学术投稿

人源性抗体库技术及其应用前景

李晓军

关键词:抗体库, 噬菌体展示, 肿瘤
摘要:抗体是机体免疫系统的重要效应分子.抗体制备经历了多克隆抗体(PcAb)、单克隆抗体(McAb)、和基因工程抗体的过程.抗体库技术的问世,加速了人源化抗体的开发,生产了大量用于研究、更适于体内诊断和治疗的基因工程抗体[1].抗体药物已成为生物制品类药物的重要部分,截止2004年底,经美国食品药品管理局(FDA)批准的抗体药物已有近20种,其中80%是基因重组抗体,目前正在进行临床验证的抗体药物也有数百种.重组人源性抗体作为药物具有广阔的应用前景.
医学研究生学报杂志相关文献
  • 皮肤角质层及其损伤的研究进展

    皮肤角质层(SC)位于表皮的外层,具有独特的结构、物理和生化特性.可能引起由终末分化的角质细胞和镶嵌于其中的脂质基质组成,是机体的重要保护屏障,能抵抗外源性有害物质渗透和防止体内水分丢失.近年的研究表明,外界各种刺激因素如紫外线辐射、机械摩擦、有机溶剂等均可能引起SC结构和功能的损伤.其损伤修复过程复杂,机制尚不清楚,多种细胞因子、神经酰胺等均可能参与了此过程的调控.作者对SC的结构与功能、损伤与修复作一综述.

    作者:潘敏鸿;周晓军;姜少军 刊期: 2006年第11期

  • 钙调神经磷酸酶调控血管升压素诱导大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的作用

    目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对血管升压素(AVP)诱导新生大鼠心脏成纤维细胞(CF)胶原合成的调控作用.方法:采用胰酶消化法培养新生SD大鼠CF,应用羟基脯氨酸比色法测定细胞培养上清中羟基脯氨酸含量,CaN活性通过分光光度计测定.结果:①CF培养上清中羟基脯氨酸含量随着AVP浓度的升高而增加,其中10-7mol/L AVP和10-6mol/L AVP组羟基脯氨酸含量与空白对照组比较有显著性差异(均P<0.01);在0.5μg/ml CaN的特异性抑制剂环孢素共同干预下,羟基脯氨酸含量明显减少,并有统计学意义(P<0.01).②随着AVP浓度的升高,CF内CaN活性亦随之增高,与空白对照组比较,10-7和10-6mol/L AVP组细胞内CaN活性显著增高(P<0.01).③在10-7mol/L AVP作用下,随着细胞内CaN活性的升高,CF培养上清中羟基脯氨酸含量随之增加,两者之间呈显著正相关(r=0.91,P<0.05).④在10-7mol/L V1受体拮抗剂[d(CH2)5-Tyr2(Me)]AVP和10-7mol/L AVP共同作用下,CF中CaN活性和培养上清中羟基脯氨酸含量与单独10-7mol/LAVP作用组比较均显著降低,并有统计学意义(均P<0.01).结论:CaN信号通路在AVP诱导CF胶原合成过程中起到了重要的调控作用,该通路的激活可能是通过V1受体介导的.

    作者:尚福军;赵连友;郑强荪;薛玉生;王捷频 刊期: 2006年第11期

  • 人源性抗体库技术及其应用前景

    抗体是机体免疫系统的重要效应分子.抗体制备经历了多克隆抗体(PcAb)、单克隆抗体(McAb)、和基因工程抗体的过程.抗体库技术的问世,加速了人源化抗体的开发,生产了大量用于研究、更适于体内诊断和治疗的基因工程抗体[1].抗体药物已成为生物制品类药物的重要部分,截止2004年底,经美国食品药品管理局(FDA)批准的抗体药物已有近20种,其中80%是基因重组抗体,目前正在进行临床验证的抗体药物也有数百种.重组人源性抗体作为药物具有广阔的应用前景.

    作者:李晓军 刊期: 2006年第11期

  • 不同胎龄人胎脑皮质颞叶神经干细胞变化特征观察

    目的:探讨不同胎龄胎脑皮质颞叶神经干细胞(NSC)的发育规律.方法:收集胎龄为16~36周的水囊引产胎儿90例,采用免疫组化及光镜技术对人胎脑皮质颞叶NSC的分布、形态、生长方式以及数量进行检测.结果:NSC主要分布在锥体细胞层及内颗粒细胞层,呈圆形、椭圆形及多角形,尤以小圆形细胞为甚,0~2个突起,核相对较大,1~2个核仁不等,染色质疏松.NSC呈区域性分布,其中有大量由数个细胞形成的NSC集落,少部分NSC以单个形式存在于其他神经细胞间.各胎龄组间NSC在分布、形态、种类、生长方式等方面无明显差异;随着胎龄的增加,皮质颞叶NSC逐渐减少.结论:不同胎龄人胎脑皮质颞叶NSC在分布、形态、种类和生长方式等方面无明显差异,其数量随着胎龄的增加而减少.

    作者:尹晓娟;胡波;巨容;封志纯 刊期: 2006年第11期

  • 乌司他丁在胸外科手术中抗侵袭作用的研究

    目的:探讨乌司他丁对胸部手术患者术后抗炎性反应和对肝肾功能的保护作用.方法:选取40例胸外科手术的患者,随机分为试验组和对照组,每组各20例.乌司他丁组术前1d和术后1、2、3 d应用乌司他丁30万单位,静脉滴注,10万单位/8h(1 h内滴完);对照组在相同时间给予等量等渗盐水.分别于手术前1d和术后1、3、5、7 d抽取外周血标本检测白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、肌酐(SCr)和尿素氮(BUN).结果:乌司他丁组患者的IL-6、IL-8、TNF-α等指标在术后1、3、5、7d均明显低于对照组,乌司他丁组术后第1、3、5 d AST,ALT以及TB比对照组明显低.术后1周内乌司他丁组患者肝肾功能恢复正常.结论:乌司他丁对接受胸外手术患者术后肝、肾功能恢复有保护性作用,通过减少有害细胞因子的产生达到保护机体的作用,提高了机体对手术应激反应的耐受能力.

    作者:唐建枢;许飚;刘志勇 刊期: 2006年第11期

  • 妊娠合并肝功能损害致凝血功能障碍产后出血治疗体会

    妊娠合并肝功能损害致凝血因子生成不足极易导致产后出血,若未认识确切病因,仅按产后出血常规方案治疗,可能效果欠佳.我院近期收治此类患者1例并抢救成功,复习文献并分析报道如下.

    作者:刘琦;吴元赭;稽晓红;管群;陆康民;李成朗 刊期: 2006年第11期

  • 超声联合微泡剂用于肿瘤治疗的研究进展

    近年来,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中的作用成为新的研究热点.目前的研究表明,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中显示出了巨大潜力,可作为一种无创的有效治疗手段.利用低功率超声辐射微泡栓塞新生血管治疗肿瘤应用前景广阔,而具有靶向性的药物施放、基因治疗及提高高强度聚焦超声(HIFU)疗效等的基础研究,亦有望取得突破性进展.

    作者:翟琦;吴巍 刊期: 2006年第11期

  • 基质金属蛋白酶-1的研究进展

    基质金属蛋白酶(MMP)是一类由Zn2+依赖性的内肽酶组成的酶家族,降解细胞外基质成分(ECM).MMP-1是先完成蛋白纯化和cDNA克隆的脊椎动物胶原酶,以酶原形式合成,通过蛋白水解作用裂解酶原N-端残基,与其他MMP分享一个催化区及一个序列相似于血红素蛋白的羧端.MMP-1是一个多功能分子,不仅参与细胞外间隙胶原纤维的代谢,也参与许多非基质底物和细胞表面分子的分裂.大量证据指出,MMP-1在不同生理、病理进程中起重要作用,如发育、组织形态建成、创伤修复,并与人类多种疾病有关,包括动脉粥样硬化、风湿性关节炎、肺气肿和纤维化等,提示抑制或刺激MMP-1可有助于疾病预防与治疗.

    作者:顾振华;汪俊军 刊期: 2006年第11期

  • 重组LacZ复制缺陷型腺病毒的构建和鉴定

    目的:构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.方法:用AdEasy-1TM系统,在大肠杆菌中同源重组,构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-LacZ).重组腺病毒在HEK293细胞内包装并扩增,测定病毒滴度、电镜鉴定病毒存在、斑点杂交检测其复制缺陷性,然后感染HeLa细胞X-gal染色检测LacZ的表达情况.结果:成功构建了重组LacZ腺病毒表达载体,包装获得的重组腺病毒的滴度为1.58×109PFU/ml.在转染的细胞和感染的靶细胞内均可检测到LacZ的表达.电镜下可见感染的HEK293细胞核内含晶格状结构的腺病毒包函体.斑点杂交提示重组病毒为复制缺陷型,其基因转移百分率和感染强度和感染时间有一定的相关性.结论:成功构建了表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.

    作者:裘秀春;许彦鸣;马保安;周勇;单乐群;杨彤涛;于翠娟;孟艳玲;杨安钢;范清宇 刊期: 2006年第11期

  • 人干燥综合征B抗原在巴斯德毕赤酵母菌中的高效分泌表达研究

    目的:通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母菌中表达人干燥综合征B(SS-B)抗原.方法:PCR扩增SS-B基因,与酵母菌表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SS-B.用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫酶斑点法鉴定.结果:PCR产物约为1 200bp,与预期1 224bp接近;pPIC9k-SS-B重组阳性克隆测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确.表达产物SS-B的相对分子质量约48 000,高拷贝毕赤酵母菌转化菌显著高于低拷贝的表达水平,表达量占分泌总蛋白的60%以上,产物浓度为800~900mg/L.免疫酶斑点法证实表达产物具有天然SS-B分子的免疫原性.阴性对照菌未见目的表达条带.结论:SS-B在巴斯德毕赤酵母菌中获得高效分泌表达,为下一步研究打下了基础.

    作者:杨湘越;兰小鹏;吴文冰;冯福英;廖剑;朱忠勇 刊期: 2006年第11期

  • Smad4/DPC4基因小发夹RNA质粒表达载体的构建和鉴定

    目的:构建Smad4基因小发夹RNA(shRNA)表达载体.方法:设计、合成3对编码Smad4基因shRNA的寡核苷酸序列,并分别将其克隆入pGCsi-H1/Neo/GFP质粒,酶切、测序鉴定,脂质体法转染293细胞.实时荧光定量PCR检测RNA干扰(RNAi)的抑制效果.结果:在经HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切分别鉴定三种重组载体后,DNA测序证实小干扰RNA(siRNA)序列正确,并被准确克隆入载体.实时荧光定量PCR检测结果表明三种重组载体psiSmad4-1、psiSmad4-2和psiSmad4-3载体,分别对293细胞中Smad4基因mRNA表达的特异性抑制率为39.00%、8.80%和73.80%.结论:成功构建Smad4 pGCsi-H1/Neo/GFP/shRNA质粒,为后期研究Smad4基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗打下基础.

    作者:季国忠;张发明;黄曙;缪林;刘政;喻容彬;王学浩 刊期: 2006年第11期

  • Prodigy型双能X线骨密度仪两种测量侧位腰椎骨密度方法的研究

    目的:探讨侧位腰椎测量法(LS)和侧位脊柱测量法(LVA)所得到的腰椎骨密度值是否一致.方法:应用GE Lunar Prodigy双能X线骨密度仪(DXA)采取两种不同的测量方法,即LS和LVA,共测量54个椎体,对骨密度值的分布情况进行探索性研究,结果用箱线图表示,比较两者的测量结果,对配对样本比较采用Wilcoxon符号秩和检验,并进行Pearson相关分析.结果:两种方法测量得到的骨密度值分布基本一致,经Wilcoxon符号秩和检验,两组结果无显著性统计学意义(P>0.05),两者有极显著相关关系(P=0.000).结论:用GE Lunar Prodigy DXA采取两种方法测量的侧位腰椎骨密度结果是一致的.

    作者:郭郡浩;蔡辉 刊期: 2006年第11期

  • 微流控芯片用于甲胎蛋白化学发光免疫分析的研究

    目的:建立一种可用于免疫分析的微流控芯片系统.方法:采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于甲胎蛋白(AFP)的测定.结果:芯片系统可在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围为1~800ng/ml,批内变异系数(CV)平均为6.3%,批间CV平均为7.8%,回收率为94.3%.结论:微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法.

    作者:黄辉;郑小林;潘静;赵志强;蒲晓允 刊期: 2006年第11期

  • 8例空蝶鞍综合征的临床分析

    空蝶鞍综合征(empty sella syhdrome,ESS)是指鞍隔扩大或缺如,鞍上蛛网膜下腔疝入蝶鞍内,导致蝶鞍扩大、垂体受压变形而产生的一组征候群.

    作者:段立晖;李敏;周国庆 刊期: 2006年第11期

  • 代谢综合征的临床研究现状

    代谢综合征(MS)又被称为死亡四重奏,是一组由多种代谢性疾病的组合.其患病率随年龄增长而增高.作者对MS的流行病学、主要发病因素、临床表现和诊断标准、早期进行健康教育、饮食控制、运动疗法和药物治疗防止或延缓MS的发生和发展进行了综述.

    作者:齐玉琴;魏国;葛才荣 刊期: 2006年第11期

  • 大鼠脑梗死后室周带神经干细胞增殖和迁移

    目的:研究成年大鼠脑梗死后室周带神经干细胞的增殖及迁移.方法:制作大鼠脑梗死模型,将其分为脑梗死后3、5、7和14d组,对照组为假手术组.采用免疫组化法动态检测大鼠脑内5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)、双皮质素(DCX)的表达.结果:与对照组相比,室周带BrdU阳性细胞在脑梗死后逐渐增加,并于7 d达高峰,14 d后开始下降,但仍高于正常水平.梗死后不同时间组室周带BrdU阳性细胞数均高于对照组(P<0.01).DCX阳性细胞具有迁移细胞的形态学特征,并向损伤区迁移,于术后5 d迁移细胞的数量达高峰.结论:脑梗死可激活室周带神经干细胞原位增殖,并向损伤区迁移.

    作者:郭芮兵;朱武生;徐格林;马敏敏;李芸;刘新峰 刊期: 2006年第11期

  • 老年非瓣膜性心房纤颤的伴随疾病和节律控制的状况分析

    目的:研究因非瓣膜性心房纤颤(房颤)住院的老年患者的伴随疾病及心律和心室率控制的状况.方法:回顾性分析12余年住院患者的240例资料,分析其房颤病程和伴随的疾病,药物治疗和起搏治疗的情况,心率和心律的变化.结果:合并心力衰竭、传导系统病变和脑卒中者分别为57.1%、31.7%和20.4%.对房颤病程不清楚者在阵发性房颤中占13.9%、在持续性房颤中占20.1%.在阵发性房颤中单独应用普罗帕酮(心律平)、β受体阻滞剂、胺碘酮治疗者分别占37.6%、25.7%和21.8%,用两种以上药物治疗者占14.9%,有7.9%的患者自行转复为窦性心律.在持续性房颤中单用地高辛、β受体阻滞剂、非二氢吡啶类钙拮抗剂治疗者分别占57.6%、23.7%和7.2%,用两种以上药物治疗者占10.8%,有20.1%的患者无需用药物控制心室率.有10.9%的阵发性房颤患者和14.4%的持续性房颤患者均行VVI起搏,主要原因分别为病态窦房结综合征和Ⅱ度以上房室传导阻滞.结论:老年非瓣膜性房颤常伴随心力衰竭、传导系统疾病和脑卒中,部分患者未及时发现和治疗房颤,大部分阵发性房颤单用普罗帕酮、β受体阻滞剂或胺碘酮可转复为窦性心律,在持续性房颤患者中,有57.6%用地高辛、20.1%不用控制心率的药物就可维持心室率.阵发性房颤和持续性房颤的起搏指征和方式均有待商榷.

    作者:徐军;缪东培;包知达;殷宇刚;王莉;张凯;肖继明;吕磊 刊期: 2006年第11期

  • 环氧化酶-2抑制剂对Ⅰ型单纯疱疹病毒复活的抑制作用

    目的:证实选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂可阻断前列腺素在Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复活中的作用.方法:用HSV-1感染小鼠角膜,待30 d病毒在三叉神经节内的潜伏感染建立后,腹腔注射氯诺昔康(Lornoxican),处理后的小鼠和对照组均用紫外线B光照射170 mJ/em2,诱导HSV-1复活,将角膜擦拭液和三叉神经节匀浆分别和指示细胞-293细胞共同培养,以鉴别有无病毒复制.结果:腹腔给予氯诺昔康注射的小鼠角膜和三叉神经节内包含的病毒复发率比对照组小鼠明显减少(χ2角膜=22.43,P角膜<0.01;χ2三叉神经节=29.16,P三叉神经节<0.01).结论:选择性COX-2抑制剂能显著抑制紫外线诱导的Ⅰ型单纯疱疹病毒的复活.

    作者:夏元;黄振平;马飞;薛春燕 刊期: 2006年第11期

  • 甘精胰岛素与胰岛素泵的基础胰岛素剂量比较

    目的:甘精胰岛素和胰岛素泵均能为糖尿病(DM)患者提供基础胰岛素,探讨这两种治疗方法之间的剂量关系,总结甘精胰岛素的临床应用经验.方法:DM患者应用胰岛素泵治疗2周,血糖控制理想后,再改为甘精胰岛素及其他降糖药,血糖平稳后,比较甘精胰岛素与胰岛素泵所用胰岛素剂量,分析其相关性.结果:甘精胰岛素剂量约为胰岛素泵总量的35%及基础量的55%,并与之呈直线正相关,相关系数(r)分别为0.77和0.74,差异具有显著性统计学意义(P<0.001).结论:甘精胰岛素的起始剂量约为胰岛素泵所用胰岛素总量的35%及基础量的50%,均与甘精胰岛素的起始剂量呈直线正相关.

    作者:马建华;李倩;李惠琴;李冬梅;陶小军;刘好;张颖;吴锦丹;毛晓明 刊期: 2006年第11期

  • 多囊卵巢综合征可能是原发性卵泡病

    多囊卵巢综合征(PCOS)是女性生殖内分泌疾病,同时存在代谢障碍.作者从PCOS是原发卵巢的疾病,卵泡功能异常是PCOS病变的核心、胰岛素抵抗是PCOS的关键病理机制和胰岛素增敏剂的有效治疗生殖障碍等方面,论证PCOS可能是原发性卵泡病,甚至可能是胰岛素抵抗卵泡病的学术观点,为PCOS的基础研究提供可能的研究思路.

    作者:Jerome Strauss;吴效科 刊期: 2006年第11期

医学研究生学报杂志

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主管:南京军区联勤部卫生部

主办:南京军区南京总医院