惠晓萍；徐勇
目的 克隆人Tim-3基因,并构建含有该目的基因的重组真核表达载体,获得稳定表达人Tim-3分子的L929基因转染细胞.方法 采用RT-PCR方法从人外周血T淋巴细胞中克隆出Tim-3基因,通过双酶切(XhoI,Sa-II)装入真核表达载体plRES2-EGFP中,脂质体法转染L929细胞,72 h后加入G418进行筛选,挑选出能稳定表达Tim-3蛋白的L929细胞株.结果 构建了用于表达的含Tim-3基因的重组真核表达载体,经脂质体转染L929细胞,继而经RT-PCR和流式细胞术表型检测,筛选出稳定表达人Tim-3蛋白的L929转基因细胞.结论 构建了含人Tim-3基因重组真核表达载体和稳定表达人Tim-3蛋白的细胞株,为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础.
作者：高鑫；李刚；陈慧；汪家敏；张光波；卢斌峰；张学光 刊期： 2011年第02期
目的 探讨产前胎儿超声心动图检查方法的临床价值.方法 应用彩色多普勒超声诊断仪对510例孕20～40周高危孕妇行产前胎儿超声心动图检查,并将胎儿超声检查与胎儿尸检或分娩后彩色多普勒超声检查结果进行对照.结果 胎儿超声心动图510例中,检出异常者71例,结构性心脏异常50例(9.80%),3例未尸检,2例随访丢失,2例生后未见异常,3例漏诊(1例为室间隔缺损,2例为房间隔缺损);非结构性心脏异常21例(4.12%),6例生后未见明显异常.超声心动图检查胎儿异常的敏感度为95.08%,特异度为98.20%,阳性预测值为87.88%,阴性预测值为99.32%.结论 胎儿超声心动图检查对胎儿结构性心血管异常的诊断有重要作用,常规胎儿超声心动图的开展可以提高其检出率.
作者：姚长芳；夏飞；顾欣贤；徐秋琴；沈宗姬；杨俊华 刊期： 2011年第02期
目的 探讨褪黑素(MT)保护大鼠肝缺血再灌注损伤的机制.方法 采取大鼠第一肝门阻断的缺血再灌注模型,将健康雄性SD大鼠64只随机分为两组:对照组和MT组,观察每组动物的病理切片,分别检测血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)及肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量,免疫组化测定诱导型NO合酶(iNOS)的表达.结果 肝脏缺血再灌注后,有明显的病理损伤改变.MT组再灌注2 h、4 h血清ALT、LDH、肝组织匀浆中MDA和SOD含量与对照组相比均明显降低(均P＜0.01),MT组iNOS表达明显低于对照组(P＜0.01).结论 自由基产生过多是肝脏缺血再灌注损伤初期的主要原因,给予MT预处理可通过调节iNOS和SOD来降低MDA、NO水平,从而减轻肝脏损伤.
作者：杜鹏；吴浩荣；耿小平 刊期： 2011年第02期
目的 探讨经脐单孔腹腔镜阑尾切除术的适应证.方法 分析该院普外科2009年11月至2010年7月为16例患者行经脐单孔腹腔镜阑尾切除术的临床资料.结果 16例中,慢性阑尾炎7例,慢性阑尾炎急性发作2例,急性阑尾炎7例.全组手术均获成功,手术平均时间(46.6±9.4)min,术中出血均小于5ml.术后无并发症发生,恢复良好.结论 经脐单孔腹腔镜阑尾切除术的适应证包括慢性阑尾炎、慢性阑尾炎急性发作、急性单纯性阑尾炎、急性化脓性阑尾炎早期.
作者：王继元；邢春根；钟丰云；吕孝东；杨晓东；赵奎 刊期： 2011年第02期
目的 探讨半枝莲总黄酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变形成早期血清脂质水平、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响.方法 载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、银杏叶胶囊组和半枝莲总黄酮高、中、低剂量组,取正常C57BL/6小鼠为对照组,每组6只.除模型组、对照组给予等容量羧甲基纤维素钠外,其他各组分别给予阳性对照药与受试药8周.处死小鼠,ELISA法检测血脂水平,黄嘌呤氧化酶法检测SOD活力,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,HE染色观察主动脉形态学变化.结果 半枝莲总黄酮中、高剂量组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显低于模型组,高剂量组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显高于模型组(P＜0.05或0.01).半枝莲总黄酮3个剂量组的MDA含量较模型组显著减少,SOD活性表达水平较模型组显著升高(均P＜0.01).结论 半枝莲总黄酮可通过降低载脂蛋白E基因敲除小鼠TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平,升高SOD活性,降低MDA含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用.
作者：祝娉婷；卜平；孙云；郑新梅；张振刚；张旭东；孙党红 刊期： 2011年第02期
目的 评价抗CD33单克隆抗体(GO)联合化疗药物对复发(或难治性)急性髓系白血病(AML)的疗效和安全性.方法 应用GO联合化疗药物治疗16例复发或难治性AML患者.治疗方法:GO 9 mg/m2,第1天;联合FLAG、HAA、CAG、合用地西他滨等化疗方案.在治疗过程中同时应用前列腺素E以及保肝药物保护性治疗.结果 16例中,难治性AML11例,复发性AML 5例,白血病细胞CD33表达中位数为93.9%.GO联合化疗1个疗程后复查骨髓象,达完全缓解(CR)7例,部分缓解(PR)3例,CR率为43.8%,PR率为18.8%,总有效率为62.6%.随访截至2010年3月1日,中位无复发生存时间为3.5(1.1～70)个月,中位总生存时间9(3～77)个月.在化疗过程中5例出现一过性高胆红素血症及转氨酶升高,化疗结束后有3例在异基因造血干细胞移植过程中出现肝静脉闭塞综合征,1例经抗凝、溶栓、保肝及对症支持治疗后症状得到控制,2例死亡.结论 GO联合化疗治疗复发、难治性AML患者可获得较高的CR率,为部分患者行异基因造血干细胞移植提供了契机,可作为伴有CD33高表达复发或难治性AML患者一种较为有效的治疗方法.
作者：王谦；仇惠英；吴德沛；孙爱宁；金正明；苗瞄；唐晓文；傅铮铮；韩悦；何广胜 刊期： 2011年第02期
目的 评估替罗非班对急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者梗死相关动脉自发再通、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后心肌灌注及住院期预后的影响.方法 连续入选316例急性STEMI患者,随机决定急诊室给予替罗非班(156例)与否(160例).根据急诊冠脉造影结果分为TMP 0～1级组(218例)和TMP 2～3级组(98例).所有TMP 0～1级患者均行紧急PCI,据替罗非班的应用情况分为替罗非班亚组(91例)与常规治疗亚组(127例).分析替罗非班与梗死相关动脉自发再通、PCI术后心肌灌注、住院期主要心脏不良事件(MACE)的关系.结果 TMP 2～3级组甘油三酯、白细胞升高显著低于TMP 0～1级组(P＜0.05),且替罗非班的应用比例显著高于TMP 0～1级组(P＜0.01).亚组分析表明,替罗非班组PCI术后即刻校正的TIMI桢数、住院时间、TMP 0～2级及住院期MACE发生率均降低(P＜0.05),左室射血分数增高(P＜0.05);高龄、替罗非班治疗、左室射血分数降低、术后TMP0～2级与住院期MACE发生率相关(P＜0.05).结论 早期应用替罗非班可增加急性STEMI患者梗死相关动脉自发再通率,改善急诊PCI术后梗死区域心肌再灌注与住院期临床预后.
作者：赵良平；徐卫亭；陈建昌；罗小雨；江建良；邵春来；佟光明；洪小苏 刊期： 2011年第02期
目的 克隆人CD40基因并原核高效表达其胞外段.方法 采用RT-PCR法,从高表达人CD40抗原的XG-2细胞中扩增CD40全长基因,并将其插入pMD18-T载体中进行测序验证.用特异引物扩增CD40抗原分子的胞外段基因(可溶性CD40、sCD40基因片段),再亚克隆至原核表达载体pGEX-5x-3,将测序正确的重组表达载体转化大肠杆菌B121(DE3),用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Western blot检测目的蛋白.结果 RT-PCR能从XG-2细胞总RNA中扩增出特异的目的基因,测序结果显示与GenBank中登录的完全一致,构建的原核表达重组载体pGEX-5x-3/hCD40ECD在表达宿主菌BL21(DE3)中经IPTG诱导能获得有效表达,Western blot证实了目的蛋白条带的特异性.结论 获得了人CD40分子的基因及其胞外段原核表达产物,为进一步研究CD40分子的功能和sCD40的应用奠定了良好的基础.
作者：姜智；陈永井；葛彦；张学光 刊期： 2011年第02期
目的 探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检测AG-490对K562细胞凋亡及细胞周期的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR技术检测AG-490作用后K562细胞bcr/abl融合基因及凋亡相关基因c-myc mRNA的表达水平.结果 AG-490可明显抑制K562细胞的增殖,并随药物作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显(P＜0.05);AG-490可使细胞周期阻滞于G1期,促使其凋亡(P＜0.05).AG-490作用于K562细胞48 h后bcr/abl融合基因的表达无明显改变(P＞0.05),而c-myc的表达水平明显降低(P＜0.05).结论 AG-490可能通过阻断JAK2信号通路而下调c-myc的表达,使K562细胞阻滞于G1期,从而抑制K562细胞增殖,促使其凋亡.
作者：高媛；姜智；杨玲焰；郭毅；李炜；郭向红；徐岚；吴士良 刊期： 2011年第02期
目的 观察蛇床子素对小鼠高脂性脂肪肝的治疗作用.方法 通过给小鼠灌服脂肪乳4周建立小鼠高脂性脂肪肝模型.将已形成脂肪肝的小鼠随机分为蛇床子素10 mg/kg、20 mg/kg、40mg/kg组和脂肪肝模型组,每组小鼠10只,连续灌胃给药6周后,检测血清和肝组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝质量系数等指标,并用光镜检查肝组织的形态学改变.结果 高脂性脂肪肝小鼠经蛇床子素10～40mg/kg治疗6周后,血清和肝组织中TC、TG、FFA和肝质量系数明显降低(P＜0.05或P＜0.01),并呈一定的剂量依赖趋势.光镜检查结果显示,给予蛇床子素治疗的小鼠肝细胞脂肪变性的程度明显减轻.结论 蛇床子素对小鼠高脂性脂肪肝具有一定的治疗作用.
作者：杜娆；谢梅林；王恒斌 刊期： 2011年第02期
目的 探讨冠状动脉CT成像(CTA)在心肌桥-壁冠状动脉临床诊断中的价值.方法 采用64层螺旋CT对327例患者行冠状动脉CTA检查,观察有无心肌桥,并对异常段壁冠状动脉进行狭窄评估.心肌桥病例均行冠状动脉造影检查并对比.结果 327例患者共发现57例66段心肌桥,其平均长度为(4.72±0.93)mm,平均厚度为(2.04±0.62)mm,壁冠状动脉的狭窄程度为(33±20)%.对比冠状动脉造影检查共发现29例35段心肌桥,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 冠状动脉CTA检查可以清晰显示心肌桥和壁冠状动脉,与传统造影方法相比对临床诊断有重要意义.
作者：张文 刊期： 2011年第02期
目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者体内血小板活化、CD40配体(CD40L或CD154)的表达及可溶性CD40L(sCD40L)变化的临床意义.方法 71例住院确诊为冠心病的患者中,稳定性心绞痛(SA)19例,不稳定性心绞痛(UA)23例,急性心肌梗死(AMI)29例.另选对照20例.应用直接免疫荧光流式细胞术测定各组病例血小板表达CD40L和P-选择素(CD62P)的水平,用酶联免疫吸附法测定血清sCD40L水平.结果 ACS患者(包括UA组和AMI组)血小板表达CD40L和CD62P的水平及血清sCD40L水平明显高于SA患者和对照组(P＜0.05),UA组和AMI组、SA组和正常对照组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).sCD40L水平与低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白a水平成正相关.结论 CD40L可能参与了ACS的发生,且可能反映动脉粥样斑块的不稳定.
作者：曹东来；杨向军；蒋文平 刊期： 2011年第02期
目的 观察下丘脑弓状核(ARC)神经元在炎症性痛觉过敏中的激活状态,分析NMDA受体在ARC神经元活动与痛觉过敏中的作用.方法 用完全弗氏佐剂建立大鼠炎症性痛觉过敏模型,用辐射热-缩腿法测定痛阈,用c-fos检测神经元激活状态,用体视学无偏差测量系统计数免疫阳性细胞,用MK801观测NMDA受体的作用.结果 佐剂组的痛阈均有明显下降(P＜0.05),ARC中Fos蛋白阳性细胞计数明显上调(P＜0.05);在侧脑室微量注射MK801后痛阈可恢复至正常水平,ARC中Fos蛋白阳性细胞计数回落接近正常水平.生理盐水组在这两方面都无明显变化.结论 ARC神经元的激活对炎症性痛觉过敏的产生和维持有重要作用,该作用主要通过NMDA受体介导.中枢敏感化也可发生在脊髓以上的高位痛觉调节中枢.
作者：李玮；龚珊；虞献民；蒋星红 刊期： 2011年第02期
目的 评价宫颈细胞学检查、人乳头瘤病毒(HPV)-DNA检测联合阴道镜检查对子宫颈病变的诊断价值,探讨性质未定的不典型鳞状细胞(ASCUS)的临床处理方法.方法 对经宫颈脱落细胞检查学诊断为ASCUS的90例患者行人HPV检测及阴道镜下多点活检.结果 90例ASCUS患者中,宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌的发生率为31.11%(28/90),HPV阳性率为43.33%(39/90).高危HPV阳性组CIN以上检出率为51.28%(20/39),HPV阴性组中CIN以上检出率为15.69%(8/51).高危HPV阳性患者中以高危HPV16、HPV52、HPV58、HPV18、HPV33多见.结论 应加强对ASCUS患者的重视,尤其是合并高危HPV感染的患者,液基细胞学检查、HPV-DNA检测联合阴道镜检查能提高宫颈病变的检出率.
作者：邵敏芳；钱志红 刊期： 2011年第02期
目的 分析腹膜透析(PD)患者退出原因并探讨相关对策.方法 收集苏州大学附属第二医院腹膜透析中心2008年1月至2010年3月143例PD患者的临床资料,了解46例退出PD治疗的原因.结果 46例患者退出PD的主要原因是死亡(58.7%),其次是转血液透析(HD)(28.3%)、肾移植(6.5%)、转院(4.4%)及失访(2.2%).原发病慢性肾小球肾炎的病死率为76.9%(20/26),糖尿病肾病患者为60.0%(6/10).前两位的死亡原因分别是心血管事件(29.6%)和感染(腹腔感染29.6%,肺部感染和消化道感染25.9%),其次为脑血管事件(18.5%)、营养不良(11.1%)、消化道出血(3.7%)、肿瘤(3.7%).转HD的主要原因包括PD相关感染(38.5%)和透析不充分(23.1%).PD早期(1年内)转HD的主要原因是技术失败(堵管、漂管、渗液等,23.1%)及腹腔感染(23.1%).结论 目前PD患者退出的主要原因是死亡,而导致死亡的主要原因是心血管并发症和感染.
作者：曾颖；石永兵；沈华英；施晓松 刊期： 2011年第02期
目的探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响.方法采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检测AG-490对K562细胞凋亡及细胞周期的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR技术检测AG-490作用后K562细胞bcr/abl融合基因及凋亡相关基因c-myc NA的表达水平.结果AG-490可明显抑制K562细胞的增殖,并随药物作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显(P＜0.05);AG-490可使细胞周期阻滞于G1期,促使其凋亡(P＜0.05).AG-490作用于K562细胞48 h后bcr/abl融合基因的表达无明显改变(P＞0.05),而c-myc的表达水平明显降低(P＜0.05).结论AG-490可能通过阻断JAK2信号通路而下调c-myc的表达,使K562细胞阻滞于G1期,从而抑制K562细胞增殖,促使其凋亡.
作者：李林萌；陈子兴；王元元；岑建农；沈宏杰；姚利 刊期： 2011年第02期
目的 建立阿尔茨海默病(AD)个体健康危险因素的评价模型,预测个体发生阿尔茨海默病的风险.方法 通过文献检索的方法,收集AD危险因素的病例对照研究资料和队列研究资料,并用RevMan软件对病例对照研究进行Meta分析,以合并的比值比(OR)值和相对危险度(RR)值为基础建立危险分数表,从而建立危险因素评价模型.结果 建立了危险分数表,将表中所列有关分数相加得出组合危险分数,借此预测发病危险.结论 运用该模型可对个体未来发生AD的危险进行预测.
作者：惠晓萍；徐勇 刊期： 2011年第02期
目的 探讨组织蛋白酶B和μ-钙激活蛋白酶的特异性抑制剂E64d对创伤性脑损伤(TBI)后神经细胞的保护作用,并对其调节机制进行初步探讨,为临床救治TBI患者提供新的靶点.方法 采用改良的自由落体损伤装置建立小鼠TBI模型,实验组侧脑室注射0.5μg/μ1的E64d 1μ1,对照组侧脑室注射等体积1%的二甲基亚砜,并按伤后时间不同分为伤后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h组,并按时间点断头取脑,运用Western blot法检测TBI后各实验组脑组织中凋亡相关蛋白caspase-3、tBid的表达情况,运用免疫荧光法进行caspase-3阳性细胞计数.结果 实验组凋亡相关蛋白caspase-3、tBid的表达量明显降低,且以伤后24～48 h为显著(P＜0.05).结论 E64d可以通过阻断内外源的凋亡通路对TBI后神经细胞起保护作用,改善神经细胞损伤导致的神经功能障碍,可能为治疗脑外伤提供新靶点,为研究防治创伤性脑损伤后继发性损伤提供新思路.
作者：杨瑞；罗承良；孙玉霞；包海军；戴定坤；倪宏；陈奚萍；秦正红；陶陆阳 刊期： 2011年第02期
目的 观察表面肌电生物反馈对中央索综合征上肢功能的治疗作用.方法 外伤所致的中央索综合征患者35例(手术治疗24例,保守治疗11例)随机分为对照组和观察组,两组患者均进行常规临床治疗和康复,观察组患者在此基础上给予表面肌电生物反馈治疗,所有患者均分别于治疗前和治疗后6周评定双上肢运动功能(MS)、改良巴氏指数(MBI)和双侧屈腕屈指肌群肌电积分值(IEMG).结果 经6周治疗后,两组患者双上肢MS、MBI、IEMG均较治疗前明显改善(均P＜0.05);观察组患者双上肢MS、MBI、IEMG改善幅度均明显优于对照组(均P＜0.05).结论 表面肌电生物反馈联合常规康复治疗可明显改善中央索综合征患者的上肢功能,是辅助治疗外伤性中央索综合征的重要康复手段.
作者：刘传道；朱红军；王海波；杨卫新 刊期： 2011年第02期
目的 检测Skp2、Caspase-3在膀胱尿路上皮细胞癌(简称膀胱癌)组织中的表达,探讨其临床意义及相关性.方法 采用免疫组化方法检测Skp2、Caspase-3蛋白在82例膀胱癌组织和16例正常膀胱黏膜组织中的表达,并收集临床资料,分析检测结果与临床病理的联系及二者的相关性.结果 Skp2在膀胱癌组织中的阳性率(43.9%)高于正常膀胱黏膜组织(12.5%)(P＜0.05);Caspase-3在膀胱癌组织中的阳性率(39%)低于正常膀胱黏膜组织(81.3%)(P＜0.05).膀胱癌细胞的恶性程度越高,Skp2蛋白表达越高,Caspase-3则无明显差异;与非肌层浸润性膀胱癌相比,肌层浸润性膀胱癌组织中Skp2蛋白的表达较高(P＜0.05),而Caspase-3的表达则较低(P＜0.05).膀胱癌组织中Skp2蛋白的表达与Caspase-3成负相关关系.结论 Skp2蛋白的表达与膀胱癌的分化、临床分期密切相关,与Caspase-3的表达成负相关;联合检测Skp2、Caspase-3有助于判定膀胱癌的侵袭能力.
作者：袁和兴；侯建全；黄玉华；丁翔 刊期： 2011年第02期
苏州大学学报（医学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：苏州大学
