尹晓娟;胡波;巨容;封志纯
目的:构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.方法:用AdEasy-1TM系统,在大肠杆菌中同源重组,构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-LacZ).重组腺病毒在HEK293细胞内包装并扩增,测定病毒滴度、电镜鉴定病毒存在、斑点杂交检测其复制缺陷性,然后感染HeLa细胞X-gal染色检测LacZ的表达情况.结果:成功构建了重组LacZ腺病毒表达载体,包装获得的重组腺病毒的滴度为1.58×109PFU/ml.在转染的细胞和感染的靶细胞内均可检测到LacZ的表达.电镜下可见感染的HEK293细胞核内含晶格状结构的腺病毒包函体.斑点杂交提示重组病毒为复制缺陷型,其基因转移百分率和感染强度和感染时间有一定的相关性.结论:成功构建了表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.
作者:裘秀春;许彦鸣;马保安;周勇;单乐群;杨彤涛;于翠娟;孟艳玲;杨安钢;范清宇 刊期: 2006年第11期
目的:探讨侧位腰椎测量法(LS)和侧位脊柱测量法(LVA)所得到的腰椎骨密度值是否一致.方法:应用GE Lunar Prodigy双能X线骨密度仪(DXA)采取两种不同的测量方法,即LS和LVA,共测量54个椎体,对骨密度值的分布情况进行探索性研究,结果用箱线图表示,比较两者的测量结果,对配对样本比较采用Wilcoxon符号秩和检验,并进行Pearson相关分析.结果:两种方法测量得到的骨密度值分布基本一致,经Wilcoxon符号秩和检验,两组结果无显著性统计学意义(P>0.05),两者有极显著相关关系(P=0.000).结论:用GE Lunar Prodigy DXA采取两种方法测量的侧位腰椎骨密度结果是一致的.
作者:郭郡浩;蔡辉 刊期: 2006年第11期
目的:通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母菌中表达人干燥综合征B(SS-B)抗原.方法:PCR扩增SS-B基因,与酵母菌表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SS-B.用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫酶斑点法鉴定.结果:PCR产物约为1 200bp,与预期1 224bp接近;pPIC9k-SS-B重组阳性克隆测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确.表达产物SS-B的相对分子质量约48 000,高拷贝毕赤酵母菌转化菌显著高于低拷贝的表达水平,表达量占分泌总蛋白的60%以上,产物浓度为800~900mg/L.免疫酶斑点法证实表达产物具有天然SS-B分子的免疫原性.阴性对照菌未见目的表达条带.结论:SS-B在巴斯德毕赤酵母菌中获得高效分泌表达,为下一步研究打下了基础.
作者:杨湘越;兰小鹏;吴文冰;冯福英;廖剑;朱忠勇 刊期: 2006年第11期
近年来,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中的作用成为新的研究热点.目前的研究表明,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中显示出了巨大潜力,可作为一种无创的有效治疗手段.利用低功率超声辐射微泡栓塞新生血管治疗肿瘤应用前景广阔,而具有靶向性的药物施放、基因治疗及提高高强度聚焦超声(HIFU)疗效等的基础研究,亦有望取得突破性进展.
作者:翟琦;吴巍 刊期: 2006年第11期
目的:评价结直肠癌肝转移患者以手术为主综合治疗的临床疗效.方法:总结手术结合术前介入、术中腹腔低渗化疗、术后介入和静脉交替化疗加免疫疗法,治疗结直肠癌肝转移患者49例的临床资料.结果:该组49例结直肠癌患者原发癌均获切除,同时一期切除肝转移癌.全组患者1、3和5年累积无病生存率分别为94%、47%和32%,累积总生存率分别为100%、61%和44%.结论:结直肠癌肝转移患者以手术为主的综合治疗安全有效.
作者:许哲;陈彻;刘福坤;黎介寿 刊期: 2006年第11期
目的:探讨不同胎龄胎脑皮质颞叶神经干细胞(NSC)的发育规律.方法:收集胎龄为16~36周的水囊引产胎儿90例,采用免疫组化及光镜技术对人胎脑皮质颞叶NSC的分布、形态、生长方式以及数量进行检测.结果:NSC主要分布在锥体细胞层及内颗粒细胞层,呈圆形、椭圆形及多角形,尤以小圆形细胞为甚,0~2个突起,核相对较大,1~2个核仁不等,染色质疏松.NSC呈区域性分布,其中有大量由数个细胞形成的NSC集落,少部分NSC以单个形式存在于其他神经细胞间.各胎龄组间NSC在分布、形态、种类、生长方式等方面无明显差异;随着胎龄的增加,皮质颞叶NSC逐渐减少.结论:不同胎龄人胎脑皮质颞叶NSC在分布、形态、种类和生长方式等方面无明显差异,其数量随着胎龄的增加而减少.
作者:尹晓娟;胡波;巨容;封志纯 刊期: 2006年第11期
目的:研究成年大鼠脑梗死后室周带神经干细胞的增殖及迁移.方法:制作大鼠脑梗死模型,将其分为脑梗死后3、5、7和14d组,对照组为假手术组.采用免疫组化法动态检测大鼠脑内5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)、双皮质素(DCX)的表达.结果:与对照组相比,室周带BrdU阳性细胞在脑梗死后逐渐增加,并于7 d达高峰,14 d后开始下降,但仍高于正常水平.梗死后不同时间组室周带BrdU阳性细胞数均高于对照组(P<0.01).DCX阳性细胞具有迁移细胞的形态学特征,并向损伤区迁移,于术后5 d迁移细胞的数量达高峰.结论:脑梗死可激活室周带神经干细胞原位增殖,并向损伤区迁移.
作者:郭芮兵;朱武生;徐格林;马敏敏;李芸;刘新峰 刊期: 2006年第11期
目的:了解过敏性鼻炎(AR)伴支气管哮喘(BA)患者的临床特征,分析AR与BA在临床表现方面的相关性.方法:问卷调查82例确诊为AR伴BA的患者,详细了解其临床表现,建立相应的个人数据库档案,对数据进行统计学分析.结果:82例患者,年龄5~72岁,平均年龄为(34±27.1)岁,其中男45例,女37例.AR和BA的发病年龄及病程间的差异无显著性统计学意义(P>0.1).其中,哮喘严重程度一级(轻度间歇)56例,二级(轻度持续)21例,三级(中度持续)4例,四级(重度持续)1例.AR分型,间歇性65例,持续性17例;按严重程度分级,轻度63例,中-重度19例.结论:AR与BA的临床表现相关,两者的分型及严重程度具有高度一致性.
作者:薛飞;王秋萍;李泽卿;辛晓峰;江满杰;季俊峰;程友 刊期: 2006年第11期
microRNA(miRNA)是真核生物中一类长度约为22个核苷酸、参与基因转录后水平调控的非编码小分子RNA.近年来研究发现,miRNA除了具有调控细胞增殖、死亡、细胞分化、个体发育等生物学功能以外,与肿瘤的发生也有着密切的关系.该文作者试图从miRNA的生物学特性、形成、生理功能、作用机制及与肿瘤的关系等方面的研究进展作一综述.
作者:杜莉莉;管晓翔;陈龙邦 刊期: 2006年第11期
目的:研究胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1)在骨髓间充质干细胞(MSC)体外分化中的作用.方法:构建含有Pdx-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSC,G418筛选阳性细胞后对转染组(Pdx-1+MSC)和未转染组(Pdx-1-MSC)均体外进行诱导分化,细胞免疫组化染色鉴定诱导后胰岛素分泌阳性细胞.结果:限制性酶切分析和序列测定证实成功构建了含有Pdx-1基因的真核表达载体,荧光显微镜观察证实Superfect能高效介导重组载体转染MSC;细胞免疫组化染色显示Pdx-1+MSC分化为胰岛素分泌细胞的数量较Pdx-1-MSC明显增多,阳性率分别为(28.23±2.56)%和(7.08±2.69)%.结论:Pdx-1能增强大鼠MSC体外分化为功能性胰岛素分泌细胞的能力,为胰岛移植开辟新的思路,对1型糖尿病治疗有重要的应用价值.
作者:孙吉平;杨于嘉;贾延劼 刊期: 2006年第11期
皮肤角质层(SC)位于表皮的外层,具有独特的结构、物理和生化特性.可能引起由终末分化的角质细胞和镶嵌于其中的脂质基质组成,是机体的重要保护屏障,能抵抗外源性有害物质渗透和防止体内水分丢失.近年的研究表明,外界各种刺激因素如紫外线辐射、机械摩擦、有机溶剂等均可能引起SC结构和功能的损伤.其损伤修复过程复杂,机制尚不清楚,多种细胞因子、神经酰胺等均可能参与了此过程的调控.作者对SC的结构与功能、损伤与修复作一综述.
作者:潘敏鸿;周晓军;姜少军 刊期: 2006年第11期
目的:观察国产加巴喷丁(Gabapentin)治疗带状疱疹后神经痛(PHN)的临床疗效及安全性.方法:PHN患者33例,采用双盲、安慰剂对照,随机分为安慰剂组(n=16)和加巴喷丁组(n=17).采用视觉模拟评分(VAS)评估患者用药前和用药后1、2、4周疼痛程度,同时观察患者的不良反应,并记录治疗前后血、尿常规和肝、肾功能等指标.结果:加巴喷丁组患者口服900~2400mg/d加巴喷丁,与用药前VAS值[(73.00±11.08)mm]相比,用药后4周VAS值[(28.47±9.40)mm]显著下降(P<0.01),与安慰剂组VAS值[(53.81±7.73)mm]相比显著降低(P<0.01).加巴喷丁组除1例患者因严重眩晕退出外,其他患者对药物均表现出良好的顺应性.结论:国产加巴喷丁治疗PHN是有效而安全的.
作者:金毅;李炜;徐建国;李伟彦;刘健 刊期: 2006年第11期
目的:甘精胰岛素和胰岛素泵均能为糖尿病(DM)患者提供基础胰岛素,探讨这两种治疗方法之间的剂量关系,总结甘精胰岛素的临床应用经验.方法:DM患者应用胰岛素泵治疗2周,血糖控制理想后,再改为甘精胰岛素及其他降糖药,血糖平稳后,比较甘精胰岛素与胰岛素泵所用胰岛素剂量,分析其相关性.结果:甘精胰岛素剂量约为胰岛素泵总量的35%及基础量的55%,并与之呈直线正相关,相关系数(r)分别为0.77和0.74,差异具有显著性统计学意义(P<0.001).结论:甘精胰岛素的起始剂量约为胰岛素泵所用胰岛素总量的35%及基础量的50%,均与甘精胰岛素的起始剂量呈直线正相关.
作者:马建华;李倩;李惠琴;李冬梅;陶小军;刘好;张颖;吴锦丹;毛晓明 刊期: 2006年第11期
多囊卵巢综合征(PCOS)是女性生殖内分泌疾病,同时存在代谢障碍.作者从PCOS是原发卵巢的疾病,卵泡功能异常是PCOS病变的核心、胰岛素抵抗是PCOS的关键病理机制和胰岛素增敏剂的有效治疗生殖障碍等方面,论证PCOS可能是原发性卵泡病,甚至可能是胰岛素抵抗卵泡病的学术观点,为PCOS的基础研究提供可能的研究思路.
作者:Jerome Strauss;吴效科 刊期: 2006年第11期
子宫颈病变是妇女常见疾患,若不及早发现和治疗,部分患者有恶变的可能,可发展为宫颈浸润癌.由于新柏氏液基薄层细胞学检测(ThinPrep cytolosy test,TCT)防癌普查等新技术的应用,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的检出率明显增加,引起临床医师的广泛重视.三阶梯式诊断方法(细胞学、阴道镜与组织学活检)是筛查宫颈病变的程序.结合近年来在我院妇科门诊就诊的82例宫颈病变患者的临床资料,为规范宫颈病变的诊治提供参考.
作者:党洁明;刘恒;刘景霞 刊期: 2006年第11期
目的:证实选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂可阻断前列腺素在Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复活中的作用.方法:用HSV-1感染小鼠角膜,待30 d病毒在三叉神经节内的潜伏感染建立后,腹腔注射氯诺昔康(Lornoxican),处理后的小鼠和对照组均用紫外线B光照射170 mJ/em2,诱导HSV-1复活,将角膜擦拭液和三叉神经节匀浆分别和指示细胞-293细胞共同培养,以鉴别有无病毒复制.结果:腹腔给予氯诺昔康注射的小鼠角膜和三叉神经节内包含的病毒复发率比对照组小鼠明显减少(χ2角膜=22.43,P角膜<0.01;χ2三叉神经节=29.16,P三叉神经节<0.01).结论:选择性COX-2抑制剂能显著抑制紫外线诱导的Ⅰ型单纯疱疹病毒的复活.
作者:夏元;黄振平;马飞;薛春燕 刊期: 2006年第11期
抗体是机体免疫系统的重要效应分子.抗体制备经历了多克隆抗体(PcAb)、单克隆抗体(McAb)、和基因工程抗体的过程.抗体库技术的问世,加速了人源化抗体的开发,生产了大量用于研究、更适于体内诊断和治疗的基因工程抗体[1].抗体药物已成为生物制品类药物的重要部分,截止2004年底,经美国食品药品管理局(FDA)批准的抗体药物已有近20种,其中80%是基因重组抗体,目前正在进行临床验证的抗体药物也有数百种.重组人源性抗体作为药物具有广阔的应用前景.
作者:李晓军 刊期: 2006年第11期
目的:探讨乌司他丁对胸部手术患者术后抗炎性反应和对肝肾功能的保护作用.方法:选取40例胸外科手术的患者,随机分为试验组和对照组,每组各20例.乌司他丁组术前1d和术后1、2、3 d应用乌司他丁30万单位,静脉滴注,10万单位/8h(1 h内滴完);对照组在相同时间给予等量等渗盐水.分别于手术前1d和术后1、3、5、7 d抽取外周血标本检测白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、肌酐(SCr)和尿素氮(BUN).结果:乌司他丁组患者的IL-6、IL-8、TNF-α等指标在术后1、3、5、7d均明显低于对照组,乌司他丁组术后第1、3、5 d AST,ALT以及TB比对照组明显低.术后1周内乌司他丁组患者肝肾功能恢复正常.结论:乌司他丁对接受胸外手术患者术后肝、肾功能恢复有保护性作用,通过减少有害细胞因子的产生达到保护机体的作用,提高了机体对手术应激反应的耐受能力.
作者:唐建枢;许飚;刘志勇 刊期: 2006年第11期
基质金属蛋白酶(MMP)是一类由Zn2+依赖性的内肽酶组成的酶家族,降解细胞外基质成分(ECM).MMP-1是先完成蛋白纯化和cDNA克隆的脊椎动物胶原酶,以酶原形式合成,通过蛋白水解作用裂解酶原N-端残基,与其他MMP分享一个催化区及一个序列相似于血红素蛋白的羧端.MMP-1是一个多功能分子,不仅参与细胞外间隙胶原纤维的代谢,也参与许多非基质底物和细胞表面分子的分裂.大量证据指出,MMP-1在不同生理、病理进程中起重要作用,如发育、组织形态建成、创伤修复,并与人类多种疾病有关,包括动脉粥样硬化、风湿性关节炎、肺气肿和纤维化等,提示抑制或刺激MMP-1可有助于疾病预防与治疗.
作者:顾振华;汪俊军 刊期: 2006年第11期
妊娠合并肝功能损害致凝血因子生成不足极易导致产后出血,若未认识确切病因,仅按产后出血常规方案治疗,可能效果欠佳.我院近期收治此类患者1例并抢救成功,复习文献并分析报道如下.
作者:刘琦;吴元赭;稽晓红;管群;陆康民;李成朗 刊期: 2006年第11期