于淼；杨晓明
Stathmin是细胞内重要的细胞周期相关的微管作用蛋白.在有丝分裂间期,Stathmin以有活性的去磷酸化形式存在,抑制微管聚合.当细胞进入分裂期,Stathmin被磷酸化失活,微管聚合形成纺锤体,进而染色体分离、细胞分裂.Stathmin的表达和活性受多种转录因子和激酶/磷酸化酶的凋控,其表达和活性异常与细胞增殖、神经系统发育及肿瘤等病理生理过程密切相关.
作者：时多；蒋恒义；缪明永；焦炳华 刊期： 2007年第04期
蛋白质组学是研究细胞、组织和器官内所有蛋白质的组成及其动态变化的科学,是在蛋白质水平上定量的、动态的、整体的研究生物体.目前蛋白质组学技术分为样品制备、分离和鉴定3个方面,其新技术主要有激光捕捉显微解剖法、离心超滤法、双向凝胶电泳、同位素亲和标签技术、色谱技术以及质谱技术等.然而,任何一种蛋白质组学研究技术都有其缺陷.因此多种技术的联合应用能使蛋白质组研究更精确和完整,是蛋白质组学的发展趋势.
作者：于靖；王方 刊期： 2007年第04期
来源于链霉菌噬菌体φC31的整合酶可通过介导链霉菌attB序列与多种生物内源性特异性序列产生重组反应,将外源基因定点整合到生物基因组中.在基因治疗研究中应用φC31整合酶,可使外源基因长期高水平表达,从而达到较好的治疗效果;且由于外源基因定点整合,故安全隐患较小.此外,φC31整合酶还可以用来生产外源基因定点整合的转基因动物,在基础研究和应用研究领域都有很高的潜在应用价值.
作者：徐焕宇；马晴雯 刊期： 2007年第04期
目的 为了获得能在转基因动物乳汁中高效表达人血小板生成素(TPO)的特异表达载体.方法 将山羊β-乳球蛋白基因5'端上游-3.9 kb和-1.9 kb调控序列及β-酪蛋白启动子分别与人TPO基因连接,构建了pB3.9T、pB1.9T和pPT3个乳腺特异表达载体.将上述载体分别进行瞬间转染和稳定整合筛选实验,从mRNA及蛋白水平检测TPO基因的表达.结果 BLG3.9、BLG1.9和P1A3 3种调控元件都可以启动人TPO在乳腺细胞中特异表达.瞬时转染时3种载体表达水平依次为pPT＞pB3.9T＞pB1.9T.但当外源基因稳定整合入细胞基因组后,TPO表达量持续升高,且pB3.9T表达量明显超过另外两种载体.结论 证实了BLG转录子去阻遏和激活转变调节的存在,可能在其5'端-3.9 kb与-1.9 kb之间存在这一调节区域.并且与BLG1.9相比,BLG3.9能更有效地启动人TPO基因在乳腺细胞中的表达,也说明在-3.9至-1.9 kb之间可能存在特殊的增强序列.
作者：刘茵；颜景斌；王强；方彧聃；潘树标；黄英 刊期： 2007年第04期
肿瘤发生与细胞凋亡异常密切相关,Caspase 8是细胞凋亡途径中的重要分子.研究发现,在肿瘤细胞中存在caspase 8基因突变、甲基化引起的表达降低等异常,导致细胞对凋亡刺激的敏感性降低,可能与肿瘤的发生,发展及治疗有关.
作者：徐智芳；王建祥 刊期： 2007年第04期
肝细胞核因子1A(hepatocyte nuclear factor 1A,HNF1α)是肝脏富集转录因子家族成员之一,调控多种肝脏特异基因的表达,参与维系肝脏的正常表型与功能.HNF1α与多种蛋白质相互作用,以复合体的形式发挥转录调节功能.复合体组成的动态变化在调控基因组织特异性表达、维持内环境稳定、修复组织损伤以及药物代谢中发挥了重要的作用.HNF1α的突变型改变了其在体内的相互作用网络,致使靶基因转录失调,诱发青少年发病型成人糖尿病(MODY3).
作者：于淼；杨晓明 刊期： 2007年第04期
RNA干扰是一种转录后基因沉默现象,可通过双链诱导使靶基因失活.为了增强对组织靶向性的治疗应用,目前研究有利用载体的特异性及基因重组构建进行调控作用于靶组织,也可以小分子基团特异性化学修饰小RNA双链或载体及其他微粒等方法提高组织靶向性.现已有部分RNA干扰治疗应用于临床,且通过组织靶向作用可拓展疾病治疗途径.
作者：孙桦；李光明；李定国 刊期： 2007年第04期
目的 研究重组纤黏连蛋白(FN)多肽CH50对小鼠黑色素瘤B16细胞体内转移的影响,以探讨CH50多肽抑制肿瘤转移的可能分子机制.方法 体外培养黑色素瘤B16细胞,用荧光染料CFSE标记,接种脾脏后24 h取脾、肝、肺做冰冻切片,观察肿瘤细胞在3种组织中的侵袭情况.从脾脏接种B16细胞,建立体内肿瘤转移动物模型,采用基于流体动力学的体内基因转染方法于小鼠体内表达CH50多肽,RT-PCR检测CH50 mRNA在肝组织的表达,Western印迹检测CH50多肽的表达.通过比较原位肿瘤结节及转移结节在数量、大小、分布上的差异及检测原位肿瘤组织中MMP-2、MMP-9表达差异,观察CH50多肽的治疗效果.结果 注射24 h后即可在脾脏形成荧光结节.pCH510质粒通过尾静脉注射后,可在肝组织中检测到CH50 mRNA及CH50多肽的表达.从脾脏接种B16细胞后第14天可在脾脏形成原发肿瘤,至第35天肝脏表面已形成转移瘤结节,成功建立了体内器官间(脾转肝)肿瘤转移动物模型.体内转染表达CH50多肽能抑制肿瘤生长、侵袭和转移,抑制原位肿瘤结节中MMP-2、MMP-9的表达.结论 CH50多肽可以通过对MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用来抑制黑色素瘤B16细胞的成瘤能力和体内侵袭、转移能力.
作者：朱明；张桂梅；黄波；刘毅；龚伟；冯作化 刊期： 2007年第04期
肝癌是威胁人类健康的主要疾病.基质金属蛋白酶(MMPs)是一类Zn2+依赖的蛋白水解酶,能参与细胞外基质的代谢.已有的研究表明,MMPs在肝癌的生长、血管形成、侵袭和转移等多个阶段中发挥重要作用,由此,MMPs成为极佳的肝癌候选易感基因,其基因多态性可能调节肝癌的易感性.然而,目前针对肝癌的遗传易感研究还不多见.随着人类基因组计划和单倍型图谱计划的完成,进行肝癌易感基因的鉴定对于指导肝癌的早期预防和治疗具有重要意义.
作者：邱炜；周钢桥；贺福初 刊期： 2007年第04期
人隔蛋白7(SEPT7)是隔蛋白家族成员,参与调控细胞内许多重要的生物学行为,现已初步发现SEPT7在神经肿瘤中表达下调,提示SEPT7与神经肿瘤具有相关性,文章对SEPT7与神经肿瘤的关系以及在酵母分裂过程中表达的与SEPT7高度同源的CDC10的资料进行了总结.
作者：贾志凡；浦佩玉 刊期： 2007年第04期
PKB/Akt是胞内信号转导通路网络的中心分子.活化的PKB参与多种生物学效应的调控过程,调控PKB活性作用机制的研究一直是信号转导通路领域的难点.新近的研究结果确定了若干新的调控PKB活性的激酶,从多方面解释了PKB活化和作用的分子机制.其中mTORC2、ATM和DNA-PK均通过磷酸化PKB的Ser473位点以依赖于PI3K的方式全面活化PKB;此外,其它以不依赖PI3K的方式调控PKB活性的激酶包括,RET/PTC通过磷酸化PKB的Tyr315位点、JNK通过磷酸化PKB的Thr450位点以及CK2通过磷酸化PKB的Ser129位点活化PKB,Brk通过磷酸化PKB的Tyr474位点以及GRK2均可通过磷酸化PKB抑制其活性.
作者：李围；杨晓明 刊期： 2007年第04期
中期因子(midkine,MK)作为肝素结合生长因子家族的一员,通过促有丝分裂和细胞增殖、促血管生成、诱导细胞恶性转化、抗凋亡等功能影响肿瘤细胞的增殖、分化及凋亡.MK在多种恶性肿瘤中呈过表达,且血清MK水平与预后不良呈正相关,因此MK有望成为一种新的肿瘤标志物;随着反义核苷酸、RNA干涉及特异性启动子参与基因治疗技术的发展,MK可能成为肿瘤基因治疗的新靶点.
作者：徐莹莹；刘云鹏 刊期： 2007年第04期
成熟的microRNA(miRNA)是一类长约18～24个核苷酸、内源性非编码小RNA分子,它在体内下调靶基因的表达.迄今在不同物种中已发现的miRNA达上千种.miRNA的发现为基因表达调控研究打开了新的窗口.目前研究者不仅关注miRNA在发育、分化、生长和代谢等诸多生物过程中的作用,而且开始进一步探寻其发挥作用的分子机理,以期重新描绘基因表达调控网络图.文章综述了miRNA对其靶基因的调控特点,介绍了miRNA自身调控研究的新进展,从而有助于理解miRNA参与的基因表达调控网络的复杂性.
作者：熊霞辉；陈梅红 刊期： 2007年第04期
多聚(ADP-核糖)聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]是真核细胞中存在的一种蛋白质翻译后修饰酶.而艾滋病已经蔓延到全世界各国,被传染上病毒的人数也正在大幅度上升.有研究指出,PARP-1主要在基因整合和转录两个水平调节HIV的感染.研究PARP-1与HIV的关系,可能会打开治疗艾滋病的新方向.
作者：黄神安；徐江晶；张吉翔 刊期： 2007年第04期
目的 研究PLAGL2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对SP-C基因(surfactant protein-C,SP-C)启动子的结合与影响作用.方法 定点诱变技术(site-directed mutagenesis)及凝胶电泳迁移实验(electrophoresis mobility shift assay,EMSA)研究PLAGL2与SP-C基因启动子之间的相互结合作用;体外培养MLE12细胞共转染和荧光素酶报告基因活性值检测技术,研究PLAGL2对SP-C基因启动子表达活性的影响;结果 EMSA及竞争性EMSA实验表明:PLAGL2能通过其核心和簇结合位点序列与同位素标记的SP-C基因启动子片段相结合形成蛋白-DNA复合物;细胞共转染及荧光素酶报告基因活性值检测结果显示:PLAGL2能明显促进SP-C基因启动子的表达.结论 在肺Ⅱ型细胞中,PLAGL2能与SP-C基因启动子相互作用并促进其表达.
作者：邓飞涛；王泽华；夏炎枝；吴超英；柴新群 刊期： 2007年第04期
血小板除参与正常的止血过程外还具有很多病理和生理作用.血小板活化后可以分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs).MMPs属于Zn2+和Ca2+依赖的内肽酶家族,能特异性与细胞外基质成分相结合并降解细胞外基质.MMPs降解基底膜中的主要成分Ⅳ型胶原,是肿瘤转移发生必不可少的关键步骤.血小板能够与肿瘤细胞结合并促进肿瘤转移,而MMPs在血小板促进肿瘤转移过程中发挥了重要的作用.
作者：苏醒；王字玲 刊期： 2007年第04期
目的 克隆、体外真核表达载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)基因并研究其抗病毒效应.方法 应用RT-PCR的方法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3F基因,构建HA-APOBEC3F融合蛋白真核表达载体pXFA3F,pXFA3F和具有复制能力的1.3倍HBV载体pHBV1.3共转染HepG2细胞,Western印迹检测APOBEC3F融合蛋白在HepG2细胞中的表达,ELISA方法检测细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg水平,实时定量PCR检测HBV相关mRNA水平变化.结果 克隆了APOBEC3F基因,其经测序与GeneBank公布序列一致;构建的APOBEC3F真核表达载体pXFA3F经转染可在HepG2细胞中瞬时表达;APOBEC3F可抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌,可使转染细胞内HBV相关mRNA水平下降.结论 成功克隆并真核表达了APOBEC3F基因,其在体外具有抗HBV生物学效应.
作者：马涛；雷延昌；郝友华；王宝菊；杨东亮 刊期： 2007年第04期
目的 构建人胎儿的骨膜组织的全长cDNA文库,了解该组织表达谱的特征.方法 以胎儿胫骨骨膜为材料,运用末端模板转换技术(SMART)构建cDNA文库,测定库容量并应用菌落PCR的方法确定平均插入片段长度,随后大规模测序并进行生物信息学处理分析.结果 所构建的cDNA文库的库容量为5.2×106,平均插入片段的长度为1.2 kb.随机测序了25 000余个克隆的序列,拼接后为5 230个聚类群(contigs)和4 714个独立EST(singleton),Blast比对分析得到骨膜基因表达谱的概况,发现了23个候选的新基因.结论 构建的骨膜组织的cDNA文库质量满足后续工作的需要,骨膜组织基因表达谱及一些新基因的获得为今后寻找骨膜组织特异性的基因从而研究骨相关疾病的发病机制、发现具有药物开发靶点的功能基因奠定了基础.
作者：王绍海；刘勇；宫伟雁；郑睿敏；林守清 刊期： 2007年第04期
目的 研究ACTH(1-24)对脂多糖(LPS)损伤的脐静脉内皮细胞(ECV304)的保护作用.方法 采用体外培养的ECV304为模型,分别观察对照组、LPS损伤组和ACTH(1-24)保护组的细胞活性及NO、TNF-α、细胞间黏附分子ICAM-1、核因子NF-κB家族成员p50、p52及趋化因子SCYA3、SCYB10的表达情况.结果 LPS(50μg/ml)可使ECV304的细胞活性降低,细胞的NO、TNF-α、NF-κB、SCYA3、SCYB10及ICAM-1的表达增强.ACTH(1-24)可以提高损伤细胞的活性,抑制上述细胞因子的高表达.结论 ACTH(1-24)可以阻断LPS对细胞的损伤,减少炎性介质和细胞因子的过度释放,对细胞具有明显的保护作用.
作者：姚璐；郑伟；赵莲；王波；王广义；王字玲；周虹 刊期： 2007年第04期
MicroRNAs(miRNAs)是一类大约22个核苷酸大小的非编码RNA,它们通过剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译从而起到转录后调控靶基因表达的作用.干细胞是指一类能够自我更新的,尚未分化的,但具有形成各种不同功能的终末分化细胞能力的细胞.在干细胞的分化过程中,大量基因参与其中,这些基因的表达水平会影响细胞分化的整个过程.MicroRNAs参与各种干细胞的分化过程,进而影响个体的发育.
作者：潘树标 刊期： 2007年第04期
医学分子生物学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学同济医学院
