学术投稿

小鼠破骨细胞骨髓诱导培养体系的建立

钱红波;赵建宁;姚静;曾晓峰;陆维举;胡云峰

关键词:破骨细胞, 细胞因子, 培养体系
摘要:目的:建立一个有效的破骨细胞培养体系,为研究和防治骨溶解和骨质疏松症提供实验基础.方法:在无菌条件下取小鼠股骨、肱骨,收集骨髓细胞,分为对照组和实验组.对照组不加入细胞因子;实验组加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)25ng/ml和骨保护素配体(RANKL)25ng/ml,进行破骨细胞骨髓诱导培养.观察比较两组抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞和骨吸收陷窝,并用扫描电镜观察骨吸收陷窝形态.结果:实验组破骨细胞数量多,功能活跃,与对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01).结论:本实验成功建立了小鼠破骨细胞骨髓诱导培养体系.
医学研究生学报杂志相关文献
  • 整形美容的心理学相关问题分析

    随着人们物质文化生活水平的提高,我国整形美容外科得到了迅速发展.医学美容的目的是为了引发自我及他人心中的美感,而美的概念形成及对美的判断是一个心理过程,因此,医学整形美容外科学与心理学有着密不可分的联系.正如英国整形外科医生Manchester所说,美容外科很大程度上是一个心理和社会的过程[1].在生物-心理-社会的医学模式下研究整形美容心理学,既可改善患者的情绪状态,提高其生活质量,有利于患者康复,又有利于医师在医疗工作中处于主动地位,减少医患之间的纠纷.

    作者:姜会庆 刊期: 2006年第08期

  • 小鼠破骨细胞骨髓诱导培养体系的建立

    目的:建立一个有效的破骨细胞培养体系,为研究和防治骨溶解和骨质疏松症提供实验基础.方法:在无菌条件下取小鼠股骨、肱骨,收集骨髓细胞,分为对照组和实验组.对照组不加入细胞因子;实验组加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)25ng/ml和骨保护素配体(RANKL)25ng/ml,进行破骨细胞骨髓诱导培养.观察比较两组抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞和骨吸收陷窝,并用扫描电镜观察骨吸收陷窝形态.结果:实验组破骨细胞数量多,功能活跃,与对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01).结论:本实验成功建立了小鼠破骨细胞骨髓诱导培养体系.

    作者:钱红波;赵建宁;姚静;曾晓峰;陆维举;胡云峰 刊期: 2006年第08期

  • 非诺贝特对新生大鼠体外肥大心肌细胞的影响

    目的:研究过氧化物酶体增殖物活化型受体α(PPARα)激活物非诺贝特对大鼠体外心肌细胞病理肥大的影响.方法:新生大鼠原代心肌细胞培养后,用不同时间、不同浓度的PPARα配体非诺贝特预处理细胞,然后以血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导其肥大.采用软件分析细胞面积,以RT-PCR法检测肥大心肌细胞α、β-肌球蛋白重链(α-MHC、β-MHC)及PPARα mRNA表达的影响,单四唑(MTT)比色法测定非诺贝特对Ang Ⅱ处理细胞活力的干预作用.结果:非诺贝特预处理24h可逆转Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,α/β-MHC mRNA表达比值降低及细胞活力的改变,同时增加PPARα mRNA的表达,并呈一定剂量依赖性;而非诺贝特和Ang Ⅱ几乎同时处理细胞时,则无明显效应.结论:PPARα参与心肌细胞肥大过程,长期慢性非诺贝特预处理可能对心肌有保护效应.

    作者:杨永曜;李隆贵;吴强;胡琴;耿昭华 刊期: 2006年第08期

  • Eotaxin原核表达载体的构建及初步表达

    目的:获得人嗜酸性粒细胞趋化因子Eotaxin 基因,构建其原核表达载体,并初步表达成熟的Eotaxin,为进一步构建其N-端突变体,检测其生物学活性作准备.方法: 提取外周血单个核细胞细胞总RNA ,经RT-PCR 扩增编码人Eotaxin全长cDNA 序列,并将其克隆至T载体进行序列测定,然后构建于原核表达载体PET30a+中,并转入大肠杆菌表达.结果: RT-PCR 扩增得到了400 bp左右的DNA 片段,序列分析发现其中包含了GenBank中报道的编码Eotaxin cDNA 序列,并获得了正确表达.结论: Eotaxin cDNA 的克隆及其原核表达载体的构建及表达,为进一步构建其N-端突变体,纯化和检测其生物学活性奠定了基础.

    作者:周锦川;朱瑾 刊期: 2006年第08期

  • 眼干燥症病理生理的研究现状

    深入认识眼表与泪膜的关系有助于眼干燥症的病理生理研究.泪膜的稳定需要精细的神经、激素调控.泪膜成分的改变、神经源性炎症及性激素降低是眼干燥症病因学的重要因素.

    作者:尹婕;黄振平 刊期: 2006年第08期

  • 同种异体头皮及面颈部和双侧耳廓复合组织移植的应用解剖

    目的:阐述同种异体头皮、面颈部和双侧耳廓复合组织移植解剖学基础.方法:对4具8侧灌注的尸体标本及8具16侧新鲜尸体标本进行解剖,观察头皮、面颈部和耳廓等面部浅表器官的血管走行、分支及其分布. 结果:头面部皮肤软组织以及头面部体表器官的血液供应均由颈外动脉分支提供的,其中颞浅动脉分支分布于额顶、耳颞、侧面颈等处,约占头面部57%的区域,面动脉供应颏部、唇部、鼻部以及眼睑等,两者间以及与其他颈外动脉分支间有丰富的交通支吻合.结论:颞浅动脉作为头皮、双侧耳廓及额颧颊颈部复合组织的血供是安全可靠的.

    作者:汪涌;姜会庆;洪志坚;胡心宝;汪军 刊期: 2006年第08期

  • 多层螺旋CT血管造影和超声检查对筛查颈动脉粥样硬化性病变的价值

    目的:本研究比较多层螺旋CT血管造影(MS-CTA)和超声(US)检查对颈动脉粥样硬化性病变筛查的价值,并比较MS-CTA不同重建技术对诊断颈动脉狭窄的可靠性.方法:对31例症状性颈动脉粥样硬化病变患者同时作MS-CTA和US检查,并对其中的4例进行了数字减影血管造影(DSA)检查.MS-CTA重建方式包括多平面重建(MPR)、大密度投影(MIP)和容积再现(VR)三种技术,分别在轴位、MPR、MIP和VR图像上测量颈动脉的狭窄程度.颈总动脉颈膨大和颈内动脉段起始段的狭窄率分别按欧洲颈动脉外科手术研究(ECST)、北美症状性颈动脉内膜剥脱术研究(NASCET)标准计算,然后将其分为五个等级:无狭窄、轻度狭窄(0%~29%)、中度狭窄(30%~69%),重度狭窄(70%~99%)和完全闭塞.结果:31例患者共62条颈动脉,其中23条在MS-CTA和US上同时发现颈动脉斑块和狭窄,两种 方法对诊断颈动脉粥样硬化性病变的一致性为81%.对颈动脉各段狭窄程度进行分级时,MS-CTA不同重建技术图像之间具有良好的相关性.与DSA比较,MS-CTA确诊3条颈内动脉闭塞,而其中1条US未能发现.结论:US、MS-CTA等非侵入性检查可较好地用于颈动脉狭窄的筛查,并在诊断颈动脉粥样硬化性病变方面具有互补作用.结合原始轴位图像并综合采用多种重建方式,MS-CTA可较好地用于评价颈动脉狭窄.

    作者:王俊鹏;卢光明;季学满;张志强;蔡军 刊期: 2006年第08期

  • 《医学研究生学报》2001至2005年论文发表时滞情况分析

    目的:分析<医学研究生学报>(简称学报)论文发表时滞(DPA)情况.方法:按国内学术期刊有关规定(月刊:国家<6个月、军队≤9个月),对2001~2005年学报的DPA情况进行分类统计,并将非基金论文的DPA与基金课题论文的DPA进行比较.结果:2001~2005年学报非基金论文平均DPA分别为(8.92±3.56)个月、(9.72±3.44)个月、(9.54±4.11)个月、(8.79±3.18)个月和(7.59±2.69)个月,基金论文DPA分别为(6.48±2.31)个月、(6.31±1.93)个月、(4.91±2.10)个月、(5.87±2.24)个月和(2.26±1.81)个月,与非基金论文相比,明显缩短(P<0.01). 结论:基金论文DPA近年呈明显下降趋势,且各年的平均DPA均低于非基金论文.

    作者:李风华;鲁立;施璐霞;刘玉秀;王修来 刊期: 2006年第08期

  • 器官保存的研究进展

    器官保存伴随损伤有缺血和低温导致的损伤,以及再灌注时产生的再灌注损伤.该作者对器官保存的基本 方法、发展史、现状及器官保存研究中存在的问题进行综述.

    作者:段贵新;景华 刊期: 2006年第08期

  • 即时通讯软件在国际维和部队中的应用

    目的:制订非洲某国维和网络环境下即时通讯软件的合理使用方案,为维和部队的通讯保障提供参考依据.方法:比较所在国维和网络环境中常用的主流即时通讯软件的优缺点.结果:Skype是好的语音软件,MSN Messenger是佳的视频工具,用QQ发送手机短信经济.结论:结合使用Skype和MSN Messenger可与在线联系人交流,用QQ与离线联系人联络是佳的即时通讯方案.

    作者:许斌;王与荣;汪春晖 刊期: 2006年第08期

  • 护理记录缺陷及原因分析

    护理记录是指护理人员在进行医疗护理活动中,对患者生命体征、执行各项医疗措施以及落实护理措施情况的记录.随着护理学科的发展,从功能制护理到护理程序的引入和临床应用,护理记录也经历了近20余年的研讨和探索.2002年起,国家卫生部颁发了<医疗事故处理条例>、<病历书写基本规范(试行)>等法规,对护理记录的书写提出了新的要求.如何使护理记录全面反映护理过程的内容,又能注入法律意识,适应新形势的要求,保护护患双方的合法利益,是护理管理的一大课题.为提高病历书写质量,减少病历缺陷引起的医疗纠纷,2005年7月我院组织有关专家对185份出院病历进行检查,现将其检查结果报道如下.

    作者:申萍;杜益平 刊期: 2006年第08期

  • 急性白血病骨髓组织中低氧诱导因子-1α表达与血管生成关系的研究

    目的:了解低氧诱导因子(HIF)-1α在急性白血病骨髓组织中的表达水平,探讨其与骨髓内血管生成的关系.方法:应用改良的乙二醇甲基丙烯酸酯(GMA)塑料包埋法进行骨髓活检组织制片,采用EnVison免疫组化二步法检测对照10例和20例初诊急性白血病骨髓组织中HIF-1α表达水平及微血管密度(MVD).结果:20例急性白血病骨髓组织中HIF-1α蛋白低、中等、较高和高水平表达分别为1、5、6和8例;对照组10例中等、较高水平表达分别为7和3例,两组差异显著(P<0.05).初诊急性白血病骨髓内MVD在40倍镜下为8.50±3.92,较对照组(4.71±1.53)明显增高(P<0.05).急性白血病骨髓组织中HIF-1α蛋白表达水平与MVD具有相关性(r=0.578,P<0.05).结论: HIF-1α在急性白血病骨髓组织中表达水平明显升高,可能对骨髓内异常新生血管生成起一定的调节作用.

    作者:陈震章;欧阳建;张启国;谢品浩;吴鸿雁;孟奎;孟凡青 刊期: 2006年第08期

  • 功能性鼻内镜术后鼻-鼻窦耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染

    自20世纪60年代甲氧西林在临床应用后不久,即出现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)感染[1],其后随着广谱抗生素的广泛应用,该细菌感染急剧增多,范围遍及全球,耐药程度日益严重,常导致其流行和暴发流行[2],目前已成为与乙型肝炎、获得性免疫缺陷综合征并列世界范围内三大难解决的感染性疾患[3].近5年来,我科共收治5例功能性鼻窦内镜手术后鼻-鼻窦MRSA感染患者,现将其临床表现、实验室检查、治疗措施及结果进行回顾总结报道.

    作者:王秋萍;李泽卿;江满杰;王天友;陈伟;江萍 刊期: 2006年第08期

  • survivin在膀胱癌中的表达及其临床意义

    目的:探讨检测尿液中survivin对筛查膀胱癌的作用及组织中survivin表达与临床分期及病理分级的关系. 方法:对10例膀胱癌患者(试验一组)晨尿和41例膀胱癌患者(试验二组)术后病理组织,分别以10例非肿瘤疾病患者(对照一组)和7例膀胱良性病变患者(对照二组)作为对照,ELISA法检测尿液中survivin,免疫组化法检测病理组织中survivin,比较试验一组和对照一组尿survivin浓度,分析两试验组尿survivin和膀胱癌组织中survivin相关性.结果:试验一组患者尿survivin浓度与对照一组的差异有显著性意义(P<0.01);两试验组患者尿survivin浓度和病理组织survivin免疫标记强度呈正相关(r=0.97,P<0.01);试验二组膀胱癌病理标本survivin标记强度与对照二组差异有显著性意义(P<0.01);不同分期、不同分级和不同复发时间的膀胱癌患者癌组织survivin标记强度不同(P<0.05); 膀胱肿瘤临床特征与组织survivin表达分析提示,肿瘤分期、分级和癌组织survivin表达量是预测患者复发的指标(P<0.05).结论:①检测尿survivin很可能是一种敏感性高、特异性强、无创、简便的膀胱癌群体筛查 方法和术后随访检查 方法. ②组织中survivin表达量与膀胱癌分期、分级和复发相关,是预测膀胱癌复发的良好指标.

    作者:葛京平;魏武;魏威;张征宇;高建平;马驰原 刊期: 2006年第08期

  • 鸦胆子油乳注射液治疗晚期恶性肿瘤疗效观察

    晚期肿瘤老年患者,因伴有种种老年疾病已无法手术及放化疗时,不仅肿瘤发展快,且患者生活质量明显下降.我们用纯中药鸦胆子油乳注射液治疗老年晚期恶性肿瘤40例,取得了较好的疗效,现报道如下.

    作者:苏全胜;林勇;杨继红;于正洪;刘畅;施志明 刊期: 2006年第08期

  • 血管紧张素受体两种亚型的矛盾与统一

    血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体的两种亚型AT1R和AT2R在体内构成矛盾的统一体,AngⅡ的大多数作用是通过与AT1R结合来实现的,AT2R的部分作用与AT1R相反.AT2R拮抗剂可减弱AT1R拮抗剂的降压作用.但AT1R和AT2R并非单纯的对抗关系.AT1R可加速糖尿病肾病的慢性化进程.

    作者:杜宏;唐政 刊期: 2006年第08期

  • 人骨髓基质干细胞在不同诱导环境下向软骨细胞的分化

    目的:探索重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导建系的人骨髓基质干细胞(hBMSC,专利名缩写为MSCxj)生成软骨的可行性、佳剂量及适宜的诱导环境.方法:rhBMP-2分为六组:空白组、100ng/ml组、200ng/ml组、400ng/ml组、600ng/ml组和800ng/ml组.血清浓度分为三组:无血清组、2%血清组和5%血清组.根据rhBMP-2和血清不同浓度间的组合,设计18种诱导模式.一部分MSCxj制成微球,模拟三维模式进行细胞爬片培养,另一部分MSCxj直接用96孔板培养,10d后,检测MSCxj的数量、总蛋白生成量和碱性磷酸酶生成量,并行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原mRNA检测,利用MPS60病理图像软件分析各组Ⅱ型胶原mRNA染色后的灰度,比较各组Ⅱ型胶原mRNA的生成量.结果:血清浓度越高细胞生成的数量越多,细胞合成的总蛋白无显著差异,rhBMP-2对细胞数量和总蛋白的合成无明显影响.2%的血清浓度比其他血清浓度更利于软骨生成.在该血清浓度下rhBMP-2为400ng/ml时,细胞特异性基质Ⅱ型胶原生成多(F=19.56, P<0.05).结论:rhBMP-2能诱导MSCxj生成软骨,在血清浓度为2%、自身浓度为400ng/ml水平下诱导MSCxj生成软骨能力强.

    作者:戴洪山;刘建;袁志;孟国林;吕荣;胡蕴玉 刊期: 2006年第08期

  • 人IκBα真核表达载体的构建及其在大鼠肝移植缺血-再灌注损伤中的作用

    目的:构建人IκBα真核表达质粒,探讨对大鼠肝移植缺血-再灌注损伤的保护作用.方法:应用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,得到点突变的人IκBα, 定向克隆至PcDNA3.0真核表达载体.将SD大鼠原位肝移植模型分为三组:Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为PcDNA3.0空载体转染组, Ⅲ组为 PcDNA3.0-IκBα转染组.分别于术后2、12、24和72 h取材.用RT-PCR测定肝组织中核转录因子(NF-κB)p65、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1 (ICAM-1) mRNA的表达及肝功能变化.结果:经酶切和DNA序列测定鉴定,证实重组质粒构建正确;Ⅲ组与Ⅰ组、Ⅱ组相比:NF-κBp65、TNFα、ICAM-1 mRNA的表达水平及肝酶学指标均明显降低(P<0.05).结论:真核表达质粒PcDNA3.0-IκBα构建成功,IκBα通过抑制NF-κBp65 mRNA的表达及其核移位减轻大鼠肝移植缺血-再灌注损伤.

    作者:秦涛;郑启昌;屈新才;王继亮;胡青钢;卢昕;张勇 刊期: 2006年第08期

  • 大鼠心肌缺血-再灌注模型心电图变化分析

    目的:探讨大鼠心肌缺血30min、再灌注120min的心电图变化.方法:选取16只SD大鼠建立心肌缺血-再灌注模型,观察心电图Ⅱ导联P波、QRS波群、T波、S-T段和心律失常发生情况.结果:①造模成功12只.②QRS波群改变:12只大鼠在结扎左冠状动脉前降支(LAD)即刻均出现短暂的R波异常增高;再灌注15~20min出现q波或原有q波加深,随再灌注时间延长,q波逐渐加深、加宽.③ST-T改变:12只大鼠在结扎LAD即刻至20min时S-T段、T波进行性抬高,此后相对恒定;再灌注早期S-T段、T波快速回落,15min内回落>50%.④心律失常发生情况:13只大鼠发生室性心律失常,心律失常多出现在结扎LAD后5~10min和再灌注早期.结论:大鼠心肌缺血20min内S-T段、T波进行性抬高达峰值可作为大鼠冠状动脉准确结扎的标志;再灌注15min内S-T段、T波快速回落>50%可作为冠状动脉再通的指标.

    作者:王砚青;江时森;刘平;毛广平 刊期: 2006年第08期

  • N-甲基-D天冬氨酸受体2B亚基重组腺病毒穿梭载体的构建及鉴定

    目的:构建携带N-甲基-D天冬氨酸(NMDA)受体2B亚基(NR2B)基因的腺病毒5型(Ad5)穿梭载体,为NR2B重组腺病毒镇痛疫苗的包装做准备.方法:以限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切质粒pcDNA3.1-NR2B获得目的基因NR2B;将NR2B定向克隆入腺病毒穿梭载体pDC515,并行酶切及DNA测序鉴定.在脂质体介导下将pDC515-NR2B转染293细胞,并以RT-PCR及Western blot分别从转录水平和翻译水平检测目的基因NR2B的表达.结果:经酶切和DNA测序证实目的基因NR2B被成功克隆入载体pDC515-NR2B中,RT-PCR及Western blot检测NR2B可在293细胞表达.结论:成功构建NR2B重组Ad5穿梭载体pDC515-NR2B,该载体可用于NR2B重组Ad5载体镇痛疫苗的包装.

    作者:王公明;田玉科;田学愎;陈建平;安珂;杨辉 刊期: 2006年第08期

医学研究生学报杂志

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主管:南京军区联勤部卫生部

主办:南京军区南京总医院