许哲；陈彻；刘福坤；黎介寿
目的:通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母菌中表达人干燥综合征B(SS-B)抗原.方法:PCR扩增SS-B基因,与酵母菌表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SS-B.用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫酶斑点法鉴定.结果:PCR产物约为1 200bp,与预期1 224bp接近;pPIC9k-SS-B重组阳性克隆测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确.表达产物SS-B的相对分子质量约48 000,高拷贝毕赤酵母菌转化菌显著高于低拷贝的表达水平,表达量占分泌总蛋白的60%以上,产物浓度为800～900mg/L.免疫酶斑点法证实表达产物具有天然SS-B分子的免疫原性.阴性对照菌未见目的表达条带.结论:SS-B在巴斯德毕赤酵母菌中获得高效分泌表达,为下一步研究打下了基础.
作者：杨湘越；兰小鹏；吴文冰；冯福英；廖剑；朱忠勇 刊期： 2006年第11期
目的:构建Smad4基因小发夹RNA(shRNA)表达载体.方法:设计、合成3对编码Smad4基因shRNA的寡核苷酸序列,并分别将其克隆入pGCsi-H1/Neo/GFP质粒,酶切、测序鉴定,脂质体法转染293细胞.实时荧光定量PCR检测RNA干扰(RNAi)的抑制效果.结果:在经HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切分别鉴定三种重组载体后,DNA测序证实小干扰RNA(siRNA)序列正确,并被准确克隆入载体.实时荧光定量PCR检测结果表明三种重组载体psiSmad4-1、psiSmad4-2和psiSmad4-3载体,分别对293细胞中Smad4基因mRNA表达的特异性抑制率为39.00%、8.80%和73.80%.结论:成功构建Smad4 pGCsi-H1/Neo/GFP/shRNA质粒,为后期研究Smad4基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗打下基础.
作者：季国忠；张发明；黄曙；缪林；刘政；喻容彬；王学浩 刊期： 2006年第11期
空蝶鞍综合征(empty sella syhdrome,ESS)是指鞍隔扩大或缺如,鞍上蛛网膜下腔疝入蝶鞍内,导致蝶鞍扩大、垂体受压变形而产生的一组征候群.
作者：段立晖；李敏；周国庆 刊期： 2006年第11期
目的:研究胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1)在骨髓间充质干细胞(MSC)体外分化中的作用.方法:构建含有Pdx-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSC,G418筛选阳性细胞后对转染组(Pdx-1+MSC)和未转染组(Pdx-1-MSC)均体外进行诱导分化,细胞免疫组化染色鉴定诱导后胰岛素分泌阳性细胞.结果:限制性酶切分析和序列测定证实成功构建了含有Pdx-1基因的真核表达载体,荧光显微镜观察证实Superfect能高效介导重组载体转染MSC;细胞免疫组化染色显示Pdx-1+MSC分化为胰岛素分泌细胞的数量较Pdx-1-MSC明显增多,阳性率分别为(28.23±2.56)%和(7.08±2.69)%.结论:Pdx-1能增强大鼠MSC体外分化为功能性胰岛素分泌细胞的能力,为胰岛移植开辟新的思路,对1型糖尿病治疗有重要的应用价值.
作者：孙吉平；杨于嘉；贾延劼 刊期： 2006年第11期
妊娠合并肝功能损害致凝血因子生成不足极易导致产后出血,若未认识确切病因,仅按产后出血常规方案治疗,可能效果欠佳.我院近期收治此类患者1例并抢救成功,复习文献并分析报道如下.
作者：刘琦；吴元赭；稽晓红；管群；陆康民；李成朗 刊期： 2006年第11期
目的:探讨不同胎龄胎脑皮质颞叶神经干细胞(NSC)的发育规律.方法:收集胎龄为16～36周的水囊引产胎儿90例,采用免疫组化及光镜技术对人胎脑皮质颞叶NSC的分布、形态、生长方式以及数量进行检测.结果:NSC主要分布在锥体细胞层及内颗粒细胞层,呈圆形、椭圆形及多角形,尤以小圆形细胞为甚,0～2个突起,核相对较大,1～2个核仁不等,染色质疏松.NSC呈区域性分布,其中有大量由数个细胞形成的NSC集落,少部分NSC以单个形式存在于其他神经细胞间.各胎龄组间NSC在分布、形态、种类、生长方式等方面无明显差异;随着胎龄的增加,皮质颞叶NSC逐渐减少.结论:不同胎龄人胎脑皮质颞叶NSC在分布、形态、种类和生长方式等方面无明显差异,其数量随着胎龄的增加而减少.
作者：尹晓娟；胡波；巨容；封志纯 刊期： 2006年第11期
联合国维和任务区危机四伏,维和人员的生命安全受到极大的威胁.维和医疗分队(中国)根据<谅解备忘录>、联合国维和行动安全防卫的相关规定和维和任务区的具体实际,制订自己的安全规章制度和应急防卫计划,充分利用医疗分队配备的作战装备,强化安全管理,落实防卫措施,做好安全防卫工作,以确保维和任务的顺利完成.
作者：王与荣；袁波；朱役 刊期： 2006年第11期
多囊卵巢综合征(PCOS)是女性生殖内分泌疾病,同时存在代谢障碍.作者从PCOS是原发卵巢的疾病,卵泡功能异常是PCOS病变的核心、胰岛素抵抗是PCOS的关键病理机制和胰岛素增敏剂的有效治疗生殖障碍等方面,论证PCOS可能是原发性卵泡病,甚至可能是胰岛素抵抗卵泡病的学术观点,为PCOS的基础研究提供可能的研究思路.
作者：Jerome Strauss；吴效科 刊期： 2006年第11期
近年来,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中的作用成为新的研究热点.目前的研究表明,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中显示出了巨大潜力,可作为一种无创的有效治疗手段.利用低功率超声辐射微泡栓塞新生血管治疗肿瘤应用前景广阔,而具有靶向性的药物施放、基因治疗及提高高强度聚焦超声(HIFU)疗效等的基础研究,亦有望取得突破性进展.
作者：翟琦；吴巍 刊期： 2006年第11期
基质金属蛋白酶(MMP)是一类由Zn2+依赖性的内肽酶组成的酶家族,降解细胞外基质成分(ECM).MMP-1是先完成蛋白纯化和cDNA克隆的脊椎动物胶原酶,以酶原形式合成,通过蛋白水解作用裂解酶原N-端残基,与其他MMP分享一个催化区及一个序列相似于血红素蛋白的羧端.MMP-1是一个多功能分子,不仅参与细胞外间隙胶原纤维的代谢,也参与许多非基质底物和细胞表面分子的分裂.大量证据指出,MMP-1在不同生理、病理进程中起重要作用,如发育、组织形态建成、创伤修复,并与人类多种疾病有关,包括动脉粥样硬化、风湿性关节炎、肺气肿和纤维化等,提示抑制或刺激MMP-1可有助于疾病预防与治疗.
作者：顾振华；汪俊军 刊期： 2006年第11期
目的:研究成年大鼠脑梗死后室周带神经干细胞的增殖及迁移.方法:制作大鼠脑梗死模型,将其分为脑梗死后3、5、7和14d组,对照组为假手术组.采用免疫组化法动态检测大鼠脑内5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)、双皮质素(DCX)的表达.结果:与对照组相比,室周带BrdU阳性细胞在脑梗死后逐渐增加,并于7 d达高峰,14 d后开始下降,但仍高于正常水平.梗死后不同时间组室周带BrdU阳性细胞数均高于对照组(P＜0.01).DCX阳性细胞具有迁移细胞的形态学特征,并向损伤区迁移,于术后5 d迁移细胞的数量达高峰.结论:脑梗死可激活室周带神经干细胞原位增殖,并向损伤区迁移.
作者：郭芮兵；朱武生；徐格林；马敏敏；李芸；刘新峰 刊期： 2006年第11期
目的:评价结直肠癌肝转移患者以手术为主综合治疗的临床疗效.方法:总结手术结合术前介入、术中腹腔低渗化疗、术后介入和静脉交替化疗加免疫疗法,治疗结直肠癌肝转移患者49例的临床资料.结果:该组49例结直肠癌患者原发癌均获切除,同时一期切除肝转移癌.全组患者1、3和5年累积无病生存率分别为94%、47%和32%,累积总生存率分别为100%、61%和44%.结论:结直肠癌肝转移患者以手术为主的综合治疗安全有效.
作者：许哲；陈彻；刘福坤；黎介寿 刊期： 2006年第11期
目的:构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.方法:用AdEasy-1TM系统,在大肠杆菌中同源重组,构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-LacZ).重组腺病毒在HEK293细胞内包装并扩增,测定病毒滴度、电镜鉴定病毒存在、斑点杂交检测其复制缺陷性,然后感染HeLa细胞X-gal染色检测LacZ的表达情况.结果:成功构建了重组LacZ腺病毒表达载体,包装获得的重组腺病毒的滴度为1.58×109PFU/ml.在转染的细胞和感染的靶细胞内均可检测到LacZ的表达.电镜下可见感染的HEK293细胞核内含晶格状结构的腺病毒包函体.斑点杂交提示重组病毒为复制缺陷型,其基因转移百分率和感染强度和感染时间有一定的相关性.结论:成功构建了表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.
作者：裘秀春；许彦鸣；马保安；周勇；单乐群；杨彤涛；于翠娟；孟艳玲；杨安钢；范清宇 刊期： 2006年第11期
目的:甘精胰岛素和胰岛素泵均能为糖尿病(DM)患者提供基础胰岛素,探讨这两种治疗方法之间的剂量关系,总结甘精胰岛素的临床应用经验.方法:DM患者应用胰岛素泵治疗2周,血糖控制理想后,再改为甘精胰岛素及其他降糖药,血糖平稳后,比较甘精胰岛素与胰岛素泵所用胰岛素剂量,分析其相关性.结果:甘精胰岛素剂量约为胰岛素泵总量的35%及基础量的55%,并与之呈直线正相关,相关系数(r)分别为0.77和0.74,差异具有显著性统计学意义(P＜0.001).结论:甘精胰岛素的起始剂量约为胰岛素泵所用胰岛素总量的35%及基础量的50%,均与甘精胰岛素的起始剂量呈直线正相关.
作者：马建华；李倩；李惠琴；李冬梅；陶小军；刘好；张颖；吴锦丹；毛晓明 刊期： 2006年第11期
目的:建立一种可用于免疫分析的微流控芯片系统.方法:采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于甲胎蛋白(AFP)的测定.结果:芯片系统可在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围为1～800ng/ml,批内变异系数(CV)平均为6.3%,批间CV平均为7.8%,回收率为94.3%.结论:微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法.
作者：黄辉；郑小林；潘静；赵志强；蒲晓允 刊期： 2006年第11期
目的:了解过敏性鼻炎(AR)伴支气管哮喘(BA)患者的临床特征,分析AR与BA在临床表现方面的相关性.方法:问卷调查82例确诊为AR伴BA的患者,详细了解其临床表现,建立相应的个人数据库档案,对数据进行统计学分析.结果:82例患者,年龄5～72岁,平均年龄为(34±27.1)岁,其中男45例,女37例.AR和BA的发病年龄及病程间的差异无显著性统计学意义(P＞0.1).其中,哮喘严重程度一级(轻度间歇)56例,二级(轻度持续)21例,三级(中度持续)4例,四级(重度持续)1例.AR分型,间歇性65例,持续性17例;按严重程度分级,轻度63例,中-重度19例.结论:AR与BA的临床表现相关,两者的分型及严重程度具有高度一致性.
作者：薛飞；王秋萍；李泽卿；辛晓峰；江满杰；季俊峰；程友 刊期： 2006年第11期
目的:研究铜绿假单胞菌(PA)对亚胺培南的耐药机制,为临床合理选择抗生素提供确切的依据.方法:用2-巯基丙酸和头孢他啶双纸片协同法,检测临床分离的48株耐亚胺培南PA金属β-内酰胺酶(MBL)产生率,并提取各菌株的外膜蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析,比较各耐药菌株外膜蛋白与标准菌株的差异.结果:48株耐亚胺培南PA中8株产MBL;在外膜蛋白SDS-PAGE图上发现32株缺少外膜蛋白OprD2,其中8株还伴随其他外膜蛋白的改变.结论:PA对亚胺培南耐药的主要原因是外膜蛋白OprD2缺失或含量减少以及MBL的产生,或由两者共同作用所致.
作者：王卫萍；邵海枫；韩丽丽；王锦娜；史利宁；张小卫 刊期： 2006年第11期
目的:探讨乌司他丁对胸部手术患者术后抗炎性反应和对肝肾功能的保护作用.方法:选取40例胸外科手术的患者,随机分为试验组和对照组,每组各20例.乌司他丁组术前1d和术后1、2、3 d应用乌司他丁30万单位,静脉滴注,10万单位/8h(1 h内滴完);对照组在相同时间给予等量等渗盐水.分别于手术前1d和术后1、3、5、7 d抽取外周血标本检测白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、肌酐(SCr)和尿素氮(BUN).结果:乌司他丁组患者的IL-6、IL-8、TNF-α等指标在术后1、3、5、7d均明显低于对照组,乌司他丁组术后第1、3、5 d AST,ALT以及TB比对照组明显低.术后1周内乌司他丁组患者肝肾功能恢复正常.结论:乌司他丁对接受胸外手术患者术后肝、肾功能恢复有保护性作用,通过减少有害细胞因子的产生达到保护机体的作用,提高了机体对手术应激反应的耐受能力.
作者：唐建枢；许飚；刘志勇 刊期： 2006年第11期
目的:探讨侧位腰椎测量法(LS)和侧位脊柱测量法(LVA)所得到的腰椎骨密度值是否一致.方法:应用GE Lunar Prodigy双能X线骨密度仪(DXA)采取两种不同的测量方法,即LS和LVA,共测量54个椎体,对骨密度值的分布情况进行探索性研究,结果用箱线图表示,比较两者的测量结果,对配对样本比较采用Wilcoxon符号秩和检验,并进行Pearson相关分析.结果:两种方法测量得到的骨密度值分布基本一致,经Wilcoxon符号秩和检验,两组结果无显著性统计学意义(P＞0.05),两者有极显著相关关系(P=0.000).结论:用GE Lunar Prodigy DXA采取两种方法测量的侧位腰椎骨密度结果是一致的.
作者：郭郡浩；蔡辉 刊期： 2006年第11期
子宫颈病变是妇女常见疾患,若不及早发现和治疗,部分患者有恶变的可能,可发展为宫颈浸润癌.由于新柏氏液基薄层细胞学检测(ThinPrep cytolosy test,TCT)防癌普查等新技术的应用,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的检出率明显增加,引起临床医师的广泛重视.三阶梯式诊断方法(细胞学、阴道镜与组织学活检)是筛查宫颈病变的程序.结合近年来在我院妇科门诊就诊的82例宫颈病变患者的临床资料,为规范宫颈病变的诊治提供参考.
作者：党洁明；刘恒；刘景霞 刊期： 2006年第11期
医学研究生学报杂志
主管:南京军区联勤部卫生部
主办：南京军区南京总医院
