学术投稿

小鼠胚胎干细胞无饲养层培养及其生物学特性

韩甫;叶荣;鲍柳君;张军超;张焕相

关键词:胚胎干细胞, 饲养层细胞, 拟胚体, 小鼠
摘要:目的 建立小鼠胚胎干(ES)细胞株S8在无饲养层的条件下短期内连续传代体系,获得大量纯的ES细胞.方法 ES-S8细胞无饲养层连续传代后,检测其未分化指标以及多分化潜能.结果 ES-S8细胞在无饲养层条件下培养5代,AKP染色、SSEA-1免疫荧光、OCT-4均显阳性,以及经拟胚体(EB)途径自发分化后,能形成多种类型的细胞.结论 ES-S8细胞能够在无饲养层条件下堵养,至少传5代仍能保持未分化特异性指标和多分化潜能.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 高血糖抑制大鼠载脂蛋白M的表达和分泌

    目的 了解高血糖对SD大鼠载脂蛋白M(apoM)表达和分泌的影响.方法 于大鼠尾静脉置管,采用微量注射泵以2.5 ml/h速度连续6 h泵入25%葡萄糖注射液的方法建立生理性高血糖大鼠模型.对照组采用同样方法泵入生理盐水.Dot-blotting法检测血清apoM浓度的变化,Beal-Time PCR法检测肝脏apoM mRNA的表达.采用Mann-Whitney检验进行统计分析.结果 高糖组大鼠肝脏apoM mRNA的表达较对照组降低54%(P<0.01),血清apoM的浓度较对照下降32.1%,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 高血糖可抑制大鼠载脂蛋白M的表达和分泌.

    作者:蒋波;张晓膺;罗光华;郑璐;Peter Nilsson-Ehle;徐宁 刊期: 2009年第02期

  • 18F-氟代脱氧葡萄糖符合线路显像在乳腺癌术后监测中的价值

    目的 探讨18F-FDC符合线路显像在乳腺癌术后监测中的价值.方法 54例乳腺癌术后患者行18F-FDG符合线路显像,并与同期CT及骨扫结果描作比较.结果 18F-FDG符合线路显像对乳腺癌术后复发和(或)转移探测的敏感性要优于CT检查,差异有统计学意义(P<0.05);18F-FDG符合线路显像在骨转移病变探测方面不如骨扫描敏感(P<0.05),18F-FDG符合线路显像对CA153升高的乳腺癌术后患者的监测价值较CA153正常组大,差异有统计学意义(P<0.05).结论 18F-FDG符合线路显像对乳腺癌术后监测有重要的临床应用价值.

    作者:郁春景;万卫星;尤徐阳;陆燕君;杜晓庆;吴娜静 刊期: 2009年第02期

  • 缺血后处理对腹腔镜气腹模型大鼠肝脏氧化应激损伤的保护作用

    目的 探讨缺血后处理对腹腔镜气腹模型大鼠肝脏氧化应激损伤的保护作用.方法 将24只雄性SD大鼠随机分为4组,即气腹组(P)、缺血预处理组(IP)、缺血后处理组(IPo)、对照组(C).对照组为假手术组,其余各组建立CO2气腹模型,气腹压力15 mmHg.P组充气60min后放气30min;IP组先进行10min充气和10 min放气,然后充气60 min,再放气30min;IPo组在充气60 min后行3个循环的放气1 min/充气1min,再放气30 min.检测各组大鼠血清天冬氨酸转氨酸(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)及肝脏组织匀浆丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO);免疫组织化学方法检测诱导型-氧化氮合酶(iNOS)在肝脏中的表达.结果 P组、IP组、IPo组较C组血清ALT、AST、肝组织匀浆MDA含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05).IP组、IPo组与P组相比,血清ALT、AST、肝组织匀浆MDA、NO含量下降,GSH含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);IP组与IPo组相比,除GSH外其他生化指标差异无统计学意义(P>0.05).免疫组织化学结果显示:IPo组iNOS表达,明显低于P组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 缺血后处理能使机体GSH含量升高并且抑制iNOS表达减少NO的生成,从而减低CO2气腹所致大鼠肝脏氧化应激损伤;缺血后处理较预处理GSH升高更显著,提示后处理可能对氧化应激更具保护作用.

    作者:朱杰;孙庆林 刊期: 2009年第02期

  • 江苏地区汉族人群中维生素K环氧化物还原酶亚单位1、细胞色素P4502C9的基因多态性

    目的 了解江苏地区汉族人群中维生素K环氧化物还原酶亚单位1(VKORC1)、细胞色素P4502C9(CYP2C9)基因多态性分布、特点及与国外其他不同民族之间的差异.方法 利用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术对206例江苏地区汉族人群中CYP2C9及VKORC1基因多态性进行检测,计算其基因型及等位基因频率,并与国外多个民族VKORC1、CYP2C9基因多态性分布进行比较.结果 检测到VKORC1有A和G两种等位基因,A和G等位基因频率分别为0.91和0.09.VKORC1-1639G>A基因型检测有169人为突变纯合子AA型,基因型频率为0.82,35人为杂合子GA型,基因型频率为0.17,2人为纯合子GG型,基因型频率为0.01.共检测到CYP2C9*1及CYP2C9*3两种等位基因,未检测到CYP2C9*2,CYP2C9*1及CYP2C9*3等位基因频率分别为0.95和0.05.CYP2C9基因型检测有186人为*1/*1型,基因型频率为0.90,20人为杂合子*1/*3型,基因型频率为0.1.结论 江苏地区汉族人群中VKORC1、CYP2C9基因多态性分布有自己的特点,可为研究VKORC1、CYP2C9基因在中国汉族人群中华法林个体化用药提供理论依据.

    作者:马心超;杨剑;黄晨蓉;缪丽燕 刊期: 2009年第02期

  • 高碳酸血症时的肺循环血流动力学的仿真分析

    目的 用计算机仿真方法评价高碳酸血症对肺循环血流动力性的影响.方法 利用包含多种心血管反射的血流动力学模型,在高碳酸血症条件下,运用动态仿真工具Simulink.采用ODE45可变步长算法实现仿真.结果 在高碳酸血症条件下,去除化学反射后,肺动脉压基本无变化,肺静脉压和肺毛细血管压都有一定程度的下降;而在去除压力反射后,肺动脉压显著升高.结论 压力反射对肺动脉压的缓冲作用有重要意义,这对动物实验设计有启示作用.

    作者:周希平;王国卿;邹容;孙茂民 刊期: 2009年第02期

  • 维甲酸、三氧化二砷联合化疗急性早幼粒细胞白血病55例疗效观察

    目的 观察维甲酸(ATRA)加三氧化二砷(As2O2)联合治疗初治急性早幼粒细胞白血病(APL)的完全缓解(CR)率、获得CR时间、缓解后不同治疗方案融合基因转阴率及无复发生存率.方法 ATRA加(治疗组,55例)或不加(对照组,20例)As2O3治疗初治APL直至CR,根据白细胞计数同时加用蒽环类药物化疗.CR后治疗组采用包含中剂量阿糖胞苷的3个疗程的化疗巩固.维持治疗采用ATRA、As2O3,及巯基嘌呤+甲氨蝶呤(MM)的序贯治疗.对照组采用传统的DA方案2个疗程巩固,ATRA、MM加DA/HA的序贯维持治疗.结果 治疗组55例中,50例获得CR,CR率为90.9%,与对照组(85.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);获得CR时间为(25.7±4.2)d,明显短于对照组的(32.6±15.7)d,差异有统计学意义(P<0.05);维持治疗期间随访的40例患者融合基因均转阴,无一例复发,与对照组无复生存率(70.6%)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ATRA、As2O3及化疗联合治疗初治APL CR率高,获得CR时间缩短,包含中剂量阿糖胞苷的巩固治疗、ATRA、As2O3,及MM序贯维持方案能获得长期无复发生存.

    作者:秦燕;陆德炎;蔡奕峰;宋国齐;尤学芬;滕鎔;徐瑞容;刘红 刊期: 2009年第02期

  • 胃肠道间质瘤肝转移5例报道及文献复习

    目的 探讨胃肠道间质瘤肝转移的临床治疗现状及进展.方法 主要通过复习相关文献,结合5例胃肠道间质瘤(GIST)肝转移病例临床及随访资料,进行总结分析.结果 通过手术、靶向药物及介入治疗的综合应用,4例GIST患者得到明显控制,取得较长时间带瘤生存;另1例广泛转移患者死亡.结论 胃肠道间质瘤肝转移患者仍有必要尽可能减瘤;不宜手术的患者可考虑介入治疗;无论手术与否,均推荐患者口服伊马替尼;通过综合治疗,患者可望获得较长时间的带瘤生存.

    作者:王兢;李德春;赵华;张海涛;张子祥;匡玉庭;周健 刊期: 2009年第02期

  • αB-晶体蛋白与放射性白内障的关系

    目的 检测受大剂量X射线照射的大鼠晶状体中可溶性αB-晶体蛋白的表达水平,探讨αB-晶体蛋白与放射性白内障形成之间的关系.方法 取8周龄SD大鼠24只,随机分为3组,每组8只.正常对照组未予干预措施;实验照射组采用直线加速器(X射线25 Gy)一次性照射SD大鼠双眼,建立放射性白内障模型;实验对照组予假照射(照射源不含射线,余条件同照射组).照射后3个月处死大鼠,取晶状体作匀浆,取其上清(可溶性晶状体蛋白)用Western blot检测α B-晶体蛋白的表达.结果 正常对照组、实验对照组均未出现晶状体混浊,25 Gy照射组逐渐形成典型放射性白内障;Western blot结果显示,照射组SD大鼠眼晶状体内可溶性α B-晶体蛋白含量较实验对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 X射线可降低晶状体中可溶性α B-晶体蛋白的含量,从而导致白内障.

    作者:杨焕;徐国旭;刘东伟;卜曙阳;季晓燕;刘玉龙 刊期: 2009年第02期

  • Galectin-3和Smad4与结肠癌浸润及转移的关系

    目的 探讨Galectin-3和Smad4在结肠癌及相应的癌旁组织中的表达差异及其与结肠癌生物学行为的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测Galectin-3和Smad4在61例结肠癌组织及对应癌旁组织中的表达情况.结果 61例结肠癌中Galectin-3阳性表达50例,阳性率为82%,对应癌旁组织中Galectin-3表达阳性率为26.2%,差异有统计学意义(P<0.05).结肠癌中Smad4阳性率为24.6%,对应癌旁组织中阳性率为80.3%,差异有统计学意义(P<0.05).Galectin-3的阳性表达及Smad4表达缺失与大肠癌分化程度、浸润和转移有关(P<0.01或<0.05).结论 Gahctin-3在结肠癌组织中表达率高,与结肠癌细胞的淋巴结转移、浸润有关,Smad4表达缺失与大肠癌分化程度和转移有关.二者是预测结肠癌转移的较有价值的指标.

    作者:高艳;林建荣 刊期: 2009年第02期

  • Rac1蛋白表达与神经前体细胞增殖分化的关系

    目的 探讨Rac1蛋白表达与神经前体细胞增殖分化的关系.方法 取新生大鼠大脑皮层,原代培养获得混合细胞堵养体系,在含10%血清的培养基中培养6 d细胞汇合后更换无血清培养基继续培养.实验中设计4个时间点,用倒置相差显微镜观察细胞增殖分化的变化,免疫荧光染色技术鉴定细胞种类以及Rac1蛋白在细胞内的表达,通过Western blot检测Rae1蛋白的表达变化.结果 建立了新生SD大鼠大脑皮层原代混合细胞培养体系,此体系底层主要是由Ⅰ型胶质细胞组成的单层细胞,GFAP染色呈阳性;在单层细胞上面有一些小圆形强折光性神经前体细胞生长,βⅢ-Tubulin染色呈阳性.更换无血清培养基后上层神经前体细胞大量增殖:βⅢ-Tubulin、Rac1染色呈阳性.Western blot定量分析结果显示,神经前体细胞增殖过程中Rae1蛋白表达上升,而分化过程中Rac1蛋白的表达下降.结论 Rac1蛋白表达与神经前体细胞的增殖分化过程密切相关,可能参与了神经前体细胞的增殖分化过程.

    作者:宋雪慧;辛莲;周俊松;董运海;张焕相 刊期: 2009年第02期

  • 急性早幼粒细胞白血病并发粒细胞肉瘤1例报告及文献复习

    粒细胞肉瘤(granulocytic sarcoma,GS)是一种未成熟粒细胞在髓外增生和浸润形成的肿瘤性包块,常侵犯的部位为皮肤、淋巴结、软组织、骨及骨膜[1].CS较多见于急性粒细胞白血病(acute myelogenous leukemia,AML)、慢性粒细胞白血病、骨髓增殖性疾病及骨髓增生异常综合征患者.在AML患者中,GS常见于存在t(8;21)、inv(16)等细胞遗传学异常者[1].

    作者:张旭辉;张日;何雪峰;周峰 刊期: 2009年第02期

  • 心肌桥与壁冠状动脉形态学变化的相关性分析

    目的 观测心肌桥与壁冠状动脉形态学变化,探讨心肌桥与壁冠状动脉病变的关系.方法 收集40例尸体心脏标本,观测心肌桥的出现率;测量心肌桥的长、宽、厚度;取心肌桥前、桥下、桥后的冠状动脉,分别石蜡包埋,切片,HE染色,观察各部位血管壁结构的变化.结果 在40例心脏标本中,发现心肌桥23处,出现率为56%.其中左冠状动脉及分支上出现心肌桥为18例(占45%),右冠状动脉及分支上发现心肌桥为5例(占12.5%).心肌桥平均长、宽、厚度分别(1.490.135)cm、(0.39±0.036)cm、(0.18±0.050)cm.心肌桥冠状动脉内膜测量,桥前段较桥下、桥后段有明显不规则增厚,差异有统计学意义(P<0.05).结论 心肌桥的出现以单一前室间支为主.心肌桥宽度、长度对桥前壁冠状动脉内膜厚度影响较小,心肌桥的厚度与桥前冠状动脉内膜增厚呈正相关.心肌桥的厚度对冠状动脉病变可能有重要关系.

    作者:徐时;吴开云;杨亚安;王旻晨 刊期: 2009年第02期

  • 结外指突状树突细胞肉瘤1例临床病理观察并文献复习

    目的 探讨结外指突状树突细胞肉瘤的诊断要点及其鉴别诊断.方法 对1例结外指突状树突细胞肉瘤进行组织病理学、免疫组化染色,并随访.结果 肿瘤发生于肝脏、脾脏,于确诊4个月后死亡.镜检:肿瘤组织呈席纹状,旋涡状或杂乱排列,瘤细胞卵圆形、梭形,胞质少,核卵圆形或短梭形,染色质少,部分有核仁,分裂象多见.瘤细胞S-100、CD68、Vimentin和LCA阳性;CD21、CD35、CD1a等均阴性.结论 指突状树突细胞肉瘤极为罕见,容易漏诊和误诊,熟悉其临床病理特点,依靠免疫组化和电镜可确诊.

    作者:杨育生;顾凤华;顾国建;程晓;陈伟琴 刊期: 2009年第02期

  • 家兔混合反流性食管炎动物模型的制作

    目的 通过酸和胆汁混合灌注制备家兔混合反流性食管炎动物模型.方法 采用盐酸和猪胆汁混合灌注建立家兔混合反流性食管炎模型,模型组以灌注不同时间分为4 d组、7 d组及10 d组,正常组则灌注生理盐水;分别在肉眼下、光镜及电镜下观察各组食管变化,并进行分级比较.结果 混合灌注后食管下端病理改变明显.3组模型家兔食管下段存在不同程度黏膜粗糙、充血、黏膜下血管增生,见散在或广泛糜烂,并可见不同程度溃疡.3组模型家兔食管肉眼积分差异有统计学意义(P<0.01).模型家兔可见部分鳞状上皮固缩脱落,固有层嗜酸性细胞、中性粒细胞浸涡,黏膜下层内血管扩张、充血,见不同程度的溃疡、组织坏死,食管肌层也可见不同程度炎性细胞浸润.3组模型家兔食管病理积分差异有统计学意义(P<0.05).电镜下模型家兔见不同程度线粒体肿胀、肌质网扩张.结论 酸和胆汁混合灌注可以成功制备家兔混合反流性食管炎动物模型.

    作者:王宏伟;马淑颖;朱生樑;程艳梅 刊期: 2009年第02期

  • 以腹壁浅动脉为蒂削薄型下腹部皮瓣修复手腕部深度创面效果观察

    目的 探讨削薄型下腹部带蒂皮瓣修复手腕部深度创面的临床效果.方法 应用以腹壁浅动脉为蒂的轴型皮瓣削薄后带蒂移植修复手腕部深度创面9例,根据术后皮瓣成活状况及手的外形、功能判断治疗效果.结果 9例皮瓣全部成活.术后随访6~18月,皮瓣颜色与受区接近,疤痕增生不明显,弹性佳.7例手术后手的外形、功能恢复良好;2例因电烧伤时肌腱、腕管毁损伤严重,术后功能差,6个月后行二期肌腱重建修复术,术后功能恢复满意.结论 削薄型下腹部带蒂皮瓣修复手腕部深度刨面简单、有效.

    作者:孙峰;沈国良;赵小瑜;陆兴安;林伟;祁强;钱志艺 刊期: 2009年第02期

  • 河北汉族人群谷胱甘肽硫转移酶A1的基因多态性

    目的 研究河北汉族人群谷胱甘肽硫转移酶(GST)A1基因多态性分布.方法 应用聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测207例河北汉族人群GST A1基因多态性,并与其他4个人群进行比较.结果 河北汉族人群GST A1基因多态性符合Hardy-Wein berg遗传平衡定律,具有代表性.GST A1*A/*A野生基因型、GST A1*A/*B杂合子突变基因型和GST A1*A/*B纯合子突变基因型分别占75.4%、22.2%和2.4%.GSTA1基因多态性在男、女性别之间的差异无统计学意义(P>0.05);与中国南方客家人群、广东汉族人群之间的差异无统计学意义(P>0.05),但与丹麦人群之间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 河北汉族人群GST A1基因存在多态性,此人群GSTA1基因型分布与中国南方客家人群、广东汉族人群、日本人群一致,而与丹麦人群有明显差别.

    作者:范志亮;任文博;郭艳苏;卜晖;姜虹;李春岩;田新英 刊期: 2009年第02期

  • 1例多种放射性核素体内、体外污染患者长期医学随访及生物标志物的改变

    目的 通过对1例239Pu等7种放射性核素体内、体表污染患者的事故经过、剂量估算、临床处理、医学随访以及生物标志物的改变情况进行分析,为核事故的医学应急救治提供资料和经验.方法 采用全身测量装置进行放射性监测,通过INDO 2000软件进行估算剂量;医学处理包括问诊与体检、污染部位皮肤的去污洗消及综合治疗等;医学随访内容包括每年1次在外院及本院医学观察,随访项目包括临床、肿瘤标志物及辐射遗传学指标检测等;生物标志物检测指标包括nm23-H1、gadd45等基因的表达.结果 估算出当时该患者的总待积有效当量剂量为0.7Sv,骨表面的待积当量剂量为14 Sv,肝脏待积当量剂量为3 Sv.对该患者进行去污洗消及综合治疗取得了较好的疗效,29年的医学随访观察发现了一些有价值的现象.结论 成功地对1例多种放射性核素体内、体表污染患者进行了剂量估算、医学处理、随访观察及生物标志物的检测.

    作者:包雍镝;刘玉龙;李元;张玉松;徐国旭;周剑影 刊期: 2009年第02期

  • 99Tcm-双半胱氨酸-甲硝唑SPECT显像预测鼻咽癌乏氧的初步研究

    目的 初步探讨99Tcm-EC-MN(99锝-双半胱氨酸-甲硝唑)SPECT显像对预测鼻咽癌乏氧状况的可行性及临床价值.方法 在放疗前对15例鼻咽癌初治病例进行99Tcm-EC-MN SPECT显像,测定鼻咽原发病灶肿瘤T/N值(放射性计数/正常组织放射性计数比值),并随访治疗疗效.结果 15例鼻咽原发病灶的T/N值为0.91~3.51(平均值为2.14),放疗后15例中,CR 8例,PR 7例;其3年总生存率、局部控制率和无远地转移率分别为53.3%、79.0%和86.2%.T/N值≤2.14和>2.14组的治疗反应率、总生存率、局部控制率和无远地转移率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 99Tcm-EC-MN SPECT显像能安全地用于鼻咽癌乏氧的检测;肿瘤之间不同的T/N值提示鼻咽原发灶均存在不同程度的乏氧现象,但其临缶床应用价值不能肯定.

    作者:张云霞;陆雪官;唐军;张力元 刊期: 2009年第02期

  • 人胰岛素样生长因子-1逆转录病毒载体的构建及其在骨髓基质干细胞中的表达

    目的 构建人胰岛素样生长因子-1的逆转录表达载体,建立逆病毒介导的IGF-1基因转移系统.方法 用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)从人肝细胞克隆IGF-1的基因;经DNA测序分析证实后将目的 基因插入逆转录病毒载体LXSN,制备pLXSN-IGF-1表达载体;借助阳离子脂质体转染包装细胞PA317,G418筛选阳性克隆,获取病毒上清;培养人骨髓基质干细胞,用病毒上清感染骨髓基质干细胞;采用RT-PCR及Western blot法检测目的 基因在靶细胞的表达.结果 经酶切电泳和DNA测序表明成功构建了IGF-1逆转录病毒表达载体,转染包装细胞后可以产生IGF-1逆转录病毒,病毒感染入骨髓基质干细胞后能够表达IGF1-1重组蛋白.结论 成功建立逆转录病毒载体介导的IGF-1体外表达体系,能够快速、稳定地将IGF-1基因转入骨髓基质干细胞.

    作者:周海斌;郑祖根;董启榕;周晓中 刊期: 2009年第02期

  • NF68在原发性脑干损伤后延脑的表达及其检测意义

    原发性脑干损伤(primary hrain stem injury,PBSI)中弥散性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)的诊断相当困难.神经纤维细丝(neurofilament,NF)在神经轴索出现继发性损害之前就已发生改变,NF68的变化能反映神经轴索的破坏情况,国内此方面与PBSI/DAI关系的研究罕见[1].我们应用免疫组化及RT-PCR技术研究大鼠原发性脑干损伤中延脑DAI与NF68蛋白的表达及NF68 mRNA的半定量分析,以此来评估进行DAI诊断的有效性.

    作者:孙荣超;杨树东;周志毅;穆会君;梁加贝;芮俊 刊期: 2009年第02期

苏州大学学报(医学版)杂志

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主管:江苏省教育厅

主办:苏州大学