学术投稿

AC133-2分子的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

王明元;居颂光;居颂文;狄文英;周晓华;薛群;曲静;方振羊;张学光

关键词:AC133-2基因, 逆转录病毒表达载体
摘要:目的克隆人AC133-2全长基因,构建PGEZ-Tem-AC133-2逆转录病毒表达载体.方法采用分段克隆的方法,通过聚合链式反应从胎肝文库中克隆AC133-2,并构建AC133-2基因的逆转录病毒表达载体.结果成功克隆AC133-2全长基因并构建PGEZ-Term-ACl33-2逆转录病毒表达载体.结论AC133-2全长基因克隆及构建逆转录病毒表达载体的成功,为构建AC133-2转基因细胞和制备抗人AC133-2单克隆抗体和研究AC133-2的生物学功能奠定了物质基础.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 恩丹西酮在乳腺癌化疗中止吐疗效的观察

    恩丹西酮是山东齐鲁制药厂生产的5-HT3受体拮抗剂.笔者选择我院1999年10月至2003年12月收治的经病理学证实的乳腺癌化疗患者76例,观察恩丹西酮在乳腺癌化疗过程中,对抑制恶心、呕吐的疗效及其副作用,并与胃复安进行对照.

    作者:钱秀珍 刊期: 2005年第01期

  • 活化剂HYP协同rSjc26GST的抗血吸虫性肉芽肿的效果及其机制的研究

    目的探讨活化剂HYP协同rSjc26GST的抗肝内血吸虫卵肉芽肿病变的效果及机制.方法采用活化剂HYP联用rSjc26GST、福氏佐剂(FCA)联用rSjc26GST、单用HYP和单用福氏佐剂分别免疫BALB/c小鼠,末次免疫后1周,免疫和对照组小鼠均用日本血吸虫尾蚴攻击感染,7周后测定其免疫效应,观察其抗血吸虫卵肉芽肿病变的效果.结果活化剂HYP联用rSjc26GST组的总虫卵数和成熟虫卵数减少率分别为55.37%和54.31%,均显著高于FCA联用rSjc26GST组的30.30%和38.07%;该两组肝内虫卵肉芽肿的直径及面积分别下降36.86%和35.25%及62.59%和60.44%;两组IgG和IgG1水平均明显升高.结论活化剂HYP协同rSjc26GST比FCA具有更好的抗肝内血吸虫卵肉芽肿病变的效果,其机制与体液免疫(IgG和IgG1)的增强密切相关.

    作者:龚唯;骆伟;刘述先;施云松;陈家旭;宋光承;周卫芳;胡永德;李允鹤 刊期: 2005年第01期

  • 人骨髓间充质干细胞表面抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定

    目的制备人骨髓间充质干细胞(MSCs)的特异性细胞表面抗原的单克隆抗体.方法以人骨髓MSCs为抗原,常规方法免疫Balb/c小鼠,细胞融合制备杂交瘤细胞,并用免疫荧光法在流式细胞仪上对杂交瘤产生的抗体进行初测和复测.结果通过分泌的抗体与人MSCs表面抗原特异性结合的鉴定,进行杂交瘤筛选,将复测为阳性的克隆连续克隆化培养,获得两株持续分泌抗人MSCs的杂交瘤细胞株:8g8、8f9.两株单抗经体外连续传代培养,生长良好,稳定分泌抗体.结论人骨髓MSCs的特异性细胞表面抗原单克隆抗体可望在MSCs的提纯和体外富集、特异性骨病的诊断等方面有广阔的应用前景.

    作者:王晓东;王明海;张亚;张德强;张锡庆;王科文 刊期: 2005年第01期

  • 快速右心室起搏诱导心衰模型的改进

    目的改进快速右心室起搏的方法,获得稳定的慢性终末期心衰模型.方法以12只太湖梅山猪为实验对象,以230次/min的频率右心室快速起搏4周后,改用190次/min的频率维持右心室起搏4周.结果230次/min快速起搏4周后,所有实验动物均出现明显的充血性心衰的表现;心超显示心室壁变薄,EF、CO明显下降;心导管结果示肺动脉压、右房压、肺动脉楔压升高而心输出量、每搏输出量和动脉压降低;在以190次/min维持4周后,上述参数仍保持稳定.结论改进的快速右心室起搏诱导的心衰模型是稳定、持久的慢性终末期心衰模型.

    作者:焦鹏;沈振亚;惠杰;杨俊华;孟自立;余云生;叶文学;黄浩岳;刘鸿程;张卫民;李红卫 刊期: 2005年第01期

  • 前列腺增生症与腹股沟疝同时手术治疗26例报告

    2000年6月至2004年6月我们对26例良性前列腺增生症(BPH)合并腹股沟疝患者行耻骨上前列腺摘除术或经尿道前列腺电汽化术(TVP)的同时行腹股沟疝修补术,取得了良好的效果,现报告如下.

    作者:赵雪志;俞弘颀;陈齐峰;孙清 刊期: 2005年第01期

  • 胆道T管引流术后并发急性肾衰13例分析

    总结胆道T管引流术后并发急性肾衰13例的诊治经验,分析发生的原因.13例均得到及时诊断和早期治疗,无1例死亡.胆道T管引流术后并发急性肾衰常发生在出院后1~2周内,术后持续T管引流胆汁及消化道功能障碍导致血容量不足是并发急性肾衰的主要原因;及时诊断,充分补充血容量是治疗该病的关键;适时夹闭T管及避免胆汁持续丢失是预防该病发生的关键.

    作者:危少华;吴浩荣 刊期: 2005年第01期

  • 胸腔镜在复发性恶性胸腔积液诊治中的应用

    采用胸腔镜配合胸膜固定术治疗43例复发性恶性胸腔积液患者,并通过胸腔镜同时获取活体组织行病理学检查.结果43例患者均获病理确诊,其中甲状腺癌2例,结肠癌4例,乳腺癌6例,胸膜间皮瘤3例,肺癌28例;经胸膜固定术后症状明显缓解,胸膜固定术有效率为100%.2例术后发生复张性肺水肿,无手术死亡.随访1~2个月无大量胸腔积液复发,无死亡.提示胸腔镜是一种微创、有效、实用的诊治方法,配合胸膜固定术治疗复发性恶性胸腔积液可减轻症状、改善生活质量,具有较好的疗效.

    作者:刘志祯;钱永跃 刊期: 2005年第01期

  • 人胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)成熟肽基因的克隆及原核表达

    目的分离人胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)成熟肽基因,并在E.coil中获得表达.方法以人的白细胞基因组DNA为模板,合成特异引物,采用PCR技术分离得到hGDNF成熟肽基因,并构建表达载体pET-21a(+)-hGDNF,转化大肠杆菌BL21(DE3),分别用IPTG和乳糖诱导表达,SDS-PAGE电泳检测hGDNF蛋白表达.结果PCR扩增出了400 bp的DNA片段,构建的表达载体pET-21a(+)-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现400 bp左右的条带,测序结果正确,用IPTG或乳糖诱导转化菌均有15kd大小的目的条带,表达的目的蛋白占菌体总蛋白30%以上,以包涵体形式存在.结论克隆得到人GDNF成熟肽基因并在大肠杆菌中得到了高效表达.

    作者:王金志;缪竞诚;盛伟华;谢宇锋;杨吉成 刊期: 2005年第01期

  • PCR检测胃黏膜和唾液中的幽门螺杆菌

    运用聚合酶链反应(PCR)分别检测48例患者的胃黏膜和唾液标本中的幽门螺杆菌(Hp).结果对于胃黏膜Hp而言,组织学检查和PCR具有高度一致性.在胃黏膜Hp阳性的36例患者中,唾液标本的检出率为72.2%(26/36).在胃黏膜Hp阴性的12例患者中,有2例患者的唾液Hp呈阳性(16.7%).提示口腔感染可能是Hp的主要传播途径之一.PCR检测唾液Hp是一种有效的非侵入性Hp诊断方法,适用于Hp感染流行病学的调查.

    作者:华江;郑家驹;王毓明;李明珍 刊期: 2005年第01期

  • 外伤性结肠破裂15例治疗分析

    外伤性结肠破裂是腹部外伤中较严重的创伤之一,处理不当或延误诊断可能会导致严重并发症.现将我院1989年1月至2003年6月收治的15例的治疗分析如下.

    作者:戴佳文;赵建军;张志斌;吴小忠;强济华;史光华 刊期: 2005年第01期

  • 生长抑素受体显像对胰腺癌诊断价值的实验研究

    目的探讨99mTc-Sandostatin显像对胰腺癌的诊断价值及与肿瘤组织生长抑素受体(SSR)表达之间的关系.方法观察99mTc-Sandostatin在裸鼠体内的生物分布.对16只荷胰腺癌裸鼠模型行99mTc-Sandostatin显像,计算瘤体与对侧正常组织的放射性比值(T/N);用RT-PCR方法检测肿瘤组织的SSR1、SSR2、SSR5 mRNA的表达.结果99mTc-Sandostatin在裸鼠血液内清除迅速.11只荷瘤鼠的肿瘤组织有较高的放射性浓聚,注射99mTcSandostatin后6 h T/N达2.53±0.84;5只荷瘤鼠的肿瘤显像阴性,T/N为1.04±0.06.显像阳性的肿瘤组织的SSR1、SSR2、SSR5 mRNA表达均明显高于显像阴性的肿瘤组织(均P<0.01).显像阳性鼠T/N值与SSR2 mRNA水平成显著正相关.结论99mTc-Sandostatin生长抑素受体显像对胰腺肿瘤有较好的诊断价值;可在活体中评估胰腺肿瘤生长抑素受体亚型Ⅱ的表达水平,为今后受体介导靶向治疗胰腺癌提供依据.

    作者:瞿卫;王自正;王峰;立彦;王书奎 刊期: 2005年第01期

  • 儿童免疫性血小板减少性紫癜发病因素分析

    分析92例初治儿童免疫性血小板减少性紫癜(ITP)发病因素.结果:男性患儿占大多数为66例(71.7%),婴幼儿为主59例(64.1%),秋冬季易发病为64例(70.5%),发病前有感染病史达65例(70.7%),49例(53.3%)有不同程度贫血,血小板相关病毒阳性40例(43.5%),血小板抗体阳性62例(67.4%).提示病毒感染和贫血可能是ITP发病的诱因,男性、婴幼儿、秋冬季节易发病.

    作者:卢俊;柴忆欢 刊期: 2005年第01期

  • 脑血管疾病CTA与DSA检查对比分析

    为探讨螺旋CT血管造影(CTA)诊断脑血管疾病的价值,对22例脑血管疾病(脑动脉瘤15例,脑动静脉畸形7例)行CTA检查,三维重建采用大强度投影(MIP)和表面成像显示(SSD),21例同时行脑血管造影(DSA).结果:CTA对脑动脉瘤的敏感性为93.3%,特异性为100%.能明确动脉瘤的部位、大小、瘤颈及瘤体与载瘤动脉的空间关系;能可靠地显示动静脉畸形的位置、形态、供血动脉和引流静脉.提示CTA是有效的血管成像技术,对脑血管疾病有诊断价值.

    作者:王雪元;胡春洪;丁乙 刊期: 2005年第01期

  • COX-2、bcl-2和PCNA在前列腺癌中的表达及其意义

    目的探讨COX-2、bcl-2和PCNA与前列腺癌(PCa)生物学行为的关系.方法采用SP免疫组织化学法分别检测12例良性前列腺增生(BPH)和70例PCa标本中COX-2、bcl-2的表达.结果BPH和PCa组织中COX-2阳性率分别为8.33%和61.43%,PCa组织的COX-2、bcl-2和PCNA的表达明显高于BPH(P<0.05),且在PCa组织中COX-2、bcl-2和PCNA的表达随肿瘤分化程度降低和临床分期的增高而上调,转移组明显高于非转移组(P<0.05),bcl-2、PCNA在PCa中的表达与COX-2的表达之间存在相关性(P<0.05).结论COX-2的异常表达与PCa的生物学行为密切相关,COX-2可能通过促进前列腺细胞增殖和抑制细胞凋亡在PCa的发生过程中发挥重要作用.

    作者:丁翔;严春寅;温端改;侯建全;浦金贤 刊期: 2005年第01期

  • 不同病理模型大鼠脾切除后细菌吞噬功能的比较

    目的比较不同病理模型大鼠脾切除后细菌的吞噬功能.方法75只Wistar大白鼠建立正常对照、肝硬化、激素负荷、免疫抑制4组动物模型,行脾切除术.所有大鼠测定中性粒细胞体外吞噬功能,计算中性粒细胞的吞噬率(PR)和吞噬指数(SI).结果大鼠中性粒细胞对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌和大肠杆菌的平均PR分别为26.25%、22.60%和22.57%,平均SI分别为4.72、3.70和3.53,后两种细菌与金黄色葡萄球菌相比均有显著性差异(P<0.05).正常对照大鼠脾切除前后对细菌的平均PR分别为39.21%和30.71%,平均SI分别为5.48和4.11,脾切除前后比较有显著性差异(P<0.05).4组模型大鼠脾切除后对细菌的平均PR分别为30.71%、20.79%、14.46%和13.86%,后三组与正常脾切组比较均有显著性差异(P<0.01),平均SI分别为4.11、3.77、3.49和3.08,免疫抑制组与正常脾切组比较有显著性差异(P<0.05).结论大鼠中性粒细胞对肺炎球菌和大肠杆菌的PR和SI较低.脾切除术后大鼠对细菌的PR和SI均有下降.不同病理状态降低大鼠对细菌的PR和SI,因此临床上对病理性脾切除患者的围手术期处理应有充分的认识和准备.

    作者:曹苇;贾鑫;张丰;卢先州;徐敏晖;池元龙 刊期: 2005年第01期

  • 儿玉法保乳根治术22例临床分析

    按日本乳癌学会<保乳疗法指南(1999))筛选早期乳腺癌22例,严格按照儿玉法进行保乳根治术,并配套进行内分泌治疗、化疗和放疗.22例术后残乳都保留了较满意的外观和较好的生活质量.22例均在随访中,无1例复发和转移.认为保乳手术辅以放疗等综合治疗,疗效并不比传统的破坏性大的手术逊色,且由于保住了作为女性重要特征器官的乳房,对患者今后的生活质量有非常显著的正性意义,值得在临床推广应用.

    作者:何山;曹苇;高敏;张志德 刊期: 2005年第01期

  • 高龄食管癌贲门癌62例手术治疗分析

    手术治疗高龄食管癌、贲门癌62例,其中左开胸经食管床胃代食管38例,右胸、腹二切口或右胸、腹、左颈三切口食管癌根治术23例,剖胸探查1例.结果61例治愈出院,死亡1例,手术病死率1.6%;半年以上生存率98.4%,1年生存率85.4%;发生并发症30例.认为高龄食管癌、贲门癌患者在条件允许情况下均应采取手术治疗,高龄患者术后并发症的发生与围术期处理密切相关.

    作者:于曙东;何靖康;朱蔚 刊期: 2005年第01期

  • 经皮桡动脉冠状动脉造影的临床应用

    目的评价经皮桡动脉冠状动脉造影的临床应用价值.方法选择50例冠心病患者行经皮桡动脉途径冠状动脉造影术.术前和术后进行桡动脉多普勒超声检查,测定桡动脉内径和血流速度等参数的变化,观察有无并发症.结果48例桡动脉穿刺成功,成功率为96%;术后1例患者出现桡动脉闭塞,其余患者无并发症出现.术前和术后桡动脉内径等指标相比无明显差异(P>0.05).结论经皮桡动脉途径行冠状动脉造影是安全可靠的,它既可作为经股动脉途径的补充,也可作为首选途径进行冠状动脉造影.

    作者:徐卫亭;洪小苏;陈建昌;江建良;张强;余荣水 刊期: 2005年第01期

  • 人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达

    目的构建表达hIFN-λ3基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白.方法用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcD-NA3.1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建重组体pcDNA3.1A-hIFN-λ3,并在COS-7细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性.结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且确为hIFN-λ3,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白.结论该研究成功地克隆出hIFN-λ3基因编码序列,并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了rhIFN-λ3蛋白具有抗病毒活性,为今后干扰素的基因治疗奠定了基础.

    作者:马丽丽;王建红;盛伟华;谢宇锋;缪竞诚;杨吉成 刊期: 2005年第01期

  • 中西医结合治疗难治性卵巢癌疗效观察

    以艾素联合铂类药佐以中药经验方治疗难治性卵巢癌12例,并与以往采用CAP或CP方案配合中药治疗的11例比较.结果有效率(CR+PR)前者(83%)较后者(63%)显著提高(P<0.05),完全缓解率(分别为6/12和6/11)和2年(分别为7/12和7/11)、5年(分别为2/12和2/11)生存率无明显差异.艾素分为3周给药,可大大减少其副反应.认为艾素联合铂类药佐以中药经验方治疗难治性卵巢癌可提高疗效,延长生存期.

    作者:曾芹;高国俊 刊期: 2005年第01期

苏州大学学报(医学版)杂志

苏州大学学报(医学版)杂志

主管:江苏省教育厅

主办:苏州大学