ml,腹腔镜组明显少于开腹组(P＜0.05);两组在肠段切除长度,肿块距离下切缘的距离和淋巴结清扫数量方面比较差异无显著性(P＞0.05).两组术后肠道功能恢复时间分别为(2.60±1.47)天和(3.6±1.3)天,差异有显著性(P＜0.05).结论:腹腔镜结直肠癌根治术能取得与开腹手术同样的治疗效果,并具有手术视野好,出血少,术后恢复快,应激反应小等优点.
作者：王道荣；陈兆雷；喻学桥；汤东；赵长勇；李洪波 刊期： 2009年第05期
目的:观察二磷酸盐类药物阿仑膦酸钠对人工关节磨损微粒刺激破骨细胞分化形成的影响,探讨二磷酸盐防治人工关节无菌性松动的可能机制.方法:体外用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导小鼠骨髓造血干细胞分化为破骨前体细胞(osteoclast precursors,OCPs),然后用核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和M-CSF两种细胞因子协同诱导OCPs向成熟破骨细胞分化,同时在培养体系中加入高分子聚乙烯微粒(103/ml)和不同浓度的阿仑膦酸钠(0.4、2.0、10.0、50.0 μg/ml),对获得的各组破骨细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色计数阳性破骨细胞(核≥3)的数目;提取总RNA用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRAP mRNA的表达.结果:高分子聚乙烯微粒组TRAP阳性破骨细胞数目和TRAP mRNA的表达显著高于空白对照组(P＜0.05);阿仑膦酸钠组TRAP阳性破骨细胞数目和TRAP mRNA的表达均显著低于高分子聚乙烯组(P＜0.05),且随着阿仑膦酸钠浓度增高TRAP阳性破骨细胞数目和TRAP mRNA的表达呈递减趋势,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:阿仑膦酸钠可以抑制人工关节磨损微粒刺激破骨细胞分化形成.
作者：吴瑞；王青；范卫民；任科伟 刊期： 2009年第05期
目的:研究肝癌的动态CT灌注成像(CTP)的可重复性.方法:采用德国Siemens sensation 64层螺旋CT机,应用Body PCT肝脏灌注软件进行处理,该软件应用的数学模型是斜率法和Patlak分析法.首先建立一个相对一致的标准后处理方法,应用软件处理后得到灌注彩图,用鼠标划出各感兴趣区,包括按肿瘤大小和按肿瘤直径一半划出的兴趣区(ROI).然后建立1个后处理对比的方法,观察观测者之内的可重复性:2个技能和经验都不相同的观测者(甲、乙)采用双盲法分别进行(CTP)的后处理.分别对甲和乙的前后2次后处理的结果进行统计学分析,评价其前后2次后处理的一致性;观察观测者之间的可重复性:对甲和乙后处理分析的数据进行比较,评价不同操作人员对CTP可重复性的影响.结果:在第1次后处理时,甲乙2人有一致性;甲前后2次后处理有一致性;乙前后2次后处理也有一致性.结论:肝癌的动态CT灌注成像具有可重复性.
作者：周丹；陈晓晖；郭金和；何仕诚；闵捷；滕皋军 刊期： 2009年第05期
目的:该研究探讨心理干预对心脏介入治疗患者的疗效.方法:选取96例进行介入治疗的患者,随机分为干预组和对照组,采用心理健康教育等干预方法对干预组实施近9个月的干预,运用焦虑抑郁量表(HAD)来评估心理干预的效果.结果:两组内HAD的得分值,干预组有显著差异(P＜0.001),对照组无显著差异(P＞0.05);两组之间HAD的得分值有显著的差异(P＜0.05),提示心理干预对提高介入治疗患者的疗效有效.结论:心理干预对提高介入治疗患者的疗效有一定的价值.
作者：周宁天；吴萌萌；钱珊珊；杨志健 刊期： 2009年第05期
目的:总结分析人工关节术后假体周围感染病例的细菌学特点,为该并发症的抗生素治疗提供依据.方法:通过文献检索,对2003～2008年我国学者在国内发表的有关人工关节置换术后假体周围感染的细菌学检查结果进行汇总、归纳和分析.结果:共有49篇文献入选,细菌谱显示G+菌占80.49%,G-菌占17.74%,真菌占1.33%,分支杆菌占0.44%.发现G+细菌中,金黄色葡萄球菌占总菌株数的34.59%,表皮葡萄球菌占总菌株数的37.48%.结论:我国人工关节术后假体周围感染以G+菌为主,且大多数为金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌感染,应有针对性的使用抗生素.
作者：陈哲峰；范卫民；李翔；刘锋 刊期： 2009年第05期
目的:研究血清胱抑素C(Cys C)与冠心病的相关性.方法:回顾性分析525例高度怀疑冠心病而行冠脉造影患者的临床资料,从冠心病病情程度、冠脉病变支数和冠脉病变Gensini总积分3方面研究血清Cys C水平与冠心病之间的关系.应用免疫比浊法检测血清Cys C浓度,对Cys C水平与冠心病病情、冠脉病变程度和冠脉病变Gensini总积分进行单因素和多因分析.结果:①随着血清Cys C水平的升高,冠心病患者病情逐渐加重,冠脉病变支数和Gensini总积分增加;在急性心梗时由于急性时相反应血清Cys C水平出现下降;②Logistic回归结果显示Cys C与冠脉有无病变显著相关(OR值5.346,95% CI为2.225～12.846,P＜0.01);③多元逐步回归结果显示在校正了年龄、性别等因素之后,Cys C与冠脉病变Gensini总积分(β=0.149,P＜0.01)仍然独立相关.结论:血清Cys C水平与冠心病有密切关系.随着血清Cys C水平升高,冠心病患者病情逐渐加重,冠脉病变程度也更加严重.
作者：孙磊；杨志健；贾恩志 刊期： 2009年第05期
目的:探讨蟾蜍灵(bufalin)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)凋亡的影响.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞.分为对照组、LPS刺激组和蟾蜍灵干预组,应用台盼蓝拒染法检测蟾蜍灵对GMC的细胞毒性作用,应用透射电镜观察系膜细胞超微结构的变化,采用逆转录PCR检测Bax和Bcl-2基因mRNA的表达.Western blot法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达.结果:透射电镜观察蟾蜍灵干预组可见凋亡早期形态学改变.逆转录PCR和Western blot结果显示蟾蜍灵组较脂多糖组Bax表达增多,Bcl-2表达减少,差异均具有统计学意义(P＜0.01),蟾蜍灵干预后,Bax较Bcl-2表达过量.结论:蟾蜍灵可能通过调节Bax和Bcl-2的相对表达量而诱导脂多糖作用后肾小球系膜细胞发生凋亡.
作者：李善文；甘卫华；陈荣华；张爱青；潘晓勤；费莉 刊期： 2009年第05期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
