学术投稿

竞争性定量RT-PCR检测妊高征患者血清对脐静脉内皮细胞TR基因表达的影响

丁洁;庞爱明;何杨;杨伟文

关键词:脐静脉内皮细胞, 逆转录PCR, 硫氧还蛋白系统, 妊高征
摘要:目的建立一种能有效检测培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中硫氧还蛋白还原酶(TR)基因表达的方法.探讨硫氧还系统与妊高征(PIH)发病之间的关系.方法以RT-PCR方法克隆TR基因,用内部缺失法构建其竞争模板,将竞争模板加入目的基因的逆转录扩增体系中,根据标准曲线得出模板中目的基因的含量.用该方法分别检测22例PIH患者及15名正常孕妇血清对体外培养的HUVEC中TR基因表达水平的影响.结果建立了竞争性定量逆转录-聚合酶链反应(cQRT-PCR)半定量分析TR基因表达水平的方法;用该方法测得PIH患者及正常孕妇血清均能使HUVEC中TR基因表达显著上调,且两者上调幅度无明显差异.结论 PIH患者内在TR基因调节缺陷是导致患者体内抗氧化能力不足的主要因素,与血清中病理性细胞因子改变无明显关系.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 万托林、爱全乐联合气动雾化吸入治疗小儿喘息性支气管炎疗效观察

    我科自2002年6月~2003年1月应用万托林、爱全乐联合气动雾化吸入治疗小儿喘息性支气管炎,取得较好疗效,现报道如下.

    作者:王劲波;顾燕明 刊期: 2004年第01期

  • 凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌中的表达及与生物学特性的关系

    目的研究肿瘤凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌发生发展中的作用.方法应用免疫组化法对28例胆囊癌及其癌旁组织、20例胆囊息肉和腺瘤组织检测基因Fas/APO-1、bc1-2的表达,并分析它们与胆囊癌生物学特性的关系.结果胆囊癌组织中bc1-2表达率与癌旁组织、息肉和腺瘤组织相比显著增高,而Fas/APO-1表达明显降低(均P<0.05);与肿瘤生物学特性的关系,bc1-2蛋白表达率在高、中分化组中明显低于低、未分化组,NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期低于Ⅳ、Ⅴ期,而Fas/APO-1蛋白表达则相反(均P<0.05).结论 bc1-2为胆囊癌细胞凋亡抑制基因,而Fas/APO-1则为促进基因,两者在胆囊癌的发生发展中起重要作用.

    作者:颜鸣;吴晓阳;李海 刊期: 2004年第01期

  • 原位逆转录PCR检测ppGalNAcT-2在胃癌细胞株SGC-7901的表达

    目的探索建立原位逆转录聚合酶链式反应方法以用于检测ppGalNAcT-2在细胞株中的表达.方法采用原位逆转录聚合酶链式反应检测胃癌细胞株SGC-7901中ppGalNAcT-2的表达.结果胃癌细胞株 SGC-7901中ppGalNAcT-2表达有差异,在细胞株中约有30%的细胞表达.结论原位逆转录PCR技术用于探索 ppGalNAcT-2在肿瘤细胞中的表达是可行的,它有助于对ppGalNAcT-2功能的进一步了解.

    作者:胡笳;徐爱华;莫建华;周迎会;吴士良 刊期: 2004年第01期

  • 单臂外固定支架治疗肱骨干开放性骨折36例

    我院1999~2002年用单臂外固定支架治疗肱骨干开放性骨折36例,取得了良好的疗效.现报告如下.

    作者:周子红;王建伟;周锦年;缪伟峰 刊期: 2004年第01期

  • 643例小儿病毒性肝炎病原学分析

    对643例小儿病毒性肝炎采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病原检测,并用聚合酶链反应(PCR)法检测HBVDNA和尿巨细胞病毒(CMV)DNA.结果:门诊383例HAV、HBV分别为 68.1%、19.6%;住院260例分别为8.1%、59.2%.提示小儿病毒性肝炎主要致病原为HAV和HBV,门诊以HAV为主,住院以HBV为主,且4~6岁组感染比例高.

    作者:尤海章;陆重琳 刊期: 2004年第01期

  • 2型糖尿病患者血浆NO、vWF和DD水平的变化及临床意义

    目的探讨2型糖尿病患者血浆一氧化氮(NO)、血管性假血友病因子(vWF)及D-二聚体(DD)的变化,了解它们在糖尿病血管病变中的变化及临床意义.方法采用硝酸还原酶法和酶联免疫吸附双抗体夹心法,测定40例2型糖尿病患者和23名正常人血浆NO、vWF和DD水平.结果糖尿病(无并发症)患者血浆NO水平( 47.64±18.38 μmol/L)明显低于正常人(75.49±15.66 μmol/L,P<0.01), vWF水平[(49.46±7.93)%]明显高于正常人[(23.69±3.63)%,P<0.01],DD水平(1.03±0.09 mg/L)明显高于正常人(0.25 ±0.36 mg/L );糖尿病并发肾病患者血浆vWF水平[(109.46±12.93)%]明显高于糖尿病无并发症者[(49.46±7.93)%,P<0.01].结论血浆NO、vWF及DD水平反映2型糖尿病患者血管结构和功能的改变,在糖尿病的临床进展和并发症的发生中起重要作用.血浆vWF水平有可能是2型糖尿病肾病发生的早期预测指标.

    作者:沈文红;沈蕾;胡晓慧;阮长耿 刊期: 2004年第01期

  • 自体血回输在髋关节手术中的应用

    将24例髋关节手术患者随机分为A、B两组,每组12例.A组采用自体血回收机回收术野出血,经过滤、离心、净化、清洗后,以洗涤红细胞的形式回输; B组完全输注库存血补充失血.记录回输血量及库存血输血量.结果:A组平均每例回收浓缩红细胞600 ml,除1例髋关节置换翻修患者因术中失血较多,输入400 ml血浆外,其余患者均未输库存血; B组平均每例输库存血550 ml.两组比较,A组共节约用血6000 ml.表明术中自体血回输是髋关节手术安全有效的补充失血的方法,对减少输库存血的机会具有临床意义.

    作者:吴学东;赵建华;方志源 刊期: 2004年第01期

  • 垂体卒中的不同影像学表现

    分析16例垂体卒中的X线、CT、MRI表现,对比它们诊断垂体卒中的特点.其中行X线检查4例;CT平扫+增强14例,2例仅做平扫;MR平扫+增强10例,6例仅做平扫.结果X线检查呈蝶鞍扩大3例,双鞍底1例.CT检查中,1例平扫表现为偏心性斑片状高密度影,增强后余部均匀强化;3例平扫呈斑片状高密度影,增强后无强化区面积大于平扫所见高密度区;10例呈均匀密度,增强后呈环形强化;2例未做增强者,1例见局限性低密度区,1例见一液平.MRI检查中,1例T1WI等信号环绕中央高信号,T2WI低信号;7例T1WI、T2WI均高信号;5例T1WI低信号,T2WI高信号;1例见1个有液平的囊性病灶;2例高低混杂信号.临床表现有2例无突发史.提示MR可明确辨别瘤体的占位情况,估计亚急性出血的新旧程度,MR增强并无补充诊断意义.

    作者:侯刚;郭亮 刊期: 2004年第01期

  • 胶原酶解离体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞

    用0.2%胶原酶Ⅰ解离原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞.取出主动脉胸、腹段,剥除外膜,血管纵向剖开,去除内皮细胞.撕下中膜,快速剪切,用0.2%胶原酶液置摇摆仪上振摆消化约8 h(37℃,35次/min),离心弃上清,加培养液,在37℃温箱培养.结果光电显微镜下见细胞呈梭形或长梭形.用抗肌动蛋白α-actin的单克隆抗体鉴定平滑肌细胞的特异性肌动蛋白,见胞浆内有明显的细胞细丝,呈现淡黄棕色,细丝与细胞长轴相平行,呈现阳性.表明用0.2%胶原酶解离原代培养法进行平滑肌细胞培养,细胞产量高、质量好、培养时间短、稳定性强、培养成功率高,是一种快速简便的培养方法.

    作者:李红霞;程绪杰;陈弹;周琳;杨向军;刘志华 刊期: 2004年第01期

  • 鼠脑缺血再灌注损伤后P-、L-选择素表达的研究

    目的研究P-、L-选择素在鼠局灶性脑缺血再灌注后的表达规律,探讨P-、L-选择素在脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 72只雄性SD鼠随机分为假手术组和脑缺血2 h再灌注2 h、3 h、4 h、6 h、12 h、24 h、48h组,采用尼龙线栓塞法建立鼠局灶性脑缺血再灌注模型,用免疫组化法检测脑组织缺血再灌注不同时间点P-、L-选择素的表达.结果假手术组未见P-、L-选择素的表达.P-选择素在脑缺血再灌注后3 h出现少量表达,12 h达高峰,48 h仍有表达;L-选择素在脑缺血再灌注后2 h出现少量表达,6 h达高峰,24 h仍有表达.结论鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中,P-、L-选择素表达明显上调,提示两者介导了白细胞、脑微血管内皮细胞的黏附,参与了脑缺血再灌注损伤的病理过程.

    作者:张世明;孙雪波 刊期: 2004年第01期

  • 苯那普利及其合用缬沙坦对心衰患者神经内分泌激素和心功能的影响

    将74例慢性心衰患者随机分为苯那普利治疗组(36例)和苯那普利合用缬沙坦组(38例),治疗前及治疗6个月后,用同位素放射免疫测定法和酶联免疫吸附法分别测定两组患者的血浆AngⅡ、ALD和NE水平,用心脏彩色多普勒超声诊断仪测量两组患者的左室射血分数(LVEF).结果:(1)苯那普利治疗后血浆NE水平明显降低,LVEF明显增高(均P<0.01);而血浆AngⅡ、ALD水平改变不大;(2)苯那普利加缬沙坦治疗后血浆NE、ALD水平明显降低,LVEF明显增高(均P<0.01),而血浆AngⅡ水平改变不大;(3)组间对比发现,苯那普利合用缬沙坦能更有效地降低血中NE、ALD的水平(均P<0.01),提高LVEF,且AngⅡ水平亦较单用苯那普利组明显下降(P<0.05).提示两种治疗方法都能提高CHF患者的LVEF,改善心功能;联合用药组在降低NE、AngⅡ和ALD水平方面明显优于单用苯那普利组.

    作者:金恒;华守明;刘志华 刊期: 2004年第01期

  • 非接触眼压计与Schiotz眼压计对正常人眼压的检测比较

    与传统的压陷式眼压计--Schiotz眼压计相比,非接触式眼压计因其方便、元污染、安全等优越性已在我科临床工作中受到重视和广泛应用.

    作者:钟蕾 刊期: 2004年第01期

  • 闭孔疝的诊断和治疗

    报告5例闭孔疝,均为老年女性,瘦弱体型,以不完全肠梗阻为首发症状.腹部平片均提示肠梗阻,B超检查未能提示梗阻原因,2例腹部CT检查示闭孔内幽闭的肠管从而确诊,余均经剖腹探查后确诊.术后并发症较多,治愈4例,死亡1例.认为闭孔疝术前诊断率极低,病死率较高,应加强对该病的认识.腹部CT检查是闭孔疝重要的诊断手段,对老年患者不明原因肠梗阻,常规行急诊CT检查,将显著提高闭孔疝的术前诊断率,有效降低病死率.

    作者:李国强;邢春根;纪建松 刊期: 2004年第01期

  • 经电视胸腔镜行肺叶切除术的麻醉处理

    我院自2000年3月至今,采用经电视胸腔镜术(Video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)行肺叶切除45例,现将麻醉处理总结如下.

    作者:仇正平;谢红;李华 刊期: 2004年第01期

  • 起搏器滞后功能治疗血管迷走性晕厥一例

    血管迷走性晕厥(VVS)是一种常见的神经介导性晕厥.发病时,血管扩张、心率骤降,导致心输出量明显降低,血压下降,可突然发生晕厥或晕厥前状态.本文报道1例VVS患者经药物治疗无效,进行双腔起搏治疗.

    作者:陈文;蒋廷波;刘志华;蒋文平 刊期: 2004年第01期

  • 反复自然流产患者血凝变化与抗心磷脂抗体的关系

    目的探讨反复自然流产(RSA)患者血凝改变与抗心磷脂抗体(ACA)的相关性.方法采用金标免疫斑点法测定40例RSA患者和同期40名已育健康妇女(正常对照组)的ACA,并用ELISA法分别检测了她们血浆中的6-酮-PGF1α、蛋白C(PC)、蛋白S(PS)、Annexin V抗体的含量. 结果 40例RSA组中ACA阳性率为47.5%.与正常对照组比较,RSA组中ACA阳性患者血浆6-酮-PGF1α、PC、PS水平有不同程度的下降,抗 Annexin V抗体的含量升高. 结论 ACA阳性患者自然流产的机制可能是ACA致抗凝物质抗凝效应降低,舒血管作用减弱,血液高凝,孕期胎盘血栓形成.

    作者:陈洁;沈宗姬;李红;徐文新;华月琴;徐新红 刊期: 2004年第01期

  • 干骺端纤维性缺损的X线表现特征分析

    分析17例20个经临床或病理证实的干骺端纤维性缺损(MFD)的X线表现.结果表明典型的MFD表现为干骺端纵向生长的局限性骨皮质缺损,境界清晰,可有骨嵴及硬化边缘.该病有自愈倾向,亦可长期存在.

    作者:吴林全;邢伟;俞胜男 刊期: 2004年第01期

  • 经胸超声心动图在肺栓塞中的诊断价值

    对临床综合诊断为肺栓塞的11例患者行经胸超声心动图检查.结果发现右心负荷过重改变9例,肺动脉高压10例,未发现右房、右室和肺动脉主干内血栓.表明超声心动图可提供右心负荷过重、肺动脉高压等间接征象,对肺栓塞的诊断有一定价值.

    作者:赵彩明;杨俊华;杨向军;宋建平;蒋廷波;惠杰;王育林;徐苏丹;王惠芬;周炳元 刊期: 2004年第01期

  • 腹部随意型带蒂真皮下血管网皮瓣临床应用712例报告

    采用761块腹部任意型带蒂真皮下血管网皮瓣(SVNF),移位修复手、前臂及上臂皮肤软组织缺损712例.断蒂时间为术后10~21 d.结果761块皮瓣完好存活749块,部分坏死9块,完全坏死3块.523例患者540块SVNF 获随访2个月~7年,肤色满意,质地柔软,滑动性良好,保护性感觉恢复.提示腹部SVNF具有设计随意、操作简单、断蒂早、感觉恢复快、供区隐蔽等优点,是修复上肢皮肤软组织缺损简单而较为理想的皮瓣.

    作者:贺楚宇;陆兴安;唐举玉;李波;刘俊;谢松林;刘鸣江 刊期: 2004年第01期

  • 电穿孔法基因转染悬浮细胞条件的优化

    目的以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因优化悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件.方法通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒GFP转入悬浮培养的人白血病细胞株K562和NB4,用流式细胞仪和荧光显微镜观察转染率.结果 (1)低电压、高电容能高效转染悬浮培养的人白血病细胞,细胞类型不同条件有所差异,K562细胞在250 V、950 μF得到大转染率40.6%,NB4细胞在350 V、950 μF得到大转染率32.9%.(2)良好的细胞生长状态能明显提高转染率.(3)温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大.结论电穿孔是一种高效的基因转染法,通过优化其条件,可提高转染率.

    作者:沈慧玲;陈子兴;王玮;段卫明;傅建新 刊期: 2004年第01期

苏州大学学报(医学版)杂志

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