张宗军;卢光明
14-3-3蛋白是高度保守的可溶性酸性蛋白家族,近年的研究表明,它们在细胞有丝分裂、生长、分化、增殖和死亡等过程中起重要的调控作用.其中14-3-3σ主要存在于上皮细胞,具有组织特异性,可以与细胞内多种信号蛋白相互作用,促进DNA损伤后的细胞周期G2期阻滞,调控细胞的生长、分化和增殖等多种生物学功能,在肿瘤发生发展过程中表达异常,可能由p53突变或启动子CpG岛超甲基化引起,与人类恶性肿瘤的发生发展及预后密切相关.该文作者仅就14-3-3σ蛋白在人类恶性肿瘤中的研究进展作一综述.
作者:潘敏鸿;周晓军 刊期: 2007年第04期
目的:评价右股动脉粥样硬化性狭窄(RFASS)与冠状动脉粥样硬化(CAAS)的关系.方法:41例行冠状动脉造影患者根据结果分为正常组和冠心病组.冠心病组根据冠状动脉病变支数分为一支病变组和二支病变组、三支病变组.冠状动脉造影同时行右股动脉造影,观察右股动脉有无狭窄及狭窄程度,计算狭窄评分.结果:冠心病组RFASS发生率与正常组无显著性差异;随冠状动脉病变支数的明显增加,RFASS评分增大;RFASS预测冠心病的敏感性、特异性分别为58.1%、80%.结论:冠状动脉病变者RFASS的发生率高,在一定程度上,冠状动脉程度越重RFASS的程度亦越重,二者间存在正相关.RFASS对预测冠状动脉病变的敏感性欠佳,尚不支持其作为冠心病的筛查指标.RFASS及(或)双侧股动脉粥样硬化性狭窄可否作为冠心病的独立危险因素,有待大样本的研究进一步验证.
作者:张凯;郑兴;顾萍;徐军;缪东培;包知达;马驰原;朱晓蔚 刊期: 2007年第04期
目的:寻求一种快速稳定的方法从人外周血中诱导培养出成熟的树突细胞(DC).方法:用密度梯度离心法从正常人外周血中分离出单个核细胞(PBMC),再用贴壁法获取单核细胞,在0h加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4),随后分四组继续培养:第一组在24 h加入多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸[Poly(I∶C)],继续培养24h,于48 h收集DC细胞,即48 h Poly(I∶C)组;第二组在24 h加入肿瘤坏死因子α(TNF-α),继续培养24 h,于48 h收集DC细胞,即48 h TNF-α组;第三组在36 h加入Poly(I∶C),继续培养36 h,在72h时收获DC细胞,即72 h Poly(I∶C)组;第四组在36h加入TNF-α,继续培养36h,于72h收集DC细胞,即72 hTNF-α组.同时设立对照组,仅加GM-CSF和IL-4.结果:经流式细胞仪检测72 h Poly(I∶C)组获得的成熟DC细胞的百分比含量高;混合淋巴细胞培养(MLC)表明72 h Poly(I∶C)组获得的DC细胞具有较强的刺激淋巴细胞增殖的能力.结论:Poly(I∶C)诱导下人外周血DC的体外培养与成熟的方法是具有快速、稳定、经济、简便的特点,为DC的深入研究和临床应用奠定了基础.
作者:李丽;刘宝瑞;钱晓萍;俞立霞 刊期: 2007年第04期
目的:总结应用腓骨肌皮瓣修复下颌骨缺损的经验.方法:对8例因肿瘤切除造成的下颌骨缺损患者,用血管化腓骨肌皮瓣修复.将腓骨截为2~4段以恢复下颌骨外形,用钛板内固定,皮瓣用于修复软组织缺损或作为观察其血液循环的观察窗.结果:8例患者移植的腓骨肌皮瓣全部成活,颌面部外形和功能恢复良好.结论:可根据下颌骨缺损的部位和形态对腓骨肌皮瓣进行截骨和塑形.血管化的腓骨肌皮瓣移植是下颌骨缺损较为理想的修复方法.
作者:孟昭业;张森林;毛钊 刊期: 2007年第04期
目的:针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白D(gD),以热休克蛋白70(Hsp70)为载体,构建pVAXHsp70-HSV2gD DNA疫苗.方法:将Hsp70和HSV-2gD蛋白的基因分别克隆至真核表达载体pVAX,构建成重组质粒pVAX-Hsp70-gD并测序鉴定.重组质粒pVAX-Hsp70-gD转染COS-7细胞,用免疫组化、SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定重组质粒的表达情况.结果:测序证实重组质粒序列正确,表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为92000处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致.免疫组化方法和Western blotting也证明,构建的重组质粒能在COS-7细胞内表达.pVAX-Hsp70-HSV2gD组核酸疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其他组(P<0.05).结论:成功构建了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,为其进一步的研究打下了基础.
作者:樊建勇;杨慧兰;关蕾;王颖;仕瑶慧 刊期: 2007年第04期
小脑发育不良性神经节细胞瘤(Lhermitte-Duclos Disease,LDD),据WHO神经系统肿瘤分类(2000年)将其归于神经元和混合性神经元-神经胶质肿瘤,编号为9493/0[1],属于良性脑肿瘤Ⅰ级,具有错构瘤和真性肿瘤两者的特征,十分罕见,国内外报道均较少.由于其特征性的MR表现有助于术前定性诊断,作者对1例LDD患者重点进行CT、MRI介绍,并进行文献复习.
作者:许健;卢光明;张新华 刊期: 2007年第04期
我们对近5年来血培养中真菌培养阳性率、菌种分布及其与相关基础疾病、感染因素进行了分析,报道如下.
作者:路光军;李珍大;邵海枫;张小卫;王卫萍;史利宁 刊期: 2007年第04期
克罗恩病(CD)的病因仍不明确,但大量证据表明CD患者的免疫系统异常是造成炎症和组织损伤的内在因素,现已明确可以通过血清学标记来预测、监测、治疗许多免疫介导的疾病.寻找理想的非侵人性的炎性肠病(IBD)筛选方法的研究仍在进行,其目的是要找到一种高度特异性、敏感性及预测性的标记或标记物组合.作者就应用血清学标记物在CD发病机制中的作用及诊断的研究进展作一综述.
作者:胡晓磊;赵允召 刊期: 2007年第04期
目的:研究凋亡相关基因PUMA在奥沙利铂(oxaliplatin)治疗大肠癌药物机制中的作用,为更好地发挥奥沙利铂的抗肿瘤作用提供实验基础.方法:蛋白印迹法检测在大肠癌LoVo细胞株中奥沙利铂对PUMA蛋白表达的诱导作用;构建稳定表达反义PUMA基因的重组质粒及细胞系;流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法测定细胞增殖.结果:成功构建表达反义PUMA基因的重组质粒及细胞系;在大肠癌LoVo细胞株中,奥沙利铂可以诱导PUMA的表达,并在一定范围内呈时间和剂量依赖关系;在PUMA的表达受抑制后,奥沙利铂诱导大肠癌细胞凋亡的作用明显减弱.结论:PUMA的表达在奥沙利铂诱导LoVo细胞凋亡的过程中具有重要作用,PUMA表达的抑制会降低大肠癌LoVo细胞对奥沙利铂治疗的敏感性.
作者:王新颖;何美蓉;李明;姜泊 刊期: 2007年第04期
多药耐药性是肿瘤化疗失败常见的原因,ATP结合盒(ABC)药物转运蛋白在肿瘤多药耐药性中产生了重要的作用.ABCC1是ABC转运蛋白超家族成员,通过介导细胞内药物排出、改变药物在细胞内分布,进而引起肿瘤耐药.作者就ABCC1介导的多药耐药及逆转的研究作一综述.
作者:李雅婷;窦骏 刊期: 2007年第04期
双源CT具有双球管和双组探测器,其单扇区重建时间分辨率可达83ms,可在不控制心率的情况下获得高质量的冠状动脉血管图像.同时,双球管可同时输出不同能量的X线,提高了CT对不同组织的鉴别能力,拓展了CT的应用范围,提高了对病变诊断的正确性.
作者:张宗军;卢光明 刊期: 2007年第04期
目的:观察氟去氧葡萄糖(FDG)正电子发射型计算机断层扫描/计算机体层扫描(PET/CT)显像和传统分期检查方法对恶性淋巴瘤分期和治疗后再分期的影响,以探讨其临床应用价值.方法:采用视觉分析和半定量分析相结合的方法,比较42例病理确诊为恶性淋巴瘤患者传统分期检查和PET/CT对分期和治疗后再分期的符合率,以及对淋巴结区和结外病灶检出率的差异.结果:PET/CT检查与传统分期手段对分期判断的符合率分别为95.2%(40/42)和78.6%(33/42).对淋巴结内病灶传统分期检查的检出率为88.2%(60/68),PET/CT为97.1%(66/68),两者间差异有显著性意义(P<0.05);对淋巴结外病灶传统分期检查的检出率为58.3%(14/24),PET/CT为91.7%(22/24),两者间差异有极显著性意义(P<0.01).PET/CT检查使TNM分期改变者9例,达21.4%,其中分期升高7例,下降2例,8例(19.0%)的治疗计划发生改变.结论:FDG PET/CT可提高恶性淋巴瘤的分期和再分期的准确率,并可提高淋巴结内外病变的检出率,这有利于更准确地制订治疗方案和预测预后.
作者:张群;陈龙邦;王靖华;朱虹;耿怀成;褚晓源;管晓翔;宋海珠;金洁 刊期: 2007年第04期
痕量DNA又称低拷贝模板(low copy number,LCN).Gill等[1]初对其定义为少于100 pg的DNA模板.现有的PCR-STR方法,虽从一定程度上解决了微量模板DNA分析的难题,但对于痕量DNA仍很难检测成功.
作者:陈玲;王慧君;刘超 刊期: 2007年第04期
目的:探讨在冠状动脉旁路移植术(CABG)中用自体骨髓干细胞(BMSC)移植对心肌梗死区域心功能的影响.方法:选取20例心肌梗死患者随机分成CABG+BMSC移植组(移植组,n=10)和CABG组(对照组,n=10)两组.对照组只行CABG,移植组在CABG的同时用制备BMSC悬液在梗死区域作多点局部注射.术后两组均随访4周和8周,观测左心室功能和梗死区域的节段性室壁运动情况以及血供情况.结果:对照组术后第4周心功能有所改善,但与术前比较无统计学意义,第8周改善明显(P<0.05).移植组第4周,心功能参数均比术前有明显改善,左室射血分数(LVEF)明显提高(P<0.05),左室舒张末期直径(LVEDD)较术前明显缩小(P<0.05),左室舒张末期容积(LVEDV)较术前明显缩小(P<0.05),梗死区域节段性室壁运动改善;QRS记分明显降低,而且低于对照组(P<0.05);心肌核素灌注断层显像(ECT)放射性核素缺损区显著小于术前,且小于对照组(P<0.05).结论:CABG改善了心肌的血供情况,BMSC移植则有效地缩小了梗死坏死区域,改善了节段性室壁异常运动,使心脏功能得到改善.
作者:封锡清;高杰;渠敬明;周亚;王虎;景华 刊期: 2007年第04期
目的:构建天花粉蛋白(TCS)突变体,并将其在原核系统内进行表达及纯化.方法:借助计算机预测TCS可能的抗原决定簇(YFF81-83)并设计出适当的突变引物.以栝楼基因组DNA为模板,利用重组PCR技术扩增TCS突变体全长基因,经BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后与原核表达载体pRSET-A连接,转化感受态E.coliDH5α,提取质粒进行酶切鉴定及测序.将所获阳性重组质粒转化感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,对表达产物进行Western blot鉴定.后用Ni-NTA亲和层析柱对所获突变体蛋白进行纯化.结果:成功构建了TCS突变体(TCSYFF81-83ACS),并获得了突变体蛋白在大肠杆菌内的可溶性高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,产生出大量均一的TCS突变体蛋白.结论:TCS的定点突变及其在原核系统内的表达,为基因工程方法改造TCS提供了新的途径.
作者:安群星;穆士杰;张献清;陈蕤;吴原茹;夏爱军;雷迎峰;黎志东;徐志凯 刊期: 2007年第04期
人膜连蛋白V(Annexin V)是钙离子依赖的磷脂结合蛋白Annexin家族成员之一,与人Annexin V有关的血栓形成机制是当前血栓学研究的热点课题之一[1].
作者:邱红;王静;江淑芳;陈军浩;邢继成;朱月蓉 刊期: 2007年第04期
现代屈光手术的概念是在20世纪80年代以来逐渐建立起来的,包含有一大批实用可行、安全可靠的手术技术和更多的正在研究、发展之中的手术方法,包含了眼科学一个全新的体系.
作者:黄振平 刊期: 2007年第04期
目的:通过对脱蛋白骨制备过程中骨块大小、保存方法的改进及理化性能研究,探索为长骨大段缺损修复提供合适的支架材料.方法:将猪股骨下端松质骨沿骨小梁方向制成30mm×3mm×3mm大小骨块.参照改良法制备脱蛋白骨,进行深低温(-85℃)冷冻3个月,蒸馏水浸泡48 h后置入干燥箱内烘干,真空抽气、包装,60Co照射消毒,-4℃保存备用.对脱蛋白骨进行形态结构、组成成分、力学性质及细胞相容性检测.结果:本法制备的脱蛋白骨具有天然网状结构,其无机成分为羟基磷灰石,有机成分为Ⅰ型胶原,力学性能良好,有良好的细胞相容性,细胞上架率高,无明显的免疫排斥反应.结论:本法制备的猪脱蛋白骨各项性能良好,可用作长骨大段缺损修复的支架材料.
作者:简月奎;吴雪晖;谢肇;杨柳;李起鸿;刘雷;高春阳;段小军 刊期: 2007年第04期
目的:研究多次小剂量131I-血管抑素(AS)放射受体治疗(RRT)对荷瘤小鼠肿瘤的治疗作用及其安全性.方法:采用荷Lewis肺癌小鼠模型,分别给予多次小剂量RRT、化疗、单次大剂量RRT治疗,观察14 d内肿瘤体积变化和小鼠生存期,并用免疫组化法检测各组肿瘤中CD34和核因子-κB(NF-κB)P65的表达以及正常小鼠RRT后体重、外周血白细胞和血小板的改变.结果:实验结果显示,多次小剂量RRT组小鼠生存期延长(P<0.05),疗效优于其他各组(P<0.01).大、小两种剂量131I-AS对小鼠的白细胞、血小板数量无显著影响;免疫组化法检测显示,131I-AS治疗组肿瘤中CD34和NF-κB P65的表达明显低于单纯化疗组(P<0.01).结论:多次小剂量RRT优于化疗;131I-AS小剂量放射免疫治疗对小鼠外周血白细胞、血小板无明显抑制作用.
作者:袁梦晖;徐海峰;邵秋菊;周润锁;张王峰;王磊 刊期: 2007年第04期
目的:观察瘦素对人肝癌细胞株Huh 7增殖活性的影响,并初步探讨其可能的机制.方法:在培养液中加入不同浓度的瘦素后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量PCR和免疫细胞化学法检测细胞周期调控蛋白Cyclin D1和P21waf1的表达.结果:MTT检测显示,瘦素可促进Huh 7细胞的增殖,有一定的时间和剂量依赖性;流式细胞仪检测结果显示,瘦素能明显降低G0/G1期细胞比例并提高S期细胞比例;瘦素(100 ng/ml)处理24h后,实时荧光定量PCR检测发现Cyclin D1 mRNA表达量增高至对照组的3.15倍,P21waf1 mRNA表达量则为对照组的55%,两者均有显著性差异(P<0.01).免疫细胞化学染色结合图像分析系统分析也发现100 ng/ml的瘦素处理24h后,与对照组相比,Cyclin D1蛋白的表达明显增高(P<0.01),P21waf1蛋白的表达明显降低(P<0.01).结论:瘦素可通过促进Cyclin D1表达、抑制P21waf1表达,使人肝癌细胞Huh 7由G0/G1期向S期转换,从而促进其增殖.
作者:戴锴;田德英 刊期: 2007年第04期