学术投稿

人完整p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员多克隆抗体的制备及鉴定

蔡云;高兴;辛海明;陈杰;扬新;刘泽军

关键词:p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员, 多克隆抗体, 免疫原, 免疫印迹
摘要:目的:p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族可调节p53抑癌功能,其抑制成员(iASPP)具有特异性抑制p53诱导细胞凋亡的能力.为了对iASPP进行系统研究,文中报道制备完整的iASPP分子多克隆抗体的方法.方法:在完整iASPP独有的N端选择3个免疫原肽段,制备了3个多克隆抗体.用ELISA检测抗体效价,Western blot比较3个抗体检测内源性抗原的效果,并用体外转录翻译系统制备的完整iASPP蛋白作为对照标准.结果:1号抗体效价>1:32 000,2号和3号抗体效价>1:16 000.Western blot确定100 000为完整iASPP蛋白的条带位置.结论:成功地制备了iASPP的多克隆抗体,为深入研究完整iASPP提供了有用的工具.
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  • CT灌注成像在肿瘤研究中的应用

    血管生成是恶性肿瘤的一个重要特征,对肿瘤的发生、发展有重要作用.CT灌注成像(CTPI)是一种功能成像,能反映肿瘤解剖学特征和病理生理学改变,在微循环水平上反映肿瘤的血流动力学改变,临床上被广泛用来鉴别良、恶性肿瘤,早期发现微小病灶或转移灶,指导肿瘤分期或分级,评价肿瘤治疗的疗效等.应用领域涉及颅脑、甲状腺、唾液腺、乳腺、肺、肝、食管、肾、结直肠等多个器官的肿瘤.文中就CT灌注成像的原理及其在肿瘤研究中的临床应用作一综述.

    作者:左衍海;施鑫 刊期: 2009年第03期

  • 静脉肾盂造影、CT尿路造影及磁共振尿路成像在诊断泌尿系统结石中的价值

    目的:泌尿系统结石是急腹症常见疾病之一,目前,影像学检查方法很多,文中就静脉肾盂造影(IVP)、CT尿路造影(CTU)、磁共振尿路成像(MRU)检查技术的异同点以及在泌尿系统结石中的应用价值进行探讨.方法:100例尿路结石患者(经手术证实)其中80例实施IVP检查,60例实施CTU检查,35例实施MRU检查.100例中,25例患者均实施了IVP检查、CTU检查、MRU检查.CTU采用的重建技术主要包括多层面重组、曲面重组、容积再现和大密度投影;MRU主要采用大密度投影.结果:经IVP检查的80例患者中能够明确诊断的共有73例,诊断率为91.3%;所有经CT检查的60例患者,其中59例患者的结石能够确诊,图像直观,结石定位准确,诊断率为98.3%;MRU检查的35例患者结石共检出20例,诊断率为57.1%,图像能够显示结石部位低信号影、充盈缺损以及肾盂肾盏输尿管的积水情况.结论:IVP检查方法比较简便,患者易于接受,对结石具有较高的检出率;CTU具有图像质量好,对结石的检出率高,结合横断面图像,诊断率可达到98%以上;MRU对结石的显示不如CTU、IVP敏感,但是作为一种非侵袭性、无需造影剂的方法,对结石的诊断也起到十分重要的作用.

    作者:李峰;郑玲;张军 刊期: 2009年第03期

  • 人肺泡型细胞A549在大肠埃希菌诱导下非特异性免疫分子的表达

    目的:呼吸道上皮细胞在呼吸道固有免疫应答中起重要作用,文中探讨呼吸道上皮细胞对大肠埃希菌(E.coli)的应激反应能力及其作用机制.方法:常规体外培养A549细胞,细胞传代24h后加入灭活的E.coli,进行不同浓度或时间的诱导;用半定量RT-PCR法检测其细胞中白细胞介素(IL)-6、补体C3和C-反应蛋白(CRP) mRNA水平;ELISA法检测其上清液中IL-6、CRP和血清淀粉样蛋白A(SAA)蛋白水平,免疫比浊法检测其上清液中C3蛋白水平.结果:培养的A549细胞在不同浓度和不同时间的E.coli诱导下,表达IL-6、C3和CRP mRNA及IL-6、C3、CRP和SAA蛋白水平呈浓度和时间的依赖性.与对照组相比,均有显著性差异(P<0.05).结论:呼吸道上皮细胞在病原微生物刺激下,表达多种非特异性免疫效应分子,积极清除外来致病物,发挥重要的固有免疫防御作用.上皮细胞还可能在固有免疫和适应性免疫之间起连接作用.

    作者:朱俊;黄开泉;徐元宏;董磊;李春红;沙泉 刊期: 2009年第03期

  • 白细胞介素6对人原代脂肪细胞增殖分化的影响

    目的:近来研究显示,肥胖是一种慢性低度炎症,脂肪组织能够分泌众多炎性因子,其中,白细胞介素6(IL-6)是重要的介质之一.文中观察IL-6对人原代脂肪细胞的增殖和分化的影响.方法:用酶消化法获得人原代脂肪细胞,MTT法检测人原代脂肪细胞生长增殖的状况.分化液诱导脂肪细胞分化至产生脂滴,同时用不同浓度IL-6(0、1、5、10、50、100、1000pg/ml)干预脂肪细胞分化,油红O染色测定脂肪细胞脂滴合成状况.结果:IL-6能抑制脂肪细胞的增殖,其中5pg/ml组细胞增殖被抑制14.1%(P<0.05),10 pg/ml组被抑制18.7%(P<0.05).IL-6能够抑制细胞分化,减少脂肪的合成,其中1pg/ml组为明显(P<0.05).结论:IL-6能有效抑制人原代脂肪细胞的增殖,并且抑制人原代脂肪细胞从前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的分化.

    作者:陈杰;马向华;田振华;周媛媛;钱凤娟 刊期: 2009年第03期

  • 腰椎后外侧融合动物模型及邻近节段的病理变化

    目的:文献报道脊柱融合对邻近节段退变的影响均集中在生物力学、影像学方面,缺少相关的实验研究,本文通过建立腰椎后外侧融合动物模型,观察其对邻近节段椎间盘退变的影响.建立腰椎后外侧融合动物模型,观察其对邻近节段椎间盘退变的影响.方法:后正中暴露兔腰4~6椎板及横突,用0.8 mm钢丝行双侧腰4~6横突间8字内固定,然后用骨水泥包绕横突及钢丝.观察术后3个月、6个月时邻近节段椎间盘的病理改变.结果:组织学观察显示术后3个月时实验组L3-4椎间盘即有退变性改变,退变程度按Miyamoto分级为2级,至术后6个月时则退变更加明显,达3级.结论:腰椎后外侧融合会引起邻近节段椎间盘的退变加速.

    作者:许斌;陈跃先;赵建宁;王与荣;吴波 刊期: 2009年第03期

  • 女性盆底障碍性疾病的诊治

    盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)系因盆底支持组织薄弱而引发的盆腔器官位置和(或)功能异常,是以尿失禁、生殖器官脱垂、粪失禁、性功能异常、便秘以及慢性盆腔疼痛为主要症状的一组征候群,是中老年女性的常见病.据报道PFD的患病率占女性人口的40%~60%以上,已成为一突出的社会卫生问题 [1].

    作者:宋岩峰 刊期: 2009年第03期

  • Ⅰ期组合肌瓣加骨移植治疗小腿中上段骨软组织缺损

    目的:避免分期、多次手术治疗的缺点,探讨Ⅰ期组合肌瓣加骨移植修复小腿中上段大块骨软组织缺损的效果.方法:对7例小腿中上段骨软组织缺损采用组合肌瓣加颗粒状骨移植治疗,其中3例组合肌瓣是腓肠肌内侧头、胫前肌和比目鱼肌,3例是腓肠肌内侧头和胫前肌,1例是腓肠肌内侧头和比目鱼肌.结果:7例随访11~44个月,平均为28.4个月.5例获得骨愈合、Ⅰ期修复软组织缺损.1例术后出现胫前肌瓣部分坏死,再次行局部皮瓣转移覆盖,获得成功.另1例松开外固定支架锻炼时发生再骨折,闭合复位后重新拧紧支架,获得骨愈合.结论:小腿中上段大块骨软组织缺损采用Ⅰ期组合肌瓣加颗粒状骨移植治疗可获得较好的效果.切取胫前肌瓣时,应注意保留近端部完整的肌腹,以防发生缺血坏死.

    作者:陆维举;李斌;钱宏波;曾晓峰;许斌;陈勇;包倪荣;刘刚;赵建宁 刊期: 2009年第03期

  • 南京军区南京总医院发展策略的SWOT分析

    采用SWOT分析法,在全面剖析了南京军区南京总医院的内部优势与劣势,外部机会与威胁的基础上,提出了在新形势下实现医院科学发展的4个策略选择,即适应军事斗争卫勤准备的学科建设策略、激励机制完善的人力资源策略、提升品牌价值的营销宣传策略和强化核算的成本管理策略.

    作者:姚蓉琛;陈金未 刊期: 2009年第03期

  • 细胞因子信号转导抑制蛋白在JAK/STAT信号通路中的负反馈调节作用

    细胞因子信号转导抑制蛋白(SOCS)通过与受体介导的信号转导,调节细胞增殖、生长、分化及炎症发生等.SOCS与细胞因子相结合,通过不同的作用位点和途径负反馈调节JAK/STAT信号通路.

    作者:李敏利;朱人敏 刊期: 2009年第03期

  • 额隐窝的影像解剖学研究进展

    额隐窝属于筛迷路的前上部分,解剖结构复杂多变,对其解剖的深入了解是鼻内镜额窦手术的基础.随着CT技术的日新月异,其能显示更精细的解剖结构,从而为从影像学角度来研究额隐窝的解剖提供了更为有利的工具.文中就近年额隐窝影像解剖学方面的研究进展做一综述.

    作者:季俊峰;王秋萍 刊期: 2009年第03期

  • 虹膜固定型人工晶体有晶体眼植入术的护理体会

    目的:虹膜固定型人工晶体有晶体眼植入术是屈光矫正的新技术, 疗效好,由于患者年龄较轻,对手术认识不足,因此对护理提出了更高的要求.文中探讨虹膜固定型人工晶体植入术矫正高度近视的护理体会.方法:对30例(58只眼)高度近视患者植入Verisyse虹膜固定型人工晶体矫正高度近视,总结术前、术后的护理体会.结果:通过术前重点宣教、访视,术中积极配合,术后精心护理,所有患眼手术均顺利完成,术后效果满意.结论:开展有计划、有步骤、有重点的虹膜固定型人工晶体植入的护理,能有效保证手术质量,减少术后严重并发症的发生.

    作者:姜忠翠;叶红;陈穗桦;夏元;卢玉文 刊期: 2009年第03期

  • RNA干扰her2/neu基因表达抑制肺癌A549细胞增殖的研究

    目的:HER2/neu表达对肺癌细胞生物学的影响尚不明了,文中运用RNA干扰技术抑制HER2/neu表达,并观察对肺癌A549 细胞体外增殖的影响.方法:构建针对her2/neu基因的RNA干扰真核表达载体,运用脂质体介导转染A549 细胞并用G418筛选出阳性克隆株;半定量RT-PCR和Western检测转染后HER2/neu mRNA及蛋白的表达水平;FCM检测细胞周期分布; MTT法绘制细胞生长曲线观察体外细胞的增值能力.结果:成功构建针对her2/neu基因的RNA干扰真核表达载体(命名为psilence 3.1-HER2),转染后使A549 细胞HER2/neu mRNA和蛋白的表达较未转染组和阴性对照质粒转染组均显著下调;细胞G0/G1期细胞增加,S期细胞减少;细胞生长曲线右移、增殖速度明显减慢.结论:psilence 3.1-HER2能够稳定、高效、特异地抑制肺癌A549内her2/neu基因的表达,可显著抑制细胞增殖.针对her2/neu基因的RNAi策略有望成为肺癌的基因治疗的新选择.

    作者:申萍;张方;吴学玲;施毅;钱桂生;罗向东;胡波;宋勇 刊期: 2009年第03期

  • 基质金属蛋白酶和血管内皮生成因子的生物学特征及其在鼻咽癌细胞浸润和转移中的作用

    在鼻咽癌转移机制研究中,基质金属蛋白酶(MMP)和血管内皮生长因子(VEGF)被认为对肿瘤细胞转移起关键性作用,其通过对肿瘤细胞外基质的降解及诱导新生血管、淋巴管形成,促进鼻咽癌细胞浸润及转移.通过研究MMP与VEGF促进鼻咽癌细胞浸润与转移的作用机制,有助于进一步认识鼻咽癌的转移机制,探索和开发鼻咽癌新的诊断和治疗方法,对发展其他组织肿瘤诊断和治疗的新方法也有重要意义.现就MMP、VECF与鼻咽癌转移作一综述.

    作者:吴新正;何迎春;田道法 刊期: 2009年第03期

  • 人工关节无菌性松动的分子机制及药物干预

    人工关节置换广泛用于终末期关节疾病的患者,以改善其生活质量.有部分关节置换患者的假体发生无菌性松动,目前认为,核激活因子受体配体-核激活因子受体-骨保护素-核因子-κB(RANKL-RANK-OPG-NF-κB)系统起着重要的作用.文中就RANKL-RANK-OPG-NF-κB系统如何调控假体周围骨溶解及骨溶解的药物干预进行综述.

    作者:朱亮亮;赵建宁 刊期: 2009年第03期

  • 新时期军人护士心理健康水平的调查分析

    目的:针对新时期部队军人护士的心理健康特点、影响因素及提高军人护士对军事应激调控能力的措施等报道少见.文章探讨军人护士在新时期部队精简整编过程中的心理健康水平及应对措施.方法:采用心理测量法和心理访谈法对123名军人护士心理健康状况进行调查,并对结果进行分析. 结果:123名军人护士中,焦虑分<50分者占70.73%;各种心理问题发生率在0.81%~3.25%;心理应激分<70分者占71.54%. 结论:护理管理者应加强军人护士的心理健康教育,帮助其营造良好的心理环境,提高优质服务水平.

    作者:王娟娣;李玉刚;周曼颖;张稳;王红 刊期: 2009年第03期

  • 超声造影对肝局灶性病变的诊断价值

    肝局灶性病变的定性诊断是临床研究的难点.超声造影通过对肝局灶性病变血流灌注信息的评价,提高了超声检查的敏感性和特异性.文章对超声造影在肝局灶性病变的诊断价值作一综述.

    作者:黄润生;顾成章;杨斌 刊期: 2009年第03期

  • 创伤性膈肌破裂的急救与护理

    目的:探索创伤性膈肌破裂(TDR)的护理方法,总结经验,提高抢救成功率,为临床提供参考依据.方法:回顾性分析1995年1月至2007年1月28例TDR患者的诊疗经过及护理方法,提炼出护理要点.结果:28例经积极有效的治疗及细致的护理,均痊愈出院.结论:早期诊断、积极治疗和细致的护理合并伤是救治TDR的关键.

    作者:曹涌 刊期: 2009年第03期

  • survivin与胰腺癌的研究进展

    胰腺癌恶性程度很高,早期特异性诊断和治疗成为延长患者生存期的关键.survivin是凋亡抑制蛋白家族中强的凋亡抑制因子,许多常见肿瘤都有其特异性表达,已成为肿瘤诊断和治疗研究的热点.现就survivin在胰腺癌中的表达、与胰腺癌的预后、胰腺癌的survivin靶向治疗等研究进展作一综述,并探讨胰腺癌靶向survivin分子影像诊断的可行性.

    作者:吴江;王中秋;朱虹 刊期: 2009年第03期

  • 人完整p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员多克隆抗体的制备及鉴定

    目的:p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族可调节p53抑癌功能,其抑制成员(iASPP)具有特异性抑制p53诱导细胞凋亡的能力.为了对iASPP进行系统研究,文中报道制备完整的iASPP分子多克隆抗体的方法.方法:在完整iASPP独有的N端选择3个免疫原肽段,制备了3个多克隆抗体.用ELISA检测抗体效价,Western blot比较3个抗体检测内源性抗原的效果,并用体外转录翻译系统制备的完整iASPP蛋白作为对照标准.结果:1号抗体效价>1:32 000,2号和3号抗体效价>1:16 000.Western blot确定100 000为完整iASPP蛋白的条带位置.结论:成功地制备了iASPP的多克隆抗体,为深入研究完整iASPP提供了有用的工具.

    作者:蔡云;高兴;辛海明;陈杰;扬新;刘泽军 刊期: 2009年第03期

  • 淫羊藿总黄酮对慢性心力衰竭大鼠肿瘤坏死因子-α、一氧化氮、环磷酸鸟苷通路的影响

    目的:观察淫羊藿总黄酮(TFE)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠左心室重量指数(LVWI)及血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、左心室心肌一氧化氮(NO)、左心室心肌环磷酸鸟苷(cGMP)改变的影响.方法:用异丙基肾上腺素(ISO) (170mg/kg)对SD大鼠皮下注射2次,6周后依据超声心动图检测左心室短轴缩短率(FS)<45%确定CHF造模成功,按照FS顺序将48只大鼠随机分为4组:TFE低剂量组(TFE-L)、TFE中剂量组(TFE-M)、TFE高剂量组(TFE-H)、CHF组.空白对照(CON)组10只. 结果:与CON组相比,CHF组大鼠出现心率(HR)、左心室舒张末压力(LVEDP)、大鼠LVWI显著升高(P<0.01),左心室内压峰值(LVSP)和左心室压力上升/下降大速率(±dp/dtmax)明显降低(P<0.01),血浆TNF-α及左心室心肌NO浓度显著增高(P<0.01),左心室心肌cGMP浓度显著降低(P<0.01).与CHF组相比,TFE各剂量组LVEDP和TNF-α显著降低(P<0.01),左心室±dp/dtmax 显著增加(P<0.01);TFE-H组HR降低(P<0.01)、LVSP升高(P<0.05),左心室心肌cGMP浓度明显增高(P<0.01) ,LVWI明显减低(P<0.01);TFE-M、TFE-H组左心室心肌NO明显降低(P<0.01).结论:TFE具有减轻CHF大鼠左心室重塑的作用,能改善大鼠的心功能,其机制与降低TNF-α、NO、升高左心室心肌cGMP浓度有关.

    作者:蔡辉;陈向民;赵凌杰;沈思钰;赵智明;郑召岭 刊期: 2009年第03期

医学研究生学报杂志

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主管:南京军区联勤部卫生部

主办:南京军区南京总医院