尚福军;赵连友;郑强荪;薛玉生;王捷频
目的:构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.方法:用AdEasy-1TM系统,在大肠杆菌中同源重组,构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-LacZ).重组腺病毒在HEK293细胞内包装并扩增,测定病毒滴度、电镜鉴定病毒存在、斑点杂交检测其复制缺陷性,然后感染HeLa细胞X-gal染色检测LacZ的表达情况.结果:成功构建了重组LacZ腺病毒表达载体,包装获得的重组腺病毒的滴度为1.58×109PFU/ml.在转染的细胞和感染的靶细胞内均可检测到LacZ的表达.电镜下可见感染的HEK293细胞核内含晶格状结构的腺病毒包函体.斑点杂交提示重组病毒为复制缺陷型,其基因转移百分率和感染强度和感染时间有一定的相关性.结论:成功构建了表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.
作者:裘秀春;许彦鸣;马保安;周勇;单乐群;杨彤涛;于翠娟;孟艳玲;杨安钢;范清宇 刊期: 2006年第11期
基质金属蛋白酶(MMP)是一类由Zn2+依赖性的内肽酶组成的酶家族,降解细胞外基质成分(ECM).MMP-1是先完成蛋白纯化和cDNA克隆的脊椎动物胶原酶,以酶原形式合成,通过蛋白水解作用裂解酶原N-端残基,与其他MMP分享一个催化区及一个序列相似于血红素蛋白的羧端.MMP-1是一个多功能分子,不仅参与细胞外间隙胶原纤维的代谢,也参与许多非基质底物和细胞表面分子的分裂.大量证据指出,MMP-1在不同生理、病理进程中起重要作用,如发育、组织形态建成、创伤修复,并与人类多种疾病有关,包括动脉粥样硬化、风湿性关节炎、肺气肿和纤维化等,提示抑制或刺激MMP-1可有助于疾病预防与治疗.
作者:顾振华;汪俊军 刊期: 2006年第11期
目的:研究铜绿假单胞菌(PA)对亚胺培南的耐药机制,为临床合理选择抗生素提供确切的依据.方法:用2-巯基丙酸和头孢他啶双纸片协同法,检测临床分离的48株耐亚胺培南PA金属β-内酰胺酶(MBL)产生率,并提取各菌株的外膜蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析,比较各耐药菌株外膜蛋白与标准菌株的差异.结果:48株耐亚胺培南PA中8株产MBL;在外膜蛋白SDS-PAGE图上发现32株缺少外膜蛋白OprD2,其中8株还伴随其他外膜蛋白的改变.结论:PA对亚胺培南耐药的主要原因是外膜蛋白OprD2缺失或含量减少以及MBL的产生,或由两者共同作用所致.
作者:王卫萍;邵海枫;韩丽丽;王锦娜;史利宁;张小卫 刊期: 2006年第11期
空蝶鞍综合征(empty sella syhdrome,ESS)是指鞍隔扩大或缺如,鞍上蛛网膜下腔疝入蝶鞍内,导致蝶鞍扩大、垂体受压变形而产生的一组征候群.
作者:段立晖;李敏;周国庆 刊期: 2006年第11期
目的:研究因非瓣膜性心房纤颤(房颤)住院的老年患者的伴随疾病及心律和心室率控制的状况.方法:回顾性分析12余年住院患者的240例资料,分析其房颤病程和伴随的疾病,药物治疗和起搏治疗的情况,心率和心律的变化.结果:合并心力衰竭、传导系统病变和脑卒中者分别为57.1%、31.7%和20.4%.对房颤病程不清楚者在阵发性房颤中占13.9%、在持续性房颤中占20.1%.在阵发性房颤中单独应用普罗帕酮(心律平)、β受体阻滞剂、胺碘酮治疗者分别占37.6%、25.7%和21.8%,用两种以上药物治疗者占14.9%,有7.9%的患者自行转复为窦性心律.在持续性房颤中单用地高辛、β受体阻滞剂、非二氢吡啶类钙拮抗剂治疗者分别占57.6%、23.7%和7.2%,用两种以上药物治疗者占10.8%,有20.1%的患者无需用药物控制心室率.有10.9%的阵发性房颤患者和14.4%的持续性房颤患者均行VVI起搏,主要原因分别为病态窦房结综合征和Ⅱ度以上房室传导阻滞.结论:老年非瓣膜性房颤常伴随心力衰竭、传导系统疾病和脑卒中,部分患者未及时发现和治疗房颤,大部分阵发性房颤单用普罗帕酮、β受体阻滞剂或胺碘酮可转复为窦性心律,在持续性房颤患者中,有57.6%用地高辛、20.1%不用控制心率的药物就可维持心室率.阵发性房颤和持续性房颤的起搏指征和方式均有待商榷.
作者:徐军;缪东培;包知达;殷宇刚;王莉;张凯;肖继明;吕磊 刊期: 2006年第11期
microRNA(miRNA)是真核生物中一类长度约为22个核苷酸、参与基因转录后水平调控的非编码小分子RNA.近年来研究发现,miRNA除了具有调控细胞增殖、死亡、细胞分化、个体发育等生物学功能以外,与肿瘤的发生也有着密切的关系.该文作者试图从miRNA的生物学特性、形成、生理功能、作用机制及与肿瘤的关系等方面的研究进展作一综述.
作者:杜莉莉;管晓翔;陈龙邦 刊期: 2006年第11期
妊娠合并肝功能损害致凝血因子生成不足极易导致产后出血,若未认识确切病因,仅按产后出血常规方案治疗,可能效果欠佳.我院近期收治此类患者1例并抢救成功,复习文献并分析报道如下.
作者:刘琦;吴元赭;稽晓红;管群;陆康民;李成朗 刊期: 2006年第11期
乙型肝炎病毒感染相关的肝硬化患者如病毒复制活跃,可加重肝炎性坏死和纤维增生,加速肝硬化进展,表现为肝细胞功能衰竭(血清清蛋白降低、胆红素升高、凝血酶原时间延长等)和门脉高压症(食管、胃底静脉曲张及其破裂出血、腹水、自发性细菌性腹膜炎及肝肾综合征、肝性脑病等),对此目前尚缺乏特效治疗方法[1].及时的抗病毒治疗是延缓和阻止肝硬化进展、减少肝癌发生的重要手段.为此,我们应用拉米夫定(Lamivudine)治疗慢性乙型肝炎后肝硬化患者35例并进行疗效观察,现报道如下.
作者:陆春芬;卢应梅;刘玉斌;周稳兰 刊期: 2006年第11期
近年来,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中的作用成为新的研究热点.目前的研究表明,超声联合微泡剂在肿瘤治疗中显示出了巨大潜力,可作为一种无创的有效治疗手段.利用低功率超声辐射微泡栓塞新生血管治疗肿瘤应用前景广阔,而具有靶向性的药物施放、基因治疗及提高高强度聚焦超声(HIFU)疗效等的基础研究,亦有望取得突破性进展.
作者:翟琦;吴巍 刊期: 2006年第11期
目的:探讨不同胎龄胎脑皮质颞叶神经干细胞(NSC)的发育规律.方法:收集胎龄为16~36周的水囊引产胎儿90例,采用免疫组化及光镜技术对人胎脑皮质颞叶NSC的分布、形态、生长方式以及数量进行检测.结果:NSC主要分布在锥体细胞层及内颗粒细胞层,呈圆形、椭圆形及多角形,尤以小圆形细胞为甚,0~2个突起,核相对较大,1~2个核仁不等,染色质疏松.NSC呈区域性分布,其中有大量由数个细胞形成的NSC集落,少部分NSC以单个形式存在于其他神经细胞间.各胎龄组间NSC在分布、形态、种类、生长方式等方面无明显差异;随着胎龄的增加,皮质颞叶NSC逐渐减少.结论:不同胎龄人胎脑皮质颞叶NSC在分布、形态、种类和生长方式等方面无明显差异,其数量随着胎龄的增加而减少.
作者:尹晓娟;胡波;巨容;封志纯 刊期: 2006年第11期
目的:评价结直肠癌肝转移患者以手术为主综合治疗的临床疗效.方法:总结手术结合术前介入、术中腹腔低渗化疗、术后介入和静脉交替化疗加免疫疗法,治疗结直肠癌肝转移患者49例的临床资料.结果:该组49例结直肠癌患者原发癌均获切除,同时一期切除肝转移癌.全组患者1、3和5年累积无病生存率分别为94%、47%和32%,累积总生存率分别为100%、61%和44%.结论:结直肠癌肝转移患者以手术为主的综合治疗安全有效.
作者:许哲;陈彻;刘福坤;黎介寿 刊期: 2006年第11期
正电子发射型计算机断层扫描仪/计算机体层扫描(Positron emission tomography/compued tomography,PET/CT)检查早期肿瘤、神经系统疾病和心血管系统疾病等,尤其对肿瘤的分期、复发和疗效的判定具有其技术优势.有文献报道,在探讨胰腺疾患的影像诊断中,用PET/CT对其诊断的敏感性为96.2%[1].我院自2004年9月至2005年9月用静脉注射放射性示踪剂氟去氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)行PET/CT检查1 071例的患者,护理实施是完成检查的首要条件,本文将检查时的护理介绍如下.
作者:王玲;董雯;李凌雯;黄红丽;常林凤 刊期: 2006年第11期
多囊卵巢综合征(PCOS)是女性生殖内分泌疾病,同时存在代谢障碍.作者从PCOS是原发卵巢的疾病,卵泡功能异常是PCOS病变的核心、胰岛素抵抗是PCOS的关键病理机制和胰岛素增敏剂的有效治疗生殖障碍等方面,论证PCOS可能是原发性卵泡病,甚至可能是胰岛素抵抗卵泡病的学术观点,为PCOS的基础研究提供可能的研究思路.
作者:Jerome Strauss;吴效科 刊期: 2006年第11期
子宫颈病变是妇女常见疾患,若不及早发现和治疗,部分患者有恶变的可能,可发展为宫颈浸润癌.由于新柏氏液基薄层细胞学检测(ThinPrep cytolosy test,TCT)防癌普查等新技术的应用,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的检出率明显增加,引起临床医师的广泛重视.三阶梯式诊断方法(细胞学、阴道镜与组织学活检)是筛查宫颈病变的程序.结合近年来在我院妇科门诊就诊的82例宫颈病变患者的临床资料,为规范宫颈病变的诊治提供参考.
作者:党洁明;刘恒;刘景霞 刊期: 2006年第11期
目的:建立一种可用于免疫分析的微流控芯片系统.方法:采用激光直接加工法制备微流控芯片,建立基于超顺磁珠的化学发光微流控免疫分析系统,用于甲胎蛋白(AFP)的测定.结果:芯片系统可在20min内完成AFP的分析,所需要的标本量和试剂量为5μl,线性范围为1~800ng/ml,批内变异系数(CV)平均为6.3%,批间CV平均为7.8%,回收率为94.3%.结论:微流控芯片系统是一种快速、耗费小、可重复使用的AFP测定方法.
作者:黄辉;郑小林;潘静;赵志强;蒲晓允 刊期: 2006年第11期
目的:探讨侧位腰椎测量法(LS)和侧位脊柱测量法(LVA)所得到的腰椎骨密度值是否一致.方法:应用GE Lunar Prodigy双能X线骨密度仪(DXA)采取两种不同的测量方法,即LS和LVA,共测量54个椎体,对骨密度值的分布情况进行探索性研究,结果用箱线图表示,比较两者的测量结果,对配对样本比较采用Wilcoxon符号秩和检验,并进行Pearson相关分析.结果:两种方法测量得到的骨密度值分布基本一致,经Wilcoxon符号秩和检验,两组结果无显著性统计学意义(P>0.05),两者有极显著相关关系(P=0.000).结论:用GE Lunar Prodigy DXA采取两种方法测量的侧位腰椎骨密度结果是一致的.
作者:郭郡浩;蔡辉 刊期: 2006年第11期
目的:通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母菌中表达人干燥综合征B(SS-B)抗原.方法:PCR扩增SS-B基因,与酵母菌表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SS-B.用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫酶斑点法鉴定.结果:PCR产物约为1 200bp,与预期1 224bp接近;pPIC9k-SS-B重组阳性克隆测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确.表达产物SS-B的相对分子质量约48 000,高拷贝毕赤酵母菌转化菌显著高于低拷贝的表达水平,表达量占分泌总蛋白的60%以上,产物浓度为800~900mg/L.免疫酶斑点法证实表达产物具有天然SS-B分子的免疫原性.阴性对照菌未见目的表达条带.结论:SS-B在巴斯德毕赤酵母菌中获得高效分泌表达,为下一步研究打下了基础.
作者:杨湘越;兰小鹏;吴文冰;冯福英;廖剑;朱忠勇 刊期: 2006年第11期
联合国维和任务区危机四伏,维和人员的生命安全受到极大的威胁.维和医疗分队(中国)根据<谅解备忘录>、联合国维和行动安全防卫的相关规定和维和任务区的具体实际,制订自己的安全规章制度和应急防卫计划,充分利用医疗分队配备的作战装备,强化安全管理,落实防卫措施,做好安全防卫工作,以确保维和任务的顺利完成.
作者:王与荣;袁波;朱役 刊期: 2006年第11期
抗体是机体免疫系统的重要效应分子.抗体制备经历了多克隆抗体(PcAb)、单克隆抗体(McAb)、和基因工程抗体的过程.抗体库技术的问世,加速了人源化抗体的开发,生产了大量用于研究、更适于体内诊断和治疗的基因工程抗体[1].抗体药物已成为生物制品类药物的重要部分,截止2004年底,经美国食品药品管理局(FDA)批准的抗体药物已有近20种,其中80%是基因重组抗体,目前正在进行临床验证的抗体药物也有数百种.重组人源性抗体作为药物具有广阔的应用前景.
作者:李晓军 刊期: 2006年第11期
目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对血管升压素(AVP)诱导新生大鼠心脏成纤维细胞(CF)胶原合成的调控作用.方法:采用胰酶消化法培养新生SD大鼠CF,应用羟基脯氨酸比色法测定细胞培养上清中羟基脯氨酸含量,CaN活性通过分光光度计测定.结果:①CF培养上清中羟基脯氨酸含量随着AVP浓度的升高而增加,其中10-7mol/L AVP和10-6mol/L AVP组羟基脯氨酸含量与空白对照组比较有显著性差异(均P<0.01);在0.5μg/ml CaN的特异性抑制剂环孢素共同干预下,羟基脯氨酸含量明显减少,并有统计学意义(P<0.01).②随着AVP浓度的升高,CF内CaN活性亦随之增高,与空白对照组比较,10-7和10-6mol/L AVP组细胞内CaN活性显著增高(P<0.01).③在10-7mol/L AVP作用下,随着细胞内CaN活性的升高,CF培养上清中羟基脯氨酸含量随之增加,两者之间呈显著正相关(r=0.91,P<0.05).④在10-7mol/L V1受体拮抗剂[d(CH2)5-Tyr2(Me)]AVP和10-7mol/L AVP共同作用下,CF中CaN活性和培养上清中羟基脯氨酸含量与单独10-7mol/LAVP作用组比较均显著降低,并有统计学意义(均P<0.01).结论:CaN信号通路在AVP诱导CF胶原合成过程中起到了重要的调控作用,该通路的激活可能是通过V1受体介导的.
作者:尚福军;赵连友;郑强荪;薛玉生;王捷频 刊期: 2006年第11期